Proteina

Biología celular y molecular.

ESTUDIANTES:

Darelis Diaz

Maria Fernanda Cabrera Romero

Daniela Morales

Santiago Valenzuela

Sebastian Petro Ramos

Profesor (a): Claudia Milena Galeano Páez.

Facultad de ciencias de la salud

Pre-Médico
MONTERÍA - CÓRDOBA
 10
PRÁCTICA

INTRODUCCION DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS

Las proteínas son polímeros compuestos por varios monómeros llamados aminoácidos.
Estos aminoácidos, a su vez se clasifican dependiendo a si se requiere su ingesta o si son
fabricados por el mismo organismo, en esenciales y no esenciales respectivamente.
En su estructura un aminoácido tiene un grupo amino y otro carboxilo, de ahí, su nombre

Los aminoácidos se unen entre si mediante enlaces peptídicos.

Las proteínas forman parte integral de las estructuras celulares y son los componentes más
importantes gracias a las propiedades fisicoquímicas y biológicas que permiten que se lleve
a cabo numerosas transformaciones metabólicas de procesos vitales.
Las proteínas cumplen varias funciones importantes en nuestro organismo como:
Se han descrito cuatro niveles de organización de las proteínas:
La función principal de una proteína depende de su configuración estructural y cuando esta
se ve alterada por agentes químicos o físicos, pierde su funcionalidad biológica y a este
proceso se le conoce con el nombre de desnaturalización.

♦ Proceso de desnaturalización de una proteína

♦ Fuente (https://propiedadesde.site/propiedades-de-las-proteinas/)
OBJETIVOS

GENERAL
 · Identificar propiedades químicas de las proteínas

ESPECIFICOS (Debes completar con los 3 objetivos específicos de esta práctica,

recuerda que debes ser cuidadoso en la elección de los verbos según el objetivo real que se
quiera lograr con el experimento)

♦ .

♦ .

♦ .

PRELABORATORIO. Estas preguntas debes traerlas respondidas desde la casa

1. Indique las principales características estructurales y funcionales de las
proteínas

R/= 1. Indique las principales características estructurales y funcionales de las

proteínas

Características Estructurales:

• Secuencia de Componentes Aminoacídicos: Las proteínas se componen de cadenas

secuenciales de unidades de aminoácidos conectadas por enlaces peptídicos. La
disposición específica de estos aminoácidos en una proteína es crucial para su función.

• Configuración Tridimensional: Las proteínas tienen la capacidad de adoptar

configuraciones tridimensionales únicas. Estas conformaciones pueden ser clasificadas en
niveles primarios (secuencia de aminoácidos), secundarios (como hélices y hojas
plegadas), terciarios (estructuras plegadas en 3D) y cuaternarios (asociación de múltiples
subunidades
1. Indique las principales características estructurales y funcionales de las proteínas
Características Estructurales:

• Secuencia de Componentes Aminoacídicos: Las proteínas se componen de cadenas

secuenciales de unidades de aminoácidos conectadas por enlaces peptídicos. La
disposición específica de estos aminoácidos en una proteína es crucial para su función.

• Configuración Tridimensional: Las proteínas tienen la capacidad de adoptar

configuraciones tridimensionales únicas. Estas conformaciones pueden ser clasificadas en
niveles primarios (secuencia de aminoácidos), secundarios (como hélices y hojas
plegadas), terciarios (estructuras plegadas en 3D) y cuaternarios (asociación de múltiples
subunidades
• Grupos Químicos Reactivos: Las proteínas incluyen diversos grupos químicos reactivos,
como grupos amino y carboxilo, además de cadenas laterales de aminoácidos que
participan en reacciones químicas y determinan las funciones de la proteína.
Características Funcionales

• Facilitadores de Reacciones Biológicas: Las enzimas son una categoría de proteínas que
desempeñan un papel clave como aceleradores de reacciones químicas en entornos
biológicos, agilizando procesos metabólicos.

• Transporte Molecular: Algunas proteínas, como la hemoglobina, actúan como

transportadores de moléculas vitales, como el oxígeno, a través del cuerpo.

