INTRODUCCIN Los organismos vivos y particularmente el hombre estn formados por infinidad de compuestos diferentes que cumplen funciones

especficas, los cuales son de gran importancia en las reacciones ya que mantienen el funcionamiento de los diversos sistemas vitales. A estos compuestos, se los denomina biomolculas, por su trascendencia en el mantenimiento de la vida. Se clasifican en hidratos de carbono, lpidos, protenas, cidos nucleicos y generalmente se encuentran en la papa, el arroz, miel, pan, pastas. Mediante la aplicacin de pruebas bioqumicas basadas en diferentes coloraciones de distintas soluciones, determinamos en el laboratorio la presencia de macromolculas de algunos seres vivos de origen animal y vegetal. En la prctica de laboratorio probamos la presencia de grasas, iones cloruro, vitaminas, almidones, azucares, protenas.

OBJETIVOS

Determinar, a travs de pruebas preliminares, las distintas reacciones que identifican la presencia de algunos compuestos fundamentales en muestras de origen orgnico Reconocer la presencia de algunos biocompuestos Conseguir un buen desarrollo en la practica

MATERIALES

a. Tubos de ensayo b. Gotero e. Clara de huevo o albumina de huevo g. Estufa o mechero i. Cloruro de sodio ( NaCl) l. Solucin de nitrato de plata m. Reactivo BIURET o. Isopropanol o ter q. Sustancias problemas como orina normal y diabtica, leche, papa, manzana, naranja, hgado de res

c. Vaso de precipitado de 150 mL d. Probeta de 50mL f. Aceite vegetal h. j. k. n. Vitamina c Reactivo BENEDITH Solucin de LUGOL Solucin de INDOFENOL al 0.1% p. Sulfato acido de potasio

PROCEDIMIENTO Y OBSERVACIONES
1. PRUEBA DE BIURET: para identificar protenas Tomamos un tubo de ensayo limpio y seco Le agregamos 5mL de albumina de huevo o clara de huevo Agregamos 10 gotas de reactivo BIURET procedemos a agitar Lo que se observ en esta muestra despus de realizar los pasos anteriores fue que tomo una coloracin morada, lo cual significa que el huevo tiene protenas. 2. REACCIN XANTOPROTEICA En un tubo de ensayo limpio y seco Agregamos 1mL de albumina de huevo 3 gotas de cido Ntrico concentrado (tuvimos mucho cuidado al utilizar este acido pues es muy peligroso y nos poda quemar). Lo que observamos en esta muestra fue que tomo un color blanco. Debido a la presencia del cido en esta muestra se rompen los enlaces de la protena y es por eso que torna a colocarse blanco. 3. PRUEBA DE LUGOL : para identificar almidones En un tubo de ensayo limpio y seco Agregamos un 1mL de solucin de almidn Agregamos 5 gotas de LUGOL Lo que observamos en esta muestra fue que tomo un color violeta, lo cual se debe a la presencia de almidones DESPUES tomamos una muestra de hgado de res lo agregamos en un tubo de ensayo limpio y seco agregamos 3 gotas de LUGOL

Debido a la presencia de glucgeno en la muestra esta tomo un color violeta. 4. REACTIVO BENEDITH: para identificar azucares En un tubo de ensayo limpio y seco Agregamos 5 gotas de BETEDITH Agregamos 2mL de glucosa a un 5% Lo que observamos al realizar el procedimiento anterior fue que cambio a un color azul, despus lo colocamos dentro de un vaso precipitando con agua hirviendo lo dejamos hay por 2 minutos y notamos que cambio a un color verde claro o verde manzana.

Lo cual quiere decir que en la mezcla hay presencia de aldehdos de azcar 5. INDOFENOL PARA VITAMINAS: Tomamos un vaso de plstico limpio Agregamos agua hasta la mitad del vaso Disolvemos una pastilla de vitamina c Tomamos 5ml con una pipeta graduada Lo anterior lo agregamos en un tubo de ensayo limpio y seco Le agregamos 8 gotas de INDOFENOL Lo que observamos en esta mezcla es que tomo un color marrn, el cambio de color en la mezcla seala que hay presencia de vitamina. 6. PRUEBA DE GRASA: partimos un pedacito de hgado lo agregamos en un tubo de ensayo limpio y seco agregamos 10ml de aceite Tomamos una hoja de papel y le agregamos lo que haba en el tubo de ensayo, esperamos a que secara y lo colocamos en la luz, al hacer eso nos dimos cuenta que haba presencia de grasa porque notamos que el papel se puso transparente.

