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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA N° 1

MÉTODOS POTENCIOMÉTRICOS

Integrantes:

1- Campos Campos, Joseph Javier

2- Chanca Camargo, Miguel Ángel

3- Gonzales Arias, Aylin Judith

4- Kohayagawa Martínez, Estefanía

5- Leal Sandoval, Diego

6- Rojas Viera, Daniel

Grupo : martes 11:00-1:00 pm.

Fecha de la práctica : 28/08/18

Fecha de entrega de informe : 04/09/18

2018-II
1.INTRODUCCIÓN
Concepto de pH
Se trata de una unidad de medida de alcalinidad o acidez de una solución, más
específicamente el pH mide la cantidad de iones de hidrógeno que contiene una
solución determinada
Los ácidos y bases tienen distintas concentraciones de iones de hidrógeno, siendo los
más fuertes, aquellos que contengan mayor cantidad de iones y los débiles lo que no
posean tanta concentración, siendo el pH el encargado de expresar el valor numérico
de las concentraciones de iones de hidrógeno, en algunos casos la carga de iones
suele ser bastante baja, lo que se vuelve tedioso al momento de trabajar con dichas
cifras, es por ello que se ideó una tabla única, llamada la “escala del pH”, la tabla se
encuentra compuesta por 14 unidades numeradas, desde el 0 hasta el 14, siendo el 0
el punto máximo de acidez y el 14 la base máxima, el 7 representa el punto medio de
la tabla y es neutro, lo que quiere decir que las soluciones con un valor por debajo
del 7 son ácidas y las que están por encima son básicas
El agua, según el modelo de Brönsted-Lowry es un anfótero: puede actuar como
ácido y como base pues es capaz de aceptar y donar protones, así que la reacción
entre dos moléculas de agua es una reacción entre un ácido y una base.

Determinación potenciométrica del pH


Los métodos potenciométricos de análisis se basan en las moléculas del potencial de
celdas electroquímicas en ausencia de corrientes apreciables. Desde el comienzo del
siglo XX, las técnicas potenciométricas se han utilizado para la detección de los
puntos finales en los métodos volumétricos de análisis. De origen más reciente son
los métodos en los que las concentraciones de los iones se obtienen directamente
del potencial de un electrodo de membrana selectiva de iones. Tales electrones
están relativamente libres de interferencias y proporcionan un medio rápido y
conveniente para estimaciones cuantitativas de numerosos aniones y cationes
importantes. (Serjeant, 1984, p. 128)

Para determinar el pH de una solución se utiliza un equipo llamado potenciómetro, el


cual mide una diferencia de potencial.

ELECTRÓMETRO: Dispositivo capaz de medir capaz de medir diferencias de potencial


muy pequeñas en un circuito de resistencia extremadamente alta.

Electrodos de referencia:
Cuando un electrodo se coloca en contacto con un electrolito, se crea entre ambos
una diferencia de potencial. Esta diferencia no puede ser medida de manera
absoluta, por lo tanto se mide en comparación con un electrodo especial, un
electrodo patrón, que es el electrodo de referencia.
2. RESULTADOS

Muestras pH teórico pH práctico


HCl 0,1 M 1 1,47
HCl 1 M 0 0,47

NaOH 0,1 M 13 10,5

NaOH 1 M 14 12,94

CH3COOH 0,2 M 2,72 2,84

CH3COONa 0,2 M 9,02 7,99


6,5-6,8 (Alais, 1985,

Leche pág. 873); (Fox & H., 6,27


1998, pág. 478)

