DESAPROBADO: deben organizar la información en cada sección del trabajo

destinada para tal fin. Las imágenes deben tener un título y una fuente. La bibliografía
debe citarse como corresponde, no copiar sólo el link. Tengan en cuenta estas
correcciones para las futuras entregas

Tema:

Medios de cultivo in vitro (artificial).√

Introducción:

En este informe a llevar a cabo los objetivos planteados en clase, para eso va a
ser necesario conocer los siguientes conceptos: Cultivo, medio de cultivo, los
instrumentos necesarios, las clasificaciones de los medios de cultivo, la
composición de los medios de cultivo.
● Concepto de cultivo es el crecimiento de los microorganismos en medios
apropiados y en condiciones óptimas para el mejor y más rápido
desarrollo de las formas vegetativas.
● Medio de cultivo es una sustancia o conjunto de sustancias de origen
natural o artificial, líquidos o sólidos, que se combinan de acuerdo a
técnicas preestablecidas, para satisfacer las exigencias nutritivas de los
microorganismos que se pretenden cultivar.
Hay requisitos mínimos que debe poseer un medio de cultivo, por
ejemplo, tener los elementos nutritivos necesarios, ser estéril, tener un
pH adecuado para el microorganismo y ser fresco.
Estos medios de cultivo se pueden clasificar según su estado, su
composición, su uso. Están compuestos principalmente por carbono y
nitrógeno, su crecimiento depende de la disponibilidad de agua y de la
disponibilidad de O2.

● Según su estado:
o Medios líquidos de origen animal (a temperatura ambiente)
o Medios líquidos de origen artificial (a temperatura ambiente)
o Medios sólidos (a temperatura ambiente):
▪ Licuables
▪ No licuables
● Según su composición:
o Comunes → Permite el desarrollo de bacterias poco exigentes.

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o Especiales →
▪ Enriquecidos: Permiten el desarrollo de bacterias
exigentes.
▪ Diferenciales: Se emplean para diferenciar grupos de
microorganismos.
▪ Selectivos: Inhiben el desarrollo de ciertos grupos de
bacterias sin inhibir otros.
● Según su uso:
o Medios para recuento: Se utilizan para determinar
cuantitativamente el contenido bacteriano.
o Medios de reparación: Se utilizan para la recuperación de
bacterias presentes en una muestra.
o Medios de enriquecimiento: Tienden a favorecer el desarrollo de
una especie bacteriana, pueden ser selectivos o no selectivos.
o Medios de aislamiento: Se utilizan para obtener colonias aisladas.
Pueden ser selectivos o no selectivos, diferenciales o no. √ Es
correcto el contenido pero está incompleta la introducción ya que
deberían haber puesto aquí todo lo correspondiente al marco teórico
solicitado: la composición de los medios de cultivo, la descripción del
material y también del autoclave con la fundamentación de la necesidad
de la esterilización.

Objetivos:√

● Definir medio de cultivo.

● Enunciar las principales características de los medios de cultivo, sus
componentes básicos y clasificación.
● Preparar medios de cultivo a partir del medio deshidratado.

