FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

● ANGIE CAROLINA GARCÍA NIÑO 20201181010

● PAULA SOFÍA CARRANZA GOMEZ 20192181033
● CHRISTIAN DANIEL CALDERÓN ROMERO 20182181039

METODOLOGÍA
PROCEDIMIENTO PRUEBA DE BENEDICT
1. Marcar cuatro tubos de ensayo con un número progresivo (1-2-3-4)
2. En el tubo de ensayo 1,2 y3 colocar respectivamente 0,5 mL de la solución de
glucosa, de la solución de miel de abeja y de la solución de sacarosa.
3. Adicionar 1 mL del reactivo de Benedict a los tubos 1, 2 y 3, calentar el contenido de
los tubos de ensayo en un baño de agua hirviendo. (Tomar apuntes de las
observaciones).
4. Al tubo de ensayo 4 colocar 1 mL de solución de sacarosa y 2 gotas de ácido
clorhídrico concentrado. Caliente en un baño de agua hirviendo por 10 min.
5. Neutralizar con solución de Na2CO3, use papel indicador, y haga prueba de
Benedict. (Tomar apuntes de las observaciones).

PROCEDIMIENTO PRUEBA DE FEHLING

Tubo 1 Colocar 1 mL de glucosa al 1%

Tubo 2 Colocar 1 mL de maltosa al 1%

Tubo 3 Colocar 1 mL de sacarosa al 1%

Tubo 4 Colocar 1 mL de refresco de jugo al 1%

Tubo 5 Colocar 1 mL de miel de abeja al 1%

Tubo 6 Colocar 1mL de un edulcorante

1. Añadir 1mL de reactivo de Fehling A y 1mL de Fehling B a cada tubo. El líquido de

los tubos de ensayo adquirirá un fuerte color azul.
2. Calentar los tubos en baño de María por espacio de 10 a 12 ml.
3. Tomar apuntes de las observaciones

PROCEDIMIENTO PRUEBA DE LUGOL

1. En un tubo de ensayo agregar unos 3mL de glúcidos a investigar, añadir unas gotas
de Lugol
2. Si la solución del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reacción es
positiva.
3. Corta unos trozos de papa o banano y colocar sobre él una gota de Lugol y tomar
apuntes de las observaciones.
4. Calentar el tubo a la llama y dejar enfriar.
5. Repetir el punto anterior varias veces.
 FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

RESULTADOS
Una de las características principales dentro del grupo de los carbohidratos, es la presencia
de un grupo carbonilo (aldehído o cetona), por lo cual el poder reductor es una de las
propiedades que se emplea en su determinación. Sin embargo , no todos los azúcares
tienen esta propiedad, ya que la reducción está condicionada a la presencia de un grupo
aldehído libro o un grupo cetónico adyacente a un grupo hidroximetil. Están divididos en
grupos según su composición o largo de su cadena:
● Monosacáridos: Son azúcares sencillos , que pueden ser aldosas o cetosas, según
si contienen un grupo aldehído o cetona respectivamente.
● Disacáridos: Están compuestos por dos monosacáridos unidos por enlaces
glucosídicos.
● Oligosacáridos: Están compuestos entre tres y diez monosacáridos también unidos
por enlaces glucosídicos.
● Polisacáridos: Son polímeros constituidos por varios miles de monosacáridos
ligados entre sí. Presentan enlaces beta o alfa.
Los distintos tipos de azúcares se pueden diferenciar con reactivos que determinan a qué
grupo pertenecen y si son fácilmente oxidables, es decir si es un azúcar reductor.

● Prueba de Benedict
El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, al
igual que el reactivo de Fehling, el de Benedict contiene ión cúprico en medio
alcalino que se reduce hasta óxido cuproso más rápidamente con los monosacáridos
que con los disacáridos. La formación de un precipitado amarillo o rojizo, es prueba
positiva para carbohidratos reductores.

Imagen 1. Prueba de Benedict antes de calentarlas en agua hirviendo.

 FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

Imagen 2. Prueba de Benedict después de calentarlas en agua hirviendo.

