GUÍAS DE

PRÁCTICAS DE Práctica No.: 1

LABORATORIO
S / TALLERES / Centro de
CENTROS DE Taller Laboratorio
X Simulació
SIMULACIÓN : :
n
UNIDAD ACADÉMICA DE SALUD Y BIENESTAR
Carrera de: Bioquímica y Farmacia Período Lectivo: abril – septiembre 2021

Asignatura: Biología
Docente: Q.F. Luis Vélez Zamora, M.Sc. Técnico docente: Q.F.
Curso/Ciclo: Séptimo Paralelo: B
Laboratorio: 214 Fecha: 12 de octubre de 2022
1 Introducción a la microbiología de los alimentos;
Bloque
Título: enfermedades microbianas y otros peligros de origen
Temático Nº:
alimentario.
Tema de la Preparación de medios de cultivo
práctica:
Astudillo Marcela, Durazno Cristina, Jerez Patricia, Toledo Jennyffer, Torres Karen
Integrantes:

1.INTRODUCCIÓN
En el laboratorio de microbiología muchos análisis y procedimientos dependen de que el medio
de cultivo sea constante lote a lote y proporciona resultados reproducibles. Los medios de cultivo
se emplean en todas las técnicas de cultivo tradicionales y también en muchas técnicas
alternativas. Numerosas fórmulas de medios de cultivo deshidratados están disponibles
comercialmente y muchas más, destinadas a crecimientos específicos, se encuentran descritas
en la literatura. Adicionalmente, en los laboratorios que realizan análisis microbiológicos de
productos alimenticios, los principales objetivos son el mantenimiento, recuperación, crecimiento,
detección y/o recuento de una amplia variedad de microorganismos. Los requisitos que han de
reunir los medios son específicos tanto para la muestra como para los organismos que se van a
detectar. Los medios de cultivo han de cumplir criterios mínimos de rendimiento, los que son un
requisito previo para cualquier análisis microbiológico confiable.
2. OBJETIVO
General: Establecer instrucciones generales y procedimientos específicos para la preparación
de medios de cultivo, diluyentes y reactivos, a partir de sus componentes básicos.
Especìfico: Preparar los medios de cultivo y reactivos, se establecen las fórmulas de los
medios de cultivo, diluyentes, reactivos y colorantes, incluyendo los métodos de coloración.
3.INSTRUCCIONES / METODOLOGÍA
Metodología: Observación
4.MATERIALES / HERRAMIENTAS / EQUIPO
Materiales y reactivos que se han observado en cada video del trabajo práctico.
EQUIPOS REACTIVOS Y MEDIOS DE CULTIVO
MATERIALES
● Planchas de calentamiento. ● Material de uso en un ● Para preparar los medios
● Baño de agua con control de laboratorio y de de cultivo, revisar el
temperatura de exactitud microbiología en especial. procedimiento a seguir
requerida. ● Erlenmeyers. en la etiqueta del
● Balanza con una graduación ● Pipetas graduadas, de uso producto y guiarse con
mínima de 0,01 g. bacteriológico, de 1 cm3 de
 ● Potenciómetro para medir
pH, con capacidad de lectura
próxima a 0,01 unidad de pH
a 25°C, permitiendo lecturas
con una exactitud de ± 0,1
unidad de pH.
● Autoclave.
capacidad nominal, 5 cm3 y la normativa INEN
10 cm3, con divisiones de 1529-1).
0,1 cm3 y una salida de ● Agua de peptona.
2mm a 3 mm. ● Agar nutritivo.
● Probetas graduadas. ● Agar Sabouraud.
● Dispensadores de capacidad
adecuada.
● Espátula

5.ACTIVIDADES POR DESARROLLAR.