Gaseosa 2 (Barrios, 2015) 2,80


2,2 (Brown et al, 2,16
Zumo de limón
2004, pág. 623)
3. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
La tabla 1 muestra la medida de pH práctico del ácido clorhídrico (0.1M) de 1.47
cuando el teórico calculado es de 1.00, esto a causa de que el potenciómetro
calcula el pH entre el rango de 2 a 12 de pH, puesto que al traspasar este rango se
dañaría la sensibilidad del instrumento, caso parecido es del ácido clorhídrico
(1M) que tuvo un pH práctico de 0.47 cuando el teórico calculado es de 0. De igual
manera el hidróxido de sodio 0.1M y 1M con pH práctico de 10.5 y 12.94
respectivamente, cuando los teóricos calculados son de 13 y 14 respectivamente,
valores que no deberían forzarse a salir en el potenciómetro. Por otro lado se
midió el pH del ácido acético (0.2M) de 2.84 y éste difiere del pH teórico de 2.72,
debido probablemente a una proporción desigual al preparar la solución, caso
parecido es el de la sal acetato de sodio (0.2M) que al ser preparado con agua los
iones acetato establecen equilibrio con su ácido conjugado ácido acético
formando iones hidróxido, haciendo básica la solución, determinándose así un pH
práctico de 7.99 difiriendo del pH teórico de 9.02, causado también por la
desproporción al preparan la solución, en cuanto a la leche expuesta a la
intemperie durante una semana se calculó un pH de 6.27, cuando el pH teórico
debe estar en el rango de 6.5 a 6.8 (Alais, 1985,pág. 873); (Fox & H.,1998, pág.
478), ésta disminución se debe a la descomposición de materiales orgánicos que
son aprovechados por microorganismos presentes en la leche, por otro lado la
muestra de gaseosa con un pH medido luego de una semana de ser abierto el
envase, tuvo un valor de 2.8 cuando el pH teórico es de 2 (Barrios, 2015), esto se
explica por el dióxido de carbono acuoso que establece equilibrio con el ácido
carbónico, y al estar expuesto al aire el dióxido de carbono escapa del estado
acuoso, disminuyendo así la concentración de ácido carbónico y aumentando el
pH. En cuanto a la muestra de zumo de limón el pH práctico de 2.16 se acerca
bastante al teórico de 2.2 (Brown et al, 2004, pág. 623), esto puede ser por el tipo
de suelo en que se cultivó el limón estudiado en el libro del autor, y el que se
evaluó como muestra.

Bibliografía

Brown, Theodore et al. (2004). Química. La ciencia central. México: Pearson


Educación de México, S.A. de C.V.
4.CONCLUSIONES

● Se concluye que el pH es la medida de la acidez o alcalinidad de un medio


expresado en una escala del 0 al 14, que mide el grado de acidez o
alcalinidad de una muestra y que se define como el logaritmo negativo de
la concentración de iones hidronio y también se puede medir con el
potenciómetro o pHmetro .
pH = -log[H3O+]

● El potenciómetro es un instrumento delicado y costoso por lo que es


importante darle un manejo adecuado, cuando no se está utilizando en el
laboratorio se debe mantener en su solución buffer, y después se debe
enjuagar con agua destilada sin que la pipeta golpee la membrana y el
secado hacerlo suavemente con papel tisú sin dejar rastros de agua para
someter la membrana a la lectura de pH se debe revisar si está calibrado
mirando la pantalla y verificando que hayan dos anillos antes de empezar
con la lectura.

● Se obtuvieron dos pH por muestra, una teórica y la lectura del


potenciómetro. Donde el margen de error fue de ± 0.13, lo que evidencia
la precisión del potenciómetro en la lectura del pH, en las muestras con
diferente molaridad varió el pH en ambos casos y mientras más pura sea la
muestra se aleja del pH neutro ya sea alcalino o ácido; el potenciómetro
también da lecturas de pH de mezclas heterogéneas como la leche o la
gaseosa y el zumo de limón, pero el resultado varía también del tiempo en
que se dejen expuestas las muestras por acción de enzimas y
microorganismos.
5. CUESTIONARIO
1. Breve revisión de cálculos con logaritmos
a) Log 10-2 = -2
b) Log 1000 = 3
c) Log 0.01 = -2
d) Log 30 = Log 10 + Log 3 = 1.5
e) Log ½ = Log 1 – Log 3 = -0.3
f) Log500 = Log100 + Log5 = 2.7
g) Log8000=Log 1000 + Log8 = 3.9
h) Log 0.3 = Log3 – Log 10 = -0.5
i) Log 0.0002 =Log2–Log 104=-3.7
j) Log 1/5 = Log 1 – Log 5 = -0.7

2. Razonando mentalmente diga ¿Cuál de las siguientes soluciones es la más ácida?,


¿Cuál es la más básica?, ¿Cuál tiene pH menor y cual pH mayor?

