UNIVERSIDAD NACIONAL SAN CRISTÓBAL DE HUMANGA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

pH Y AMORTIGUADORES

PRÀCTICA N.º: 03

ASIGNATURA: BIOQUIMICA I (CF-343)

DOCENTE: Mg. MENDOZA ALMEIDA, Tania.

ESTUDIANTE: PALOMINO CAHUANA, Lisbeth.

DÌA Y HORA DE PRÀCTICA DE LABORATORIO: martes, 5:00 – 8:00 pm

SERIE: 300

AYACUCHO- PERÚ
2022
I. OBJETIVOS

 Analizar las propiedades de las soluciones acidas y básicas.

 Evaluar la capacidad amortiguadora de líquidos biológicos.

II. MATERIALES DE PROTECCION

 Guardapolvo: esta indumentaria es muy necesario utilizar cuando hacemos uso

del laboratorio, ya que se manipulan reactivos altamente contaminantes,

corrosivos, etc.

Fig. 1 Mandil blanco de laboratorio

 Guantes: de igual modo los guantes son muy importantes ya que es un

indumento de protección al estudiante y al maestro. Puesto que en el

laboratorio de bioquímica utilizaremos reactivos corrosivos, soluciones ácidas,

soluciones bases, etc.

Fig. 2 Guantes de nitrilo

 Gorro: nos ayuda a reducir el riesgo de contaminación.

Fig. 3 Gorro cofia

 Lentes: al igual que las demás indumentarias de protección, los lentes nos

ayudan y es muy necesario su uso, puesto a que principalmente protegerá

nuestra vista de reactivos corrosivos, soluciones ácidas, etc.

 Fig. 4 Lentes protectoras

 Mascarilla: su uso de igual modo es indispensable puesto a que nos ayuda a

disminuir el riesgo de contaminación, al momento de manipular muestras

tóxicas, etc.

Fig. 5 Mascarilla KN 95
III. MATERIALES, SOLUCIONES Y MUESTRAS

 Ajuga 23

 Algodón 70°

 Ligadura

 Alcohol

 Mandarina

 Saliva

 Orina

 Suero

 Agua

 Hidróxido de sodio 0.1 N (NaOH)

 Ácido clorhídrico 0.1N (HCl)

 Hidróxido de sodio 1 N (NaOH)

 Ácido clorhídrico 1 N (HCl)

 Subsalicilato de bismuto

 Papel toalla

 Gradilla

 Agua destilada

 Micropipeta

 pHmetro

 Frasco lavador

 Balanza analítica

 Beacker

 Tubos de ensayo
 IV. RESULTADOS

Experiencia 1: medición de pH y evaluación de sistemas amortiguadores.

Tubos Muestra pH NaOH HCl pH

(2.5 ml) (inicial) (0.1 N) (0.1 N) (final)

1 Orina 6.2 0.5 ml 8.7

2 Orina 6.2 0.5 ml 4.2

3 Suero 7.3 0.5 ml 5.6

4 Suero 7.7

5 Saliva 6.9 0.5 ml 9.0

6 Saliva 7.0 0.5 ml 1.7

7 Agua 4.7 0.5 ml 11.5

8 Agua 4.7 0.5 ml 1.3

9 Mandarina 3.4 0.5 ml 3.6

10 Mandarina 3.4 0.5 ml 2.9

Tabla 1. El pH inicial y final de las distintas muestras al adicionar una solución de

base o acido fuerte, realizado el 08 de noviembre de 2022.

Interpretación:

Orina: Se realizo la medición del pH en la orina antes de agregar NaOH O.1 N y HCl

0.1 N. La cual el pH inicial de la orina del primer tubo fue de 7.3 y del segundo tubo fue

de 7.7.

