Taller

TCR Y LINFOPOYESIS T
GRUPO 12 - SUBGRUPO 16
Cecilia Balmelli-João Nuñez-
Luana Cabrera- Jacinta Trindade
Introducción
 Proceso de formación de:
- Serie linfoide B
- Serie linfoide T
- Células natural killer

Linfopoyesis
- Célula dendrítica plasmocitoide.

Progenitor Linfocito
linfoide común NKT
Celula madre
Hematopoyetica

Proliferan y pueden Linfocito

maduran fuera de la T
Linfocito
médula ósea como es el
B
caso del linfocito T
Plasmocito
Linfopoyesis T
Generación de
linfocitos T
maduros a partir de
los precursores
linfoides

Es fundamental que

este TCR reconozca

el MHC propio

La maduración implica:
- Rearreglo de genes del receptor de células T (TCR)
- Proliferación
- Selección por parte de antígenos
(MCH y antigenos propios)
 Linfopoyesis T
Los precursores de células T
Selección de
migran desde la médula ósea
linfocitos que
al timo para madurar
reconocen MCH
propio
TIMO Selección Positiva

Selección Negativa
Solo quedan aquellos
linfocitos que no
Linfocito T maduro GANGLIOS
van a migrar a los LINFATICOS reconozcan MCH
MALT
órganos linfoides con alta afinidad
BAZO
secundarios
Diferenciación Dos tipos de linfocitos T maduros

Linfocito T CD4+
- linfocito cooperador
- Reconocen MHC 2

Linfocito T CD8+
- Linfocito citotóxico
-Reconocen MHC 1

 APC -CÉLULAS PRESENTADORAS DE ANTÍGENOS

Capturan y presentan
antígenos a los linfocitos T
Exponen complejos
péptido-MHC

Conceptos Importantes
Complejo mayor de histocompatibilidad (MHC)

Proteínas de membrana encargadas de

presentar en las superficies de las APC
antígenos o segmentos peptídicos a los
linfocitos T CD4+ y CD8+
 Es el receptor para el antígeno de los
linfocitos T CD4+ cooperadores y de los
linfocitos CD8+ citotóxicos

TCR Heterodímero de dos

cadenas polipeptídicas
transmembranarias

Expresados exclusivamente
por los linfocitos T.
Especificidad determinada, cada
linfocito T identifica a un antígeno
 El Timo es un órgano que involuciona a
partir de la adolescencia

Importante
Pero no queda completamente
a-funcional en el adulto,
continúan produciendo
linfocitos T en un ritmo menor
a como lo hacen los niños
 Estudiar el rol de la afinidad del
reconocimiento TCR-MHC en el desarrollo

Objetivo
de los progenitores de los linfocitos T

Diseño para el estudio ratones que expresan TCRs que

reconocen la proteína ovoalbúmina (OVA).

se les bloqueó la vía de procesamiento y transporte

Timo fue extraído y sus timocitos de antígenos al Retículo Endoplasmático (RE)
cultivados in vitro. Al agregar ovoalbúmina
los timocitos logran reconocer a esta son incapaces de procesar antígenos
proteína por sus TCR. citoplasmáticos y generar linfocitos CD8.

Les suministraron fragmentos peptídicos ya

procesados de la proteína OVA, se logra que se formen
complejos MHC1-péptidos.
 Pregunta A

Describir cómo cambia el resultado

obtenido en función de la afinidad
del péptido, sabiendo que los
péptidos difieren en la afinidad que
cada uno tiene con el TCR
Resultados de una citometría de flujo realizada a partir de los linfocitos T recuperados
transgénico, y se ordenan según la
del timo de ratones transgénicos luego de agregar al cultivo diferentes proteínas.
afinidad en orden creciente

Nota:
- VSV8 es un péptido control que no pertenece a la proteína OVA.
- Los péptidos E1, Q4H7, T4, Q4R7, Q4 y OVAp son fragmentos
peptídicos de la proteína OVA.