Imagen 3. Tubo de Sacarosa y ácido clorhídrico, luego de realizar la primera prueba de Benedict.

Imagen 4. Tubo de Sacarosa, ácido clorhídrico y carbonato de sodio, luego de realizar la segunda prueba de
Benedict
 FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

● Prueba de Fehling
La prueba de Fehling en presencia de carbohidratos con poder reductor, el complejo
ión cúprico (del hidróxido cúprico) es reducido en ambiente alcalino para formar
óxido cuproso. De esta manera, a partir de una solución inicial de color azul
(CuSO4) debido al Cu2+ (oxidado), se obtiene un precipitado de color rojo/naranja
(Cu2O) por el Cu+ (reducido).
La solución de Fehling se divide en dos partes:

○ Fehling A: Una solución de sulfato cúprico.

○ Fehling B: Una solución de hidróxilo de sodio y tartrato de sodio y potasio.

Imagen 5. Prueba de Fehling (Tubo 1-2-3-4) antes de calentar en baño maría.

Imagen 6. Prueba de Fehling (Tubo 5-6) antes de calentar en baño maria.

FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

Imagen 7. Prueba de Fehling calentado a baño maría los tubos.

Imagen 8. Prueba de Fehling agregando reactivo A y B

Imagen 9. Prueba de Fehling calentado a baño maría

 FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

● Prueba de lugol
Esta prueba es una reacción química usada para determinar la presencia o
alteración de almidón u otros polisacáridos. El reactivo de Lugol, que contiene una
mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente el
almidón por la formación de una coloración azúl-violeta intensa y el glucógeno y
dextrinas por la formación de coloración roja. Esta reacción es el resultado de la
formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón con el yodo
presente en la solución de Lugol. La amilosa, el componente del almidón de cadena
lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando un color azul
oscuro a negro.(Gutiérrez A, 2004).

Imagen 10. Prueba de Lugol antes de calentar a baño maría

Imagen 11. Prueba de Lugol calentando a baño maría.

 FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

ANÁLISIS DE RESULTADOS
● Prueba de Benedict
Esta prueba sirve para el reconocimiento de azúcares reductores, los cuales son agentes
reductores porque tienen un grupo aldehído y un grupo cetona libre. Los azúcares
reductores en medio alcalino, pueden reducir el picrato de color amarillo, a picramato de
color rojo (Na2CO3). Es decir que, si observamos un color amarillo o rojizo, es positivo para
carbohidratos reductores. El patrón de carbohidratos que se emplea en esta prueba es:
glucosa, maltosa y sacarosa. Los azúcares reductores que presentan un grupo carbonilo
intacto son la glucosa, lactosa, fructosa, maltosa, galactosa, manosa, y que a través del
mismo pueden reaccionar con otras moléculas. Los azúcares no reductores, al contrario no
poseen un grupo carbonilo libre, entre estos tenemos la sacarosa y trehalosa. (De, De,
Reductores, & Su, n.d.)

Para la prueba de Benedict utilizamos respectivamente en cuatro tubos de ensayo, glucosa,

miel de abejas, sacarosa y sacarosa más ácido clorhídrico (Imagen 1). Se calientan los tres
primeros tubos al baño maría dando como resultado, un cambio de coloración para los dos
primero (Imagen 2); situación que está afianzada en bibliografía ya que la glucosa es un
azúcar reductor, al igual que la fructosa, presente en gran medida en la miel de abejas del
segundo tubo de ensayo. La sacarosa al no ser un azúcar reductor por no presentar un
grupo carbonilo libre, está protegida de la oxidación y por ende su resultado es negativo en
la prueba.(De, De, Reductores, & Su, n.d.)