Después con el mismo pHmetro determinamos la capacidad amortiguadora de cada

solución (tubo 1 + NaOH O.1 N y tubo 2 + HCl 0.1 N). Midiendo el pH final después
de la adición de la base y acido fuerte (NaOH O.1 N y HCl 0.1 N), el pH final de la

orina del primer tubo fue de 8.7 y del segundo tubo fue de 4.2. Se pudo observar que al

añadir el NaOH cambio su acidez a base. Y lo mismo ocurre al añadir HCl, solo que en

este caso la orina paso hacer moderadamente más acido de lo que estaba. Se debe a que

la orina es un líquido ácido y funciona como un amortiguador urinario ideal ya que el

cambio de pH no fue drástico, sino cambio relativamente poco. Es un amortiguador ya

que observamos que resistió a la adición del ácido y la base, así reduciendo el impacto

de los cambios drásticos de H+ y OH-. De esta manera permitiendo la excreción urinaria

de una cantidad importante de hidrogeniones y mantener así bajos niveles en el plasma

impidiendo la generación de acidosis metabólica. Es una defensa contra el cambio del

pH.

Suero: realizamos la medición del pH en el suero antes de agregar HCl 0.1 N. La cual

su pH inicial fue de 7.3

Después con el mismo pHmetro determinamos la capacidad amortiguadora de la

solución (tubo 1 + HCl 0.1 N). Midiendo el pH final después de la adición del ácido

fuerte (HCl 0.1 N) el pH final del suero fue 5.6, observamos que al añadir HCl 0.1 N su

acidez cambio a base. Pero el cambio que se produjo en el pH no fue tan significativo.

Por tanto, el suero demostró tener la capacidad amortiguador frente al HCl 0.1 N.

Saliva: realizamos la medición del pH en la saliva antes de poder agregarlo NaOH 0.1

N y HCl 0.1 N. La cual su pH inicial del primer tubo fue de 6.9 y del segundo tubo fue

de 7.0

Después con el mismo pHmetro determinados la capacidad amortiguadora de la

solución (tubo 1 + NaOH 0.1 N y tubo 2 + HCl 0.1 N). Midiendo el pH final después de

la adición de la base y acido fuerte (NaOH 0.1 N y HCl 0.1 N) el pH final de la saliva
del primer tubo fue 9.0 y del segundo tubo fue 1.7. Se pudo observar que al añadir el

NaOH cambio moderadamente el pH. Por lo visto la saliva también es un amortiguador,

ya que de este modo contrarresta los cambios de pH y ayuda proteger a los tejidos

bucales contra la acción de los ácidos provenientes de la comida o de la placa dental.

Agua: realizamos la medición del pH en el agua antes de poder agregarlo NaOH 0.1 N

y HCl 0.1 N. La cual su pH inicial del primer y segundo tubo fue de 4.7

Después con el mismo pHmetro determinados la capacidad amortiguadora de la

solución (tubo 1 + NaOH 0.1 N y tubo 2 + HCl 0.1 N). Midiendo el pH final después de

la adición de la base y acido fuerte (NaOH 0.1 N y HCl 0.1 N) el pH final al agregar

NaOH al primer tubo fue de 11.5 y al añadir HCl al segundo tubo fue de 1.3. Se pudo

observar que al añadir la base y el ácido a la solución cambio drásticamente el Ph. Por

tanto, el agua no es un amortiguador

Mandarina: realizamos la medición del pH en la mandarina antes de poder agregarlo

NaOH 0.1 N y HCl 0.1 N. La cual su pH inicial del primer y segundo tubo fue de 3.4

Después con el mismo pHmetro determinados la capacidad amortiguadora de la

solución (tubo 1 + NaOH 0.1 N y tubo 2 + HCl 0.1 N). Midiendo el pH final después de

la adición de la base y acido fuerte (NaOH 0.1 N y HCl 0.1 N) el pH final de la saliva

del primer tubo fue 3.6 y el pH del segundo tubo fue 2.9. Pudimos apreciar que al añadir

la base y el ácido no cambio bruscamente, sino fue moderadamente o no fue tan

significativo. Por tanto, la mandarina es un amortiguador.

Experiencia 2: capacidad antiácida.