⮚ PREPARACIÓN DEL AGAR NUTRITIVO

REGISTRO DE DATOS DE LA PRÁCTICA

Agar Nutritivo

● Uso de 4 cajas bipetri por grupo, 3 para trabajar por duplicado y 1 de control.
● 12 cajas bipetri x 20 ml = 240 ml + 10 ml de pérdida = 250 ml de Agua destilada.
DE ACUERDO A LA ETIQUETA DEL AGAR:

Agar Saburad

● Uso de 4 cajas bipetri por grupo, 3 para trabajar por duplicado y 1 de control.
● 12 cajas bipetri x 20 ml = 240 ml + 10 ml de pérdida = 250 ml de Agua destilada.

DE ACUERDO A LA ETIQUETA DEL AGAR:

Agar Agua de peptona

DE ACUERDO A LA ETIQUETA:

6.GRÁFICOS O FOTOGRAFÍAS

7.CONCLUSIONES

● Es de relevancia conocer previamente las instrucciones que se establecen en las etiquetas de

cada agar con la finalidad de preparar la cantidad adecuada de medio de cultivo, así como las
condiciones a las que debe someterse para la homogeneización del agar y su posterior
esterilización en autoclave en caso de ser necesario para ese medio. Además, se debe tener en
cuenta la normativa INEN 1529-1 que establece el proceso adecuado para la preparación de
 diversos tipos de agar y las condiciones de temperatura a las que se debe trabajar. Finalmente, es
necesario realizar el proceso en condiciones de asepsia que garanticen la inocuidad evitando la
proliferación de microorganismos no deseados en los medios de cultivo.

8.RECOMENDACIONES

● Leer con anticipación la guía práctica y la normativa INEN 1529-1.

● Realizar los cálculos respectivos de acuerdo a la cantidad de agar que se necesite.
● Colocar de manera correcta el tapón de aluminio en el erlenmeyer para evitar la aglutinación y
contaminación del agar.
● Tomar en cuenta que el autoclave se encuentre con agua para su óptimo funcionamiento y
visualizar que queden los erlenmeyer en una posición correcta.

9. EVALUACIÓN

1. ¿Cuáles son los tipos de siembra que existen?

- Siembra por inmersión (1).

- Siembra en doble capa (1).

- Siembra en superficie(1).
TIPOS DE SIEMBRA EN LOS MEDIOS
DE CULTIVO - Siembra en estría (1).

- Siembra volumétrica (1).

- Siembra masiva (1).

2. ¿Qué medios de cultivo necesitan autoclave y cuáles no?

Los medios de cultivo están formados por elementos o compuestos granulados que proporcionan
nutrientes y condiciones necesarias para el desarrollo de microorganismos (2).

Medios de Cultivo Autoclave

Requiere No requiere

Agar PCA X

Agar EMB X

Agar Simmons X

Agar VRB X

Agar sal levadura de Davis X

Agar Bird Parker X

Agar bismuto sulfito X

Agar verde-brillante rojo-fenol X

Agar fenilalanina X

Agar hierro lisina X

 Agar hierro triple azúcar X

Agar nutritivo semisólido X

Agar SS X

Agar Wort X

Agar patata dextrosa X

Agra xilosa-lisina-desoxicolato X

Agar SPS X

Agar TSN X

Agar TSC X

Agar Saburad X
(3)
10. BIBLIOGRAFÍAS
1. Cuenta A. Tipos de siembra en medios de cultivos [Internet]. Studocu.com. 2020 [citado el
18 de octubre de 2022]. Disponible en:
https://www.studocu.com/pe/document/universidad-privada-de-tacna/microbiologia/tipos-d
e-siembra-microbiologia/9019969
2. Martínez C. Zhurbenko R. Manual de medio de cultivo 2017. [Internet] BioCen. 2018
.[citado el 18 de octubre de 2022]. 1(4): pp. 11-14 Disponible en:
https://www.biocen.cu/wp-content/uploads/2021/05/Manual-MC-2018.pdf
3. Control Microbiológico de los Alimentos. Preparación de Medios de Cultivo y Reactivos.
Instituto Ecuatoriano de Normalización. [Internet] .[citado el 18 de octubre de 2022].
Disponible en: https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/1529-1-1R.pdf