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UNIVERSIDAD SURCOLOMBIANA SEDE PITALITO

INGENIERIA AGRICOLA - INFORMES DE LABORATORIO

INFORME DE LABORATORIO BIOQUIMICA

DIEGO ANDRES BONILLA LONDOÑO

YEIMY FERNANDA JURADO ROMO

MILVIA RUIZ

MATERIA: BIOQUIMICA

DOCENTE: CAROLINA QUINTERO PUENTES

UNIVERSIDAD SURCOLOMBIANA SEDE PITALITO


INGIENERIA AGRICOLA

2017

Esp. Carolina Quintero Puentes- Docente Catedrá tica. Pá gina 1


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INTRODUCCION
Esta práctica de laboratorio extrajimos el ADN de una forma muy sencilla, vimos
cualitativamente la actividad de la α-amilasa salival, demostramos el comportamiento
químico y físico de las grasas, observamos reacciones comunes de las proteínas,
reconocimos carbohidratos y detectamos glúcidos en alimentos de consumo diario.
MARCO TEORICO
CARBOHIDRATOS: Son moléculas formadas de carbono, hidrogeno y oxígeno, una de las más
importantes es la glucosa, ésta es utilizada por las células para la obtención de energía metabólica.
LÍPIDOS: Son un grupo de biomoléculas cuya característica principal es su insolubilidad en agua y
solubilidad en solventes orgánicos. Están compuestas por carbono e hidrogeno y en menor medida
oxígeno. Cumplen la función de la reserva energética (triglicéridos).ENZIMAS: Las enzimas son
proteínas que catalizan todas las reacciones bioquímicas, establecen el equilibrio químico del
organismo. ÁCIDOS NUCLEICOS: Son grandes moléculas constituidas por la unión de
monómeros, llamados nucleótidos son el ADN y el ARN. PROTEINAS: Son cadenas
polipeptídicas, son polímeros de aminoácidos que están unidos entre sí por medio de enlaces
peptídicos, se diferencian de los oligopéptidos por la cantidad de aminoácidos que contienen.
Tienen funciones específicas de cada tipo de proteína que le permiten a las células defenderse de
agentes externos, logrando una unión selectiva a moléculas.

RESULTADOS
El primer procedimiento fue el de extraer el ADN de un material vegetal y animal. Como ya
teníamos triturado el material vegetal y animal en agua. Vertimos el contenido en tubos de ensayo
exactamente un ml a cada uno, luego acá uno de estos le aplicamos menos de un ml de jabón y lo
dejamos reposar 15 minutos. Al pasar el tiempo determinado Añadimos una pequeña porción de
enzima (jugo de piña triturada en mortero) a cada tubo de ensayo y agitamos suavemente. Luego
ladeamos el tubo de ensayo para poder aplicar lentamente el alcohol (isopropílico al 70-95% o
alcohol etílico) el cual formo una capa sobre la mezcla. Vertimos hasta que tuvimos en el tubo
aproximadamente la misma cantidad de alcohol que el de la mezcla. En un tiempo determinado
vimos cómo se le elevaba el ADN tomamos evidencias.
Limpiamos los tubos de ensayo y seguimos con el procedimiento de enzimas el cual consistió en
pusimos en una gradilla 4 tubos numerados del 1 al 4, colocamos en cada uno de ellos 2 mL de
solución de almidón al 0,2%. En Tubo 1: añadimos 4 gotas de solución diluida de Lugol,

