Bioseguridad y técnicas asépticas

Las manipulaciones en el laboratorio deben ser llevadas a cabo de tal modo de impedir la contaminación en el área de
trabajo.

Los procedimientos utilizados para conseguirlo se conocen con el nombre de técnica aséptica.

Objetivos

● Evitar que el operador se contamine con microorganismos procedentes de las muestras o cultivos.
● Evitar la contaminación de muestras o cultivos con microorganismos procedentes del ambiente o del propio
operador.

En el laboratorio de la universidad utilizamos un mechero que nos brinda un zona esteril ya que el fuego tan caliente
impide que haya microorganismos vivos. Antes hay que lavarse bien las manos y luego utilizar alcohol 70. Podemos
esterilizar con el fuego del mechero las herramientas.

Seguridad biológica o bioseguridad

Aplicación del conocimiento, técnicas y equipos necesarios para prevenir la exposición a agentes potencialmente
infecciosos o peligrosos.

Riesgo biológico: consiste en la presencia de un organismo o sustancia derivada de un organismo, que genera una
amenaza a la salud humana. Esto puede incluir residuos sanitarios, muestra de un microorganismos, virus o toxinas de
una fuente biológica que pueda resultar patógena.

Bioseguridad en el laboratorio

● Guantes de látex o vinilo, gorro.

● Gafas de seguridad (protección de salpicaduras)
● Delantal o bata de protección (material de baja permeabilidad, manga larga y puños ajustados)
● Máscara de protección respiratoria (riesgo de enfermedades transmisibles vía aerea)

Protección: boca, piel, ojos, pulmones.

Descarte de material contaminado

● Bolsas rojas: se descartan residuos patogénicos, residuos que contengan algún tipo de microorganismo o
sustancia relacionado con microorganismos, sangre o tejidos.
● Bolsas amarillas: se descartan residuos peligrosos como sustancias, algodones.
● Descartador especial con paredes rígidas: se descartan objetos cortantes.

Criterios para la clasificación de microorganismos en grupos de riesgo:

● Patogenicidad de microorganismos.
● Modo de transmisión y diversidad de hospederos de microorganismos.
● Disponibilidad local de medidas preventivas eficaces (vacunas, lucha contra los vectores, etc)
● Disponibilidad de tratamientos eficaces.

Clasificación de los microorganismos infecciosos por grupo de riesgo

● Grupo 1 (riesgo individual y poblacional escaso o nulo) microorganismos que tienen poca probabilidades de
provocar enfermedades en el ser humano o los animales.
● Grupo 2 (riesgo individual moderado y riesgo poblacional bajo) agentes patógenos que causan enfermedades
humanas o animales pero que tienen poca probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal del
 laboratorio, la población, el ganado o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede provocar una
infección grave, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.
● Grupo 3 (riesgo individual elevado y riesgo poblacional bajo) Agentes patógenos que suelen provocar
enfermedades humanas o animales graves pero que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen
medidas preventivas y terapéuticas.
● Grupo 4 (riesgo individual y poblacional alto) agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el
ser humano o los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente.
Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.

Control del crecimiento microbiano

El control se puede realizar mediante diversos métodos (químicos o físicos) que permiten la eliminación total del
microbio o la inhibición del crecimiento.

● Esterilización: el uso de procedimientos físicos o químicos para destruir completamente los microorganismos,
incluyendo las endosporas bacterianas que están presentes en objetos inanimados.
● Desinfección: Es un proceso menos letal que la esterilización. Elimina todos los microorganismos reconocidos
como patógenos pero no necesariamente todas las formas microbianas (endosporas) que están presentes en
objetos inanimados.
● Descontaminación: Proceso o tratamiento al que se someten los dispositivos e instrumentos médicos o las
superficies de manera de garantizar su seguridad para la posterior manipulación. La descontaminación puede
requerir esterilización, desinfección o limpieza con agua y jabón.
● Antisepsia: es el uso de germicidas sobre la piel o tejido vivo con el propósito de inhibir o eliminar
microorganismos.

Factores que influyen en el tratamiento germicida

● Números de microorganismos presentes: Cuanto mayor sea la biocarga mayor será el tiempo que un
desinfectante necesita para actuar.
● Resistencia natural del microorganismo: los microorganismos tienen diferentes resistencias a los germicidas, las
más resistentes son las esporas bacterianas, le sigue: micobacterias, virus desnudos o pequeños, hongos, células
vegetativas bacterias, virus medianos o envueltos.
● Cantidad de materia orgánica: la presencia de materia orgánica omo suero, sangre, pus, materia fecal pueden
inactivar la acción de algunos desinfectantes.
● Tipo y concentración del germicida usado: se relaciona con la potencia de acción de cada uno de los agentes
para que produzcan la acción esperada. Las concentraciones varían con respecto a los agentes desinfectantes.
● Duración y temperatura de exposición: cada método de desinfección y cada agente tiene un tiempo específico
necesario para lograr el nivel deseado. Algunos desinfectantes tienen especificado la temperatura ambiente a la
que deben ser utilizados para su efectividad. El pH favorece la actividad de los mismos.

