UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN ANTONIO

ABAD DEL CUSCO

Escuela Profesional Farmacia y Bioquímica

INFORME N°5

ANALISIS DE PROTEINAS

Docente:

Mijail Cjuno Quispe

Integrante:

Paniura Alcca Emerson

Cusco- Perú

2023
 PRACTICA N°5

FUNDAMENTO TEORICO:

La determinación cualitativa de proteínas es crucial en el análisis de muestras

biológicas y alimenticias. Tres pruebas comúnmente empleadas son la prueba de

ninhidrina, la xantoproteína y la biuret, cada una ofreciendo información valiosa

sobre la presencia de proteínas.

1. Prueba de Ninhidrina: Esta prueba destaca los grupos amino en los

aminoácidos, generando un color púrpura intenso en presencia de proteínas. La

ninhidrina reacciona con los enlaces peptídicos, facilitando la identificación

cualitativa de aminoácidos y proteínas en la muestra.

2. Prueba de Xantoproteína: La xantoproteína es una técnica que revela la

presencia de residuos de tirosina y triptófano en proteínas. Al reaccionar con ácido

nítrico, forma complejos coloreados, permitiendo la identificación cualitativa de estas

proteínas específicas.

3. Prueba de Biuret: Esta prueba se basa en la formación de complejos entre

iones de cobre y enlaces peptídicos. En presencia de proteínas, la solución adquiere

un tono violeta, indicando la presencia de enlaces peptídicos y permitiendo la

identificación cualitativa de proteínas.

METODOLOGÍA

Para la presente practica se utilizó la metodología cualitativa en el cual se

utilizó diferentes pruebas, por ejemplo, la prueba de la ninhidrina, la prueba

xantoproteica y prueba del biuret para la determinación de proteínas.

OBJETIVO:

Aprender sobre las pruebas analíticas más comunes para determinar proteínas

cualitativas y cuantitativas.

ESQUEMAS DE REACCIONES:

NINHIDRINA + AMINOACIDO

XANTOPROTEINA + AMINOÁCIDO

Da un producto amarillo
BIURET + AMONOACIDO

ESQUEMAS:
MATERIALES:

1. Probeta

2. Pipeta Pasteur

3. Vaso precipitado

4. Agua destilada

5. Mechero de alcohol

6. Pinzas de soporte de tubos de ensayo

7. Baguete

REACTIVOS

1. Hidróxido de sodio

2. Ácido nítrico

3. Biuret

4. Xantoproteina

5. Ninhidrina
PROCEDIMIENTO:

PREPARACIÓN DE MUESTRAS
1. En un vaso precipitado preparamos una mescla 2 ml de clara de huevo más
25 ml de agua destilada.

2. En un vaso precipitado preparamos una mescla 2 ml de leche más 20 ml de

agua destilada.

3. En un vaso precipitado preparamos una mescla 1 cucharada (espátula) de

colapez más 20 ml de agua destilada.
PRUEBA DE NINHIDRINA

NINHIDRINA + HUEVO

I. Se tomó 2 ml de la muestra de clara de huevo en un tubo de ensayo

II. agregue 4 gotas de solución de ninhidrina

III. por último, se llevó a hervir

OBSERVACIÓN

Se observó un cambio de color, un azul tenue

NINHIDRINA + LECHE

I. Se tomó 2 ml de la muestra de leche en un tubo de ensayo

II. Se agregó 4 gotas de solución de ninhidrina

III. por último, se llevó a hervir

OBSERVACIÓN

Se observó un cambio de color (azul tenue)

NINHIDRINA + COLAPEZ

I. Se tomó 2 ml de la muestra de colapez en un tubo de ensayo

II. Se agregó 4 gotas de solución de ninhidrina

III. por último, se llevó a hervir

OBSERVACIÓN

Al finalizar los pasos a seguir no se observó un cambio de coloración

PRUEBA XANTOPROTEICA

MUESTRAS

HUEVO (CLARA DE HUEVO)

Se Tomó aproximadamente 2 ml de la muestra de clara de huevo disuelto en agua

destilada en un tubo de ensayo.

Se agregó 4 gotas de conc. HNO 3 en el tubo de ensayo

Por último, se calentó el tubo de ensayo.

OBSERVACIÓN

Al finalizar el procedimiento se observó un cambio de color, un color amarillo intenso

LECHE

I. Se Tomó aproximadamente 2 ml de la muestra de leche disuelto en agua

destilada en un tubo de ensayo.