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Observamos resultados, en el tubo 2 Añadimos 1 mL de solución Fehling A y otro de Fehling B.
los calentamos a cada uno con el mechero de bunsen a 100 ºC . Agregamos en los tubos 3 y 4,
una pequeña cantidad (0,5 ml) de saliva. Para ello tras enjuagar la boca, masticamos un chicle para
incentivar la saliva, está la recogimos en un pequeño recipiente. Al tener esto incubamos los tubos 3
y 4 en un baño María de 35-40º C durante 20 minutos., Transcurrido ese tiempo sacamos los tubos
del baño y dejamos enfriar. Después que se enfrió añadimos al tubo 3 ,4 gotas de solución diluida
de Lugol, Añadimos al tubo 4, 1 mL de Fehling A y 1 mL de Fehling B. calentamos el tubo 4 a 100º
C y observamos resultados
Nuestro siguiente procedimiento fue el de carbohidratos el cual consistió en machacar en el
mortero la fruta seleccionada para obtener el jugo. A este jugo le añadimos 5 ml de agua destilada
Y obtuvimos una disolución de glucosa, luego Colocamos 3 tubos de ensayo numerados sobre
la gradilla, Con una pipeta, añadimos 3 ml de la disolución de glucosa preparada al tubo número 1.
Luego 1 ml de disolución de Fehling A, y con otra pipeta distinta, 1 ml de disolución de Fehling B a
ese mismo tubo. Lo calentamos hasta que hubiera ebullición y Observamos su coloración si es roja
o azul luego. Reacción de lugol Colocamos 3 ml de la disolución de glucosa preparada, y, con una
pipeta, añadimos 3 gotas de solución de Lugol. Observamos coloración repetimos este
procedimiento con el jugo de uvas y remolacha

Nuestro siguiente procedimiento fue el aminoácidos y proteínas: reacción xantroproteica


Pusimos dos tubos de ensayo sobre la gradilla a uno le agregamos de 3 ml, de solución de clara de
huevo y al otro 3 ml de caldo, le Añadimos 1 ml de HNO3 concentrado a cada tubo y lo calentamos
al baño maría a 100°C al pasar el determinado tiempo sacamos las muestras de ahí y las Enfriamos.
Añadimos gota a gota una disolución de NaOH al 40% a cada tubo hasta que observamos cambio
de coloración, limpiamos el material para la siguiente reacción .Reacción de Biuret Pusimos dos
tubos de ensayo sobre la gradilla, en uno agregamos 3 ml de albumina de huevo y en el otro 3 ml
de caldo. A cada uno le Añadimos 2 ml de solución de hidróxido de sodio al 20% y 5 gotas de
solución de sulfato cúprico diluida al 1%, Observamos el cambio de coloración. Reacción de
aminoácidos azufrados Colocamos dos tubos de ensayo sobre la gradilla, en uno aplicamos 3 ml
de albumina de huevo y en el otro 3 ml de caldo. Luego Añadimos 2 ml de solución de hidróxido
sódico al 20% a cada tubo, vertimos 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5% a cada tubo y
los Calentamos hasta ebullición.
El ultimo procedimiento fue el lípidos: SAPONIFICACIÓN Colocamos en un tubo de ensayo
2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.lo Agitamos enérgicamente y colocamos el tubo al baño

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María de 20 a 30 minutos. Repetimos el procedimiento con los demás ingredientes, el caldo de
pollo, la clara y la yema del huevo. Aseamos los tubos de ensayo: TINCIÓN Colocamos tres tubos
de ensayo en la gradilla, En cada tubo de ensayo agregamos 2 ml de aceite animal o grasa animal,
Añadimos 4 gotas de solución alcohólica de Sudán III en el primer tubo, Añadimos 4 gotas de tinta
china en el segundo tubo, Añadimos 4 gotas de colorante artificial en el tercer tubo, los agitamos y
dejamos reposar. Repetimos el procedimiento con, el caldo, la yema y la clara de huevo.
SOLUBILIDAD: en dos tubos de ensayo Pusimos 2ml de mantequilla en cada uno. Luego le
añadimos 2 ml de agua a un tubo y 2 ml de solvente orgánico al otro, luego lo agitamos
fuertemente y dejamos reposar. Repetimos el procedimiento con, el caldo, la yema y la clara de
huevo.

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AMINOACIDOS Y PROTEINAS

REACCIÓN XANTROPROTEICA

En esta práctica se realiza la demostración mediante


reacciones sencillas algunas reacciones comunes de proteínas y se examina e identifica la presencia
de proteínas mediante reacciones coloreadas en muestras de alimentos.

Los elementos que utilizamos.

 Caldo de carne
 Clara de huevo
 HNO3 concentrado
 NaOH al 40%

OBSERVACIONES:

Se observó que la clara de huevo se coloro de amarillo claro trasparente, al igual que el caldo
de gallina se tornó a color café, como lo podemos observar en la imagen.

