UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

PERÍODO ACADÉMICO
ASIGNATURA
NOMBRE DEL DOCENTE
FECHA
NÚMERO DE PRÁCTICA
2023-2S
HEMATOLOGÍA SEMESTRE: PARALELO: A
I TERCERO
Mgs. XIMENA ROBALINO FLORES
7 HORA: 10:00- 13:00 DURACIÓN: 3 horas

• Guala Verdezoto Melany Jhajaira

NOMBRE DE LOS
• Hernández Garcia Génesis Nicole
ESTUDIANTES.
• Tenemasa Carrazco Emyly Solange
• Tenemaza Allaica Josselyn Lizeth
Laboratorio Clínico de Docencia
LUGAR DE LA PRÁCTICA

TÍTULO DE LA UNIDAD SERIE ROJA

TEMA DE LA PRÁCTICA DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA EN SANGRE
RESULTADO DE APRENDIZAJE.
Integra técnicas de recuento de eritrocitos, determinación de hematocrito o volumen globular,
determinación de hemoglobina con todas las normas de control de calidad para identificar las
características de los eritrocitos interpretando resultados de los índices eritrocitarios, dispersogramas e
histogramas de la serie roja
Determinar hemoglobina en sangre por el método de la
OBJETIVO GENERAL
cianmetahemoglobina
OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Realizar la toma de muestra por punción venosa en un tubo con anticoagulante.

• Aplicar el micro y macro método para la determinación de hemoglobina.
• Calcular la concentración de hemoglobina en sangre de acuerdo con el método de la
cianmetahemoglobina con lectura en modo absorbancia, standard y factor.
FUNDAMENTO TEÓRICO:
HEMOGLOBINOMETRÍA
La capacidad de combinación del oxígeno de la sangre es directamente proporcional a la concentración
de hemoglobina más que al número de hematíes. Por lo tanto, la hemoglobinometría, una de las
determinaciones de laboratorio más frecuentes, es importante como prueba para descartar las
enfermedades asociadas con anemia y para seguir la respuesta de estas enfermedades al tratamiento.
La concentración normal de hemoglobina expresada en gramos/100 ml de sangre varia ampliamente
según el estándar de Hemoglobina utilizado, la edad, sexo del paciente y la altitud del lugar.
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Muchos son los métodos para determinar la concentración de la Hemoglobina, los más comúnmente
utilizados se basan en uno de los cuatro procedimientos siguientes: medida de la capacidad de
combinación de la sangre con el oxígeno (método gasométrico); medida del contenido en hierro en la
sangre (método químico), medida colorimétrica de la densidad de la sangre total en soluciones de
sulfato de cobre de densidad conocida y la determinación posterior de la hemoglobina y medida
colorimétrica de un derivado coloreado de la hemoglobina por ejemplo la oxihemoglobina, la hematina
acida, la hematina alcalina y la cianmetahemoglobina y comparación de la muestra desconocida con
una estándar, mediante un método espectrofotométrico.

MÉTODO DE LA CIANMETAHEMOGLOBINA (ICSH-OMS)

Principio: 1.- La Hemoglobina de la sangre se une al ferricianuro de potasio y se forma la

