Crecimiento Microbiano

Crecimiento de poblaciones
 Modos de cul3vo (fermentación)
Cerrado / Batch Semi-con2nuo / Feed-batch Con2nuo

Modos de operación para cultivo celular. X: [biomasa], V: volumen, S: [sustrato]. La línea discontinua vertical indica el inicio del proceso continuo,
ya que generalmente comienza con una fase de lote o lote alimentado (Bolmanis, E. et al 2023, https://doi.org/10.3390/fermentation9030206 ).
Modos de cul3vo (fermentación)
 Curva de crecimiento bacteriano

• Cul$vo puro de bacterias en un medio liquido (cul$vo cerrado / batch).

Cálculo matemá3co del crecimiento bacteriano
Cálculo matemá3co del crecimiento bacteriano

(g) tiempo de generación

(k) velocidad específica de crecimiento

(v) velocidad de división

Cálculo matemá3co del crecimiento bacteriano
 Medidas directas del crecimiento bacteriano.

• Recuento de células totales.

- Microscopia –

• Recuento de celulas viables.

- Recuento de colonias -
Diluciones seriadas y siembra en placa

0.1 ml 0.1 ml
Técnica de siembra por extensión en superficie

4: Extender el inóculo en la placa

1.: Colocar el inóculo en la placa de Petri

2, 3: Esterilizar el asa de vidrio

Morfología de las colonias
 Medidas indirectas del crecimiento bacteriano
• Turbidez.
- fotómetro, espectrofotómetro.
Preguntas?
Control del crecimiento Microbiano
Factores que afectan el crecimiento microbiano
Factores que afectan el crecimiento microbiano
• Temperatura
Factores que afectan el crecimiento microbiano
• pH
Factores que afectan el crecimiento microbiano
• Osmolaridad
• Osmolaridad: producción de solutos compa5bles
Factores que afectan el crecimiento microbiano
• Oxigeno

a) Aerobios estrictos
b) Anaerobios estrictos
c) Anaerobios facultativos
d) Microaerófilos
e) Anaeobios aerotolerantes
• Oxigeno: ¿Por qué el oxígeno es tóxico y como se controla?
Cultivo de microorganismos anaerobios o microaerófilos
Figure 6.5
Control del crecimiento microbiano
 Control del crecimiento microbiano
• Físicos
 Control del crecimiento microbiano
• Químicos

Numero de
células totales

Numero de
células viables
Determinación de Actividad Inhibitoria y Concentración Mínima Inhibitoria.
Preguntas?
Antibióticos
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Antibacterianos
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Antibacterianos
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Penicillinas
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Antibacterianos
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Macrólidos

Mecanismo de acción de los antibióticos tipo MACROLIDOS.

Antibióticos y sus mecanismos de acción: Antibacterianos
 Antibióticos y sus mecanismos de acción: Macrólidos

Mecanismo de acción y resistencia de los an?bió?cos ?po POLIMIXINAS.

Mecanismo de acción de los an?bió?cos ?po QUINOLONAS.

Antibióticos y sus mecanismos de acción: Antibacterianos
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Sulfas y Trimetoprima
Mecanismos de Resistencia a los Antibióticos
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Antifúngicos
Antibióticos y sus mecanismos de acción: Antivirales
Preguntas?
Metabolismo
microbiano
Metabolismo microbiano
 Metabolismo microbiano

Productos de
desecho
nutrientes

Anabolismo
E E
(biosíntesis) Movimiento
Transporte de solutos
Catabolismo
Componentes
(degradación)
celulares

Fuente de energía
Luz
Compuestos orgánicos
Compuestos inorgánicos
Catabolismo y Anabolismo

Microbiology: an Introduction
Chapter 5
2008 Pearson Education
 Proteins Carbohydrates Lipids HYDROLYSIS

Amino acids Sugars Glycerol Fatty acids

Glucose GLYCOLYSIS

ATP Glucose 6P

NADH Fructose 6P

Glyceraldehyde 3P

Phosphoenolpyruvate

Pyruvate
NADH

n
io
FERMENTATION

at
RESPIRATION

id

re
ox

du
ct
io
n
Acetyl CoA

NADH Fermentation end products

ATP Krebs cycle NAD+ ATP

NADH
Electron Transport Chain

NAD+ CO2

ATP
Clasificación de microorganismos atendiendo a la fuente de energía
Clasificación de los microorganismos atendiendo
a la fuente de Carbono

AUTÓTROFOS HETERÓTROFOS
Utilizan compuestos Utilizan compuestos
inorgánicos (CO2) orgánicos (glucosa)
 Clasificación de microorganismos
atendiendo a la fuente de energía y de carbono

E QUIMIOORGANOTROFOS QUIMIOLITOTROFOS FOTOTROFOS

c
Litoautótrofos Fotoautótrofos
AUTÓTROFOS

Quimioheterótrofos Litoheterótrofos Fotoheterótrofos

HETERÓTROFOS
(Heterótrofos) (mixotrofos)
 Ejemplo de una reacción de
oxidación-reducción

Media reacción de cesión de un electrón

Media reacción de captación de un electrón

Formación de agua
Dador de Aceptor de
electrones electrones

Reacción global
 Ejemplo de reacciones con
Par redox
H2 como dador de e-

∆G0‘ producido al
reaccionar el H2
con tres aceptores
diferentes:
1 fumárico
2 nitrato
3 oxígeno

Cuando los e- son donados desde el extremo superior de la torre, pueden ser capturados por
aceptores a distintos niveles. Cuanto mayor sea la diferencia de E’0 entre el dador y el aceptor
de e-, mayor será la energía liberada (∆G0‘)
Transportador de electrones
Uniones de alta energía
 Conservación de la energía
en la fermentación y en la respiración