PRUEBAS BIURET

XANTOPROTEICA LUGOL

MEZCLAS Albumina de huevo y 10 gotas de reactivo BIURET Albumina de huevo y 3 gotas de cido ntrico Almidn y 5 gotas de LUGOL Hgado y 3 gotas de LUGOL 5 gotas de BENEDICT y 2mL de glucosa Mezcla anterior dentro de agua hirviendo

RESULTADO

+ + + + + +

COLOR Morado

Blanco Violeta

LUGOL BENEDICT

Violeta Azul

Verde

INDOFENOL

5mL Vitamina c disuelta en agua y 8 gotas de Hgado y 10 ml de aceite + papel

+ +

Marrn

GRASA

Transparente

Papel transparente

PRUEBA DE SUSTANCIAS PROBLEMAS Luego de haber realizado todos los procedimientos anteriores y determinado los tipos de colores en presencia de las sustancias especficas, utilizamos estos resultados para comprobar la presencia de sustancias en materiales de origen animal y vegetal tales como leche, manzana, orina de diabtico y orina normal, hgado, papas.
BIURET XANTOPROTEICA LUGOL BENEDITH INDOFENOL

MANZANA PAPA LECHE ORINA NORMAL ORINA DE DIABETICO NARANJA SAL Extracto de hgado

+ + + +

+ + + + -

+ -

+ + + + + -

? + + +

GRASA

IONES CLORURO

MANZANA PAPA LECHE ORINA NORMAL ORINA DIABETICA NARANJA SAL Extracto de hgado

+ + + +

+ + -

PREGUNTAS DE LABORATORIO 1. Qu sustancias problemas de las que se investig contiene todas los compuestos estudiadas? R/= La papa es la sustancia que contiene la presencias de los compuestos utilizados en laboratorio, es decir, es esta se encuentra la presencia de protenas, almidn, cido ntrico, azucares, vitaminas, y iones cloruro. 2. En caso de que no haya un compuesto qumico en algn tejido, considera usted que la prueba excluya su presencia en ese tejido? R/= si considero que al no encontrarse la presencia de un compuesto qumico en una sustancia es porque no est presente o la prueba que le apliquemos hace que ese compuesto se pierda 3. De qu manera la validez de las pruebas es afectada por el color propio del material investigado? R/= Es afectada cuando dicho compuesto hace parte de una sustancia. Por ejemplo cuando hacemos un experimento y le agregamos dicha prueba para identificar la presencia de protenas, si esta se encuentra presente en la sustancia cambiara de color. 4. Con base a los resultados cul de los tejidos parece contener la ms elevada concentracin de protenas, almidn, de glucosa, de vitamina c, y de grasa? R/= la naranja ya que contiene: Azcares 10.39 g Grasas 0.17 g Protenas 0.26 g Vitamina C 4.6 mg (8%) Y es mucha mayor concentracin a diferencia de las otras sustancias que las tienen en menor concentracin. REACCIN DE MOLISCH La reaccin de Molisch es una reaccin que tie cualquier carbohidrato presente en una disolucin; es llamada as en honor del botnico austraco Hans Molisch. Se utiliza como reactivo una disolucin de -naftol al 5% en etanol de 96. En un tubo de ensayo a temperatura ambiente, se deposita la solucin problema y un poco del reactivo de Molisch. A continuacin, se le aade cido sulfrico e inmediatamente aparece un anillo violeta que separa al cido sulfrico, debajo del anillo, de la solucin acuosa en caso positivo.