REACCIÓN DE BIURET

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En esta práctica se realiza la demostración mediante reacciones sencillas algunas reacciones
comunes de proteínas y se examina e identifica la presencia de proteínas mediante reacciones
coloreadas en muestras de alimentos.

En esta práctica utilizamos:

 Albumina de huevo
 Caldo de carne
 hidróxido de sodio al 20%
 solución de sulfato cúprico diluida al 1%

OBSERVACIONES

Como se puede observar en la imagen, la albumina de huevo se tornó violeta en la parte de encima
contiene proteína.

REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS

En esta práctica se realiza la demostración mediante reacciones sencillas algunas reacciones


comunes de proteínas y se examina e identifica la presencia de proteínas mediante reacciones
coloreadas en muestras de alimentos.

En esta práctica se utilizaron

 albumina de huevo
 solución de hidróxido sódico al 20%
 solución de acetato de plomo al 5%

OBSERVACIONES

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Se detecta en las proteinas un alto contenido de azufre (S) por lo que se torna de color café como lo
podemos observar en la imagen.

LIPIDOS

Se pretende demostrar mediante reacciones sencillas el comportamiento químico y físico de los


lípidos al igual se va Examinar e identificar la presencia el tipo de lípidos en muestras grasas

SAPONIFICACIÓN

En esta practica se utilizaron los siguientes elementos:

 aceite
 NaOH al 20%.

OBSERVACIONES

Pasado el tiempo se puede observar que la clara que contine la


solucion el aceite esta alterado por lo que se observa esa masa.

TINCIÓN

Se utiliza los siguientes elementos:


 aceite animal
 caldo de carne
 aceite de bebe
 alcohólica de Sudán III
 tinta china

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 colorante artificial

Observar los resultados: en el tubo con Sudán III el aceite solo se tiñe en la parte inferior, mientras
que el aceite de bebe la tinta empieza a esparcirse y en la grasa de animal o caldo se tiñe solo una
parte o se forma un bola el colorante artificial

ENZIMAS

En esta practica se quiere determinar cualitativamente la actividad de la α- amilasa salival


(ptialina)al igual demostrar la acción de la α-amilasa salival sobre el almidón, comprobando que los
productos resultantes de la acción enzimática son reductores y no dan la reacción del yodo.

Elementos que se utilizaron:

 Gradilla
 Tubos de ensayo
 Mechero
 Pipetas graduadas de 5 o 10 ml
 Soporte universal
 Baño María
 Vaso de precipitado de 50 ml
 Agitadores de vidrio
 Embudo
 Papel filtro
 Solución de almidón al 0,2% (preparar en agua destilada calentando)
 Solución de Lugol
 Fehling A
 Fehling B

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LUGOL CON AGUA FELIN A Y FELIN B

SALIVA FELIN A FELIN B

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DISUCION DE RESULTADOS
La extracción del ADN se hace con el fin de conocer la composición genética de los seres vivos.
La extracción del ADN del material vegetal y animal pudimos ver como se desprende el ADN. En
la cual el desprendimiento se debe gracias al sumo de piña el cual tiene la capacidad de romper la
proteína dejando libre las unidades que la forman, este empieza a elevarse hasta la capa de alcohol,
en lo que se pudimos observar una pequeña capa blancuzca en lo que podemos deducir que ese era
el ADN d esos dos materiales.
En este procedimiento tratamos de demostrar mediante reacciones el comportamiento de los
lípidos una de ellas es La saponificación es la hidrolisis con catálisis básica de grasas y aceites para
producir jabón. Los aceites vegetales y las grasas animales son triglicéridos. Al ser tratados con una
base fuerte como (NaOH) se saponifica, es decir se produce el jabón (sal del ácido graso) y la
glicerina (glicerol). En nuestro procedimiento se utilizaron tres tipos de aceite (animal, vegetal y
estético) los tres son aptos para que se pueda producir la saponificación, pero los resultados no
dieron como lo esperábamos en lo que podemos concluir que tuvimos un mal manejo de la de los
reactivos o algún agente externo no lo daño.