• Soporte Estructural: Proteínas como el colágeno proporcionan una estructura resistente a

tejidos y órganos, manteniendo la integridad de la piel, huesos y cartílagos.

• Defensa Inmunitaria: Las proteínas, incluyendo los anticuerpos, desempeñan un rol

fundamental en la respuesta inmunitaria, ayudando a combatir infecciones y enfermedades.

• Comunicación Celular: Proteínas de membrana, como los receptores, facilitan la

comunicación entre células, permitiendo que estas respondan a señales químicas.

Movimiento y Contracción: Proteínas motoras, como la miosina y actina, posibilitan el

movimiento de las células y la contracción muscular.

• Almacenamiento y Transferencia de Nutrientes: Algunas proteínas tienen la función de

almacenar y transportar nutrientes esenciales, como la ferritina, que almacena hierro en el
hígado.

• Regulación Biológica: Las proteínas pueden actuar como reguladores, controlando

procesos biológicos como la regulación de la expresión génica. Las proteínas, debido a su
diversidad estructural y a la variabilidad de aminoácidos que las conforman, desempeñan
un papel esencial en una amplia gama de

funciones biológicas.

2. Señale la importancia de la estructura primaria, secundaria, terciaria y

cuaternaria, en la determinación de las propiedades funcionales de las
proteínas.

R/= Estructura Primaria:

- Importancia: La estructura primaria se refiere a la secuencia lineal de aminoácidos en una

proteína. Es crucial porque determina la identidad de la proteína y la disposición específica
de los aminoácidos.

- Propiedades Funcionales: La secuencia de aminoácidos en la estructura primaria influye

en la capacidad de la proteína para realizar su función biológica. Cualquier cambio en la
secuencia puede alterar significativamente la función de la proteína.
Estructura Secundaria:

- Importancia: La estructura secundaria se relaciona con los patrones de plegamiento de

segmentos locales de la cadena de aminoácidos, dando lugar a estructuras como hélices
alfa y láminas beta.

- Propiedades Funcionales: La estructura secundaria contribuye a la estabilidad y solidez

de la proteína, así como a la interacción con otras moléculas. Por ejemplo, hélices alfa
pueden formar regiones de unión o sitios activos enzimáticos.

Estructura Terciaria:

- Importancia: La estructura terciaria se refiere al plegamiento tridimensional único de toda

la cadena polipeptídica de la proteína.

- Propiedades Funcionales: La estructura terciaria es esencial para la función biológica de

la proteína, ya que determina la disposición de los grupos funcionales y las interacciones
químicas con su entorno. El plegamiento tridimensional influye en la actividad catalítica de
las enzimas, la unión a ligandos y su capacidad para interactuar con otras proteínas o
moléculas. Estructura Cuaternaria:

- Importancia: La estructura cuaternaria se aplica a proteínas formadas por múltiples

subunidades polipeptídicas que se ensamblan en una estructura funcional más grande.

- Propiedades Funcionales: En proteínas con estructura cuaternaria, esta organización

permite funciones más complejas. Las subunidades pueden cooperar o regularse entre sí, lo
que es esencial en proteínas como las hemoglobinas, que transportan oxígeno, o en enzimas
con múltiples subunidades que tienen funciones específicas en la regulación de procesos
biológicos.

3. ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Biuret?

R/= Esta reacción se basa en cómo los enlaces peptídicos de las proteínas interactúan con
una solución de reactivo de Biuret. Aquí está el procedimiento fundamental:

Las cadenas de aminoácidos están unidas por enlaces peptídicos para formar proteínas.
Cada enlace peptídico se forma entre los grupos amino (-NH2) de un aminoácido y los
grupos carboxilo (-COOH) de otro aminoácido. El reactivo de Biuret, que normalmente es
una solución de sulfato cúprico (CuSO4) en una solución alcalina (como hidróxido de
sodio, NaOH), reacciona con los enlaces peptídicos de las proteínas. Los iones de cobre
(Cu2+) en la solución se forman complejos con los electrones de los enlaces peptídicos
cuando el reactivo de Biuret se combina con las proteínas de la muestra. Esto hace que la
solución cambie de color de azul a púrpura o violeta, dependiendo de la concentración de
proteínas en la muestra.
La intensidad del color violeta aumenta con la concentración de proteínas en la muestra.
En resumen, la reacción de Biuret se basa en la capacidad del reactivo de Biuret para
formar complejos con los enlaces peptídicos de las proteínas, lo que provoca un cambio de
color observable que se utiliza como un indicador cualitativo de la presencia de proteínas
en una muestra. La mayoría de los laboratorios utilizan esta prueba para medir las
concentraciones de proteínas en soluciones; también es una técnica importante en
bioquímica y análisis clínicos.

