ACTIVACIÓN DE LOS LINFOCITOS T

Interacción con la CPA y señalización intracelular

¿Cuáles son los mecanismos que permiten la activación de los linfocitos T cuando su
TCR reconoce un complejo péptido-CMH?
- La activación de los linfocitos T frente a un antígeno ocurre gracias a su interacción
con la CPA (célula presentadora de antígeno) y a la generación de señales
intracelulares.
¿Cuáles son los eventos celulares y moleculares que conducen a la activación de los
linfocitos T?
- Activación de los linfocitos T vírgenes y efectores por el antígeno:
 Los antígenos transportados por las CD (células dendríticas) a los ganglios
linfáticos son reconocidos por algunos linfocitos T vírgenes que recirculan a
través de los ganglios.
 Los linfocitos T se activan para diferenciarse en células efectoras. Estos
pueden permanecer en los órganos linfoides secundarios para ayudar a los
linfocitos B o CTL (linfocitos T citotóxicos), o pueden migrar a los lugares
de infección, donde son activadas de nuevo por los antígenos.

- Secuencia de eventos durante l activación de los linfocitos T

 El reconocimiento del antígeno por los linfocitos T induce la secreción de
citoquinas (ej. IL-2) particularmente en los linfocitos TCD4+, la expansión
clonal y la diferenciación de los linfocitos T en células efectoras o células de
memoria.
- Activación de los linfocitos TCD8+
 Los linfocitos TCD8+ vírgenes reconocen antígenos presentados en el
CMH-I por una CPA infectada y esto les permite activarse.
 También puede ocurrir que una CPA fagocite una célula infectada y presenta
Ag del germen a un linfocito TCD4+, que una vez activo produce citoquinas
que activa linfocitos TCD8+ que están reconociendo Ag del mismo agente
infeccioso.

- Expresión de proteínas y síntesis de ADN durante la activación de linfocitos T

 Se presenta la cinética aproximada de la expresión de algunas moléculas
durante la activación de los linfocitos T por antígenos y coestimuladores.
 Estas proteínas se suelen expresar en cantidades bajas en los linfocitos T
vírgenes y aumenta en respuesta a las señales activadoras.
  El reconocimiento del Ag junto a la coestimulación desencadena una
cascada de señales intracelulares que terminen por activar la transcripción en
el ADN nuclear del linfocito T.

- La transmisión de las señales procedentes de la superficie celular tiene faces

citosólicas y nuclear
 Una vez el receptor se une a su ligando activa una tirosina quinasa diferente
al receptor.
 La quinasa fosforila una tirosina clave en la cola citoplasmática del receptor,
trayendo como resultado que la cola del receptor reclute una enzima situada
a continuación que se activa.
 Esta enzima activada modifica un factor de transcripción especifico que se
localiza en el citoplasma.
 El factor de transcripción modificado entra a el núcleo e induce la expresión
de genes blanco.

Moléculas que participan en la activación de los linfocitos TCD4+

- Las principales moléculas de la superficie de los linfocitos TCD4+ implicadas en su
activación (receptores) y las moléculas en la CPA (ligandos) reconocidas por esos
receptores.
Moléculas de membrana importantes del linfocito T, adicionales al TCR, que participan en la
activación o inhibición des estos linfocitos.

Moléculas del Función Ligando

linfocito T nombre Expresado en
CD3 Transducción de la Ninguno
señal por el complejo
TCR
5 Transducción de la Ninguno
señal por el complejo
TCR
CD4 Transducción de la Clase II Células
señal del CMH presentadoras
de antígenos
CD8 Transducción de la Clase I del Todas las
señal CMH células
nucleadas
CD28 Transducción de la B7-1/B7-2 Células
señal (coestimulación) presentadoras
de antígeno
CTLA-4 inhibición B7-1/B7-2 Células
presentadoras
de antígeno
PD-1 inhibición PD- Células
L1/PD-L2 presentadoras
de antígeno,
células
tisulares,
células
tumorales
LFA-1 Adhesión ICAM-1 Células
presentadoras
de antígeno,
endotelio

