Facultad de Ciencias de la Vida

Departamento de Ciencias Biológicas

BIOL150-2022

Metabolismo y
Crecimiento Bacteriano

Ruth González ruth.gonzalezm@gmail.com

Metabolismo y Necesidades energéticas...

Productos de desecho

Nutrientes para
la síntesis

Anabolismo
(Biosíntesis)
Energía Energía
para biosíntesis para la movilidad,
transporte
de nutrientes
Macromoléculas y Catabolismo
otros componentes

Productos químicos, luz

(fuente de energía)
Metabolismo. Anabolismo…

Anabolismo: Síntesis de componentes estructurales

Según su fuente de carbono, las bacterias se clasifican en:

Heterótrofas:
Obtienen el carbono a partir de moléculas más
complejas. Ej.: hidratos de carbono, aminoácidos, lípidos.

Autótrofas:
Obtienen el carbono a partir de moléculas simples. Ej.:
CO2 y CH4

La gran mayoría de las bacterias de interés clínico son heterótrofas

Metabolismo. Anabolismo. Biosíntesis de Macromoléculas…

Los microorganismos son la base de todas las cadenas alimenticias

Clasificación bacteriana. Según fuente de energía…

Quimiotróficas o Fototróficas o
Quimiosintéticas: Fotosintéticas:
“Son aquellas que obtienen “Son aquellas que obtienen
su energía a partir de su energía captándola de la
reacciones químicas” luz solar”

E. coli (Enterobacteria) Ocillatoria (Cianobacteria)

Clasificación bacteriana. Según fuente de energía…

Quimiotróficas o Quimiosintéticas:
a) Quimioorganotróficas

Quimioorgano...Sustancia química orgánica

(trophos: alimento)
“Obtienen su energía a través de la utilización
de sustancias químicas orgánicas”
Clasificación bacteriana. Según fuente de energía…

Quimiotróficas o Quimiosintéticas:
a) Quimiolitotróficas

Quimiolito...Sustancia química inorgánica

(lithos: piedra; trophos: alimento)
“Obtienen su energía a través de la utilización
de sustancias químicas inorgánicas”
Metabolismo. Catabolismo…

Catabolismo: Obtención de Energía

Nutrientes Bacterianos:
Macronutrientes:
Son requeridos en gran cantidad…
(Ej.: Carbono, Nitrógeno,Hidrógeno, Oxígeno, Fósforo,
Azufre, Potasio, Magnesio, Calcio, Sodio y Fierro)
Micronutrientes:
Son requeridos en pequeña cantidad…
(Ej.: Cromo, Cobalto, Cobre, Manganeso, Molibdeno, Níquel,
Selenio, Tungsteno, Vanadio y Zinc.)
Glicólisis…

Glucosa

Piruvato
Gasto: 2 ATP
2 ATP Producción: 4 ATP +
2 NADH
2 NADH = 6 ATP
8 ATP

Vías de
Fermentación
 Fermentación del ácido pirúvico.

Glicólisis Ácido Pirúvico

Glucosa
(piruvato)

Fermentación Respiración
anaeróbica aeróbica

Piruvato Piruvato Ciclo de Krebs

piruvato
lactato
descarboxilasa
deshidrogenasa
Acetaldehido Fosforilación
Lactato alcohol oxidativa
deshidrogenasa

Etanol
CO2 + H2O
F. F.
Láctica Alcohólica
 Catabolismo. Ciclo de Krebs
2 Piruvato 2 Acetil- CoA + 2 NADH

Balance energético:

Producción: 8 NADH + 2 FADH2 + 2

GTP

2 GTP ó 2 ATP
8 NADH = 24 ATP
2 FADH2 = 4 ATP

30 ATP
Cadena transportadora de electrones. Fosforilación oxidativa...

Glicólisis = 8 ATP
Ciclo de Krebs = 30 ATP

Rendimiento energético final: 1 Glucosa = 38 ATP

Respiración. Aeróbica y Anaeróbica…

Respiración aeróbica Respiración anaeróbica

E. coli es capaz de realizar ambos tipos de respiración, dependiendo si esta creciendo en
presencia o ausencia de oxígeno.
Respiración. Formas tóxicas del oxígeno…

Estas moléculas tóxicas se generan durante el metabolismo normal de las

bacterias (Respiración aeróbica).