Tubos Muestra pH NaOH HCl pH

(2.5 ml) (inicial) (1 N) (1 N) (final)

1 Hidróxido 7.7 0.5 ml 11.4

2 Hidróxido 7.7 0.5 ml 3.2

3 Subsalicilato 5.8 0.5 ml 12.2

de bismuto

4 Subsalicilato 5.7 0.5 ml 0.4

de bismuto

Tabla 1. Capacidad antiácida de dos muestras, realizado el 08 de noviembre de

2022.

Interpretación:

Hidróxido: realizamos la medición del pH en el hidróxido antes de poder agregarlo

NaOH 1 N y HCl 01 N. La cual su pH inicial del primer y segundo tubo fue de 7.7

Después con el mismo pHmetro determinados la capacidad amortiguadora de la

solución (tubo 1 + NaOH 1 N y tubo 2 + HCl 1 N). Midiendo el pH final después de la

adición de la base y ácido fuerte (NaOH 1 N y HCl 1 N) el pH final del hidróxido del

primer tubo fue 11.4 y del segundo tubo fue 3.2. Se pudo observar que al añadir el

NaOH 1 N y HCl 1 N cambio bruscamente el pH. Por tanto, el hidróxido no es un

amortiguador.

Subsalicilato de bismuto: realizamos la medición del pH en el subsalicilato de bismuto

antes de poder agregarlo NaOH 1 N y HCl 01 N. La cual su pH inicial del primer tubo

fue de 5.8 y del segundo tubo fue de 5.7

Después con el mismo pHmetro determinados la capacidad amortiguadora de la

solución (tubo 1 + NaOH 1 N y tubo 2 + HCl 1 N). Midiendo el pH final después de la

adición de la base y acido fuerte (NaOH 1 N y HCl 1 N) el pH final del hidróxido del

primer tubo fue 12.2 y del segundo tubo fue 0.4. Pudimos observar que al añadir el

NaOH 1 N y HCl 1 N el pH cambio bruscamente. Por lo tanto, el subsalicilato de

bismuto no es un amortiguador.
 V. DISCUSIONES

Los amortiguadores son muy importantes, ya que sirven para que no haya cambios

bruscos en el pH de una solución. Así para que pueda mantenerse el medio interno en

equilibrio.

Según Pérez KK y Fonseca D, mencionan que los amortiguadores son sistemas que

tienden a mantener el pH casi constante cuando se agregan pequeñas cantidades de

ácidos (H+) o bases (OH-). Así reduciendo el impacto de los cambios drásticos de H+ y

OH-, ya que la solución amortiguadora contiene especies que van a reaccionar con los

iones H+ y OH-. El pH del sistema amortiguador depende de la proporción relativa

entre la sal y el ácido (1).

En nuestra practica la orina tuvo un pH de 6.2. Según Laso MC, afirma que la orina es

normalmente ácida. Los valores de pH oscilan entre 5 y 6 con un rango de 4,5 a 8,5. La

orina contiene, urea, sodio, potasio, cloro, bicarbonato, creatinina, ácido úrico y amonio,

el pH de la orina puede variar con el tipo de alimentación que consumamos, siendo más

ácida con el consumo de productos ricos en proteínas, grasa y cereales, y más alcalina

con el consumo de productos vegetales (2).

os amortiguadores (buffers) en los fluidos corporales sirven como una defensa contra el
cambio del PH .Cada compartimiento de fluido contiene tipos y características de substancias
disueltas, algunas que son amortiguadores a un pH fisiológico. Por eso, el pH es estabilizado
por la capacidad amortiguadora de los fluidos corporales.

https://www.academia.edu/38488046/PH_Y_AMORTIGUADORESv

Esta propiedad ayuda a proteger a los tejidos bucales contra la acción de los ácidos

provenientes de la comida o de la placa dental, por lo tanto, puede reducir el potencial

cariogénico del ambiente.