Metodología:√

En el laboratorio se observó los diferentes materiales requeridos para

realizar los medios de cultivo: Deberían haber descrito cada uno de ellos

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● Vidrio de reloj
● Vaso de precipitado
● Erlenmeyer
● Cuchara metálica
● Probeta
● Pipeta descartable de 10 ml.
● Mechero
● Trípode
● Tela de amianto
● Campana de Durham
● Balanza
La metodología se redacta en tiempo pasado y en modo impersonal. Ej: “Una
vez observados los instrumentos, se pasó a la preparación del medio de cultivo.
Primero se buscó el medio de cultivo designado, llamado Nutritivo Agar, el cual es
utilizado para propósitos generales, para aislamiento y recuento de microorganismos
con escasos requerimientos nutricionales.”
Una vez observados los instrumentos, pasamos a la preparación del
medio de cultivo. Primero se busca el medio de cultivo designado, llamado
Nutritivo Agar, el cual es utilizado para propósitos generales, para aislamiento y
recuento de microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. Su
fórmula es de pluripeptona 5.0 (gr/l), extracto de carne 3.0 (gr/l), cloruro de
sodio 3.0(gr/l) y agar 15.0 (gr/l), con un pH final de 7.3+/- 0.2 (a 25°C).
Para su preparación se debe suspender 31 g del polvo en 1 litro de agua
purificada, pero se realizó el medio en un volumen de 80 ml, por eso es que se
utiliza 2,48 gramos de polvo. Se colocan los gramos necesarios en el vidrio de
reloj para verificar su peso, se pasa a el vaso de precipitado con ayuda del
agua destilada, se le agrega el agua destilada restante y se disuelve el
preparado. Se deja reposar 5 minutos. Una vez disuelto se pasa a la
erlenmeyer y se calienta en el mechero sobre la tela de amianto (revolviendo
constantemente para evitar que se pegue en la base del recipiente), se lleva a
ebullición durante 1 o 2 minutos hasta observar espuma creciente. Se retira del
fuego, se deja enfriar y se coloca mediante la pipeta 8 mililitros de cultivo en los

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tubos de ensayo comunes. Se distribuyó en 9 recipientes y se esterilizó en

autoclave a 121°C durante 15 minutos.
El autoclave es un instrumento habitual en los laboratorios de
Microbiología, que esteriliza mediante calor húmedo. Utiliza vapor de agua a
alta presión y temperatura durante 15 minutos a 1 atm. Su función es romper
las paredes de las células para poder destruir los microorganismos y esporas.
Esteriliza tanto líquidos como sólidos y descontamina residuos o sustancias
con riesgo biológico. Las distintas partes de un autoclave son:
● Perilla
● Cámara de acero inoxidable
● Tanque de agua destilada
● Tanque de agua utilizada
● Pantalla lcd
● Panel de control
● Interruptor principal
● Llave de drenaje de tanque agua destilada
● Llave de drenaje de tanque agua utilizada
● Filtro bacteriológico
● Válvula de seguridad
● Puerto USB
● Puerto impresión
● Fusibles principales
● Cable de suministro de electricidad
● Parrilla
● Porta parrilla
● Mango para parrillas Deberían haber hecho una breve descripción de la
función de cada uno de los elementos o al menos los más importantes.
El autoclave es importante ya que es el mecanismo de destrucción
microbiana más efectivo, y bien utilizado, asegura su esterilización. La
esterilización es importante ya que es el proceso mediante el cual se eliminan
todas las formas de vida existentes en un medio, incluyendo esporas y virus.

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debe citarse como corresponde, no copiar sólo el link. Tengan en cuenta estas
correcciones para las futuras entregas

Falta títulos de las imágenes.

Falta fuente de las imágenes.

Además la imagen del erlenmeyer con el medio de cultivo en ebullición no está en el
lugar correcto.
Otros de los medios de cultivo artificiales utilizados son los siguientes:
Lauril Sulfato Caldo:
Fórmula en gramos por litro: Triptosa 20.0, Lactosa 5.0, Cloruro de sodio
5.0, Lauril Sulfato de sodio 0.1, Fosfato Dipotásico 2.75, Fosfato
monopotásico 2.75. Con un pH final de 6.8 +/- 0.2 (a 25°C).

SIM Medio:
Fórmula en gramos por litro: Tripteina 2.0, Peptona 6.1, Sulfato de hierro
y amonio 0.2, Tiosulfato de sodio 0.2, Agar 3.5. Con un pH final de 7.3
+/- 0.2 (a 25°C).
T.S.I. Agar:
Fórmula en gramos por litro: Extracto de carne 3.0, Pluripeptona 20.0,
Cloruro de sodio 5.0, Lactosa 10.0, Sacarosa 10.0, Glucosa 1.0, Sulfato de

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hierro y amonio 0.2, Tiosulfato de sodio 0.2, Rojo de fenol 0.025, Agar 13.0.
Con un pH final de 7.3 +/- 0.2 (a 25°C).

