“AÑO DEL FORTALECIMIENTO DE LA SOBERANÍA

NACIONAL”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
Facultad de Ciencias
Escuela Profesional de Ciencias Biológicas

HEMOGLOBINOMETRIA
Curso: Análisis clínicos.

Alumnos : Vilela Chunga, Jonathan Josué.

Yarlequé Troncos, Daniela Mercedes.
Yesquén Navarro, Marcia Gieraldine.

Docente: Mcblg. Jaime Fernández Ponce.

Semestre: 2022-II
 HEMOGLOBINA Transporte de oxígeno en el organismo.

Es una proteína compleja, constituida

por el grupo hem, que contiene hierro y Molécula de
Glóbulo rojo
le da el color rojo al eritrocito, y globina oxígeno
2. Molécula de
hemoglobina

1.Oxígeno de los 3. El oxígeno es

pulmones liberado a las células
de tejido
2. El oxígeno se une
a la hemoglobina.
HEMOGLOBINOMETRÍA

Es la medida de la concentración de hemoglobina

en la sangre.
Los métodos empleados se agrupan según su
técnica básica y sus variantes respectivas:
- Métodos colorimétricos
- Gasométricos
- Densimétricos
- Químicos

Concentración de hemoglobina

Es la cantidad de hemoglobina en un volumen fijo

de la sangre.
Se expresa en gramos por decilitros (g/dL).
 Método de la
Cianometahemoglobina

- 1967, es el método recomendado por el

Comité Internacional de Estandarización en 540 nm
Hematología (ICSH).

Espectrofotómetro

Hemoglobina + Ferrocianuro potásico -> Metahemoglobina

Metahemoglobina + Cianuro potásico -> Cianometahemoglobina

Materiales Materiales

Equipo de toma de
muestra Equipos

Gradillas
3 Tubos de ensayo

Torniquete Guantes

Pipetas automáticas

Reactivos

Espectrofotómetro
Aguja Tubos EDTA ➔ Bicarbonato de Sodio calibrado
vacutainer
➔ Cianuro de Potasio
➔ Ferrocianuro de Potasio
➔ Agua destilada
Procedimiento

Preparación del reactivo

Extracción de la muestra

Muestra de sangre completa con Se adiciona agua destilada, se sella

Se diluye el reactivo de Drabkin,
anticoagulante EDTA con papel parafilm, y se mezcla
se pipetea, evitando que se
levemente
hagan burbujas
 Montaje de la prueba
Lectura
Tres tubos
rotulados:
Blanco Se adicionan 10 ml de muestra de
Muestra sangre en el tubo correspondiente a
Standard la Muestra.
Se deja reposar por 10 min.

Blanco: 0
Standard: 12
Se adicionan 10 ml en el
tubo correspondiente al Muestra: 15.6
Se pipetea el reactivo de Drabkin a cada tubo Standard.
 Cálculos
Fórmula general
Rango de referencia
Varones 13,8 - 17,2 gr/dL

Mujeres 12.1 - 15,1 gr/dL

Mujeres 11 o superior
Reporte embarazadas

- Nombre del paciente: Niños 11 - 13 gr/dL

- Sexo:
- Edad:
- Muestra: Sangre Neonatos 14 - 19 gr/dL
- Examen solicitado: Determinación de
concentración de hemoglobina
- Resultado: 15,6 gr/dL
Método de la Azidametahemoglobina Vanzetti, 1966

Las membranas de eritrocitos son

desintegradas por el desoxicolato de
sodio, liberando a la hemoglobina.

Nitrito de sodio convierte el hierro de la

Hb del estado ferroso al estado férrico
para formar metahemoglobina.

Se combina con la azida de sodio para

formar la azidametahemoglobina

Luego la microcubeta es leída en el
hemoglobinómetro. Absorbancia de
565 y 880 nm.
Punción capilar
Consiste en hacer un incisión o punción en el
pulpejo de un dedo de la mano o en la piel del talón
con una lanceta retráctil para obtener una pequeña
muestra de sangre capilar.
Paso a paso para toma de muestra de sangre capilar

6 7 8
Procedimiento

Hemoglobinometro
Equipo con filtro incorporado y
una escala calibrada para
realizar lecturas directas de
hemoglobina en gr/dL.
Microcubeta
Dispositivo de medición, por el
cual ingresa la muestra de
sangre por capilaridad.

