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PRACTICA No.3: Prueba Xantoproteíca para la identificación de proteína.

Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios No.128


Yaneli Duran Sosa- Equipo No.2
Bioquímica-Cecilia Edith Gómez Rodríguez
6.S
febrero-junio 2022

INTRODUCCIÓN:
Los aminoácidos que tienen un anillo aromático (fenilalanina, triptófano y tirosina)
se denominan aminoácidos aromáticos. Se usan para producir hormonas y varias
aminas en el cuerpo. También se usan como un componente para hacer proteínas.
La reacción Xantoproteíca es un procedimiento químico utilizado para determinar
presencia o ausencia de aminoácidos aromáticos, tales como la tirosina y el
triptófano, que pueden estar de forma libre o constituyendo proteínas solubles,
péptidos o polipéptidos.
La reacción básicamente detecta la presencia del grupo bencénico, tanto en
aminoácidos, como en proteínas y péptidos. El ácido nítrico actúa sobre el anillo
bencénico de los aminoácidos que lo poseen, formando nitrocompuestos fenólicos.
La reacción necesita calor para llevarse a cabo, por lo general se forma un
precipitado que enturbia el medio, volviéndolo lechoso. El precipitado puede ser
blanco o amarillo. Finalmente, requiere un paso de alcalinización que acentúa el
color. Para ello se utiliza una base como hidróxido de sodio al 40% o amoníaco.
La reacción será interpretada como positiva si se observa una coloración amarilla
fuerte durante el proceso de calentamiento o naranja oscuro al alcalinizar la
reacción. Los aminoácidos que detecta son principalmente tirosina y triptófano.
El uso de la reacción xantoproteíca forma parte de un set de pruebas
bioquímicas que ayudan a conocer la composición química de alguna sustancia
desconocidas. Esta prueba aporta al análisis químico la detección de proteínas que
contienen grupos bencénicos en su estructura.

OBJETIVO:
Determinar si el tipo de proteínas que se encuentra en cada producto contiene
aminoácidos con anillos bencénicos, como la tirosina, el triptófano y la fenilalanina,
algunos de los cuales son esenciales.

MATERIALES:
▪ 1 gradilla
▪ 18 tubos de ensayo
▪ 1 parrilla de calentamiento
▪ 3 pipetas de 5ml
▪ 1 balanza granataria
▪ 1 vidrio de reloj
▪ 1 mortero con pistilo
▪ Ácido nítrico concentrado
▪ Hidróxido de sodio a 40%
▪ 20 ml de agua destilada
▪ Agua de la llave (la necesaria para enfriar los tubos de ensayo)
▪ 3 alimentos de cada grupo alimenticio; por ejemplo: lácteos, vegetales,
leguminosas

PROCEDIMIENTO:
1. Lo primero que hicimos fue moler las muestras de alimentos que conseguimos,
en este caso fueron carne, huevo, pasas, frijoles y aguacate. Nos ayudamos del
mortero y el pistilo para moler las leguminosas y el aguacate, y de una licuadora
para la carne. Fue necesario agregar un poco de agua destilada a las mezclas para
darles una consistencia más acuosa.
2. Después agregamos 3ml de alimento liquido a los tubos de ensayo (en total
fueron 5 tubos de ensayo).
3. Con la ayuda de una pipeta colocamos 1ml de ácido nítrico en cada uno de los
tubos de ensayo.
4. En un baso de precipitado agregamos 100ml de agua de la llave y con la ayuda
de una parrilla de calentamiento hicimos un baño maría donde posteriormente
colocamos los tubos de ensayo.
5. Transcurridos 5 minutos empezamos a notar cambios en la coloración de las
mezclas a un amarillo oscuro.
6. Posteriormente procedimos a enfriar la mezcla colocando los tubos de ensayo en
el chorro directo de agua fría.
7. Por último agregamos de 10 a 15 gotas de hidróxido de sodio a cada tubo de
ensayo hasta que notamos un cambio de coloración de amarillo oscuro a un naranja
rojizo o rojo muy intenso.
RESULTADOS:

(Imagen 1: Muestras molidas de pasas, frijol, clara de huevo, carne roja y aguacate)

(Imagen 2: Muestras después de verter el 1ml ácido nítrico y calentar a baño maría)
(Imagen 3: Muestras después de verter el hidróxido de sodio al 40%)

DISCUSIÓN:
Después de haber agregado el ácido nítrico y calentarlo a baño maría (imagen 2)
este se torno de un color amarillo oscuro, debido a los residuos de tirosina de las
proteínas por el ácido nítrico dando un compuesto a pH básico.
La prueba xantoproteíca dio positivo a aminoácidos aromáticos (imagen 3). Esto
se da gracias a aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos
bencénicos, tirosina, fenilalanina y triptófano, obteniéndose nitrocompuestos de
color amarillo, que se vuelven anaranjados en medio fuertemente alcalino (NaOH al
40%). En esta prueba se produce la nitración del anillo bencénico presente en
dichos aminoácidos.
Para que la reacción fuera positiva fue necesario agregar un total de 10-15 gotas
de NaOH al 40%.

CONCLUSIÓN:
La práctica concluyó con éxito ya que las 5 muestras dieron positivo a la prueba
xantoproteíca para la identificación de proteínas, esto gracias a que se pudo
apreciar una coloración naranja rojiza al verter el hidróxido de sodio al 40%, lo cual
nos indica que las sustancias tenían en su composición aminoácidos aromáticos los
cuales se caracterizan por tener anillos bencénicos. Durante la practica se
presentaron algunas dificultades, entre ellas que al momento de manipular el ácido
nítrico este cayó sobre nuestras manos y percibimos una sensación de escozor
incluso llevando los guantes puestos, por lo que podemos decir que es un material
peligroso con el cual se debe tener especial atención al maniobrarlo pues podríamos
causar un accidente en el laboratorio.
BIBLIOGRAFÍA:
1. Vázquez-Jorge, Yanira G.; Guerra-Molina, Leticia; Quintana-Tamayo, Jabiel
F. (1 de enero 2014). Caracterización fisicoquímica y contenido de
proteínas de extractos fluidos del ostión de mangle. 06/06/2022, de
Revista Cubana de Química Sitio web:
https://www.redalyc.org/pdf/4435/443543737009.pdf
2. Gil, Marisela. (30 de octubre de 2019). Reacción xantoproteíca:
fundamento, procedimiento, uso. 06/06/2022, de Lifeder Sitio web:
https://www.lifeder.com/reaccion-xantoproteica/

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