Mecanismos de señalización intracelular (transducción de señales)

desencadenados por el TCR

¿Cómo hace el receptor de los linfocitos T para reconocer el antígeno presentado por
la célula presentadora de antígeno?
- Estructura del receptor del linfocito T (TCR)
  La región del TCR que une al antígeno esta formada por los dominios
variables β y α (amino terminal), en los cuales se encuentran segmentos
hipervariables que forman la zona de unión al péptido-CMH.
 Este TCR forma un complejo multiproteíco con las cadenas del CD3 (2
heterodímeros) y un hemodímero de la proteína S.

- Reconocimiento antigénico por el TCR

 Los dominios Valfa y Vbeta del TCR establecen contacto con ambos
componentes del complejo formado por péptido-CMH. Así se reconocen los
antígenos que son presentados por las moléculas del CMH.

- Componentes del complejo TCR

 El complejo TCR de los linfocitos T consta del TCR unido de forma no
covalente a las proteínas CD3 y L. la asociación de estas proteínas entre sí
está mediada por aminoácidos con carga a las regiones transmembrana. Esto
permite a la señalización intracelular.

¿Cuáles son las etapas claves en la señalización intracelular para la activación de los
linfocitos T?
- Cuando el TCR reconoce un antígeno unido al CMH pone en marcha fenómenos de
señalización intracelular que son mediados por las moléculas adicionales. Esto se
debe a que la cola citoplasmática del TCR es muy corta para desencadenar la
activación.
- Estructura de los correceptores CD4 y CD8
 La molécula CD4 de los linfocitos T se asocia a una porción invariante del
CMH-II en la CPA que esta interactuando con el TCR ubicado en el mismo
linfocito T.
 Algo similar ocurre con la molécula CD8.
- Fosforilación temprana de tirosinas en la activación del linfocito T
 El inicio de la activación de linfocitos T depende de la Fosforilación del
dominio o motivos de activación de inmunorreceptores basados en tirosinas
(ITAM) presentes en CD3 y L. Estos ITAM son fosforilados por la quinasa
Lck.
- Cadena L del complejo TCR y proteína ZAP-70
 La activación de linfocitos T depende de la Fosforilación completa de los
ITAM de la cadena L. Esto permite la unión ZAP-70 que a si vez fosforila
otras proteínas.
 En efecto de agonistas parciales o antagonistas del TCR se debe a una
Fosforilación limitada de la cadena L ZAP-70.
- Las proteínas adaptadoras tienen un papel importante en la activación de
células T

 Una vez ZAP-70 es activada fosforila varias proteínas adaptadoras, que

después se unen a moléculas transmisoras de señales a modo de puentes de
activación.

- Activación de la vía MAP quinasas en el linfocito T

 La vía de la quinasa Ras-MAP en la activación del linfocito T produce
Fosforilación de proteínas adaptadoras asociadas a la membrana (como
LAT), que se unen a otro adaptador, Grb-2, que proporciona un lugar de
acoplamiento para el factor intercambiador de GTP/GDP SOS. Esta activa a
Ras-GTP que pone en marcha una cascada de enzimas, que culmina en la
activación de la quinasa MAP ERK.
- Transmisión de señales en el linfocito T luego de PLCγ1
A. La proteína adaptadora LAT que se fosforila al activarse el linfocito T se una a
la enzima citosólica PLCγ1, que se fosforila por ZAP-70 y se activa. La
PLCγ1activa hidroliza el PIP2 de la membrana para generar IP3, que estimula
un aumento del calcio citosólico, y DAG, que activa la enzima PKC.
B. El IP3 induce la salida de calcio del retículo endoplásmico. La PKC induce
numerosas respuestas celulares.
C. STIM1, que es activada por el calcio citosólico produce la apertura del canal
CRAC, que a su vez facilita la entrada de calcio extracelular en el citosol. El
aumento del calcio citosólico y la PKC activan entonces varios factores de
transcripción, lo que conduce a las respuestas celulares.
- Activación de factores de transcripción en los linfocitos T
 Múltiples vías de señalización en los linfocitos T estimuladores convergen
para generar factores de transcripción que estimulan la expresión que
estimulan la expresión de varios genes. La vía del calcio-calmodulina activa
NFAT, y las vías Ras y Rac estimulan dos componentes de AP-1.
 La coestimulación que recibe el linfocito T es un fenómeno fundamental para su
activación