La prueba del tubo de ensayo cuatro, al ser neutralizada con el carbonato de sodio,
presenta un medio alcalino determinado por la prueba con el papel de tornasol, al dar una
coloración azul (Imagen 3) para luego ser calentada nuevamente, para realizar la prueba de
Benedict (Imagen 4) dando como resultado positivo para azúcares reductores; se entiende
que la sacarosa no es un azúcar reductor, pero al momento de agregar ácido clorhídrico y al
calentarlo, este se hidroliza, es decir se incorpora una molécula de agua y se descompone
en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que sí son azúcares reductores.
(DE, 2014)

● Prueba de Fehling
Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que se debe al
grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de
manifiesto por medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre
(II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la reacción con el glúcido reductor se
forma óxido de Cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha
producido la citada reacción y que, por lo tanto, el glúcido presente es reductor. ( Práctica
determinación de glúcidos, S.f).

Teniendo en cuenta los resultados obtenidos después de realizar la prueba de Fehling y

calentar los tubos a baño maría como se observa en la Imagen 9 podemos llegar a la
conclusión que los tubos de ensayo 1,2,4 y 5; los cuales corresponden a glucosa, maltosa,
refresco de jugo y miel respectivamente, se considera una reacción de Fehling positiva esto
 FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

quiere decir que las muestras pertenecen a una glucosa o fructosa. Por otro lado los tubos
de ensayo 3 y 6, correspondientes a sacarosa y edulcorante es una reacción de Fehling
negativa lo que quiere decir que sin sacarosas.

● Prueba de Lugol
En la Imagen 10 podemos observar cuatro tubos, los cuales corresponden a banano en el
tubo de ensayo marcado como B, el tubo de ensayo con papa marcado con la letra P, la
miel corresponde al tubo m2m y finalmente el corte de banano con una gota de Lugol en el
tubo marcado como J. Después de añadir unas gotas de Lugol a cada uno de los tubos de
ensayo, se logró observar que en el tubo m2m no tuvo mayor cambio, solo se puso un poco
más naranja; por lo contrario, en los tubos B y P se tornaron a una coloración oscura como
se logra observar en la Imagen 11, lo que indica presencia de polisacáridos provenientes de
la materia orgánica del banano y en el caso de la papa presencia de almidón. El patrón de
carbohidratos que se emplea en esta prueba es: almidón y glucógeno.

CONCLUSIONES
● Las anteriores pruebas realizadas para la determinación de carbohidratos, son de
calidad cualitativa, ya que, por medio de reacciones químicas, modifican su
estructura y cambian su apariencia física, denotando la presencia o ausencia de los
mismos.
● La solución de Benedict es semejante a la de Fehling con la modificación de que se
utiliza citrato de sodio en lugar del trato de sodio y potasio.
● Se logra evidenciar experimentalmente la presencia de carbohidratos en distintos
tipos de alimentos y soluciones, obteniendo como resultado distintas características
demostrables a raíz de un análisis y procedimientos.
● Se reconocieron y clasificaron las diferentes muestras de glúcidos analizadas
experimentalmente en tres grandes grupos como lo son los monosacáridos,
disacáridos u oligosacáridos y por último los polisacáridos que a su vez se
subdividen respectivamente.

BIBLIOGRAFÍA

● Hart H., Craine L. y Hart. D. Química Orgánica. McGraw Hill. Novena edición.
España. 1997.

● McMurry, J. Química Orgánica. Quinta edición, Thomson editores, México, 2001.

● The Merck Index: an encyclopedia of chemical. Drugs and Biologicals. Budavari S.

Guide for safety in the Chemical Laboratory.

● Carey Francis A. Química Orgánica Mc Graw Hill , Tercera Edición . España. 2000

● Práctica determinación de glúcidos, S.f.

 FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO

● De, I., De, D., Reductores, A., & Su, Y. (n.d.). UNIVERSIDAD TÉCNICA DE
AMBATO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE LABORATORIO
CLÍNICO. Retrieved from
https://repositorio.uta.edu.ec/bitstream/123456789/10569/1/TESIS%20MAYRA
%20MOREANO%20(1).pdf
● PLUMER, D.T. Introducción a la bioquímica práctica. Mexico. MaGraw-
HillLatinoamericana, S.A
● CONN, E y Stumpf, P.K. Bioquímica F
● DE, H. (2014). HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA - LABORATORIOS DE
BIOQUÍMICA. Retrieved February 24, 2022, from Google.com website:
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/
carbohidratos/hidrolisis-de-la-sacarosa