II. Se agregó 4 gotas de conc. HNO 3 en el tubo de ensayo

III. Por último, se calentó el tubo de ensayo.

OBSERVACIÓN

Al finalizar el procedimiento se observó un cambio de color, un color amarillo intenso

COLAPEZ

I. Se Tomó aproximadamente 2 ml de la muestra de colapez disuelto en agua

destilada en un tubo de ensayo.

II. Se agregó 4 gotas de conc. HNO 3 en el tubo de ensayo

III. Por último, se calentó el tubo de ensayo.

OBSERVACIÓN

Al finalizar el procedimiento no se observó un cambio de color (transparente)

PRUEBA DE

BIURET MUESTRAS

HUEVO (CLARA DE HUEVO)

I. Se Tomó 2 ml de muestra en un tubo de ensayo

II. Luego se agregó 3 gotas de NaOH en él tubo de ensayo que contiene la

muestra de clara de huevo

III. Después se agregó 8 gotas de solución de CuSO 4 al 1%

IV. Por último, se calentó la mezcla durante 5 minutos

OBSERVACIÓN

Después de culminar el procedimiento se observó un cambio de color, un color marrón

LECHE

I. Se Tomó 2 ml de la muestra de leche en un tubo de ensayo

II. Luego se agregó 3 gotas de NaOH en él tubo de ensayo que contiene la

muestra de leche

III. Después se agregó 8 gotas de solución de CuSO 4 al 1%

IV. Por último, se calentó la mezcla durante 5 minutos

OBSERVACIÓN
 Después de culminar el procedimiento se observó un cambio de color, un color

amarrillo

COLAPEZ

I. Se Tomó 2 ml de muestra de colapez en un tubo de ensayo

II. Luego se agregó 3 gotas de NaOH en él tubo de ensayo que contiene la

muestra de colapez

III. Después se agregó 8 gotas de solución de CuSO4 al 1%

IV. Por último, se calentó la mezcla durante 5 minutos

OBSERVACIÓN

Después de culminar el procedimiento no se observó ningún cambio de color (color

violeta)

CONCLUSIONES Y

RESULTADOS PRUEBA DE

NINHIDRINA

Después de haber realizado todos los experimentos con respecto al a

ninhidrina y las diferentes muestras se puede decir que las muestras de clara de

huevo y leche dan positivo a la ninhdrina y la muestra de colapez da negativo a la

ninhidrina, es decir si la muestra da un calor azul es positivo además indica la

presencia de proteínas y si es de un color diferente es negativo.

PRUEBA DE XANTOPROTEINAS
 Al haber culminado la experimentación con respecto a esta prueba solo

dieron positivo la muestra de la clara de huevo y la muestra de leche porque

mostraron un cambio de color amarillo lo que indica la presencia de proteínas y dio

negativo la muestra de colapez.

PRUEBA DEL BIURET

Al culminar la parte experimental solo la muestra de colapez dio positivo a la

prueba del biuret, Dando un color violeta que indica la presencia de proteínas y las

demás muestras dieron negativo por que dieron un color diferente.

De manera general en la prueba xantoproteica el color amarillo se debe

al ácido xantoproteico que se forma por la nitración de ciertos aminoácidos

presentes en proteínas como la tirosina y el triptófano. La prueba de la ninhidrina

Se trata de una prueba de aminoácidos y proteínas con grupo –NH 2 libre Cuando

dicho grupo – NH 2 reacciona con la ninhidrina, se forma un complejo de color

azul intenso. La prueba de biuret esta prueba se utiliza para detectar la presencia

de enlace peptídico. Cuando se trata con una solución de sulfato de cobre en

presencia de álcali (NaOH o KOH),

DATOS FISICOQUÍMICOS

ÁCIDO NÍTRICO

I. Estado físico líquido

II. Color incolor - amarillo claro

III. Olor picante

IV. Punto de fusión/punto de congelación -18,5 °C a 1.013 hPa

 V. Punto de ebullición o punto inicial de ebullición e intervalo de ebullición 118

°C a 1.013 hPa

VI. Inflamabilidad no combustible

VII. Límite superior e inferior de explosividad no determinado

VIII. Punto de inflamación no determinado

IX. Temperatura de auto-inflamación no determinado

X. Temperatura de descomposición 83 °C a 1.013 hPa

Reacciones fuertes con: Acetona, Aldehidos, Álcalis (lejía), Metales alcalinos,

Alcoholes, Ácido fórmico, Amina, Amoníaco, Anilina, Materiales combustibles,

Diclorometano, Metal alcalinotérreo, Anhídrido acético, Hidracina, Hidrocarburos,