4. ¿Cuáles son las patologías relacionadas con el aumento o disminución de las

proteínas?

Patologías relacionadas con el aumento de proteínas:

Mieloma múltiple: Aumento de inmunoglobulinas en la sangre.

Amiloidosis: Acumulación anormal de proteínas en los tejidos.

Hiperproteinemia: Elevación general de proteínas en la sangre.

Patologías relacionadas con la disminución de proteínas:

Desnutrición: Falta de ingesta adecuada de proteínas.

Cirrosis hepática: Reducción en la producción de proteínas hepáticas.

Síndrome nefrótico: Pérdida excesiva de proteínas en la orina.

Enteropatía perdedora de proteínas: Pérdida de proteínas a través del tracto digestivo.

Tanto el aumento como la disminución de proteínas en el cuerpo pueden ser signos de

problemas de salud que requieren atención médica.

MATERIALES (Por grupo):

 Clara de huevo (ovoalbúmina)*  Jamón *

 Leche *  Pipetas de pasteur

 Frascos o vasos vacíos de vidrio  Marcador permanente*

transparente. **
 Servilletas de papel de cocina*
 Semillas de papaya*
  Papel de filtro  Jeringa de 10 ml o medidores de
jarabes infantiles. **
 Baño Maria

 Olla **
 Vinagre Ácido acético *

 Reactivo de Biuret

* Materiales que deben traer los estudiantes en casa

** Materiales para experimentos en casa

1) REACCIÓN DE BIURET
PROCEDIMIENTO
1. Rotular 2 tubos de ensayo como leche y huevo.

2. Colocar 1 mL de muestra (leche/clara de huevo) en cada tubo.

3. Añadir 1 mL de hidróxido de sodio al 20%.

4. Agitar suavemente

5. Añadir 4 o 5 gotas de sulfato de cobre al 1%

6. Observar el cambio de coloración.

RESULTADOS
Muestra Color Interpretación (+/-)
LECHE Purpura Positivo
CLARA DE HUEVO Entre purpura Positivo
y violeta
Análisis de resultados
5. ¿Hay diferencias de coloración entre la leche y la clara de huevo?

Si por que la clara del huevo presenta mayor concentración de proteínas que la leche y
la leche por ser blanca da un purpura desabrido o claro

6. ¿Cuál de las dos presenta una mayor concentración de proteínas?

El huevo su yema al no ser de color blanco y ser un alimento alto en proteínas es de

mayor concentración como podemos notar en la reacción de benedi

2) DESNATURALIZACIÓN PROTEICA
 PROCEDIMIENTO

1. Rotular 2 tubos como D (desnaturalización) huevo y D Leche

2. Añadir 2 ml de muestra (leche/clara de huevo) en el tubo de ensayo correspondiente

3. Añadir 5 gotas de ácido acético y agitar.

4. Observar y tomar nota de los cambios

5. Llevar al Baño María por 5 minutos a 90ºC

6. Observar y tomar nota de los cambios

RESULTADOS
Muestra Aspecto Interpretación (Hubo
desnaturalización Si/No)
Leche + Vinagre Si

Clara de huevo + Vinagre Si

Leche +calor Si

Clara de huevo + calor Si

Análisis de resultados

7. ¿Cómo afecta el ácido acético a las proteínas?

R/= : El Ácido Acético produce desnaturalización intracelular reversible de las

proteínas citoplasmáticas. La pérdida de las estructuras secundaria y terciaria ocurre
cuando cambian las condiciones, como aumentar la temperatura o hacer el pH muy
ácido o básico. Si el pH cambia, los grupos R básicos y ácidos pierden sus cargas
iónicas y no pueden formar puentes salinos, lo que produce un cambio en la forma
de la proteína.

