INSTITUTO DE EDUCACIÓN SUPERIOR TECNOLOGICO PRIVADO

HIPOLITO UNANUE

CARRERA:
LABORATORIO CLINICO

TEMA:
MÉTODOS Y DIAGNÓSTICO PARA SÍFILIS

DOCENTE:
T.M SEGUNDO FRANCISCO RAMIREZ FLORES

INTEGRANTES:

 FLORES MOZOMBITE KAREN JAZMIN

MEDINA SAUCEDO ANTONY
 SANDOVAL TENAZOA KATHERIN
 TENAZOA AMASIFEN LLENY (NO TRABAJO)
 VASQUEZ MOZOMBITE NIDIA
 VILLEGAS OJANAMA JHON KENEDY

TARAPOTO-PERU
2023
 INTRODUCCIÓN
La sífilis es causada por la espiroqueta Treponema pallidum que también afecta únicamente a
los seres humanos. Se trata de un microorganismo móvil de forma espiral, estrechamente
relacionado con los organismos causantes de las treponematosis no venéreas Es una infección
bacteriana que se transmite a través del sexo vaginal, oral o anal con una persona infectada.
También puede transmitirse de una mujer embarazada a su bebé.

Es posible realizar un diagnóstico presuntivo con el uso de 2 tipos de pruebas

serológicas de sífilis:

 Las pruebas no treponémicas: Son aquellas que no determinan anticuerpos

específicos contra T. pallidum, en su lugar detectan anticuerpos contra
antígenos generados comúnmente por los tejidos dañados por este
microorganismo. Presentan un bajo costo, son fáciles de efectuar y son
utilizadas para la detección de una infección reciente, o para evaluar la
respuesta a un tratamiento, sin embargo, su desventaja es la alta
inespecificidad que presentan. Las principales pruebas de este grupo son VDRL
(Venereal Research Disease Laboratory), RPR (Rapid Plasma Reagin).

 Las pruebas treponémicas: Son las que detectan anticuerpos IgG e IgM
específicos contra T. pallidum, gracias a que utilizan antígenos de la membrana
externa del protozoo y antígenos recombinantes. Presentan una alta
especificidad y sensibilidad, por lo cual son utilizadas para confirmar los
resultados obtenidos con las pruebas no treponémicas. Su desventaja es que
no pueden distinguir entre una infección reciente y activa vs. una infección
anterior ya tratada y no contagiosa, debido a que el anticuerpo treponémico
permanece reactivo de por vida en el donador. Las pruebas más conocidas de
este grupo son FTA-ABS (Inmunofluorescencia indirecta con absorción del
suero), TPHA (Micro_ hemaglutinación), ELISA (ensayo de inmunoadsorción
ligado a enzimas).
PRUEBAS

La sífilis se puede diagnosticar mediante el análisis de muestras de:

• Sangre. Los análisis de sangre pueden confirmar la presencia de anticuerpos

que el cuerpo produce para combatir la infección. Los anticuerpos contra la
bacteria que causa la sífilis permanecen en tu cuerpo durante años, por lo que
el examen se puede utilizar para determinar una infección actual o pasada.

• Líquido cefalorraquídeo. Si se sospecha que tienes complicaciones de la sífilis

en el sistema nervioso, tu médico también puede sugerirte que se te tome una
muestra de líquido cefalorraquídeo a través de una punción lumbar.
 FLOCULACIÓN
La floculación es definitiva, supone una agregación de partículas. De este modo
muchas partículas de tamaño pequeño se aglutinan para dar lugar a grandes grumos
conocidos como flóculos. Un concepto importante en este ámbito es el de coagulación,
que consiste en desestabilizar las partículas coloidales que aparecen como resultado
de agregar un coagulante, un reactivo químico, el cual neutraliza las cargas
electrostáticas de las primeras y las lleva a unirse entre sí.
El VDRL es una prueba serológica no treponémica para cribado de sífilis, que también
se usa para evaluar la repuesta a la terapia, para detectar el compromiso del sistema
nervioso central y como ayuda en el diagnóstico de la sífilis congénita. La base de este
test radica en detectar anticuerpos (o inmunoglobulinas) producido por un paciente
infectado por el agente causal de la sífilis. Específicamente detecta anticuerpos
anticardiolipina (IgG, IgM o IgA), visualizados a través de la espuma del fluido en el
tubo de ensayo, proceso conocido como floculación.

VDRL
MUESTRA

 Suero, plasma y LCR

PROCEDIMIENTO
Método cualitativo
1. En la placa de vidrio colocar (50 ul)de muestra
2. Seguidamente colocar una gota (50 ul) del reactivo VDRL
3. Homogenizar suavemente la suspensión
4. Poner la placa sobre un agitador rotatorio a 180 r.p.m. durante 4 minutos. El
exceso de tiempo de agitación puede originar la aparición de falsos positivos.
5. Finalmente, observamos el efecto de floculación en el microscopio a 10x
Método semicuantitativo

 Realizar diluciones dobles de la muestra en la solución salina 9 g/l.

 Proceder para cada dilución, como la prueba cualitativa.