Preparación de
hemoglobinometro
Capilares
Se procede a introducir la
microcubeta con la
Se introducen las gotas de muestra de sangre, y se
sangre por capilaridad a la espera a que el equipo
microcubeta. esté listo.
Medición

Resultado
Procedimiento realizado en neonatos
HEMOGLOBINA GLICADA (HbA1c)

Otros nombres Glicación de la Hb

Glicohemoglobina, h. glicosilada,
hemoglobina A1c o simplemente
A1C Proceso no enzimático y lento, que ocurre
dentro de los 120 días de vida media de un
eritrocito → unión de Hb a un azúcar, hasta la
muerte del hematíe
Origen
Rx. bioquímicas entre
hemoglobina y
azúcares en la sangre
Tipos de hemoglobina

97%
2.5%
0.5%

Principales tipos de Hb glicada

La HbA1c tiende a ser la más abundante (80% aprox.) de las

HbA1. Se relaciona con la diabetes.
 1 4

DETERMINACIÓN DE HbA1c

MÉTODO CROMATOGRÁFICO DE ALTA EFICIENCIA 5 6

1. Preparación de hemolizado: 500 uL lisante + 100 uL muestra

2. Remover y dejar reposar x 3 min.
3. Homogeneizar 3 mL de resina.
4. Colocar 100 uL de muestra a los tubos con resina.
5. Colocar un filtro a 2 cm de la disolución y mezclar durante 5
7 8
min.
6. Dejar reposar durante 5 min.
7. Se filtra el sobrenadante presionando el filtro sobre la mezcla.
8. Decantar el sobrenadante a una celda para la lectura en
espectrofotómetro
 1

Para calcular la glicohemoglobina total se añaden los siguientes

pasos:

1. 5 mL de agua destilada + 20 uL de hemolizado

2. Se homogeniza y se coloca en una celdilla para realizar la
lectura.
3. El espectrofotómetro se calibra con un Glicohemoglobina
calibrador y luego se realizan los cálculos.

=R
VALORES DE HbA1c

NORMAL Menor que 5.7%

PREDIABETES 5.7% - 6.4%

DIABETES Mayor o igual que 6.5%

Los resultados de HbA1c indican qué porcentaje de su hemoglobina está cubierto con
glucosa
Se recomienda hacer esta prueba si:

- Tiene prediabetes
- Tiene sobrepeso u obesidad
- Tiene un padre o hermano con diabetes tipo 2
- Tiene hipertensión o niveles altos de colesterol
- Tiene enfermedad cardíaca o ha tenido un accidente cerebrovascular
- Está físicamente active menos de 3 veces por semana
- Ha tenido diabetes gestacional (diabetes durante el embarazo) o ha dado a
luz a un bebé de más de 9 libras
- Tiene síndrome del ovario poliquístico (PCOS)
- Tiene síntomas de diabetes
 HEMATOCRITO
Indica la masa eritrocitaria respecto al
volumen total de sangre, es decir, el
volumen que ocupan los eritrocitos en
muestras de sangre capilar o venosa.
Sinónimos: Volumen de paquete globular
(VPG), fracción del volumen de los
eritrocitos y valor del hematocrito.
Para la determinación del hematocrito
existen dos métodos a escoger: el
Micrométodo y el Macrométodo.
HEMATOCRITO MÁS BAJO
- Insuficiencia de glóbulos rojos sanos
(anemia)
- Gran cantidad de glóbulos blancos
- Vitaminas o minerales deficientes
- Pérdida de sangre reciente
HEMATOCRITO MÁS ALTO
- Deshidratación
- Policitemia primaria
- Enfermedad pulmonar o cardiaca
 Macrométodo

1. Recolectar 5 mL de sangre venosa

con anticoagulante.
2. Homogeneizar la sangre con el
anticoagulante por inversión del
tubo.
3. Llenar el tubo Wintrobe con sangre
empleando una pipeta Pasteur.
4. La columna de sangre debe quedar
en la marca de 100 mm.
5. Centrifugar durante 30 minutos a
3000 rpm
6. La altura de la columna de
eritrocitos es expresada como una
fracción de la longitud original de la
columna de sangre.
 Micrométodo

1. Mezclar la sangre por inversión del tubo.

2. Los capilares de vidrio se llenan con sangre hasta
las dos o tres cuartas partes de su longitud total.
3. Sellar el extremo seco y opuesto al orificio de
llenado con plastilina o mediante el calor de una
flama
4. Colocar los capilares en los rieles de la
microcentrífuga
5. Centrifugar de 10000 - 12000 rpm por 5 minutos
6. Sacar los capilares de la microcentrífuga.
7. Las mediciones se hacen con respecto a la
longitud de la columna de eritrocitos y pueden
hacerse colocando el tubo capilar contra papel
milimétrico o contra una regla.
Valores de Referencia

Ej. Si el resultado de su hematocrito es 42, significa que el

Hombres: 42-52%
42% de su sangre es glóbulos rojos y el resto glóbulos
Mujeres: 37-48%
blancos, plaquetas y plasma.
GRACIAS