TREPONEMAS

Clasificación
ORDEN. SPIROCHAETALES
FAMILIA SPIROCHAETACEAE
TREPONEMA PALLIDUM
T. pallidum subsp. Pallidum (sífilis via sexual)
T. pallidum subsp. Endemicum (sífilis no sexual y
endemica)
T. pallidum subsp. Pertenue (frambesia o pian)
TREPONEMA CARATEUM (mal de pinto)
TREPONEMA PALLIDUM
SIFILIS
ETS
Caracteristicas morfologicas
Bacterias gramnegativas
4-14 espirales uniformes
15m de longitud por 0.2 m de ancho
Espiroqueta
sífilis
El perdiodo de incubacion de la enfermedad es de 10 a
90 dias con un promedio de 3 semanas. El treponema
penetra a la piel a traves de pequeñas soluciones de
continuidad. T pallidum subespecie pallidum esta
asosciado a dos entiedades nosologicas:
Sífilis adquirida por via sexual
Sífilis neonatal
sífilis
Sífilis temprana
Sífilis secundaria
Sífilis latente
Sífilis tardia
Sífilis neonatal
Sífilis temprana
Chancros en genitales, labios, boca, dedos de las
manos, mamas y pubis.
Pápula erosionada que se transforma en una ulcera
único o múltiples en el sitio de infección,
generalmente no duele.
El tiempo de duración del chancro sin tratamiento
varia de 3-6 semanas y al desaparecer deja una cicatriz.
Sífilis secundaria
Se manifiesta de 6 a 8 semanas después del chancro
primario, el cual en ocasiones aun persiste cuando
aparecen las lesiones cutáneas de la sífilis secundaria.
Los signos y síntomas pueden ser variados: mialgias,
astenia, adinamia, hipertermia y crecimiento glandular