LECTURA E INTERPRETACIÓN
Examinar mediante microscopio óptico (objetivo 10x) la presencia o
ausencia de aglutinación inmediatamente después de la agitación.
Resultados
Básicamente, el resultado del examen VDRL puede ser:
A) Negativo o no reactivo: Si las partículas observadas son en forma de filamentos
cortos dispersos. Significa que la persona nunca entró en contacto con la
bacteria causante de la sífilis o que está curada.
B) Débilmente reactivo: Si las partículas se presentan agrupadas en flóculos
pequeños en el suero es débil reactivo
C) Positivo o reactivo: Si las partículas se presentan agrupadas en flóculos
grandes. Por lo general indica que la persona tiene sífilis
No obstante, también existe la posibilidad de tener resultados falsos positivos debido a
infecciones virales, bacterianas, parasitarias, reacciones de hipersensibilidad o
posvacunación, en estos casos, puede significar que la persona puede tener otras
enfermedades como brucelosis, lepra, hepatitis, paludismo, asma, tuberculosis, cáncer
y enfermedades autoinmunes.

INMUNOCROMATOGRAFIA

La prueba rápida de sífilis es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la

detección cualitativa de anticuerpos (IgG e IgM) contra Treponema Pallidum (TP) en
sangre total, suero o plasma para ayudar en el diagnóstico de sífilis.

La respuesta de anticuerpos a la bacteria TP se puede detectar dentro de los 4 a 7 días

posteriores a la aparición del chancro. La infección permanece detectable hasta que el
paciente recibe el tratamiento adecuado.

PROCEDIMIENTO

 Hacer la extracción sanguínea (venosa o capilar),

 Colocar 2 gotas de la muestra (suero, sangre o plasma) en el casete
 Coloque la muestra en el cartucho.
 Agregue 2 gotas de buffer.
 Esta mezcla migra cromatográficamente a lo largo de la prueba e interactúa
con el antígeno de sífilis inmovilizado.
 Interprete los resultados a los 10 minutos.
 El formato de prueba de doble antígeno puede detectar tanto IgG como IgM en
muestras.
 Si la muestra contiene anticuerpos TP, aparecerá una línea de color en la región
de la línea de prueba, lo que indica un resultado positivo.
 FTA-ABS
Es una prueba de sangre que detecta anticuerpos específicos dirigidos contra el Treponema
palladium. Siendo altamente específico de sífilis. Un resultado positivo es poco probable que
se deba a otra enfermedad. Estos anticuerpos permanecen durante toda la vida.

La prueba de FTA-ABS es útil luego de 3 a 4 semanas después de haber sido infectado por la
bacteria. Puede emplearse tanto en sangre cómo líquido cefalorraquídeo, en este caso para el
diagnóstico de neuro sífilis.

MUESTRA.

Emplear suero o plasma sin inactivar. Si el análisis no se va a realizar en el momento, se

pueden conservar las muestras a – 20 ° C durante un máximo de 4-6 semanas.

PROCEDIMIENTO

1. Preparar una dilución 1/5 de los sueros controles y las muestras con el absorbente 10 ul de
muestra + 40 ul del absorbente

2.Sacar los portaobjetos (sustrato), emplear las improntas necesarios

3.Cubrir las áreas reactivas con las diluciones del control reactivo, no reactivo y muestras
problemas

4.Incubar en cámara húmeda 30 minutos a temperatura ambiente

5.Lavar rápidamente con PBS, usando pizeta. Luego realizar dos lavados de 5 minutos cada
uno, colocando los portaobjetos en el coplin, conteniendo PBS, agitarlo suavemente

6.Diluir la antigamma (G,A,M) humana FITC en PBS, aprox. 1/100. Tener en cuenta la dilución
sugerida por el fabricante

7.Sacar las improntas del PBS, sacudir el exceso sobre papel toalla, pero manteniendo
húmeda las áreas reactivas
8.Cubrir cada área reactiva con la dilución de antigammaglobulina humana, e incubar
en cámara húmeda 30 minutos a temperatura ambiente
9.Lavar como en paso 6. Secar como en paso 8
10.Colocar medio de montaje sobre un cubreobjetos y cubrir las áreas reactivas sin
presionar evitando la formación de burbujas
11.Se recomienda leer inmediatamente en el Microscopio de Fluorescencia o dentro
de las 24 horas conservados entre 2 – 8ºC en oscuridad

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS.
Sueros Reactivos: Las treponemas se observan teñidos en forma homogénea con una
típica fluorescencia verde manzana
Sueros no Reactivos: Ausencia total de fluorescencia o coloración verde amarilla muy
débil opaca y no fluorescente
Reacción Indeterminada: Cuando una muestra no puede interpretarse como reactivo,
ni como no reactivo. Si se diera este caso, el examen deberá repetirse con una segunda
muestra.

REFERENCIAS
https://www.mayoclinic.org/es/diseases-conditions/syphilis/diagnosis-treatment/drc-
20351762

https://tuchequeo.com/pruebas-treponemicas-treponema-pallidum-anticuerpos/#%c2%bfpor-
que-existen-las-pruebas-treponemicas

https://es.scribd.com/doc/96890387/Practica-FTA-ABS