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PRÁCTICA

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE MOLÉCULAS ORGÁNICAS:

CARBOHIDRATOS

INTRODUCCIÓN

La mayor parte de la materia orgánica de las células está constituida por cuatro
tipos principales de macromoléculas: los ácidos nucleicos, las proteínas, los
carbohidratos y los lípidos.

Los glúcidos o carbohidratos son moléculas formadas por C, H y O, donde los

átomos de carbono están unidos a radicales hidroxilo o alcohol (-OH) y a
radicales hidrógenos (-H). El nombre de Hidratos de carbono o carbohidratos
se debe a que la mayoría de ellos responde a la fórmula (CH2O)n. En todos los
glúcidos siempre hay un grupo carbonilo C=O, que puede ser un grupo
aldehído o un grupo cetona, pudiendo definirse a los glúcidos como
polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas.
Los carbohidratos se clasifican según su tamaño molecular, desde los más
pequeños o azúcares simples: monosacáridos (glucosa, galactosa y fructosa),
los cuales pueden estar formados moléculas de entre 3 a 6 átomos de carbono,
como se mencionó antes la posición del grupo funcional carbonilo los diferencia
en Aldehídos y Cetonas; los intermedios u oligosacáridos, formados por la unión
de hasta nueve monosacáridos, donde se encuentran disacáridos como la
maltosa, sacarosa y lactosa, y las moléculas con más de 10 átomos de carbono
en su estructura llamadas polisacáridos, como ejemplo tenemos el almidón,
glucógeno y la celulosa. Los polisacáridos pueden estar formados solo por un
solo monosacárido y se denominan homopolisacáridos como por ejemplo el
glucógeno, formado por glucosa y que es la forma en que se almacena la glucosa
en las células animales o por diferentes monosacáridos, y se denominan
heteropolisacáridos, como por ejemplo la heparina sustancia anticoagulante
que está presente en las células cebadas o mastocitos.

Los de monosacáridos se unen entre sí mediante enlaces de tipo O-glucosídico,

y con los aminoácidos mediante enlaces N-glucosídicos. Cuando los
carbohidratos están unidos a otra molécula como lípidos (glucolípidos) o
proteínas (glucoproteínas), se denominan Heterósidos.
El carácter reductor de los monosacáridos viene determinado por la posibilidad
de su grupo carbonilo de reaccionar con agentes oxidantes como el Cu++.

Disacáridos comunes.

Tomado de: https://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enlace-

glucosidico
Los polisacáridos, como el almidón, reaccionan con el yodo presente en el Lugol
y forman cadenas de poliyoduro Esta reacción es el resultado de la formación
de cadenas de poliyoduro, formando un color azul oscuro a negro.

DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS

OBJETIVOS GENERALES
♦ Determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

♦ Diferenciar azúcares reductores de no reductores.

♦ Demostrar la hidrólisis del enlace glucosídico de la sacarosa

♦ Identificación de polisacáridos

MATERIALES
q Marcador permanente

q Sacarosa* (Azúcar blanca)

q Glucosa

q Almidón* (fécula de maíz)

 q Leche entera* q Lugol

q 1 Papa * q Frascos o Vasos transparente

pequeños (casa)
q 1 Naranja*
q Celular, cámara o similar para
q 1 jeringa de 5mL, o algún medidor poder grabar el procedimiento y
de que permita medir cantidades tomar fotos de los resultados de
de 1 a 5mL tus experimentos (casa)
q Cuchillo o Bisturí. q Servilletas de papel de cocina
q Ácido acético (vinagre blanco) q Encendedor o Fósforo
q Isodine solución*

Los materiales con * deben ser traídos por el estudiante (por grupos) o
disponer de ellos en casa, según el caso.

PROCEDIMIENTO

1) REACCIÓN DE BENEDICT.
1. Rotular 4 frascos como leche, azúcar, naranja y glucosa.

2. Colocar 1 mL de cada muestra a analizar (leche, solución de sacarosa,

naranja y glucosa) en cada frasco o tubo de ensayo que previamente
rotulaste con el nombre de la muestra a añadir.
3. Añadir 1 mL de reactivo de Benedict y mezclar.

4. Calentar el frasco o tubo de ensayo en baño maría entre 5 -10 min.

5. Sacar los tubos o frascos del Baño María. CUIDADO, estarán calientes.

6. Observar si hay cambio de coloración de la solución (La escala a

continuación te permite saber si hay presencia o no de azúcares
reductores)
7. Toma fotos o Video y Anota sus resultados
Interpretación de los Resultados

Negativo Trazas de azúcares reductores. Moderado. Alto

Análisis de resultados

1) ¿Cuáles muestras fueron positivas?

2) ¿POR QUÉ?
3) Sabiendo que BENEDICT es mi cuantitativa. ¿Cuál de las muestras tienen
mayor concentración de AZÚCARES REDUCTORES?