metahemoglobina. 2.-La metahemoglobina se une al cianuro de potasio y se forma la
cianmetahemoglobina,
¿Qué es un análisis de hemoglobina?
El análisis de hemoglobina mide los niveles de hemoglobina en la sangre. La hemoglobina es una
proteína de los glóbulos rojos que lleva oxígeno de los pulmones al resto del cuerpo. Los niveles
anormales de hemoglobina podrían ser signo de un trastorno de la sangre (1).
¿Para qué se usa?
El análisis de hemoglobina se usa comúnmente para detectar anemia, un nivel anormalmente bajo de
glóbulos rojos en el cuerpo. Cuando una persona tiene anemia, las células de su cuerpo no reciben el
oxígeno que necesitan. Los análisis de hemoglobina se miden como parte de un conteo sanguíneo
completo (1).
¿Qué significan los resultados?
Los niveles de hemoglobina pueden estar fuera de los límites normales por muchas razones.
Si los niveles de hemoglobina están bajos, esto podría ser signo de (1):
• Diferentes tipos de anemia
• Talasemia
• Deficiencia de hierro
• Enfermedad del hígado
• Cáncer y otras enfermedades
Si los niveles de hemoglobina están altos, esto podría ser signo de:
• Enfermedad pulmonar
• Enfermedad del corazón
• Policitemia vera, un trastorno en que el cuerpo produce demasiados glóbulos rojos. Puede
causar dolores de cabeza, cansancio y dificultad para respirar.
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MATERIALES Y MÉTODOS
Equipos
• Espectrofotómetro
MUESTRA Sangre total obtenida con anticoagulante EDTA
PROCEDIMIENTO / TÉCNICA:
EXTRACCIÓN SANGUÍNEA
Materiales Reactivos
• Tubo de tapa lila • Alcohol antiséptico
• Torniquete • Solución de Drabkin
• Aguja hipodérmica • Bicarbonato de sodio
• Gradilla • Cianuro de potasio
• Capsula • Ferricianuro de potasio
• Tubos de ensayo • Agua destilada
• Papel absorbente • patrón o Estándar de
• Papel Parafilm cianmetahemoglobina.
• Absorbedor de goma
• Pipetas volumétricas de
vidrio calibradas de 20 ml o
10 ml
• Pipetas automatizadas
• Matraz aforado
• Puntas azules y amarillas
• Vaso precipitado

1. Aplicarse el equipo de bioseguridad.

Ilustración 1. Equipo de bioseguridad.

2. Preparar los materiales a emplear en la

punción por encima del mesón.
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Ilustración 2. Materiales por utilizar.

3. Codificar el tubo con el nombre del

paciente, cédula, edad y código.

Ilustración 3. Rotulación del tubo.

4. Procedemos a sacar sangre fijar la vena,

estirar un poco la piel e introducir la
aguja con el bisel hacia arriba siguiendo
la trayectoria de la vena. Una vez
introducida la aguja vacutaimer, con una
mano fijamos el dispositivo de sujeción
de tubos al vacío mientras que con la otra
insertamos el tubo con EDTA al interior
del dispositivo de sujeción y, nos
Ilustración 4:Extracción sanguínea
aseguraremos de que podamos observar
al momento de llenarse.

5. Homogenizar bien la sangre mediante

agitación suave durante un tiempo
mínimo de 5 minutos o por inversión
del tubo 20 veces.

Ilustración 5:Homogenizar la muestra

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6. Pipetear con cuidado 5ml de solución de

Drabkin en un tubo, evitando tragarse el
reactivo.

Ilustración 6:Pipeteo del reactivo

7. Con ayuda de una micropipeta añadir

0,02 ml de sangre o 20 ul de sangre
Homogenizada en el tubo con solución
de Drabkin. Al realizar esta operación,
es fundamental eliminar el exceso de
sangre que puede quedar en las paredes
externas del capilar antes de introducirlo
en el reactivo y procurar así mismo que
Ilustración 7:pipeteo de la muestra
no quede sangre adherida a las paredes
internas de la pipeta.

8. Tapar la boca del tubo con papel

Parafilm, para evitar que se derrame al
momento de homogenizarlo

Ilustración 8:Tubo con la lámina de parafílm

9. Agitar el tubo mediante inversión (4 o 5

veces) con el fin de homogenizar bien la
mezcla sangrereactivo y esperar mínimo
5 minutos para que se produzca la
hemolisis total y se completa la
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transformación de toda la hemoglobina

en cianmetahemoglobina

Ilustración 9:Homogenizar la muestra

10. Conectar el espectrofotómetro según las

especificaciones de la casa comercial.