Según Rodríguez JA, and others., el pH de la mandarina es de 3.61, en la práctica nos

salió el valor del pH 3.4, podríamos decir que no es mucho la diferencia y de que si es

un buen tampón o amortiguador. Ya que contiene potasio, vitamina C, provitamina A,

ácidos orgánicos y flavonoides (3).

http://www.fcb.uanl.mx/IDCyTA/files/volume5/5/3/47.pdf
 VI. CONCLUSIONES

En esta práctica logre aprender a analizar las propiedades de las soluciones ácidas y

básicas y a medir la capacidad amortiguadora de los líquidos biológicos o ciertas

sustancias. Ya que es un aspecto fundamental en todos los seres vivos la homeostasis o

la capacidad de mantener una situación en equilibrio dinámico. Y justamente para

mantener el medio interno en equilibrio, los amortiguadores cumplen un papel

primordial y tienen una gran importancia ya que van a equilibrar la presencia de

sustancias ácidas y básicas para mantener el pH dentro de los limites fisiológicos,

porque las sustancias amortiguadoras desarrollan rápidamente su acción previniendo de

esta forma cambios excesivos en la concentración de iones hidrogeno (H+) e iones

hidroxilo (OH-). Es decir, tienden a mantener el pH casi constante al agregar una

pequeña cantidad de ácido o base. De esta forma evitando o reduciendo el impacto de

los cambios drásticos de H+ y OH-.

 pero al estar un amortiguador en la solución, esta mantiene sus niveles de acidez o

basicidad según sea el caso

un buffer es un sistema que tiende a mantener el ph casi constante cuando se agregan

pequeñas cantidades de ácidos o bases

una solución amortiguadora reduce el impacto de los cambios drásticos de h+ y oh-

la solución amortiguadora contiene especies que van a reaccionar con los iones h+ y oh-

agregados

los tampones son, como sabemos mezcla de acidos o bases débiles con sus sales y su

zona de utilidad como tales dependen lógicamente del valor de su pka. este es pues un

factor limitante a la hora de seleccionar un tampon.

https://issuu.com/danielafonseca38/docs/pr__ctica_no.3_bq
 VII. CUESTIONARIO

1. Explique la importancia biológica de los sistemas amortiguadores

biológicos. Describa dos ejemplos.

Según Túnez I, and others es muy importante los sistemas amortiguadores biológicos ya

que ellos son los encargados de poder mantener el pH de los medios biológicos dentro

de los valores compatibles con la vida. Permitiendo con ello la realización de funciones

bioquímicas y fisiológicas de las células, tejidos, órganos, aparatos y sistemas.

https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/06%20pH

%20AMORTIGUADORES.pdf

Ejemplos:

Sistema Fosfato: El sistema fosfato es uno de los amortiguadores más importantes, ya

que participa en la orina, debido a que los protones excretados en la orina son

principalmente en la forma de la especie H2PO4 -1

Hemoglobina: también es uno de los amortiguadores muy importantes y está presente

en los glóbulos rojos de la sangre. Las razones principales son por su alta concentración

en la sangre y su altísimo contenido del aminoácido histidina. Este aminoácido tiene una

cadena lateral única llamada imidazol. Esta cadena, puede atraer a los protones y

sacarlos de los fluidos corporales o puede donar protones dichos fluidos en el intento de

mantener el pH cerca de 7.40. Las otras proteínas en los compartimentos de fluido,

también le deben su capacidad de amortiguar a esta cadena lateral. La albúmina es la

proteína del plasma más abundante y contribuye en forma significativa a la

amortiguación de la sangre. Donde el fluido intracelular está lleno de proteínas que

funcionan como el sistema más importante de amortiguación dentro de la célula. En

condiciones metabólicas la Hb se comporta como un ácido débil y la oxihemoglobina

como un ácido más fuerte que la Hb reducida (es decir aquella que lleva un hidrogenión

—> HHb).

https://repository.unad.edu.co/bitstream/handle/10596/4810/334001-%20Soluciones

%20Buffer-

Amortiguadoras.pdf;jsessionid=208E3AB29EE2595B5B3A9BA44C85FAD0.jvm1?

sequence=1
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Pérez KK y Fonseca D. Solubilidad en el entorno acuoso y lipídico-

amortiguadores [internet]. México. 2017; [citado el 25 de noviembre de 2022].