Cuestionario Bioquímica
CARBOHIDRATOS

1. Un analista de laboratorio olvido rotular los tubos A y B, con los nombres de los
compuestos que contienen; sabe que la formula molecular de ambos es C6H12O6. Además conoce
que son sustancias diferentes y que no son alquenos ni compuestos cíclicos.
a) ¿Qué tipo de funciones orgánicas son A y B?
A: Son carbohidratos.
B: Son la glucosa y la fructuosa...

b) ¿Qué pruebas debe realizar para identificar cada uno de los compuestos?
La prueba fue la reacción de Seliwanoff. Los carbohidratos se clasifican como cetonas o
aldehídos Las cetonas en el carbono 2 tienen una función que en presencia de un ácido fuerte
producen rápidamente derivados fosfóricos que reaccionan con un difenol contenido en el reactivo

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de selinawanoff, es una reacción de cetosas que es positiva para la fructuosa y negativa para la
glucosa.
c. ¿adicional a las pruebas químicas de laboratorio existen otros mecanismos para la
identificación de estos compuestos?
2. Diseñar un experimento de laboratorio que permita diferenciar azucares reductores de no
reductores.

MATERIALES: 8 tubos de 18x150, vaso de precipitados, gradilla, mechero, pipetas, fehling a,


fehling b, HCL, yodo. PROCEDIMIENTO: Colocar 3ml de cada azúcar en un tubo de ensayo,
añadir 1 cm de fehling a y 1ml de fehling b, colocar al baño maría.

Rxn positiva: tubos color rojo. Rxn negativa: tubos color azul.

IDENTIFICACIÓN DE POLISACÁRIDOS: Colocar 1ml de cada azúcar en los tubos, añadir 1 a


3 gotas de yodo.
Rxn positiva: color morado. Rxn negativa: sin cambio de color.
3. Las personas que desarrollan ejercicio físico, de manera exagerada o sin calentamiento
sufre de fatiga muscular. Explicar la razón por la cual se presenta esta situación.
La fatiga muscular se produce por la acumulación de ácido láctico en el musculo, perdida de
fosfato en el musculo y sangre necesario para la formación del ATP. Disminución del glucógeno
muscular y disminución del aporte sanguíneo y pérdida de oxígeno en los músculos.
4. El almidón, el glucógeno y la celulosa son ejemplos de polisacáridos presentes en plantas y
animales. Indicar en cuál de estos organismos esta almacenada la glucosa como almidón. Explicar
cómo este es degradado por el otro organismo para utilizarlo en sus procesos metabólicos. La
glucosa se degrada por medio de la glucolisis, las enzimas transforman un compuesto en otro, se
caracteriza porque puede usar oxigeno o si es necesario puede continuar el proceso en ausencia de
este.
5. Realizar la ecuación que señale las reacciones de cada uno de las pruebas realizadas para
azucares, explicar el resultado en cada caso.

LÍPIDOS
1. Completar la siguiente información…

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propiedad Ácido graso saturado Ácido graso insaturado


Solubilidad en agua insoluble Insoluble
Punto de fusión 86° 71°
Punto de ebullición
Isomería trans Cis
Estado físico solido Liquido