Los radicales superóxido (O2-) e hidroxilo (HO•) reaccionan rápidamente

oxidando diversas macromoléculas orgánicas como lípidos, proteínas y ácidos
nucleicos…

Esta oxidación provoca la destrucción de estructuras biológicas, como

membranas, complejos multiproteicos, DNA, etc.
Enzimas que degradan formas tóxicas del oxígeno…

La presencia de enzimas capaces

de degradar los derivados tóxicos
del O2 le permite a un determinado
microorganismo utilizar esta
molécula como aceptor final de
electrones durante el proceso de la
respiración aeróbica…

Catalasa (-) Catalasa (+) Prueba de la presencia de catalasa:

Colonia suspendida en agua oxigenada
(30%)
( 2H2O2  2H2O + O2 )
Clasificación bacteriana. Según tolerancia al oxígeno…

Anaerobias estrictas: Carecen de SOD, catalasa y peroxidasa por lo que el O2 es

muy tóxico para ellas. No soportan presiones de O2 > al 0,5%.

Ej. Clostridium haemolyticum

Anaerobias moderadas: Soportan presiones de O2 de 2 - 8%. Pueden estar

expuestas al aire por 60-90 minutos sin perder viabilidad.

Ej. Bacteroides fragilis

Anaerobias aerotolerantes: Poseen algún nivel de enzimas detoxificantes.

Ej. Lactobacillus spp., Leuconostoc spp.

Clasificación bacteriana. Según tolerancia al oxígeno…

Microaerófilas: Sobreviven a presiones de O2 menores a la atmosférica (<21%).

Son capnofílicas (requieren CO2).

Ej. Campylobacter spp.

Anaerobias facultativas: Pueden realizar metabolismo anaerobio o aerobio

dependiendo del ambiente.

Ej. Escherichia coli y otras enterobacterias.

Aerobias estrictas: Sólo crecen en presencia de O2.

Ej. Pseudomonas sp.

 Resumen Catabolismo

Obtención de Energía

Fermentaciones:
Glicólisis
láctica
Ciclo de Krebs alcohólica
Sistema de transporte de electrones.

Tolerancia al O2
Anaerobios estrictas
Anaerobios moderadas
Anaerobios aerotolerantes Microaerófilos
Anaerobios facultativas
Aerobios estrictas

Fuente de Energía Quimiotróficos:

Quimiotróficos Quimioorganotróficos
Fototróficos Quimiolitotróficos
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Crecimiento y Medios de
Cultivo
https://www.youtube.com/watch?v=WaCG5_lzzOI
División Bacteriana. Fisión Binaria…

Se requiere coordinación espacial

y temporal (secuencial) en la
síntesis de macromoléculas:

DNA
Proteínas
Hidratos de Carbono
Lípidos

Reflejado (poblacionalmente) por

un aumento en el número de
organismos presentes

El tiempo requerido para la duplicación bacteriana es variable para cada especie

(Ej: 20 min para Escherichia coli; 24 horas para Mycobacterium tuberculosis)
 División Bacteriana. Crecimiento Exponencial

Crecimiento Logarítmico (Progresión Geométrica)

20 21 22 23 24
Curva de Crecimiento Bacteriano…

Etapas de la curva clásica de crecimiento bacteriano:

• Fase lag: Crecimiento lento (etapa de acondicionamiento ambiental)
• Fase exponencial o logarítmica: Crecimiento bacteriano a máxima capacidad
• Fase estacionaria: Detención del crecimiento, no del metabolismo (estrés,
hambruna)
• Fase de decaimiento: Muerte celular (agotamiento del cultivo)
Factores que afectan el Crecimiento Bacteriano...

Temperatura
pH
Disponibilidad de agua y nutrientes
Disponibilidad de oxígeno
Factores que afectan el Crecimiento Bacteriano. TEMPERATURA...

Las reacciones Las reacciones

enzimáticas van enzimáticas
aumentando su ocurren a la
velocidad de máxima velocidad
reacción. posible.

Congelación de la Desnaturación de
membrana; el proteínas; colapso
transporte es tan de la membrana
lento que no hay citoplasmática;
crecimiento. lisis térmica.

Consecuencias moleculares de la temperatura en el crecimiento bacteriano

Factores que afectan el Crecimiento Bacteriano. TEMPERATURA...

Psicrófilos: Temperatura óptima baja (<1 a 15ºC)

Mesófilos: Temperatura óptima en rango medio (25 a 42ºC)
Termófilos: Temperatura óptima alta (50 a 70ºC)
Hipertermófilos: Temperatura óptima muy alta (80 a >100ºC)
Factores que afectan el Crecimiento Bacteriano. SALINIDAD...

No halófilos: No toleran ni siquiera concentraciones moderadas de sal.