HCl 0.1M HCl 0.01M HCl 0.02M HCl 0.005M

-Log[0.1M] = 1 -Log[0.01M] = 2 -Log[0.02M] = 1.7 -Log[0.005M] = 2.3


El más ácido es el HCl 0.1M, el más básico es HCl 0.005M y el de pH menor y mayor
es HCl 0.1M Y 0.005M respectivamente.

3. ¿Cuál es el pH de una solución que tiene una [H +] de 2*10-6?

pH= -Log[2*10-6] = - (log 2 + log10-6) = 5. 7

4. ¿Cuál es la [H+] de una solución de pH 12?

12 = - Log[H+] [H+] = 10 -12M

5. Si el Ka del ácido acético es 1,8 x 10-5 calcular el pKa.

pKa = -Log[1,8 x 10-5]


pKa = 4,74

6. ¿Cuál es el pH de una solución de H2SO4 0,000005M.

H2SO4 → 2H+ + (SO4)- pH =


-5
-Log[1x10 ]
[]I 0,000005 - - pH = 5
[]F - 0,00001 0,000005

7. Describa la preparación de un litro de solución de NaOH con un pH de 12,7

pH + pOH = 14 NaOH → Na+ + OH-


12.7 + pOH = 14 [] i 10-1,3
pOH = 1.3 [] f 10 -1,3 10-1,3
-Log[OH] = 1.3
[OH] = 10-1.3 10-1.3 = 0.05
Se debe prepara una solución de NaOH 0,05 M.

8. Calcular el pH de las siguientes disoluciones:


HCl 0,00188M HCL 0,0031% (p/v) H 2SO4
0,0013

Ácido fuerte, se disocia por completo [] de H + 0,00188M


pH = -Log[0,00188]
pH = 2,72

HCl 0,0031% (p/v) = 3,1x10-5 g/mL = 3,1x10-2 g/L


1 mol → 36,5 g [] = 8,49x10 -4 M pH = -Log[8,49x10 -4]
X → 3,1x10-2 g pH = 3,07
X = 8,49x10-4

Ácido fuerte, se disocia por completo [] de H + 0,0026 M


pH = -Log[0,0026]
pH = 2.58

9) ¿Cuál es el pH de una solución HCl 10 -8 M?

Sea HCl un acido fuerte

HCl ----> H+ + Cl-

10-8 10-8 10-8

pH = - log [H+] ----> - log [10-8]= -(-8)

pH = 8

10) Calcular la [H+] de:


➢ Sangre de pH 7.4
pH = - log [H+] = 7.4
log [H+] = - 7.4
Antilog* log [H+] = 10-7.4 mol [H+]

➢ NaOH pH 10.66

pH = - log [H+] = 10.66

log [H+] = - 10.66

Antilog* log [H+] = 10-10.66 mol [H+]

➢ Orina pH 5.78
pH = - log [H+] = 5.78

log [H+] = - 5.78

Antilog* log [H+] = 10-5.78 mol [H+]

➢ Fluido muscular intracelular pH 6.7

pH = - log [H+] = 6.7

log [H+] = - 6.7

Antilog* log [H+] = 10-6.7 mol [H+]

➢ Agua de mar pH 7.4

pH = - log [H+] = 7.4

log [H+] = - 7.4

Antilog* log [H+] = 10-7.4 mol [H+]

11) ¿Cómo calibraría su potenciómetro en las siguientes circunstancias?