2) AZÚCARES NO REDUCTORES
1. Rotular el frasco como H o Hidrólisis

2. Añadir 1mL de la solución de Sacarosa.

3. Provocar hidrólisis de la sacarosa agregando 20 gotas de ácido acético

incubar 5 a 10 min en baño maría.

4. Sacar del baño Maria.

5. Adicionar 1 mL de reactivo de Benedict

6. Calentar nuevamente en baño de María 5 – 10 minutos

7. Observar si ocurre algún cambio. Tomar fotos o video de tus resultados

La reacción positiva nos dice que hemos conseguido romper el enlace O-

glucosídico de la sacarosa.
 Análisis de resultados

1) Comparado con el primer ensayo de la sacarosa ¿Qué diferencias ves con el

ensayo de la HIDRÓLISIS?
2) ¿Por qué crees que ocurrió este cambio? Usa el principio de la reacción
3) Cúal de los dos ensayos tiene una mayor concentración de AZÚCARES
REDUCTORES? ¿Por qué?

3) REACCIÓN DE LUGOL:
Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto con
unas gotas de Isodine solución o Lugol toma un color azul-violeta
característico. La disolución del frasco se torna de color azul-violeta, la reacción
es positiva.

1) Preparar la solución de almidón, usando 1 tapa de gaseosa de

fécula de maíz y 30 ml de agua. Remover para mezclar

2) Adicionar 1ml de esta preparación en un tubo de ensayo

3) Adiciona 4 gotas de Lugol y mezcla.

4) Observa los resultados

CONTROL NEGATIVO:
Como control negativo usaremos una solución de Glucosa.
1) Adicionar 1ml glucosa en un tubo de ensayo

2) Adicionar 4 gotas de Lugol y mezcla.

3) Observa los resultados

Análisis de resultados

1) Comparado con el CONTROL NEGATIVO ¿Qué diferencias ves en el ensayo

de FÉCULA DE MAÍZ?
2) ¿Por qué crees que ocurre esta diferencia? Usa el principio de la reacción
Reacción de Yoduro con Isodine.

En casa usaremos Isodine Solución para experimentar la reacción de yoduro en

la detección de almidones.
NOTA: No usemos ISODINE espuma o bucofaríngeo, pues no darán los
resultados

5) ISODINE Y FÉCULA DE MAIZ

1. Preparemos una solución de almidón usando fécula de maíz y agua como

lo vimos en el vídeo. Mezclando 1 tapa de gaseosa de maicena con 30 ml
de agua.
2. Tomar 10 ml de la solución de almidón y colocar en un frasco
3. Adiciona 4 gotas de Isodine solución a la mezcla y registra los resultados.

CONTROL NEGATIVO: Como control negativo usaremos una solución de

sacarosa

4. Preparemos la solución de sacarosa, para prepararla mide una tapa de

gaseosa con azúcar de mesa y con ayuda de la jeringa de 10 ml o un
medidor de jarabes infantiles adiciona 50 ml de agua y agita la solución
con una cuchara
5. Tomar 10 ml de la solución de almidón y colocar en un frasco
6. Adiciona 4 gotas de Isodine Solución y registra los resultados

Análisis de resultados

Toma fotografías de todo el proceso y úsalas en la sección de resultados de tu

informe de laboratorio
Analiza los resultados respondiendo las siguientes preguntas:
1) ¿Existen diferencias entre la reacción de la fécula de maíz con Isodine y la
reacción de lugol? ¿Por qué crees que existen estas diferencias?
2) ¿Cuál es la principal diferencia entre el Isodine y lugol en relación con la
concentración de yodo?

6) ISODINE Y PAPA

Procedimiento

1. Corta pequeños cuadros de Papa como lo vimos en el vídeo esta será tu

muestra 1, coloca aproximadamente 1ml de esta muestra en un frasco rotulado
como 1.
2. Licua o macera otra parte de la Papa con un poco de agua esta será tu
muestra 2, coloca aproximadamente 1ml de esta muestra en un frasco rotulado
como 2.
3. Adiciona a cada frasco 14 gotas de Isodine solución

Análisis de resultados

Toma fotografías de todo el proceso y úsalas en la sección de resultados de tu

informe de laboratorio
Analiza los resultados respondiendo las siguientes preguntas:
1) ¿Existen diferencias entre los resultados obtenidos en la muestra 1 y 2?
2) Si existen diferencias, ¿Por qué crees que ocurren?

CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Benedict? ¿Qué tipo de glúcidos
dan positivo en esta reacción?

2. ¿Qué explicación tienes los diferentes colores obtenidos en tus muestras al

aplicarles Reactivo de Benedict?

3. Tenemos 2 pacientes A y B, ambos diabéticos, al realizarle Benedict a la

orina de la mañana en ayunas el paciente A dio verde mientras que el B dio
naranja. Explica e Interpreta estos resultados.

4. ¿Que color toma la sacarosa al realizarle la hidrólisis y agregarle Reactivo

de Benedict? ¿Por qué?

5. ¿A qué se debe la coloración producida por el Lugol en el almidón y la

papa?