8. ¿Crees que si el ácido acético rompe el enlace peptídico la reacción de Biuret

dará positiva?

R/= reacción es positiva cuando la molécula contiene dos uniones peptídicas o más,
cercanas entre si (es decir, tripéptidos en adelante).

9. ¿En qué consiste el proceso de desnaturalización de las proteínas?

 R/= : La desnaturalización de una proteína ocurre cuando hay una alteración de las
interacciones entre los grupos R que estabilizan la estructura secundaria, terciaria o
cuaternaria. Sin embargo, los enlaces amida covalentes de la estructura primaria no
son afectados. La pérdida de las estructuras secundaria y terciaria ocurre cuando
cambian las condiciones, como aumentar la temperatura o hacer el pH muy ácido o
básico. Si el pH cambia, los grupos R básicos y ácidos pierden sus cargas iónicas y
no pueden formar puentes salinos, lo que produce un cambio en la forma de la
proteína. La desnaturalización también puede ocurrir cuando se agregan ciertos
compuestos orgánicos o iones de metales pesados, o mediante agitación mecánica.
Cuando hay una alteración en las interacciones entre los grupos R de una proteína
globular, ésta se despliega como una pieza holgada de espagueti cocido. Con la
pérdida de su forma global (estructura terciaria), la proteína ya no es biológicamente
activa.

10. ¿Qué es la renaturalización de las proteínas?

R/= la renaturalización es el proceso mediante el cual una proteína desnaturalizada puede

volver a convertirse a su estructura 3D original.

3) EFECTO DE LAS ENZIMAS SOBRE LAS PROTEÍNAS

PROCEDIMIENTO

1. Coloca en un mortero 10 semillas de papaya con un poco de agua, macéralas y

filtra con ayuda de una gasa.

2. En otro mortero macera una loncha de jamón con un poco de agua y filtra con ayuda
de una gasa, descarta el sólido y reserva el líquido decantado

3. Coloca en un tubo de ensayo 2 mL del líquido del decantado del jamón, y realiza la
prueba de Biuret. Agite. Anote el color

4. En otro tubo coloca 2 mL del líquido del decantado del jamón y 2 mL del líquido
del decantado de la papaya, agítala y déjela reposar por 25 minutos, transcurrido
este tiempo realizamos prueba de Biuret a esta tubo.

5. Observar y tomar nota de los cambios

RESULTADOS
Muestra Color Interpretación (+/-)
Jamón solo Azul Cielo Positivo
Jamón + papaya Marron Negativo
 Análisis de resultados

1. ¿Qué tipo de enzima se encuentra en las semillas de papaya cuál es su sustrato?

R/= Las semillas de papaya contienen una enzima llamada papaína. La papaína es una
enzima proteolítica, lo que significa que descompone las proteínas en sus aminoácidos
componentes. Su sustrato principal son las proteínas. Esta enzima se utiliza
comúnmente como ablandador de carne debido a su capacidad para descomponer las
fibras proteicas en la carne, haciéndola más tierna

2. Luego de someter el jamón a esta enzima …… ¿Por qué la prueba de Biuret da

negativa?

R/= La prueba de Biuret es una prueba química utilizada para detectar la presencia de
proteínas en una muestra. Esta prueba se basa en la capacidad de las proteínas para
formar complejos coloreados con el reactivo de Biuret en condiciones alcalinas.

Sin embargo, después de someter el jamón a la enzima papaína, esta proteasa

descompone las proteínas presentes en el jamón en sus aminoácidos constituyentes. Al
descomponer las proteínas en aminoácidos, las proteínas ya no están presentes en su
forma original, lo que significa que no hay enlaces peptídicos para reaccionar con el
reactivo de Biuret. Por lo tanto, la prueba de Biuret dará negativa después de someter el
jamón a la enzima papaína, ya que las proteínas han sido descompuestas y ya no están
presentes en su forma estructural intacta para reaccionar con el reactivo.