(Especifique: frecuencia de calibración, que utilizaría para calibrar su equipo, etc.)

a) Necesitara hacer el control de calidad de 100 latas de zumo de limón diluido

Frecuencia de calibración: cada 20 latas

Buffer: 2 cercano a la medida de pH del jugo de limón (2.3).

b) Necesitara determinar el pH sanguíneo de 25 pacientes.

Frecuencia de calibración: cada 5 pacientes

Buffer: 7 cercano al pH sanguíneo

c)Trabajara en un Instituto de Investigación donde se analizarán diversas muestras de


líquidos biológicos, alimenticios y de industrias en general.

Frecuencia de calibración: cada 10 muestras

Buffer: dependiendo de la sustancia a analizar, cercano al pH regular de la muestra.

12) ¿Por qué es importante el producto iónico del agua?

El agua es un electrolito débil, es decir se disocia en escasa proporción, dicha disociación


es reversible.

Keq = [H+][OH-]

[H2O]
[H2O] *Keq = [H+][OH-]

El equilibrio de disociación está muy desplazado hacia la izquierda, en otras palabras, la


concentración de H+ y OH- es mínima. La constante de equilibrio determinada
experimentalmente es 1.8*10-16.

[H2O] *Keq = [H+][OH-]

El producto iónico del agua (K w) se mantiene constante, con lo cual se puede concluir que
la concentración de iones H+ y OH- es muy baja (10-7), permite mantener el pH estable
adecuado en diversas células y tejidos para hacer posible la vida, con lo cual esto no
altera las diversas reacciones quimicas existentes en los organismos.

KW = [H+][OH-]

10-14 = [H+][OH-]

[H+] = [OH-] = 10-7

13) ¿Cuál es el valor de pH de las siguientes sustancias?

a. sangre: arterial (7.4); venoso (7. 3)

b. suero: 7.4

c. orina: 4.6 - 8

d. jugo gástrico:0.9 – 1.5

e. jugo intestinal: 7.6

14)¿Qué aplicaciones tiene la medición del pH por ejemplo: en la agronomía, industria de


alimentos, biología, zootecnia, ciencias forestales, pesquería e ingeniería ambiental?

Agronomía:

El monitoreo del pH del suelo da idea de la liberación, concentración y disponibilidad para


absorción de minerales por las plantas. Conocer el pH del suelo influye en las actividades
de manejo como encalado que regula el pH, muchas veces debido al uso de fertiriego que
tiende a acidificar el suelo, y elección de las especies a cultivar, como por ejemplo la
cebada es sensible a los suelos fuertemente ácidos y los rendimientos pueden reducirse si
el pH es inferior a 5.5.

Industrias alimentarias:

Para el proceso de conservación de ciertos alimentos es crucial la medida del pH, por
ejemplo, carne de calidad adecuada usualmente posee moderadas cantidades de
glucógeno, lo cual después de beneficiado el animal forma ácido láctico que baja el pH,
inhibiendo así el crecimiento de microrganismos y prolongando la vida de anaquel. Carne
con pocas reservas de glucógeno, posee pH alcalino, es dura y no se conserva
adecuadamente por la contaminación bacteriana.

Biología:
La medición de pH se aplica a la utilización de algunos ácidos orgánicos como una
alternativa de menor costo al uso de antibióticos para contrarrestar enfermedades y la
proliferación de actividad bacteriana.

Para percibir alteraciones en la actividad regular de los organismos, como estados de


acidosis o alcalosis en los organismos. Encontrar límites de tolerancia de los organismos a
este parámetro e implementarlos para el desarrollo de técnicas y tecnologías, como por
ejemplo el rastreo genético para encontrar genes determinantes en la tolerancia al estrés
por cambios de pH y poder implementarlo a algún cultivo de interés.