Eliminación de microorganismos

(métodos físicos)

● Esterilización por calor húmedo (autoclave) Se utilizará el calor en forma de vapor saturado y a presión para
esterilizar, este nos proporciona temperaturas superiores a la ebullición. El autoclave regula la presión interna y
el tiempo, utiliza una presión de vapor de una atmósfera por encima de la presión atmosférica que corresponde
a 120°C. Utilizamos la cinta testigo para saber si la esterilización ocurrio de manera correcta, esta cinta cambia
de color a negro (no llegó a los 120°c)
● Esterilización por calor seco (horno pasteur) Se utiliza el calor seco para esterilizar material de vidrio y
materiales sólidos estables al calor. Para los materiales de vidrio de laboratorio se utiliza dos horas a 160°C. Se
utiliza en materias termotolerantes. Provoca la destrucción de pirógenos y el material sale seco del horno.
 ● Esterilización por radiación (luz ultravioleta) Se utiliza la luz UV para el saneamiento del aire, esterilizar
superficies de alimentos, reducir la población microbiana en quirófanos, esterilizar cuartos de llenado asépticos
en la industria farmacéutica, superficie contaminadas en la industria de alimentos y leche. La radiación UV tiene
poca capacidad de penetrar la materia, sólo los microorganismos expuestos directamente a la luz UV son
susceptibles de ser destruidos.
● Esterilización por radiación (radiación gamma) Los rayos gamma es un tipo de radiación ionizante capaz de
penetrar en la materia más profundamente que la radiación UV. Puede causar daño al ADN por lo cual se utilizan
para esterilizar equipos médicos, materiales, alimentos, etc.
● Esterilización por filtración (líquido) Se utiliza para eliminar a los microorganismos de los medios líquidos que
sean susceptibles al calor. Se esteriliza a través de un filtro con un tamaño de poro 0.45 um y no elimina virus ya
que estos son de menor tamaño.
● Esterilización por filtración (aire) Los filtros HEPA están compuestas por mallas de fibras dispuestas al azar, estas
fibras están compuestas por fibras de vidrio. Los filtros HEPA evitan la propagación de bacterias y virus a través
del aire, por lo tanto son importantes para prevenir las infecciones.

(métodos químicos)

óxido de etileno: se utiliza para esterilizar placas petri, jeringas y otros objetos de plástico que se funden a temperaturas
mayores a 100°C. Actúa inactivando enzimas y otras proteínas que contienen grupos sulfidrilos mediante reacciones de
alquilación.

Glutaraldehido: es una solución acuosa al 2% presenta una amplia actividad antimicrobiana. Es efectivo frente a virus,
células vegetativas y esporas de bacterias y hongos. Se utiliza para esterilizar instrumentos urológicos y ópticos.

Niveles de desinfección

Alto: Su objetivo es eliminar todo microorganismos vegetativo, incluyendo todo tipo de virus, micobacterias y esporas.
Los desinfectantes para la desinfección deben estar registrados en ANMAT, los cuales son glutaraldehído,
ortoftalaldehido y ácido peracético. Se debe monitorear la concentración del agente desinfectante, temperatura y
tiempo de exposición. Se debe controlar la fecha de validez y verificar la compatibilidad física y funcional del
instrumento con el producto.

Medio: Su objetivo es eliminar todo microorganismo vegetativo incluyendo micobacterias pero no elimina esporas. Se
puede utilizar alcoholes (etanol) y compuestos clorados (dióxido de cloro). Algunos virus desnudos pequeños suelen ser
resistentes.

Bajo: Su objetivo es eliminar de forma rápida las formas vegetativas bacterianas, hongos y virus envueltos de mayor
tamaño. No elimina micobacterias y esporas. Se puede utilizar amonio cuaternario, compuestos fenólicos o yodóforos.

Clasificación de los productos de uso médico

Materiales críticos: son aquellos que en forma directa o indirecta se ponen en contacto con los tejidos o cavidades
habitualmente estériles y torrente sanguíneo del paciente, los mismos se deben esterilizar. Como instrumental, gasa
quirúrgica, etc.

Mat. semicríticos: Son aquellos que en forma directa o indirecta se ponen en contacto con las mucosas intactas del
paciente. Se deben esterilizar o realizar desinfección de alto nivel. Como los equipos de reanimación, circuitos para
anestesia, etc.

Mat. no críticos: Son aquellos que en forma directa o indirecta se ponen en contacto con la piel intacta. Estos materiales
deberán ser sometidos a una desinfección de bajo nivel o nivel intermedio como proceso terminal. Como las piletas,
camas, etc.