Ilustración 10: El espectrofotómetro

11. Leer la absorbancia de la solución a 540

mm o 546 mm con blanco de reactivo.
Ilustración 11:Longitud de onda

12. Para calcular la concentración de

hemoglobina es recomendable disponer
de una gráfica o curva de calibración o
aplicando la siguiente formula:
Ilustración 12:Datos
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=𝑨(𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂)𝒙 𝑪𝒐𝒏𝒄𝒆𝒏𝒕𝒓𝒂𝒄𝒊ó𝒏 𝑺𝒕𝒂𝒏𝒅𝒂𝒓𝒅

Hb g/d
𝑨(𝑺𝒕𝒂𝒏𝒅𝒂𝒓𝒅)

A: absorbancia o densidad óptica

Cuando utilizamos factor:
Hemoglobina g/dl = A (muestra) x Factor
(36.7

Ilustración 13:cálculos y resultados

RESULTADO (Gráficos, cálculos, etc.)

Valores obtenidos en la práctica, imágenes, gráficos, etc

PIPETA DE SAHLI TUBOS Y MUESTRA BLANCO ESTÁNDAR Y

MUESTRA

ESPECTROFOTÓMETRO Y LECTURA
HERNANDEZ GARCÍA GENESIS CÁLCULOS
NICOLE
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Hb
Espectrofotómetro 16,34 g/dl
(Modo factor)
Hb tras la Hb= 0,436 x 36,77=
Absorbancia en el 16,03 g/dl
espectrofotómetro
Hemoglobina 𝟏𝟔,𝟎𝟑+𝟏𝟔,𝟑𝟒
𝑯𝒃 = =
𝟐

𝟏𝟔, 𝟏𝟖 g/dl
INTERPRETACIÓN El paciente se
encuentra en los
niveles normales de
hemoglobina.
MELANY VERDEZOTO GUALA

Hb
Espectrofotómetro 16,34 g/dl
(Modo factor)
Hb tras la Hb= 0,492x 36,77=
Absorbancia en el 18,09g/dl
espectrofotómetro
Hemoglobina 𝟏𝟖,𝟎𝟗+𝟏𝟓,𝟕𝟑
𝑯𝒃 = =
𝟐

𝟏𝟔, 𝟗𝟏 g/dl
INTERPRETACIÓN El paciente se
encuentra en los
niveles normales de
hemoglobina.

TENEMAZA ALLAICA JOSELYN

LIZETH
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Hb
Espectrofotómetro 10,60 g/dl
(Modo factor)
Hb tras la Hb= 0,317 x 36,77=
Absorbancia en el 11,65 g/dl
espectrofotómetro
Hemoglobina 𝟏𝟎, 𝟔𝟎 + 𝟏𝟏, 𝟔𝟓
𝑯𝒃
𝟐
= 𝟏𝟏, 𝟏𝟐𝟓𝒈/𝒅𝒍
INTERPRETACIÓN El paciente se
encuentra con los
niveles bajos de
hemoglobina.
TENEMASA CARRASCO EMYLY Hb
SOLANGE Espectrofotómetro 15,64 g/dl
(Modo factor)
Hb tras la Hb= 0,393 x 36,77=
Absorbancia en el 14,45 g/dl
espectrofotómetro
Hemoglobina 𝟏𝟓, 𝟔𝟒 + 𝟏𝟒, 𝟒𝟓
𝑯𝒃
𝟐
= 𝟏𝟓, 𝟎𝟒𝟓𝒈/𝒅𝒍
INTERPRETACIÓN El paciente se
encuentra con los
niveles normales de
hemoglobina.