Halotolerantes: Toleran concentraciones moderadas de sal; crecen mejor sin ella.
Halófilos: Leves (1 a 6% NaCl) y Moderados (6 a 15% NaCl).
Halófilos extremos: 15 a 30% NaCl.
Factores que afectan el Crecimiento Bacteriano. ACIDEZ (pH)...
Factores que afectan el crecimiento Bacteriano. Oxígeno

Jarra Anaeróbica (GasPack)

Diseñada para el
crecimiento de bacterias
anaeróbicas.
Mecanismo hermético,
posee un catalizador
químico que consume todo
el oxígeno dentro del
recipiente.

Cámara Anaeróbica
Medios de Cultivo…
Condiciones de los medios de cultivo…

Esterilidad…

Tener todos los nutrientes esenciales (agua, fuente de

nitrógeno, fuente de carbono, sales minerales, micronutrientes,
vitaminas, etc.)…

Cumplir con requisitos físicos: temperatura (37ºC), pH neutro

(7.0 - 7.2 ), condición atmosférica (10% CO2)…

Estar protegidos del medio ambiente (Evitar su contaminación

con microbiota ambiental y/o comensal)…
Medios de Cultivo…

¿Cómo se observa desarrollo bacteriano en los medios de cultivo?

En medio líquido…
• Enturbiamiento
• Aparición de grumos
• Formación de un velo o película en la superficie

En medio sólido… formación de colonias

Colonia: Multiplicación de una bacteria que

forma una masa visible a ojo desnudo
Medios de Cultivo…

¿Cuál es la utilidad de los medios de cultivo?

Aislamiento de bacterias a partir de una muestra (agua,

secreciones, aire, alimentos, muestras clínicas)

Obtención de cultivos puros, para el estudio de propiedades

fisiológicas e identificación

Conservación de cepas

Evaluación de antibióticos

Pruebas de esterilidad

Fabricación de sueros, vacunas, etc.

Medios de Cultivo…
Según su estado físico...

Medio semi sólido

Medio sólido (agar 0,8%)
(agar 1,5%)

Medio líquido
Medios de Cultivo…
Según su contenido de nutrientes...

Medios definidos (químicamente):

Contienen cantidades precisas y bien formuladas de diversos
componentes inorgánicos y orgánicos. Reúnen los requerimientos
nutricionales para el desarrollo de un determinado microorganismo…

Medios complejos (indefinidos):

No poseen una formulación precisa.
Se preparan en base a infusiones de
digeridos proteicos (carne, soya,
caseína, extracto de levadura). La
mayoría de estos medios se venden
deshidratados, lo que facilita su
preparación…
Medios de Cultivo…
Agar Chocolate
Según su utilidad...
1.- Corriente (básicos):
Contienen sólo los elementos nutritivos esenciales. Ej.:
caldo Luria (medio líquido) y agar corriente (medio sólido)
2.- Especiales:
Mejorados o enriquecidos: Son medios corrientes Agar MacConkey
adicionados de sustancias de alto valor nutritivo (sangre,
suero, vitaminas, extractos de levaduras), que permiten el
desarrollo de bacterias más exigentes. Ej.: Agar sangre
(medio sólido), agar chocolate (medio sólido)
Medios selectivos: Contienen sustancias inhibidoras para
determinadas bacterias. Ej.: Agar SS para Salmonella y
Shigella, Thayer Martin para N. gonorrhoeae y Agar Agar Sangre
MacConkey para Gram (-)
Medios diferenciales: Permiten establecer si una bacteria
desarrolla una determinada función metabólica que la
diferencia de otras bacterias. Ej.: Citrato de Simmons, TSI,
MIO, LIA, Caldo urea
 Medios de Cultivo. Clasificación

Enriquecidos

Agar Chocolate con Agar Sangre con

Haemophilus influenzae Staphylococcus

epidermidis
 Medios de Cultivo. Clasificación

Enriquecido y diferencial: Agar Sangre.

-hemólisis: Parcial -hemólisis: Total

(se observa halo verdoso) (se observa halo transparente)
-hemólisis: No produce hemólisis
 Medios de Cultivo. Clasificación

Selectivo y diferencial: Agar Mc Conkey.

E. coli S. Typhimurium S. aureus

Gram (-), lac+ Gram (-), lac- Gram (+)

Selectivo: “Selecciona” lo que crece, en este caso sólo Gram (-) debido a la
presencia de cristal violeta y sales biliares.

Diferencial: Dentro de lo que crece, marca diferencias. En este caso los que
utilizan lactosa como fuente de carbono (lac+) de los que no (lac-)
 Medios de Cultivo. Clasificación

Selectivo y diferencial: Agar Manitol Salado.

En este medio sólo crecen

Staphylococcus.
Es selectivo por su alta
concentración de sal.
Diferencia según la
capacidad de utilizar manitol

S. aureus Gram + S. epidermidis Gram +

Utiliza manitol No utiliza manitol