Es una reaccin cualitativa, por lo que no permite saber la cantidad de glcidos en la solucin original. PRUEBA DE BARFOED La Prueba de Barfoed es un ensayo qumico utilizado para detectar monosacridos. Se basa en la reduccin de cobre (II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En forma de xido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo. RCOH + 2Cu+2 + 2H2O RCOOH + Cu2O + 4H+ Los disacridos tambin pueden reaccionar, pero en forma ms lenta. El grupo aldehdo del monosacrido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su cido carboxlico correspondiente. Muchas sustancias, entre ellas el cloruro de sodio, pueden interferir en la prueba. Esta prueba fue descrita por primera vez por el qumico dans Christen Thomsen Barfoed y se utiliza principalmente en botnica. La prueba es similar a la prueba de Fehling. Composicin El reactivo de Barfoed se compone de una solucin de 0.33 molar de acetato de cobre neutro en una solucin de 1% de cido actico. No es recomendable guardar el reactivo, sino prepararlo previamente a su uso. La prueba de Seliwanoff es una prueba qumica que se usa para distinguir entre aldosas y cetosas. Los azcares son distinguidos a travs de su funcin como cetona o aldehdo. Si el azcar contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehdo, es una aldosa. Esta prueba est basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas ms rpido que las aldosas. REACCIN DE SELIWANOFF El reactivo consiste en resorcin y cido clorhdrico concentrado: La hidrlisis cida de polisacridos y oligosacridos da azcares simples Entonces la cetona deshidratada reacciona con el resorcinol para producir un color rojo. Es posible que las aldosas reaccionen produciendo un leve color rosa. La fructosa da positiva a esta prueba. La sacarosa da negativa a esta prueba ya que la molcula, si bien est constituida por glucosa y fructosa, en la unin alfa (1-2) se anulan las propiedades reductoras de la glucosa y la fructosa, por lo que no da positiva, la sacarosa da positiva cuando se le realiza una hidrolisis cida, lo que la convierte en un azcar invertido o invertida, donde se rompe el enlace alfa (1-2) y permite que la reaccin con esta prueba d positivo.

PRUEBA DE NINHIDRINA: La ninhidrina es un poderoso agente reactivo comn para visualizar las bandas de separacin de aminocidos por cromatografa o electroforesis, tambin es utilizada con fines cuantitativos para la determinacin de aminocidos Reacciona con todos los aminocidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloracin que vara de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado prpura de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloracin producida por la ninhidrina es independiente de la coloracin original del aminocido. Esta prueba es positiva tanto para protenas como para aminocidos. En aquellos casos donde no da positiva la prueba de biuret y da positiva la de ninhidrina, indica que no hay protenas, pero si hay aminocidos libres. REACCIN DE HOPKINS-COLE La reaccin de Hopkins-Cole, tambin conocida como reaccin de Adamkiewiczs, es una prueba estndar para el triptfano y para las protenas que contienen triptfano. La solucin que se va a examinar se mezcla con cido glioxlico y se agrega cido sulfrico concentrado. Un anillo entre violeta y rojo en la unin de los dos lquidos indica que la reaccin es positiva. PRUEBA DE SULLIVAN La prueba de Sullivan es utilizada comnmente para el reconocimiento de Cistena y Cistina. Consiste en aplicar La reaccin de identificacin de aminocidos por Ninhidrina es una reaccin en la que la Ninhidrina descarboxila por oxidacin a los alfa-aminocidos a CO2 y NH3 y un aldehdo con un aminocido.

CONCLUSIN DE LOS RESULTADOS

Cuando introducimos las diferentes sustancias orgnicas con sus respectivos reactivos, estos cambian de color, o no hacan nada; dependiendo del tipo de reaccin que se provocara. La mayora de las sustancias usadas en el laboratorio nos producan colores fuertes y vivos. Con esta experiencia pude conocer como demostrar la presencia de compuestos en sustancias

BIOCOMPUESTOS, SUSTANCIAS QUE SE ENCUENTRAN EN LOS SERES VIVOS

YUCELIS PAOLA HERAZO SALGADO 96090822613 GRUPO- 16C

JAVIER HERNANDEZ ACENDRA

LABORATORIO DE FUNDAMENTOS DE BIOLOGIA

UNIVERSIDAD DEL ATLANTICO

Barranquilla, 22 de octubre del 2013