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PRÁCTICA

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE MOLÉCULAS ORGÁNICAS:

CARBOHIDRATOS

INTRODUCCIÓN

La mayor parte de la materia orgánica de las células está constituida por cuatro tipos
principales de macromoléculas: los ácidos nucleicos, las proteínas, los carbohidratos y los
lípidos.

Los glúcidos o carbohidratos son moléculas formadas por C, H y O, donde los átomos de
carbono están unidos a radicales hidroxilo o alcohol (-OH) y a radicales hidrógenos (-H).
El nombre de Hidratos de carbono o carbohidratos se debe a que la mayoría de ellos
responde a la fórmula (CH 2O)n. En todos los glúcidos siempre hay un grupo carbonilo
C=O, que puede ser un grupo aldehído o un grupo cetona, pudiendo definirse a los
glúcidos como polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas.

Los carbohidratos se clasifican según su tamaño molecular, desde los más pequeños o
azúcares simples: monosacáridos (glucosa, galactosa y fructosa), los cuales pueden estar
formados moléculas de entre 3 a 6 átomos de carbono, como se mencionó antes la posición
del grupo funcional carbonilo los diferencia en Aldehídos y Cetonas; los intermedios u
oligosacáridos, formados por la unión de hasta nueve monosacáridos, donde se encuentran
disacáridos como la maltosa, sacarosa y lactosa, y las moléculas con más de 10 átomos
de carbono en su estructura llamadas polisacáridos, como ejemplo tenemos el almidón,
glucógeno y la celulosa. Los polisacáridos pueden estar formados solo por un solo
monosacárido y se denominan homopolisacáridos como por ejemplo el glucógeno,
formado por glucosa y que es la forma en que se almacena la glucosa en las células
animales o por diferentes monosacáridos, y se denominan heteropolisacáridos, como por
ejemplo la heparina sustancia anticoagulante que está presente en las células cebadas o
mastocitos.

Los de monosacáridos se unen entre sí mediante enlaces de tipo O-glucosídico, y con los
aminoácidos mediante enlaces N-glucosídicos. Cuando los carbohidratos están unidos a
otra molécula como lípidos (glucolípidos) o proteínas (glucoproteínas), se denominan
Heterósidos.
El carácter reductor de los monosacáridos viene determinado por la posibilidad de su
grupo carbonilo de reaccionar con agentes oxidantes como el Cu++.

Los polisacáridos, como el almidón, reaccionan con el yodo presente en el Lugol y forman
cadenas de poliyoduro Esta reacción es el resultado de la formación de cadenas de
poliyoduro, formando un color azul oscuro a negro.

DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS

OBJETIVOS GENERALES
♦ Determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos

OBJETIVOS ESPECÍFICOS (Debes completar con los 3 objetivos específicos de esta

práctica, recuerda que debes ser cuidadoso en la elección de los verbos según el objetivo
real que se quiera lograr con el experimento)
 ♦ .

♦ .

♦ .

PRELABORATORIO. Estas preguntas debes traerlas respondidas desde la casa.

1 ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Benedict? ¿Qué tipo de glúcidos dan
positivo en esta reacción?

2 ¿Cuál es la estructura química de la glucosa y de la sacarosa?

3 ¿Cómo se denominan los carbohidratos presentes en la naranja y en la leche?. Según

su composición que tipo de carbohidratos son: monosacáridos, disacáridos o
polisacáridos. ¿Cuál es su estructura química?

4 ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Lugol? ¿Qué tipo de carbohidratos

resultan positivos en esta reacción?

5 ¿Cuál es la principal diferencia entre el Isodine y Lugol en relación con la

concentración de yodo?

MATERIALES
Los materiales con * deben ser traídos por el estudiante (por grupos) o disponer de ellos en
casa, según el caso.
 Marcador permanente

 Sacarosa* (Azúcar blanca)  Isodine solución*

 Glucosa  Lugol

 Leche entera*  Frascos o Vasos transparente pequeños

(casa)
 1 Papa *
 Celular, cámara o similar para poder
 1 Naranja* grabar el procedimiento y tomar fotos
de los resultados de tus experimentos
 1 jeringa de 5mL, o algún medidor de (casa)
que permita medir cantidades de 1 a
5mL  Servilletas de papel de cocina
 Cuchillo o Bisturí.  Encendedor o Fósforo
 Ácido acético (vinagre blanco)  Almidón* (fécula de m
PROCEDIMIENTO