Polvo de metal, Nitrilos, Medios de reducción, Lejía fuerte, Peróxido de hidrógeno,

=> Propiedades explosivas

Liberación de materiales inflamables con Metales, Metales ligeros (debido al

desprendimiento de hidrógeno en un medio ácido/alcalino)( Roth,c .2023)

HIDROXIDO DE SODIO

El hidróxido de sodio puro es un sólido cristalino incoloro que funde a 318 °C

(604,F °F) sin descomponerse, y con un punto de ebullición de 1388 °C (2530,4 °F).

Es altamente soluble en agua

I. Estado físico: sólido Forma según la descripción del producto

II. Color: blanco

III. Olor: característico

IV. Punto de fusión/punto de congelación 323 °C (ECHA)

 V. Punto de ebullición o punto inicial de ebullición e intervalo de ebullición 1.388

°C a 1.013 hPa (ECHA)

VI. Inflamabilidad: no combustible

VII. Límite superior e inferior de explosividad no determinado

VIII. pH (valor) 14 (en solución acuosa: 100 g /l , 20 °C)

IX. Viscosidad cinemática: no relevantes

X. Solubilidad(es) /Hidrosolubilidad 1.090 g /l a 20 °C

XI. Coeficiente de reparto /Coeficiente de reparto n-octanol/agua (valor

logarítmico): no relevantes (inorgánico)

XII. Presión de vapor: no determinado

XIII. Reacciones fuertes con:

Acetona, Cloroformo, Hidrocarburos halogenados, Magnesio, Anhídrido maleico,

Metanol, Nitrato, Nitrilos, Derivado nitrado, Peróxidos, Fósforo, Ácidos, Calcio,

Bromo, Peróxido de hidrógeno, Polvo de metal, => Propiedades explosivas 10.4.

Condiciones que deben evitarse ES LA HUMEDAD. (Roth, c.2022)

NINHIDRINA

La ninhidrina es un poderoso agente reactivo común para visualizar las

bandas de separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también

es

utilizada con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos Esta prueba

es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos casos donde

no da positiva la prueba de Biuret, da positiva la de ninhidrina, e indica

que no

hay proteínas pero sí hay aminoácidos libres. De un ph 4 y 8. (wiquipedia, 2022)

I. Estado físico: sólido

 II. Forma: polvo cristalino

III. Color: amarillo

IV. Olor: característico

V. Punto de fusión/punto de congelación 250 °C

VI. Punto de ebullición o punto inicial de ebullición e intervalo de ebullición no

determinado

VII. Temperatura de descomposición ~250 °C pH (valor) 4,6 – 5 (en solución

acuosa: 10 g /l , 20 °C)

VIII. Densidad aparente ~680 kg/m³

IX. Condiciones que deben evitarse

Conservar alejado del calor. Descomposición comienza a partir de

temperaturas de: ~250 °C. Luz directa. Radiación UV/luz solar.(Roth,c.2022)

CUESTIONARIO

ESCRIBIR TODAS LA REACCIONES INVOLUCRADAS (REFERENCIAS )

BIURET
XANTOPROTEINA

NINHIDRINA
ANEXOS:
 Bibliografía

producto, i. d., roth, c., co, g., schoemperlenstr, k. g., & alemania, k. (s/f). ficha de

datos de seguridad. carlroth.com. recuperado el 7 de enero de 2024, de

https://www.carlroth.com/medias/sdb-6771-es- es.pdf?

context=bwfzdgvyfhnly3vyaxr5rgf0yxnozwv0c3wyotcwmdf8yxbwbgljyx

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mte0zjuxnwjizdfky2m0zme

quimivita, s. a. (s/f). ficha de datos de seguridad. carlroth.com. recuperado el 7 de

enero de 2024, de https://www.carlroth.com/medias/sdb-9274-es-

es.pdf?context=bwfzdgvyfhnly3vyaxr5rgf0yxnozwv0c3wzmzu2ndl8yxbwbgljyx

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