Docente : Luis Martínez Guerrero

Integrantes: Abelardo García Nuñez

:Wilson Jiménez Andrade

: Cristian Díaz Garay

Año: 2015 Ciclo:lll Seccion: 2

 Reconocimiento de proteínas

Objetivos:

- Reconocer la presencia de proteínas. Para ello se utilizará un reactivo químico conocido

como Reactivo de Biuret.

- Reconocer el enlace peptídico (entre el carbono y el grupo amino). Las proteínas y los
péptidos van a formar enlace peptídico; mas no los aminoácidos.

- Identificar la presencia de proteínas en diversos alimentos por medio de la reacción de

Biuret, observando la desnaturalización de una proteína.

- Reconocer la presencia de diversidades de proteínas en la sangre y orina.

Equipos

Materiales

 Gradilla
 Pipeta semiautomático
 Pinza de madera

 Matraz de Erlenmeyer

 Vaso Beaker
  Pipeta de vidrio de 0.1ml

Muestra : Clara de huevo

Para el reconocimiento de proteínas necesitaremos un huevo.

Específicamente la clara, Ya que contiene gran cantidad de proteína.

Todos los tubos serán positivos en proteína.

Lo que se quiere en la práctica es reconocerlos con diferentes métodos.

Reactivos

NaOH [] (Hidróxido de sodio)

HNO3 (Ácido Nítrico)

CUSO4 (Sulfato de cobre)
Procedimiento

1.-Rotular los tubos, con letra breve para cada reactivo Biuret, Xantoproteica y Ninhidrina.

2.-Sacar la clara del huevo

3.-Filtrar la clara de huevo

4.- Echar a los tubos según corresponda el método

Procedimientos:

Reacción Biuret :

Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la
presencia del enlace péptido, CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos,

Fundamento

El reactivo de biuret lleva sulfato de cobre (ii) y sosa. Y el Cu en un medio fuertemente alcalino, se
coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (biuret) cuya intensidad
de color depende se la concentración de proteínas, el reactivo vira a rosa en presencia de
polipéptidos de cadena corta.

Proceso

- 3 ml de albumina en el tubo

- 4 a 5 gts. de CUSO4 1%

-3 ml de sol NaOH 20%

- Agitar
1)
Vertir en un tubo de ensayo 3ml de clara de huevo (albumina)

2) Echar 4 a 5 gots de CUSO4 1%

3) Verter 3 ml de solución NaOH 20 %

RESULTADO :

La Reaccion biuret en reconocimiento de proteinas

es positivo.

La reaccion viró color verdoso.

Reacción calentamiento:

Es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, cuando las proteínas
son tratadas con ácido nítrico concentrado.

Fundamento

La aparición de una coloración amarilla, que se torna de color naranja intenso con la adición de
hidróxido de amonio denota la presencia de grupos fenilo , que se forman los compuestos nitrados
en posición 2 y 4, de color amarillo que se intensifica con la adición de álcalis.

Proceso

2 ml de clara de huevo en el tubo

Colocar al mechero de alcohol

1 ml HNO3 concentrado

1) Agregar 2 ml de clara de huevo

 2) Colocar al mechero de alcohol

3) 1 ml HNO3 concentrado

RESULTADO:

El color amarillo vira a naranja por la reacción de HNO3

reaccion por Calentamiento en reconocimiento de proteinas es positivo.
Reacción por reactivo:
Proceso

3 ml de clara de huevo en el tubo

1.5 ml de NaOH []

CuSO4 al 10%

1) Agregar 3 ml de clara de huevo (albumina)

2) Colocar 1.5ml de NaOH []

 3) Por ultimo colocar CuSO4 al 10% 1ml

RESULTADO:

Cambio de color y presencia de anillo

proteico violeta.

Reaccion del hidróxido de sodio

concentrado y del sulfato de cobre
reconocimiento de proteinas positivo.

Resultado

Reacción de Biuret:

La Prueba de Biuret es un ensayo general para las proteínas. Cuando una proteína reacciona con el
cobre (II) sulfato (azul), la prueba positiva es la formación de un complejo de color violeta.
 Ampliación del resultado de la reacción de biuret

La prueba de biuret funciona para cualquier compuesto que

contenga dos o más de los siguientes grupos:

Reacción calentamiento:

Se representa  la producción de un producto de color amarillo en la adición de ácido nítrico realizado

en un ensayo para detectar la presencia de tirosina y triptófano en una proteína .
Muestra: Orina

1.Colocamos la Orina en el vaso precipitado

2.Luego extraemos la orina en un tubo de ensayo

3.ya en el tubo de ensayo se centrifuga por 3 minutos

4. Luego a esto se le agrega Acido Nitrico , para destruir las proteínas

5. A este resultado se aplica NaoH y CuSo4

6. Al reaccionar hay una coloración verdosa y hay liberación de proteínas

Muestra en Sangre

1. Extraemos la sangre del paciente en un tubo de ensayo

2. centrifugamos por 5 minutos la sangre con otro tubo para el contrapeso

3. luego de la centrifuga separamos el suero del paquete globular

4. y este suero resultante se va a hacer reaccionar con Acido Nitrico

5. y va a formar un pequeño halo si hay presencia de proteínas

1.¿Que proteínas encontramos en la sangre?

la hemoglobina, el LDL (transportadora de colesterol), el fibrinógeno, el colágeno, las inmunoglobulinas,

etc

2.¿Que es desnaturalización de proteínas?

La desnaturalización es un cambio estructural de las proteínas o ácidos nucleicos, donde pierden su

estructura nativa, y de esta forma su óptimo funcionamiento y a veces también cambian sus propiedades
físico-químicas.