OBSERVACIONES
• En la siguiente práctica, se pudo observar que al momento de mezclar la solución Drabkin
con la muestra sanguínea, se pueden conocer las absorbancias para una determinación de
hemoglobina en sangre.
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• Por otro lado, con la aplicación de las fórmulas se pudo conocer si el paciente se encuentra
con concentraciones normales o alteradas de la hemoglobina en sangre.
CONCLUSIONES
• La correcta toma de muestra con el tubo correcto, en este caso tubo de tapa lila con
anticoagulante EDTA al evitar que la sangre se coagule, permite la precisión de los resultados
del análisis de sangre pues de esta manera no hay interferencias en el por una muestra en mal
estado.
• El análisis de hemoglobina es útil para evaluar la salud general y diagnosticar enfermedades
como la anemia o policitemia vera, la técnica de micro y macro método permite realizar el
análisis de esta proteína de manera más segura pues los resultados pueden compararse e
interpretarse con más seguridad.
• Al calcular los valores de hemoglobina se pueden determinar aspectos muy importantes en la
sangre ya sea por deficiencia o aumento de la misma, los diferentes modos de lectura benefician
al laboratorista al poder expandir su conocimiento sobre el cálculo de esta proteína, permitiendo
así no solo ampliar el campo en diferentes lugares, sino la interpretación por diferentes
métodos.
RECOMENDACIONES
• Asegúrate de que las muestras de sangre estén correctamente recolectadas y etiquetadas.
• Mantén un área de trabajo limpia y ordenada.
• Siempre usa equipo de protección personal adecuado, como gafas de seguridad, guantes, bata
de laboratorio y calzado cerrado.
• Asegurarse del uso de los equipos de seguridad correctamente.
PREGUNTAS:
1.-Ponga los valores de referencia de Hemoglobina según edad, género y altitud geográfica.
• Recién nacido: 14 a 24 g/dL
• Lactantes (6 meses a 2 años): 9.5 a 13 g/dL
• Niños (6 a 18 años): 11.5 a 15.5 g/dL
• Hombres: 13,2 a 16,6 g/dL
• Mujeres: 11,6 a 15 g/dL
• Altitud baja (nivel del mar): Valores estándar mencionados anteriormente.
• Altitud alta (más de 3,000 metros): Los niveles de hemoglobina pueden aumentar más
significativamente (2).
2.- Factores de corrección de la hemoglobina por la altitud geográfica.
La concentración de hemoglobina en la sangre puede variar en función de la altitud geográfica debido
a las diferencias en la presión atmosférica y la disponibilidad de oxígeno. En altitudes más elevadas, la
presión atmosférica es menor, lo que lleva a una menor presión parcial de oxígeno. En respuesta a esta
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baja presión de oxígeno, el cuerpo tiende a producir más glóbulos rojos y aumentar la concentración de
hemoglobina para mejorar el transporte de oxígeno a los tejidos.
Para corregir las mediciones de hemoglobina y tener en cuenta las variaciones asociadas con la altitud,
se han propuesto algunos factores de corrección. Uno de los métodos más comunes es el índice de masa
eritrocitaria (IME), que ajusta la concentración de hemoglobina a la cantidad total de glóbulos rojos.
Este índice proporciona una estimación más precisa de la capacidad de transporte de oxígeno del cuerpo
en diferentes altitudes (3).
BIBLIOGRAFÍA

RUBIO CAMPAL, Faustina. Fundamentos y técnicas de Análisis hematológicos y citológicos.

Paraninfo.
GARCÍA ESPINOZA, Benjamín. Hematología II, Citología, Fisiología y Patología de hematíes y
leucocitos. Paraninfo

VIVES CORRONS, Joan Lluís. Manual de Técnicas en Laboratorio de Hematología. Tercera edición.
Masson. 2006

BIBLIOGRAFÍA DEL ESTUDIANTE

1. Medlineplus.gov.Análisis de hemoglobina. [Online].; 2021 [cited 2024 Enero 28. Available from: https://medlin

2. Anemia por deficiencia de hierro. [Online].; 2022. Available from: https://www.mayoclinic.org/es/diseases-con

3. Gob.pe.Vista de Necesidades de investigación para el diagnóstico de anemia en poblaciones de altura. [Online].

https://rpmesp.ins.gob.pe/index.php/rpmesp/article/view/3208/2922#:~:text=FACTOR%20DE%20CORRECCI

Mgs. Ximena Robalino

Flores MsC. Franklin Ramos
DIRECTORA DE Mgs. Ximena Robalino Flores RESPONSABLE DEL
CARRERA DOCENTE LABORATORIO