Membrana
activada

Membrana menos
activada

Fosforilación a nivel de sustrato Fosforilación oxidativa

 Metabolismo Quimioorganotrofo

Hongos
El O2 R. aerobia Protozoos
Procariotas
Aceptor de electrones Aceptor de e-
exógeno = Respiración SO42- sulfato reductoras
Fuente de NO3- desnitrificantes
energía: El O2 R. anaerobia Fe3+ bacterias del Fe
Compuestos Quimioorganotrofos CO2 Metanogénicas y
Orgánicos homoacetogénicas
Aceptor de electrones bacterias
endógeno = Fermentación levaduras
 FERMENTACIÓN Glucolisis

Etapa I: Reacciones Preparatorias

Producción de gliceraldehido-3-P

Etapa II: Oxidación

Obtención de ATP y pirúvico

Etapa III: Reducción

Formación de los productos de fermentación
 Tipos de Fermentación
F. Ácido-Mixta
Succínico
Ácido acético
Láctico
Etanol
F. Alcohólica Escherichia coli
Etanol + CO2 ↓ pH
Saccharomyces cerevisiae F. Butanodiólica
Butanodiol
Etanol
Pirúvico Ácido láctico
Glucosa Ácido fórmico
Enterobacter

F. Láctica
Ácido láctico F. Acetona-Butanol
Lactobacillus Acetona
Butanol
Butírico
Isopropanol
Clostridium

F. Propiónica
Ácido propiónico
Ácido láctico
Propionebacterium
 Ciclo del ácido Cítrico

RESPIRACIÓN
FERMENTACIÓN Glucolisis
Cadena de electrones
ESQUEMA DE LA ATP SINTETASA

CITOPLASMA

membrana

AMBIENTE
 Metabolismo Quimiolitotrofo

SH2, S0 y S2O3- Bacterias

Fuente de energía: no coloreadas del S
Compuestos NH3 Bacterias nitrificantes
Quimiolitotrofos NO2- Bacterias nitrificantes
inorgánicos
Fe2+ Bacterias del hierro
H2 Bacterias del hidrógeno
RESPIRACIÓN ANAEROBIA
Algunos aceptores de electrones alternativos en la respiración anaerobia
 Quimiolitotrofía
Formación de ATP y poder reductor en bacterias del H2
 FOTOSÍNTESIS

Fotosíntesis Algas
Poder reductor el H2O Cianobacterias
oxigénica

Fuente de
energía Fototrofos
La luz SH2, S0
Bacterias coloreadas del S
Verdes del S
Poder reductor un Fotosíntesis Rojas del S
compuesto reducido anoxigénica H2, Compuestos orgánicos
Verdes no del S
Rojas no del S
Fotosíntesis anoxigénica
Fotosíntesis oxigénica
 Microorganismos Fotosintéticos

Producción Fuente de Fuente de Clasificación

de O2 H C
Algas oxigénica H2O CO2 Fotoautótrofos

Cianobacterias oxigénica H2O CO2 Fotoautótrofos

Bacterias verdes del anoxigénica H2, H2S, CO2, acetato, Principalmente fotoautótrofos
S Chlorobiaceae S2O32- butirato

Bacterias púrpura anoxigénica H2, H2S, CO2, acetato, Principalmente fotoautótrofos

del S S2O32- butirato
Chromatiaceae
Bacterias púrpura anoxigénica H2, CO2, Principalmente fotoorganotrofos, pueden ser
no del S compuestos compuestos quimioorganotrofos en oscuridad y sin O2
orgánicos orgánicos

Bacterias verdes anoxigénica H2, CO2, Principalmente fotoorganotrofos, pueden ser

deslizantes compuestos compuestos quimioorganotrofos en oscuridad y sin O2
Chloroflexaceae orgánicos orgánicos

Heliobacterias Compuestos Compuestos Fotoorganotrofos

orgánicos orgánicos
Ciclo de Calvin
 Diversidad metabólica de microorganismos
Poder reductor el H2O Fotosíntesis Algas
oxigénica Cianobacterias

La luz Fototrofos
Fotosíntesis SH2, S0
Poder reductor un Bacterias coloreadas del S
compuesto reducido anoxigénica
Verdes del S
Rojas del S

H2, Compuestos orgánicos

Verdes no del S
Rojas no del S
Fuente de SH2, S0 y S2O3- Bacterias no coloreadas del S
energía Inorgánicos Quimiolitotrofos NH3 Bacterias nitrificantes
NO2- Bacterias nitrificantes
Fe2+ Bacterias del hierro
H2 Bacterias del hidrógeno
Hongos
El O2 R. aerobia Protozoos
Procariotas

Aceptor de electrones Aceptor de e-

exógeno = Respiración
C. químicos Quimiotrofos SO42- sulfato reductoras
El O2 R. anaerobia NO3- desnitrificantes
Fe3+
Orgánicos Quimioorganotrofos CO2 Metanogénicas y
homoacetogénicas

Aceptor de electrones bacterias

endógeno = Fermentación levaduras
 Catabolismo y Anabolismo

Aminoácidos
 Catabolismo y Anabolismo

Ácidos nucleicos
 Fin

Preguntas?
Pruebas Bioquímicas para la
iden4ficación bacteriana.
IMViC: Indol, Rojo de me1lo, Voges-Proskauer y Citrato.
Presencia de Catalasa
Presencia de Ureasa
Producción de Indol
Claves de Identificación
Preguntas?