Zootecnia:

La utilización de este parámetro puede dar luces del estado fisiológico de un animal y es
crucial en el uso de ciertas técnicas de manejo. En el caso de poligástricos cambios en el
pH ruminal, dado que el rumen es un ambiente con características anaerobias,
temperaturas de entre 30 y 40°C, pH de 5.5 a 7, afectan notablemente la población
bacteriana habitual, lo que a la larga desencadena problemas como meteorismo. Estos
cambios en el pH suelen estar afectados por la dieta, y ya que cada vez se requiere mayor
uso de alimentos ricos en azucares que proveen energía para el crecimiento o lactancia,
existe una delicada línea que se debe controlar para no alterar el estado fisiológico del
animal.

En técnicas reproductivas la medida del pH es crucial para el uso o preparación de


soluciones buffer que deben mantener en perfectas condiciones células germinales para
que luego puedan ser almacenadas y usadas en programas de mejoramiento genético.

manejo de residuos pecuarios como el compostaje es necesario el monitoreo del pH, para
evitar la proliferación de entero bacterias en el compost y controlar así su calidad y
características organolépticas.

Ciencias Forestales:

El pH en las diversas especies forestales, así como también en duramen (parte interna del
tronco) y albura (parte más externa y pálida) son atribuidas al pH del suelo, temporada de
volteo, altura de la muestra en la troza, contenido de humedad de la madera y extractivos
presentes en la madera. Dicha variación se puede deber principalmente al contenido de
extractivos de la madera que aumenta de la copa hacia la base del árbol. Asimismo, se
puede corroborar con los antecedentes teóricos los cuales indican un aumento del valor
de pH de la base a la copa; además una relación directa de pH y extractivos.

Siendo la madera un producto de extracción, el pH influye en la corrosión de metales en


contacto con ella, en la fijación de determinados preservantes químicos, en la coloración
de algunas maderas expuestas a la radiación solar, en la fijación de lacas y barnices sobre
su superficie y en el fraguado de colas y adhesivos, ya sea en madera sólida o en forma de
chapas o partículas para la producción de tableros.

Pesquería:

La química del agua tiene una influencia decisiva en el desarrollo de los peces, directa o
indirectamente, las sustancias orgánicas e inorgánicas deben encontrarse en las
cantidades adecuadas según la biología del pez. En la actividad acuícola los parámetros
más importantes de la calidad del agua son el oxígeno disuelto, el amonio, el nitrito, el
nitrato, la temperatura, salinidad y el pH. Dado que los peces están muy ligados a su
medio el control del pH está ligado a la alcalosis o acidosis de los peces, si el pH es bajo
existe una mayor cantidad de CO2 disuelto en el agua.

Ingeniería ambiental:

Existen indicadores de calidad ambiental los cuales reflejan un diagnóstico de los


ecosistemas permitiendo realizar decisiones. Como es el caso del pH en el suelo, donde
concentraciones de metales se toman como base para identificar suelos ácidos, pudiendo
así identificar zonas de manejo y recuperación, a través de técnicas que reestablezcan el
sistema de intercambio catiónico natural, para prácticas agrícolas, forestales sostenibles,
devolverle el valor como integrante fundamental de los ecosistemas naturales como
regulador del ciclo hidrológico o como sumidero de CO 2, por ejemplo.

Es usual la medición de este parámetro en el agua como parte de estudios técnicos


(fisicoquímicos), por ejemplo, en aguas residuales con pH bajos presenta dificultades para
el tratamiento con procesos biológicos y el efluente puede modificar la concentración de
iones hidronio en las aguas naturales. Así mismo para la desinfección con cloro eficaz es
preferible que se realice con un pH inferior a 8.

15)Calcular:

Muestra [H+] [OH-] pH pOH


HNO3 0.02 M 0.02 5*10-13 1.699 12.301
HCl 10 mmoles/L 0.01 10-12 2 12
HCl 0.01 M 0.01 10-12 2 12
NaOH 10 nmoles/L 10-6 10-8 6 8
KOH 0.04 M 2.5*10-13 0.04 12.602 1.398

a. HNO3 0.02 M
Sea HNO3 un ácido fuerte.