2. Un tipo de arterioesclerosis, endurecimiento de las arterias, se debe al consumo de grasas


saturadas junto con el colesterol, con el tiempo los depósitos llamados placas se clasifican, se
endurecen, quitando a los vasos su elasticidad.
a) ¿Qué tipo de dieta alimenticia sugieres para evitar esta enfermedad?
Para evitar la aparición de esta enfermedad es necesario llevar una vida sana y ante todo una
buena alimentación. Algunos consejos que pueden ayudarnos son evitar en lo posible la ingesta de
alimentos ricos en grasas saturadas de origen animal como las carnes de cerdo, tocino, embutidos...
En su defecto hay que aumentar el consumo de alimentos ricos en grasas insaturadas como pescado,
carnes blancas, aceite de oliva...
b) ¿Qué es el colesterol?
El colesterol es una sustancia cerosa, de tipo grasosa, que existe naturalmente en todas las partes
del cuerpo. El cuerpo necesita determinada cantidad de colesterol para funcionar adecuadamente.
Pero el exceso de colesterol en la sangre, combinado con otras sustancias, puede adherirse a las
paredes de las arterias. Esto se denomina placa. Las placas pueden estrechar las arterias o incluso
obstruirlas.
c) ¿Por qué razón el consumo de pescado disminuye el resigo de contraer esta enfermedad a
pesar de que es una dieta rica en colesterol y grasas totales?
Los pescados poseen propiedades nutricionales que los convierten en alimentos fundamentales
dentro de lo que se considera una alimentación equilibrada y cardiosaludable. No sólo disponen de
proteínas de excelente calidad, sino que además presentan un perfil de lípidos más saludable que el
de otros alimentos también ricos en proteínas, como las carnes.
1. Los jabones se consideran como sales alcalinas de ácidos grasos
a) Representar la relación entre estearina y el hidróxido de potasio. ¿Qué tipo de jabón se
obtiene, duro o blando?
b) Describir en pocas palabras como ocurre la acción limpiadora de un jabón.
El jabón forma un micela sobre la grasa o solvente orgánico que se quiera remover y como es
soluble en agua hace que estás no se mezclen y las separa

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2. Escribir las ecuaciones de las reacciones ocurridas en el laboratorio, explicar cada una.

AMINOACIDOS Y PROTEINAS

1. En el laboratorio, al realizar el análisis de una muestra, se encuentra que esta es positiva a la


reacción de Biuret y negativa a la reacción xantroproteica. Con estos datos determina qué clase de
proteína contiene la muestra.
2. En el huevo se encuentran dos proteínas fundamentalmente, ovoalbúmina y globulina.
a. ¿Qué clase de proteínas son la ovoalbúmina y la globulina?
ALBÚMINA:
Es una proteína que se encuentra en gran proporción en el plasma sanguíneo, siendo la principal
proteína de la sangre y a su vez la más abundante en el ser humano. Es sintetizada en el hígado.
GLOBULINA
Las globulinas son un grupo de proteínas solubles en agua que se encuentran en todos los
animales y vegetales.
Entre las globulinas más importantes destacan las seroglobulinas (de la sangre), las
lactoglobulinas (de la leche), las ovoglobulinas (del huevo), la legumina, el fibrinógeno, los
anticuerpos (gamma-globulinas) y numerosas proteínas de las semillas.

b. ¿en qué parte del huevo se encuentran estas proteínas?


Está presente en toda la clara del huevo.
3. El mal de Chagas producido por el parasito Tripanosoma Cruzi, fue descubierto en 1909
por el doctor Carlos Das Chagas. Se desarrolla en las zonas más cálidas y pobres del continente.
Desde 1996 algunos instituciones se han encargado de aislar y clonar diversas proteínas del
Tripanosoma cruzi, para poderlas atacar con un fármaco. Este procedimiento se realiza en el espacio
exterior con el fin de obtener cristales homogéneo, más grandes y puros
a) ¿Por qué las proteínas cristalizan mejor en el espacio?
Ya que la ausencia de la gravedad terrestre evita los problemas de convención y sedimentación
b) ¿Qué ventajas ofrece este método?
Cristales más grandes, mejorías en la cristalización y la pureza de esta
c) ¿de qué manera un fármaco puede inhibir la acción de una proteína?
4. La queratina que se encuentra en piel, lana, pluma, uñas de animales y el colágeno
localizado en pezuñas y tendones, son proteínas conjugadas.

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6. ¿Cuáles son los grupos prostéticos que acompañan a estas proteínas? Lípidos: Lipoproteína.
Hidratos de carbono: Glicoproteína.
Fosfatos: Fosfoproteína.
Hemo (Ferroporfirina): Hemoproteína.
Iones metálicos: Metaloproteína.
Nucleótidos de Flavina: Flavoproteína.

a) ¿Qué otras proteínas conjugadas puedes mencionar?


