PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS

I. PRECIPITACIÓN POR SALACIÓN (SALTING OUT) 

Procedimiento   

PROCEDIMIENTO IMAGEN

Rompa un huevo y separe la yema de la clara. Descarte la yema y vacíe la clara

1
en un vaso de precipitados de 250 ml. 

Agite suavemente la clara. No agite vigorosamente pues provocaría la

2 producción de espuma, cosa que no es recomendable. (Toda solución proteica
si se agita produce espuma; si la proteína es enzima se desnaturaliza). 
Filtra a través de gasa doble o de un pañuelo limpio de tejido no muy cerrado.
3 Puede filtrar directamente a una probeta para calcular la cantidad de filtrado
que se obtuvo. 

Mida el volumen de filtrado obtenido y vacíelo a otro vaso de precipitados de

4 250 ml. Añada un volumen igual de una solución saturada de sulfato de
amonio. Agite suavemente y deje reposar por unos 10 minutos. 

Filtre a través de papel filtro ordinario.  El precipitado contiene

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la ovoglobulina y el filtrado contiene la ovoalbúmina todavía en solución. 

Disuelva este precipitado en un vaso de precipitados de 100 ml, añadiendo 50

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ml de cloruro de sodio al 1% 

Al filtrado, que ya está en solución al 50% de sulfato de amonio, agréguele

sulfato de amonio sólido para llevarlo al 100% de saturación. Se mide la
cantidad de filtrado y se calcula los gramos de sulfato de amonio que hay que
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añadir sabiendo que por cada 100 ml de filtrado habrá de añadir 37.5 gramos.
Agregue suavemente para que se disuelva bien el sulfato de amonio. Deje
reposar unos 10 minutos. Se precipitan la ovalbúmina. 
 8 Filtre a través de papel filtro ordinario rápido 

Disuelva este nuevo precipitado en otro vaso de precipitados de 100

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ml añadiendo 50 ml de cloruro de sodio al 1% 

Conserve estas soluciones para hacer la siguiente reacción (continuación de la

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práctica)

Lo que acaba de hacer es la precipitación de la ovalbúmina y la

ovoglobulina por salación

II. REACCIÓN DE BIURET

Coloque en su gradilla 3 tubos de ensaye de 13x100 e identifíquelos

1
de alguna manera. 

2 Pipetee 2.0 ml de agua destilada al tubo número 1. 

3 Pipetee 2.0 ml de solución de ovoalbúmina al tubo número 2 y 2.0

ml de solución de ovoglobulina al tubo núm3. (Éstas son las
soluciones que obtuvo en la primera parte). 
 Agregue 2.0 ml del reactivo de Biuret ya preparado a cada uno de
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los 3 tubos. Agite bien y deje reposar por unos 10 minutos. 

Observe el color desarrollado en los tubos 2 y 3 que deben ser

5
positivos para la reacción. 

6 Anote sus resultados y observaciones en la hoja de datos. 

Lo que acaba de hacer es la detección de proteínas por la reacción

de Biuret

El experimento se puede hacer cuantitativo, para lo cual es necesario

primero hacer curva patrón con una serie de tubos de ensaye, a los
cuales se le pipetean cantidades crecientes de proteína, se hace la
reacción y se mide la densidad óptica de cada 1 de los tubos a
550 nanómetros. Se grafican los datos en papel milimétrico. A esta
gráfica se refiere cualquier problema de Cantidad de proteína. 

Nota; 

 
 III. PRECIPITACIÓN POR SOLVENTES ORGÁNICOS

Coloque en la gradilla 4 tubos de ensaye de 18x150 e identifíquelos de

1
alguna manera. 

Pipetee 3.0 ml de albúmina de huevo al punto 0.1%, ya preparada, a los

2
tubos 1,2 y 3. 

3 Pipetee 4.0 ml de agua destilada al tubo número 4 

4 Pipetee 1.0 ml de ácido clorhídrico 0.1N al tubo 1

5 Pipetee 1.0 ml de hidróxido de sodio 0.1N al tubo 2 

6 Pipetee 1.0 ml de solución amortiguadora de acetato pH 4.7 al tubo 3 

7 Pipetee 5.0 ml de etanol al 95% a cada uno de los 4 tubos 

8 Observe la turbidez relativa de los tubos, que indica la precipitación 

9 Anote sus resultados y observaciones en la hoja de datos 

Lo que acaba de hacer es la precipitación de la ovoalbúmina con solvente orgánico

a distintos pHs .

IV. PRECIPITACIÓN POR FORMACIÓN DE SALES

Coloque 6 tubos de ensayo de 13x100 en su gradilla e identificarlos de alguna

1
manera. 

2 Pipetee 2.0 ml de albúmina de huevo al 0.1%, ya preparada, a los tubos 1,3 y 5 

3 Pipetee 2.0 ml de agua destilada a los tubos 2,4 y 6 

4 Pipetee 0.5 ml de cloruro de mercurio al 5% a los tubos 1 y 2

5 Pipetee 0.5 mililitros de nitrato de plata al 1% a los tubos 3 y 4 

6 Pipetee 0.5 ml de ácido tricloroacético al 10% a los tubos 5 y 6 

7 Observe la formación del precipitado en los distintos tubos 

8 Anote sus resultados y observaciones en la hoja de datos 

Lo que acaba de hacer es la precipitación de ovoalbúmina por formación de sales