¿Por qué se necesitan moléculas coestimuladoras para la activación de los linfocitos

T?
- Moléculas coestimuladoras necesarias en la activación de los linfocitos T
 Las CPA en reposo expresan pocos o ningún coestimulador y no activan los
linfocitos T vírgenes.
 Los agentes microbianos y las citoquinas producidas durante la respuesta
inmune innata activan las CPA para que expresen coestimuladores.
 Las CPA adquieren la capacidad para activar la capacidad para activar a los
linfocitos T vírgenes.

- Mecanismos de coestimulación del linfocito T por el CD28

 la unión del CD28 a su ligando induce vías de señalización que potencian las
señales del TCR o producen señales adicionales que activan varios factores
de transcripción.
 Estos estimulan la expresión de proteínas de supervivencia, citoquinas y
receptores para citoquinas; promueven la proliferación celular e inducen la
diferenciación hacia las células efectoras y de memoria.

- Los principales miembros de las familias del B7 y del CD28

 Los principales miembros de ligandos de la familia B7 se expresan en las
CPA (células dendríticas, macrófagos y linfocitos B) y los receptores de la
familia CD28 se expresan sobre todo en los linfocitos T.
 Diferentes miembros de la familia del CD28 estimulan o inhiben diferentes
estadios y tipos de respuesta de los linfocitos T.
 - Papel del CD40 en la activación del linfocito T
 La activación del linfocito T induce la expresión del ligando para CD40
(CD40L). El CD40L se une al CD40 situado en las CPA y la estimula para
aumentar la expresión de moléculas B7 y la secreción de citoquinas que
activan los linfocitos T; así, el CD40L hace a las CPA más capaces de
amplificar la activación del linfocito T.

Después de la activación inicial el linfocito T desencadena la producción de citoquinas

y su proliferación

- ¿Cuáles son los eventos moleculares que conducen a la proliferación clonal de

los linfocitos T y qué respuestas se producen?
 Señalización en los linfocitos T en respuesta a citoquinas:
 Las señales intracelulares en el linfocito T en respuesta a citoquinas,
producen la activación de las quinasas JAK que a su vez activan los
factores de transcripción STAT. Estos inducen la expresión de
múltiples genes relacionados con la respuesta inmune.
 Regulación de la expresión del receptor de la IL-2
 Los linfocitos T en reposo (vírgenes) expresan el complejo IL-
2Rβγc, que tiene afinidad moderada por la IL-2. La activación de los
linfocitos T por el Ag, la coestimulación y la propia IL-2 inducen la
expresión de la cadena IL-2Rα (CD25), lo cual permite la formación
del complejo IL-2Rβγc de afinidad elevada por la citoquina.
 Transducción de señales por el receptor de IL-2:
 Las vías de señalización en el linfocito T en respuesta a la IL-2 son
mediadas por la cadena gamma común (γc) que conducen a la
activación de las quinasas JAK-STAT.
 Acciones biológicas de la IL-2:
 La IL-2 estimula la supervivencia, la proliferación y la
diferenciación de los linfocitos T, con lo que actúa como un factor
autocrino de crecimiento que lleva a la generación de linfocitos
efectores, de memoria y reguladores.
 Desarrollo de los linfocitos T de memoria
 Los linfocitos T vírgenes se diferencian en células efectoras y de
memoria en respuesta al antígeno y la coestimulación. La mayor
parte de las células efectoras mueren mediante apoptosis.