Selección Positiva
Linfopoyesis T

Selección Negativa
 Pregunta A
Nota:
- VSV8 es un péptido control que no pertenece a
la proteína OVA.

- Los péptidos E1, Q4H7, T4, Q4R7, Q4 y OVAp son

Resultados de una citometría de flujo realizada a partir de los linfocitos T recuperados del fragmentos peptídicos de la proteína OVA.
timo de ratones transgénicos luego de agregar al cultivo diferentes proteínas.

Interpretación de la citometría:
• Cuadrante inferior izquierdo : CD4 - / CD8 -

•Cuadrante inferior derecho : CD8+

• Cuadrante superior izquierdo: CD4+

• Cuadrante superior derecho : CD4+ / CD8+

 Preponer una estrategia para Pregunta B
poder inducir en estos ratones la
generación de Linfocitos T CD8+

Utilizar los péptidos Q4H7 o E1

• Se unen con poco afinidad al TCR

• Los que más expresan CD8+

• Linfocitos capaces de atravesar el

proceso de Linfopoyesis completo
 Pregunta C:

Supongamos que los investigadores detectan un ratón cuyo TCR

tiene menor afinidad a la Ovoalbúmina (OVA) que el resto de los
ratones, y sugieren que podría haber una mutación en el ADN del
TCR de ese ratón. Proponer qué región de la secuencia podría estar
alterada en comparación a los TCR de alta afinidad de los otros
ratones
Complejo TCR
Comparar la población de timocito de ratones normales
(sin transgénesis) del timo y del ganglio periférico. Si

Pregunta D:
ambas poblaciones fueran estudiadas por citometría
con marcación CD8+ y CD4+, proponer cómo se verían
los resultados para ambos casos.

TIMO GANGLIO LINFATICO

 Preguntas
En los ganglios periféricos es correcto decir que:

A) No existe ninguna población de linfocitos doble negativos y dobles positivos

B) Tienen sólo presencia de cd4+ y cd8+

C)Es uno de los organos a los que migran los linfocitos T una vez que ya pasaron por él proceso
de maduración

D) Una vez allí los linfocitos nunca más salen

E) Es dónde ocurre la maduración de los linfocitos T

 Preguntas
Con respecto al Timo es falso afirmar:

A) Es dónde ocurre la maduración de los linfocitos T

B) La selección positiva ocurre en la medula y la selección negativa en la corteza

C) No es proporcional la cantidad de linfocitos T doble positivos que la de linfocitos T

positos únicos

D) Hay mayor proporción de linfocitos CD4+ que de CD8+. Relación 2:1

E) Los linfocitos T CD4+ reconocen MHC II y los linfocitos T CD8+ reconocen MHC I
 Para logran una Linfopoyesis adecuada y la obtención
final de un linfocito T maduro, es muy importante la
funcionalidad y estado de sus componentes Cada TCR reconoce un
antígeno especifico

Debe expresar un
TCR funcional

Conclusión Linfocito T maduro

Es fundamental el reconocimiento
Aquellos linfocitos que del MHC propio (baja afinidad)
expresen un TCR con alta
afinidad por el MCH propio, En antigenos de origen proteico,
es importante el procesamiento de
no llegan a madurar a este antigeno para la formacion
linfocito T y sufre apoptosis del complejo MCH-péptidos
Bibliografía
• Abul K. Abbas, Andrew H. Lichtman, Shiv Pillai. Inmunología celular y
molecular.10° Edición. Editorial Elsevier ; 2022

• dem. Marcelo Hill. Linfopoyesis.[Internet] Youtube;2021. [Citado el 27 de agosto de 2023].

Disponible en https://youtu.be/DRy1-Ij9IWk?si=iHraW95wAhKSpXIq

• dem. Marcelo Hill. TCR. [Internet] Youtube;2021. [Citado el 27 de agosto de 2023].

Disponible en: https://youtu.be/naRJ9RsoLY8?si=7uCahq8VApyooXKg
Muchas
gracias!