Universidad Autónoma de Chihuahua

Facultad de Ciencias Químicas

Practica # 1
Uso de Micropipetas

Integrantes:
• Miriam Salas Méndez 355375
• Yolanda Gisell Álvarez Serna
 Objetivo
Aprender el uso correcto de las micropipetas, así como sus partes y su
funcionamiento.
Realizar una curva de calibración para comprender el uso de lector de placas de
ELISA.

Resultados obtenidos
En la practica realizada se llevo a cabo el uso correcto de micropipetas para obtener
diluciones seriadas por triplicado en una placa ELISA, a partir de 200 µL de safranina
con concentración de 10 mg/mL, a partir de ello se tomo la lectura de la absorbancia
a 405 nm en el equipo Multiskan FC de Thermo SCIENTIFIC.
La safranina (también llamada Safranina O o rojo básico 2), es un colorante
biológico, de contraste que se utiliza en la Tinción de Gram para proporcionar un
color violeta más intenso a las bacterias Gram+ y tiñe de rosa a las bacterias G- ;
en histología y en citología.
En la tabla 1.0 se puede observar los resultados obtenidos de los integrantes del
equipo los cuales comprenden la absorbancia las soluciones seriadas y su
promedio.

Interpretación de resultados
Tabla 1.0 absorbencias y concentraciones.

6.0000 3.7497 2.0455 1.0863 0.4359 0.2971 0.1742 0.1851 0.0774 0.0757 0.1055 0.0995
6.0000 3.9220 2.0600 1.0198 0.5381 0.2958 0.1921 0.2038 0.0744 0.0984 0.0743 0.0756
6.0000 3.9059 2.0664 1.0035 0.5859 0.3230 0.2175 0.2059 0.1075 0.1032 0.0821 0.0748
0.1326 0.1095 0.0777 0.1385 0.1062 0.0994 0.1063 0.0837 0.0891 0.0880 0.0676 0.0956
6.0000 3.6806 1.7291 0.9735 0.4900 0.2945 0.1493 0.1495 0.0998 0.1026 0.0745 0.0752
6.0000 3.2979 1.9753 0.7636 0.4038 0.2018 0.1580 0.1446 0.0740 0.0887 0.1115 0.0847
5.8290 3.0368 1.6798 0.8204 0.4285 0.2153 0.1324 0.1176 0.0849 0.0778 0.0861 0.0830
0.0891 0.0764 0.0855 0.0697 0.0857 0.0968 0.1084 0.1127 0.0831 0.0834 0.1021 0.0802

A continuación, se realizaron las gráficas de absorbencia contra las concentraciones

de cada dilución, con la finalidad de obtener la ecuación de la recta y su coeficiente
de correlación el cual permite medir la relación lineal que tienen, las 2 variables
presentadas en valores próximos a 1; indica una correlación fuerte y positiva.
Valores próximos en -1 indican una correlación fuerte y negativa. Los valores
próximos a cero indican que no hay correlación lineal. (Pendas, 2009)
 A continuación, se muestra en la tabla 2.0 el primer gráfico de un integrante del
equipo, hoy el primer gráfico muestra una R2 con un valor de 0.9988 y esto es una
correlación lineal fuerte y positiva ya que su coeficiente de correlación tiene un valor
de 0.9988.
Tabla 2.0 Primer integrante.

Tendencia de las concentraciones de Miriam

4.0000

3.5000 y = 0.6669x + 0.0399

R² = 0.9988
3.0000

2.5000

2.0000

1.5000

1.0000

0.5000

0.0000
0.0000 1.0000 2.0000 3.0000 4.0000 5.0000 6.0000

Tenemos la tabla o gráfico de la curva de calibración 3.0 aquí podemos observar

que la R2 obtuvo un valor de 0.9993, y se observa al igual una correlación lineal y
positiva ya que su coeficiente de correlación tiene ese valor.
Tabla 3.0 segundo integrante.
 En la tabla número cuatro se va a observar la absorbancia y las concentraciones
para la realización de la curva de calibración en total del equipo número 1

Tabla 4.0

concentración Absorbancia desviación estándar

0.156 0.16775 0.03588887
0.156 0.170583333 0.030810739
0.312 0.27125 0.049886381
0.625 0.480366667 0.070842238
1.25 0.944516667 0.125079933
2.5 1.897885714 0.175364163
5 3.6105 0.356262686
en esta parte tenemos el gráfico de la curva de valoración con una absorbancia a
405 NM dicha curva ya se encuentra con su r cuadrada y su ecuación de la recta
del equipo uno dando así el promedio del equipo uno

Tabla 5.0

Para finalizar en el gráfico 5.0 se encuentra el promedio por número de cada

persona del equipo que anteriormente está señalizado con las tablas 2.0 y 3.0.
Así mismo en cada gráfico hoy se encuentra su ecuación de la recta conjunto a su
R2.

Conclusiones
Se logró obtener las concentraciones de cada pozo con una R² promedio de
0.9996,esto indica una precisión casi perfecta debido a la cercanía al número uno.
La variación de 5e-4 puede deberse al error humano que se encuentra siempre
presente en cualquier procedimiento realizado por una persona. El gráfico 2.0
muestra la curva del primer integrante de equipo, mientras que el 3.0 muestra el
del segundo integrante de equipo.
Se decidió realizar la lectura en espectrofotómetro a 406 nm, debido a la
coloración rojiza-naranja que se presentó en las celdas, ya que el color rojo se
encuentra en una longitud de onda.
Nota: Se utilizó safranina como colorante.

Referencias bibliográficas
● Harris, D. (2022). ANÁLISIS QUÍMICO CUANTITATIVO. Reverte.
● Pendás, L. C. T., Ortega, M. M., Ortega, R. M. M., Abreu, A. P., &

Cánovas, A.M(2009). EL COEFICIENTE DE CORRELACIÓN DE LOS

RANGOS DE SPEARMAN CARACTERIZACION. Revista Habanera de

Ciencias Médicas, 8(2).