Agar citrato de Simmons:

Fórmula en gramos por litro: Citrato de sodio 2.0, Cloruro de sodio 5.0,
Fosfato dipotásico 1.0, Fosfato monoamonico 1.0, Sulfato de magnesio 0.20,
Azul de bromotimol 0.08, Agar 15.0. Con un pH final de 6.9 +/- 0.2 (a 25°C).
Todo este material teórico debe incluirse en la introducción.

Resultados:

Se observó que luego que las muestras se enfríen, se comenzó a

espesar el medio de cultivo, el cual luego de un rato cuando ya se encuentre frío
por completo se gelificará y pasará de estado líquido a sólido, como
consecuencia de la presencia del agar. √

Falta título y fuente

Análisis y discusión:

El Agar Nutritivo se utiliza para el cultivo de bacterias y para el recuento

de organismos en agua, alcantarillado, heces y otros materiales. Está formado
por peptona, extracto de carne y agar. Esta fórmula relativamente sencilla
proporciona los nutrientes necesarios para la multiplicación de un amplio
número de microorganismos que no son necesariamente exigentes. El extracto
de carne contiene sustancias solubles en agua incluidos los carbohidratos,
vitaminas, compuestos de nitrógeno orgánicos y sales. Las peptonas son la

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fuente principal de nitrógeno orgánico, en particular aminoácidos y péptidos de

cadena larga. El agar es el agente solidificante.
Además, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie,
por lo que se distinguen mejor las colonias pequeñas. En un caldo de
nutrientes, la bacteria crece en el líquido, y aparece como una sustancia
espesa, con colonias difícilmente observables. Por ser nutritivo permite el
crecimiento de la mayoría de los microorganismos.
Este agar se utiliza para diagnósticos in vitros, el medio de cultivo
deshidratado tiene un color beige claro, homogéneo mientras que preparado
pasa a tener un color ámbar claro ligeramente opalescente. √ correcto el
contenido pero en esta sección se debe analizar los resultados. en este caso podrían
hacer esa aclaracion que hicieron en los resultados, el medio es sólido por
calentamiento se funde para poder ser vertido en las placas de Petri para el cultivo de
ciertas especies microbianas, etc..

Conclusiones:

En conclusión, se pudo observar que en todas las muestras de cultivo

trabajadas en el laboratorio, salvo el caldo Lauril Sulfato, a medida que se
enfriaban comenzaban a gelificar, terminando en un estado sólido a
temperatura ambiente. Se puede confirmar que este va a ser un medio de
cultivo apto para el desarrollo microbiano. En la conclusión se evalúan los
objetivos propuestos al principio del informe se expone si se alcanzaron o no y se da
un cierre al informe.

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Bibliografía: La bibliografía no está citada de la manera que se solicita. Deben

buscar en internet las normas ISO 690 y elaborar las referencias según allí se indica.
En el caso de las páginas web, el formato que se sigue es el siguiente: AUTOR, Año
de publicación. Título del artículo/post. En: Título de la web/blog en cursiva [en línea].
Disponible en: URL del recurso [consulta: fecha de consulta].

● BBL Nutrient Agar (2014), En línea, disponible en:

https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=22881#:~:text=Nutrient%20Agar
%20se%20utiliza%20para,alcantarillado%2C%20heces%20y%20otros%
20materiales.
● LAURA BARRERO CUEVAS, Microbiología Clínica (2016). En línea,
disponible en: https://www.sintesis.com/data/indices/9788490773185.pdf
● https://es.scribd.com/document/364176315/1-Informe-de-Preparacion-de
-Medios-de-Cultivo
● https://docenciamicrobiologia.umh.es/indice-de-practicas/2-esterilizacion-
y-desinfeccion/autoclave/
● https://viresa.com.mx/blog_autoclave_esterilizacion