5. Cuando las proteínas son sometidas a la acción de agentes como el claro, el alcohol, los
ácidos o bases experimentan cambios muy notables.
a. ¿Qué nombre recibe este procedimiento?
Recibe el nombre de Desnaturalización de la proteína
a) Expresar dos ejemplos de la cotidianidad, en donde se observen estos cambios.
6. Escribe todas las reacciones ocurridas en el laboratorio.

ACIDOS NUCLEICOS
1. La estructura del genoma humano explica el ordenamiento y la ubicación de los genes den
el ADN, contendió en los cromosomas. Los genes representan manos de 3% del ADN del ser
humano y cumplen con la síntesis de proteínas. La decodificación del genoma ha servido para
determinar las bases moleculares de la vida y del comportamiento, y ha contribuido a una nueva
forma de manipulación de los genes en el campo de la ingeniería genética.
a) La ingeniería genética permite la inserción de material genético de un organismo en el
núcleo de otro. ¿Cuáles son las consecuencias de este procedimiento?
La consecuencia de este procedimiento seria la alteración de la función de la célula y la posible
aparición de enfermedades desconocidas
b) ¿Cuál ha sido la contribución de la biología molecular al campo de la medicina?
c) ¿Cuáles son los riesgos de la utilización de cultivos transgénicos?
Aumento de la toxicidad, aumento de las alergias, propagación de resistencia a los antibióticos,
recombinación de virus y bacterias, aumento del nivel de residuos tóxicos en el alimento.
2. Las cadenas de ADN son características por la doble elice, que es unida mediante puentes
de hidrogeno.
a) ¿Qué sucede si se rompen los puentes de hidrógenos?
b) ¿Cuál de los dos enlaces es más fuerte? ¿Por qué?

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c) ¿por medio de que procedimientos se pueden romper los puentes de hidrogeno?
3. ¿Qué reacciones o mecanismos de laboratorio son utilizados para la identificación de
secuencia de ácidos nucleicos?
4. Escribir las reacciones realizadas en el laboratorio y explicar los resultados.

ENZIMAS
1. ¿Qué es la amilasa desde el punto de vista químico?
Una enzima encargada de degradar el almidón.
La amilasa, es un enzima hidrolasa que tiene la función de catalizar la reacción de
4 del componente α
-Amilasa al digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples. Se produce
principalmente en las glándulas salivales (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas.
2. ¿Qué papel desempeña el almidón en los animales?
Los polisacáridos que ingerimos son de dos tipos principales: almidón amilosa y amilo pectina,
de vegetales y granos, y glucógeno del tejido animal. Los polisacáridos de la dieta menos la
celulosa se hidroliza en la boca mediante una reacción catalizada por la enzima amilasa salival. La
velocidad de la hidrólisis catalizada por esta enzima, disminuye en el estómago por los iones H+1.
La glucosa es el principal producto de la hidrólisis del almidón y glucógeno. Alrededor de un tercio
de la glucosa de la dieta a va los músculos esquelético y cardiaco para la producción y
almacenamiento de energía; cerca de otro tercio va al cerebro; el tercio restante va al hígado para
almacenarse en forma de glucógeno. La glucosa de la dieta que se distribuye en los tejidos se utiliza
en la biosíntesis de otros carbohidratos.
3. ¿Por qué es necesario para los animales que la amilasa actué sobre el almidón?
Porque si la amilasa no actuara sobre el almidón, el almidón no podría ser degradado en
moléculas simples, la glucosa, y no podría ser absorbida por las células.
4. ¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón?
Rompe los enlaces entre los azucares que constituyen al almidón y finalmente después de su
acción deja glucosa libre y maltosa

BIBLIOGRAFIA
 https://www.researchgate.net/publication/276913170_Biologia_molecular_en_medicina_nue
vas_estrategias_que_originan_nuevos_desenlaces .visitado el 09 de octubre de 2017

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 Ciencias al natural ,extracción de ADN, (2011) disponible en


http://ciencias.iesgrancapitan.org/?p=134
 Cristalización en el espacio, visitado el 09 de octubre de 2017,disponible en:
http://www.ott.csic.es/rdcsic/rdcsicesp/rdrn07esp.htm
 https://prezi.com/gld7rkvg1gd4/como-detectar-una-enzima/

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