Facultad de ciencias agropecuarias

“Retraso en el desarrollo neurológico, anomalías motoras y déficits cognitivos en

ratones transgénicos que sobre expresan Dyrk1A (mini cerebro), un modelo murino
del síndrome de Down.”

Carrera de:
Medicina Veterinaria

Docente:
Ing. Juan Carlos Alvarado

Materia:
Genética y Mejoramiento

Ciclo:
7 “A”.

Alumno:
Keyla Yhanira Mendieta Pacheco

Sábado 22 de abril del 2023

La trisomía 21 o síndrome de Down (SD) es una de las principales causas de retraso mental. Un
caso excepcional de SD se debió a una trisomía parcial 21 y ha permitido definir una región
crítica (DSCR) que, si se triplica, se asocia con una variedad de características clínicas, que
incluyen retraso mental e hipotonía. A pesar de encontrar casos raros de trisomía que afectan
a otras partes del cromosoma, esta región crítica entre los marcadores D21S17 y ETS2 ha
atraído el interés de muchos investigadores y ha centrado esfuerzos intensivos en la
caracterización de genes. El gen quimérico sMT-Ia/Dyrk1A se utilizó para generar ratones
transgénicos. Después de la microinyección, se generaron cuatro ratones fundadores que
portaban entre dos y 20 copias del transgén, según lo confirmó el análisis de transferencia
Souther, además se crearon cuatro líneas transgénicas, designadas como líneas 9, 28, 31 y 33.
Para determinar la expresión del transgén, se realizó un análisis de RT-PCR de varios tejidos,
que mostró una expresión ubicua del transgén. El análisis de transferencia Northern de ARN de
cerebro adulto demostró la presencia de un transcrito de 6,2 kb correspondiente a Dyrk1A. Los
niveles de transcripción fueron mayores en los ratones transgénicos, aproximadamente 1,5 y
2,2 veces, en L9 y L33, respectivamente. La sobreexpresión del transgén también se detectó
mediante transferencia de Western. La sobreexpresión fue leve al inicio del estudio y aumentó
después de la inducción del transgén de expresión con ZnSO 4. Los ratones TgDyrk1A (n = 4) y
de control (n = 4) se sacrificaron para un examen neuropatológico. No hubo diferencia en el
peso medio del cerebro y el análisis histológico no mostró cambios significativos en el SNC de
los ratones TgDyrk1A. Los ratones TgDyrk1A (L9 y L33, n = 22) también exhibieron alteraciones
en la prueba de suspensión de alambre, un índice de coordinación motora durante el
neurodesarrollo, como lo demuestra la latencia significativamente menor para caer con
respecto a los compañeros de camada de control, los ratones transgénicos que expresaban
ADNc de Dyrk1A de longitud completa bajo el control del promotor MT-Ia inducible eran
viables, normales en el desarrollo somato métrico y en la apariencia de los hitos del desarrollo,
y no mostraban anomalías anatómicas graves. El retraso más importante se observó en una
tarea que evaluaba el desarrollo psicomotor general, la prueba de orientación, en la que los
ratones TgDyrk1A se desempeñaron significativamente peor que los ratones de tipo salvaje. El
retraso en el desarrollo locomotor observado en los ratones TgDyrk1A puede influir en el
regreso de las crías al nido durante el período de lactancia. Sin embargo, la prueba de
orientación se realizó en P14 cuando el retraso en la actividad de caminar estaba bastante
atenuado La estructura de la función de varianza se utilizó para modelar la heterocedasticidad
en los errores dentro del grupo. Todos los modelos incluyeron sujeto como efecto aleatorio. La
prueba de la necesidad de un efecto aleatorio para el genotipo no fue estadísticamente
significativa. La estimación de los coeficientes y errores estándar para calcular los intervalos de
confianza del 95 % se basó en la máxima verosimilitud restringida. Las comparaciones de los
modelos se basaron en pruebas de razón de verosimilitud derivadas de los ajustes del modelo
utilizando el ajuste de máxima verosimilitud, cuando no se detectaron diferencias significativas
de ratones transgénicos de ambas líneas, se combinaron los resultados.