En la sífilis secundaria la prueba de serología es

positiva en una dilución generalmente superior a 1:16
Sífilis secundaria
Sífilis terciaria o tardía
Aparece de 2 a 10 años después de la sífilis secundaria
Se caracteriza por gomas sifilíticos en piel (sífilis
benigna tardía)
Manifestaciones cardiovasculares (sífilis
cardiovascular) en donde se afecta la válvula aortica,
con secuelas como insuficiencia valvular aortica, con
secuelas como insuficiencia valvular aortica, estenosis
y aneurismas aórticos.
La sífilis de sistema nervioso central
Diagnostico en el laboratorio
Examen directo (microscopia de campo oscuro y
fluorescencia directa)
Examen indirecto (serología)
VDRL y RPR (rapid plasma reagin) *pruebas no
treponemicas
FTAABS (fluorescent treponemal antibody absorption) y
MHA-TP (microhemoaglutinacion para T pallidum)
Por cultivo en células epiteliales de conejo
Obtención de muestras
Para la microscopia de campo oscuro, la muestra debe
ser un fluido seroso libre de eritrocitos y residuos de
tejidos o puede ser material obtenido por aspiración de
ganglio; se limpia la lesión con solución salina, solo si
estuviera contaminada. Puede ser necesario realizar
una abrasión leve de la lesión, para obtener fluido
seroso, el cual se coloca directamente en una lamina,
la que debe examinarse antes de transcurridos 20
minutos ya que el treponema pallidum es muy sensible
al oxigeno, calor, cambios de pH y desecación
Para la fluorescencia directa se obtiene la muestra de
manera similar que la descrita en campo oscuro, pero
se deja secar al medio ambiente. También se puede
trabajar con muestras parafinadas de cualquier tejido
Para western blot se trabaja con suero y para PCR con
muestras sanguíneas, exudados y tejidos
Microscopia en campo oscuro
Es la prueba de elección en sífilis primaria asintomática.
Las bacterias T. pallidum son tan delgados que no pueden
ser observadas en un microscopio de luz a campo normal
y es necesario un microscopio que tenga campo oscuro
T. pallidum se diferencia de otros microorganismos
espiralados porque son mas delgados, sus espirales son
muy regulares y presentan un movimiento característico
en tirabuzón.
Este examen no descarta la sífilis y se deben realizar
obligatoriamente pruebas serológicas
T. pallidum en campo oscuro
Inmunofluorescencia directa
Mediante este examen se pueden detectar la presencia
de subespecies de T pallidum en tejidos, fluidos
corporales, secreciones y exudados de lesiones. Se
necesita un microscopio de fluorescencia equipado con
condensador de campo oscuro y una lámpara para
iluminación de fluorescencia. La prueba permite
diferenciar treponemas patógenos de no patógenos,
por una reacción antígeno-anticuerpo
Inoculación de animales
RIT (rabbit infectivity test). Consiste en la inoculación
de T pallidum en los testículos de un conejo. Esta
prueba es la estándar de oro, que determina la
sensibilidad y especificidad de las pruebas para el
diagnostico de sífilis. Es el método mas antiguo para
detectar una infección de T. pallidum.
cultivo
El cultivo de T pallidum solo se ha logrado en células
epiteliales de conejo. La multiplicación de las bacterias
es muy lenta, siendo el tiempo promedio entre 30 y 33
horas.
Pruebas serológicas
Las pruebas serológicas son de dos tipos:
-treponemicas
-no treponemicas
Pruebas treponemicas
Son usadas para el despistaje, son económicas y sirven
para evaluar la eficacia del tratamiento. Sus limitaciones
consisten en la baja sensibilidad en sífilis primaria
temprana, con prueba de campo oscuro positiva, en
sífilis tardía y en resultados falsos positivos.
Emplean como antígeno al T. pallidum subespecie
pallidum y detectan anticuerpos específicos
antitreponemicos. Se utiliza para verificar cuando las
pruebas no treponemicas son reactivas o pruebas
confirmatorias
Pruebas no treponemicas
Incluyen VDRL (Venereal Disease Research
Laboratory)
PRP (Rapid Plasma Reagin)
USR (Unheated- serum reagin)
TRUST (Toluidine red unheated-serum test)
Las mas usadas son VDRL y PRP
Todas estas pruebas están basadas en antígenos en
solución alcohólica, que contiene cardinolipina,
colesterol y lectina purificada en cantidad adecuada
para producir reacciones estándares
se denomina reagina a una proteína similar a un
anticuerpo, que se une a un antígeno, como pueden ser
la cardiolipina y la lecitina en las pruebas no
treponemicas y se denominan a anticuerpos reaginicos
a anticuerpos no treponemicos producidos por un
individuo infectado con T pallidum
Los anticuerpos reaginicos no son exclusivos de la sífilis y también son producidos
por otras enfermedades infecciosas como :
Sarampión
Varicela
Hepatitis
Mononucleosis infecciosa
Lepra
Tuberculosis
Malaria
Leptospirosis
Tripanosomiasis
Linfogranuloma venéreo
Enfermedades autoinmunes
drogadictos
VDRL
MATERIAL
Suero del paciente
Placa de vidrio
Aguja no.21 sin bisel
Tubos de vidrio de 13x75
Pipeta automática
EQUIPO
Centrifuga
Baño maria
Agitador de placas
Microscopio
REACTIVOS
Suero control negativo
Suero control positivo
Reactivo VDRL
METODO CUALITATIVO
En una placa de vidrio colocar 50 microlitos de suero
Colocar 50 microlitos de suero control negativo en la
misma placa de vidrio a una distancia considerable
para evitar su mezcla con el agitador
Colocar 50 microlitos de suero control positivo
Añadir una gota de antígeno en suspensión
estabilizado previamente re suspendido utilizando una
aguja no. 21 sin bisel
Colocar en el agitador 4 minutos
Observar aglutinación a 10x
Aglutinación positiva
Aglutinación negativa
Metodo cuantitativo
Colocar en una gradilla 6 tubos de 12x75 y numerarlos
Agregar a cada tubo 0.5 ml de solución salina al 0.9%
Depositar 0,5 ml de suero al tubo 1 y mezclar
Depositar 0.5 ml de la solución del tubo 1 al tubo 2 y mezclar
Continuar la operación hasta el tubo 6 y desechar los últimos
0,5 ml.
Depositar 50 microlitros de cada dilución a la placa
Añadir una gota de antígeno
Mezclar en el agitador 5 minutos
Observar a 10x
diluciones
tubo Dilucion
1 1:2
2 1:4
3 1:8
4 1:16
5 1:32
6 1:64
Se considera positiva a una VDRL con un título mayor
o igual a 1/4. Se considera que un cambio en el título
de dos diluciones es clínicamente significativo. Por
ejemplo: un cambio de 1/16 a 1/4 habla de la
efectividad del tratamiento mientras que un cambio de
1/8 a 1/32 nos indica que la enfermedad está más
activa.
RPR
Es una prueba diseñada para detectar reagina en el
suero de manera rápida, no requiere inactivación por
el calor. La muestra se mezcla con una suspensión que
posee cardiolipina, lecitina y colesterol en partículas
de carbón. Si la muestra es positiva se observan
pequeños grumos negros (floculación). El resultado se
reporta como reactivo o no reactivo; todos aquellos
reactivos deben ser diluidos seriadamente para realizar
la titulación y se reporta la dilución mas alta que
exhibe la reacción.
PREVENCION
Existen varias formas de evitar el contagio de
la sífilis:
Limite la cantidad de compañeros sexuales;
Utilice un condón masculino o femenino**;
Si usted piensa que puede estar infectado(a),
evite el contacto sexual y acuda a la clínica
local de ETS, a un hospital o consulte a su
médico;
Notifique a todos sus contactos sexuales de
inmediato para que puedan realizarse un
examen y recibir tratamiento;
Todas las mujeres embarazadas deben ser
sometidas al menos a un examen de sangre
prenatal que permita determinar la
presencia de sífilis.
Uso del condón
El uso de condones puede
evitar la enfermedad sólo si
la llaga inicial de contacto se
encuentra en el área del pene
o la vagina. Sin embargo, la
transmisión puede ocurrir si
la llaga no se encuentra en
las áreas cubiertas por el
condón .
Mitos
Esta enfermedad, no se propaga por el contacto con
inodoros, manillas de puertas, piscinas, bañeras y
jacuzzis ni por compartir ropa ni cubiertos.