1) REACCIÓN DE BENEDICT.
1. Rotular 4 frascos como leche, azúcar, naranja y glucosa.
2. Colocar 1 mL de cada muestra a analizar (leche, solución de sacarosa, naranja y
glucosa) en cada frasco o tubo de ensayo que previamente rotulaste con el nombre
de la muestra a añadir.
3. Añadir 1 mL de reactivo de Benedict y mezclar.
4. Calentar el frasco o tubo de ensayo en baño maría entre 5 -10 min.
5. Sacar los tubos o frascos del Baño María. CUIDADO, estarán calientes.
6. Observar si hay cambio de coloración de la solución
7. Toma fotos o Video y anota los resultados
Interpretación de los Resultados

Negativo Trazas de azúcares reductores. Moderado. Alto

RESULTADOS

MUESTRAS COLOR Presencia de OBSERVACIONES

 azúcares reductores
INTERPRETACIO (SI o NO)
N EN %

GLUCOSA

NARANJA

LECHE

SACAROSA

Análisis de resultados

1) ¿Según los resultados anteriores: ¿cuáles muestras fueron positivas?

2) ¿POR QUÉ estas muestras resultan positivas?
3) Sabiendo que BENEDICT es semicuantitativa. ¿Cuál de las muestras tiene mayor
concentración de AZÚCARES REDUCTORES?

2) AZÚCARES NO REDUCTORES

1. Rotular el frasco como H o Hidrólisis

2. Añadir 1mL de la solución de Sacarosa.

3. Provocar hidrólisis de la sacarosa agregando 20 gotas de ácido acético incubar 5 a

10 min en baño maría.

4. Sacar del baño maría.

5. Adicionar 1 mL de reactivo de Benedict

6. Calentar nuevamente en baño de María 5 – 10 minutos

7. Observar si ocurre algún cambio. Tomar fotos o video de tus resultados

La reacción positiva nos dice que hemos conseguido romper el enlace O-glucosídico de la
sacarosa.

RESULTADOS
INTERPRETACION Presencia de azúcares
MUESTRAS COLOR
EN % reductores (SI o NO)
SACAROSA SIN ACIDO
ACÉTICO
SACAROSA CON
ACIDO ACETICO

Recuerda que los resultados de la sacarosa sin ácido acético los obtuviste en el experimento
anterior

1) ¿
2)
3) Cuál de las dos muestras (sacarosa sin ácido acético o con ácido acético tiene una
mayor concentración de AZÚCARES REDUCTORES?
4) ¿Por qué́ ?

3) REACCIÓN DE LUGOL:
Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto con unas gotas
de Isodine solución o Lugol toma un color azul-violeta característico. La disolución del
frasco se torna de color azul-violeta, la reacción es positiva.

FÓRMULA PARA LA PREPARACION DE SOLUCIONES (PARA EXPERIMENTOS

EN CASA)
 Preparar la solución de almidón, usando 1 tapa de gaseosa de fécula de maíz y 30 ml de
agua. Remover para mezclar

 Preparemos la solución de sacarosa, para prepararla mide una tapa de gaseosa con azúcar de
mesa y con ayuda de la jeringa de 10 ml o un medidor de jarabes infantiles adiciona 50 ml
de agua y agita la solución con una cuchara

PROCEDIMIENTO
1) Pelar la papa y picar en cuadritos pequeños, macera con el mortero una
parte de esta papa.

2) Rotular los tubos como papa, almidón y sacarosa

3) Adicionar 4 ml de cada muestra en sus tubos de ensayo, según corresponda

 (como no puedes pipetear 4ml de papa te vas a guiar por la cantidad que
tienes los tubos de ensayo de almidón y sacarosa y colocarás la misma
cantidad)

4) Adiciona 4 gotas de Lugol (Isodine solución para experimentos en casa) y

mezcla.

5) Observa los resultados

RESULTADOS

MUESTRAS COLOR INTERPRETACIÓN (+ / -)

ALMIDON
PAPA EN
CUADRITOS
PAPA
MACERADA
SACAROSA

Análisis de resultados

1) ¿A qué se debe la coloración producida por el Lugol en el almidón, la papa y la

sacarosa?
2) ¿Existen diferencias entre los resultados de la papa en cuadritos y macerada?
3) Si existen diferencias, ¿Por qué́ crees que ocurren?

CONCLUSIONES (Recuerda que deben responder a los objetivos de esta practica)

♦ .

♦ .

♦ .

CUESTIONARIO

1. Si Tenemos 2 pacientes A y B, ambos diabéticos, al realizarle Benedict a la

orina de la mañana en ayunas el paciente A dio verde mientras que el B dio
naranja. Explica e Interpreta estos resultados.