HNO3 ----> H+ + NO3-


0.02 0.02 0.02

pH = - log [H+] ----> - log [0.02]= -(-1.699)


pH = 1.699

b. HCl 10 mmoles/L

10*10-3 moles [HCl]/L = NaOH 10-2 M

HCl ----> H+ + Cl-


10-2 10-2 10-2

pH = - log [H+] ----> - log [10-2]= -(-2)


pH = 2
c. HCl 0.01 M

HCl ----> H+ + Cl-


0.01 0.01 0.01

pH = - log [H+] ----> - log [0.01]= -(-2)


pH = 2

d. NaOH 10 nmoles/L

10*10-9 moles [NaOH]/L = NaOH 10-8 M

NaOH ----> Na+ + OH-


10-8 10-8 10-8

pOH = - log [OH-] ----> - log [10-8]= -(-8)


pOH = 8 ----> pH = 6

e. KOH 0.04 M
Sea KOH una base fuerte:

KOH ----> K+ + OH-


0.04 0.04 0.04

pOH = - log [OH-] ----> - log [0.04]= -(-1.398)


pOH = 1.398 ----> pH = 12.602

16)Si a 1 L de una solución de NaOH de concentración 10 nmoles/L se le añade 235 ml. de


agua ¿Cuál es el pH de la solución final?

Sea: 10*10-9 moles NaOH / L = 10-8 moles NaOH

Dado que es una base fuerte sus iones se disuelven totalmente

10-14 = [H+]*[OH-] ---->[H+] =10-14/10-8 ---->[H+] = 10-6

pH inicial = - log [10-6] = 6

Volumen total de la disolución: 1L + 0.235 L = 1.235 L

Concentración final: 10-8 moles NaOH / 1.235 L = 8.097*10-9 moles NaOH

NaOH ----> Na+ + OH-


8.097*10-9 8.097*10 -9
8.097*10-9
pOH = - log [OH-] ----> - log [8.097*10-9]= -(-8.092)
pOH = 8.092 ----> pH final = 5.908

Fuentes:
El Uroanalisis, un gran aliado del medico.Campuzano Maya German, Arbelaez
Gomez, Mario. Departamento de Medicina Interna, Facultad de Medicina,
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia. Urología Colombiana, Marzo 2007.
Alteraciones del equilibrio Acido Base.Dr. Benito Saibz Menendez. Rev. Cubana Cir
2006; 45.
Determinación del pH en diversas especies de Los Renovales de la provincia de
Valdivia. Rudiger Albin A. BOSQUE Vol. 1 N°1, 1975.
Determinacion de Ph y capacidad buffer en tres niveles de altura del fuste de la
especie Miconia barbeyana Cogniaux (PALIPERRO). Aliaga Campos, A. Universidad
Nacional Agraria de La Selva. Tingo María, Perú. 2007.
Indicadores de calidad Ambiental en Suelos Ácidos. Cruz Chavez, E.Universidad
Autonoma del Estado de Hidalgo. México, 2010.
Bienestar animal en la enseñanza de Medicina Vetrinaria y Zootecnia. ¿Por qué y
para qué?. Aline S. de Aluja. Vet. Méx vol. 42 no.2 México abr./jun. 2011.
Efecto de la Materia Orgánica y Encalado del Suelo en Cebada (Hordeum vulgare
l.) Variedad UNA 96 cultivado en invernadero. Chuco Vega, M. Lima, Perú 2014.
Biología molecular de la regulación de la homeostasis de pH en Arabidopsis
thaliana .Niñoles Rodenes, R. Departamento de Biotecnología. Universidad
Politécnica de Valencia.2011.
Análisis de la dinámica del oxígeno y el amonio en un sistema de recirculación con
agua de mar, para el cultivo experimental de peces. Sotomayor Bello, C. Lima,
Perú 2016.

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