Disponible en: https://issuu.com/danielafonseca38/docs/pr__ctica_no.3_bq

2. Laso MC. Interpretación del análisis de orina [internet]. Buenos aires. 2017;

[citado el 25 de noviembre de 2022]; p. 179. Disponible en:

https://www.sap.org.ar/docs/archivos/arch02_2/179.pdf

3. Rodríguez JA, Florido AL, Hernández MA. Determinación de parámetros

fisicoquímicos en jugos de frutas cítricas. México. 2020; [citado el 26 de

noviembre de 2022]. Disponible en:

http://www.fcb.uanl.mx/IDCyTA/files/volume5/5/3/47.pdf

4.

1. https://baixardoc.com/preview/informe-de-practica-de-
laboratorio-n-1-ph-y-amortiguadores-y-reaccion-de-soluciones-
amortiguadoras-5d191c4f1e997
https://www.studocu.com/co/document/universidad-de-los-
llanos/farmacologia-1/informe-bioquimica-practica-3-ph-y-
soluciones-amortiguadoras/20526147
2. https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/06%20pH
%20AMORTIGUADORES.pdf
3. https://issuu.com/danielafonseca38/docs/pr__ctica_no.3_bq
4. https://bioquimicaipn.wordpress.com/2017/09/15/practica-3-
soluciones-reguladoras/
5. https://repository.unad.edu.co/bitstream/handle/
10596/4810/334001-%20Soluciones%20Buffer-
 Amortiguadoras.pdf;jsessionid=8A9E4F2E9A8E41A6330F2099
DD7BC547.jvm1?sequence=1
6. https://med.unne.edu.ar/sitio/multimedia/imagenes/ckfinder/
files/files/Fisio/cap%203%20PH.pdf
 IX. ANEXOS

Primeramente, extraer los Depositar cada muestra en

líquidos biológicos, tubos de ensayo y rotular.
soluciones, saliva, agua y Para cada uno de ellos va Medir el pH del
mandarina. haber dos tubos iguales con agua destilada.
las mismos muestras y
cantidades.

Medir con diferentes

Leer el pH de cada uno
de los tubos
micropipetas a 500 microlitros
que equivale a 0.5 ml. Al
primer tubo adicionar 0.5ml de
NaOH y al segundo 0.5ml de
HCl
Medir el pH de la
orina, sin haber
todavía
adicionado
ninguna solución.
 Realizamos el mismo Medimos su pH sin Adicionar 0.5ml de HCl
procedimiento con el haber agregado
suero. HCl

Al primer tubo adicionar 0.5ml Medimos el pH de la

de NaOH y al segundo 0.5ml saliva, sin haber Valores obtenidos del
de HCl agregado el NaOH y pH al añadir NaOH y
HCl HCl
 Medimos el Al primer tubo adicionar
pH del agua, 0.5ml de NaOH y al
Valores obtenidos del pH al
sin haber segundo 0.5ml de HCl
añadir NaOH y HCl
agregado
NaOH y HCl

Al primer tubo adicionar Medimos el pH

0.5ml de NaOH y al segundo de la mandarina,
Valores obtenidos del pH al
0.5ml de HCl sin haber
añadir NaOH y HCl
agregado NaOH
y HCl
 Al primer tubo adicionar
Valores obtenidos del pH al Medimos el pH 0.5ml de NaOH y al
añadir NaOH y HCl del hidróxido segundo 0.5ml de HCl

Al primer tubo adicionar Medimos el pH de

0.5ml de NaOH y al Valores obtenidos del pH al
Subsalicilato de
segundo 0.5ml de HCl añadir NaOH y HCl fue 11.4 y
bismuto, sin haber
3.2
agregado NaOH y HCl
Valores obtenidos del pH al
añadir NaOH y HCl fue 12.2 y
0.4