PRACTICA DE LABORATORIO MORFOLOGÍA BACTERIANA

PRESENTADO POR
YEIMI CAROLINA PEÑA AGUIRRE
JESSICA PAOLA TREJOS JAMIOY
SHAIRA NATALIA VARGAS HERRERA
NELFI PENAGOS CHARRY
PAULA ANDREA PERDOMO RIVAS

FUNDACIÓN UNIVERSITARIA NAVARRA UNINAVARRA

CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA: ENFERMERÍA 2DO SEMESTRE
ASIGNATURA: MICROBIOLOGÍA
MARIA EUGENIA HERNANDEZ VALENZUELA
NEIVA – HUILA
2023
 PRACTICA DE LABORATORIO MORFOLOGÍA BACTERIANA

1. Haga un esquema (foto o dibujo), de sus observaciones al microscopio de los

frotis teñidos por la técnica de Gram, indicando al pie de cada uno el tipo de bacteria
(coco, bacilo etc.), la agrupación que presenta (en cadena, en racimo) y la afinidad por
los colorantes de Gram (Gram positivo o Gram negativo).

NOMBRE VISTA AL MICROSCOPIO OBSERVACION

Se observa gran cantidad de bacterias, don

pueden diferenciar gracias a la técnica de G
bacterias que no se tiñen o son incoloras s
denominadas Gram negativas por tener un
BACTERIAS GRAM
más fina de peptidoglicano, lo contrario pa
Gram positivas que tornan un color violeta
por tener una capa mucho más gruesa con
peptidoglicano.

Observación del microscopio se capta que

GRAM NEGATIVO
negativas en su mayoría eran de forma de
en agrupación de cadena.

Observación del microscopio se capta que

positivas en su mayoría eran de forma de c
GRAM POSITIVO
agrupación de racimo.
2. Describa el fundamento de la coloración de Gram.

Los principios de la tención de Gram están basados en la composición y estructura de la

pared celular de las bacterias, la cual le atribuye propiedades determinantes a cada
microorganismo. La tención de Gram se basa en colocar como colorante primario cristal
violeta, el cual se une a la pared celular bacteriana ya que tiene afinidad con el
peptidoglicano de ésta. Posteriormente, se coloca Lugol, el cual funciona como
mordente, es decir, para la unión o fijación del colorante e impide la salida del cristal
violeta de algunas especies de bacterias, incluso luego del tratamiento con un
decolorante, debido a la formación de un complejo cristal violeta-Lugol que satura los
espacios del peptidoglicano de la pared bacteriana. Posteriormente, se coloca una
mezcla de alcohol acetona, la cual deshidrata la pared bacteriana y cierra los poros de
ésta, así como también destruye la membrana externa de las bacterias Gram negativas
debido a que ésta es soluble a la acción de disolventes orgánicos, como la mezcla de
alcohol acetona. Las bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de
peptidoglucano, retiene con mayor fuerza este complejo, mientras que las Gram
negativas no lo pueden retener por tener menos cantidad de peptidoglucano en su
pared. Por último, se coloca safranina, la cual funciona como colorante secundario o de
contratación y sirve para teñir las bacterias que no pudieron retener el complejo cristal
violeta-lugo. (Pág. 85).

3. Describa el fundamento de la coloración de Ziehl-Neelsen.

El fundamento de esta técnica de tinción se basa en las propiedades de la pared celular

de estos microorganismos. La pared está formada por un tipo de ácidos grasos llamados
ácidos micólicos; estos se caracterizan por presentar cadenas muy largas.
Cuando los ácidos grasos presentan estructuras muy largas, estos pueden retener los
colorantes con mayor facilidad. Algunos géneros de bacterias son muy difíciles de teñir
mediante tinción de Gram, debido al alto contenido de ácidos micólicos de la pared
celular.
En la tinción de Ziehl-Neelsen se utiliza el compuesto fenólico carbol fucsina, un
colorante básico. Este tiene la capacidad de interactuar con los ácidos grasos de la
pared celular, la cual es de textura cerosa a temperatura ambiente.
La tinción con carbol fucsina es mejorada en presencia de calor, debido a que la cera se
derrite y las moléculas de colorante se mueven con mayor rapidez hacia el interior de la
pared celular. (Pag… 2).

4. Relate dos técnicas de coloración diferencial distintas a las vistas en la práctica y

que se utilicen en microbiología.

TINCIÓN DE KINYOUN
Esta tinción proviene de la modificación de la tinción de Ziehl Neelsen, por lo tanto,
ambas técnicas se interpretan de la misma forma y tienen como base el mismo
fundamento, pero se diferencian en dos aspectos: en el reactivo principal (debido a que
en Kinyoun se utiliza carbol fucsina tergitol) y en que la técnica de Kinyoun no utiliza
calor. El objetivo de esta tinción, al igual que la tinción de Ziehl Neelsen, consiste en
diferenciar a los microorganismos Bacilo Alcohol Resistentes (BAAR) positivos de los no
positivos. La modificación de Kinyoun a la técnica de Ziehl Neelsen se denomina
“método frío”, porque utiliza un detergente tensoactivo como el tergitol, en lugar de
tratamiento con calor. Esta coloración permite una tinción más rápida que el clásico
procedimiento de Ziehl Neelsen y evita la necesidad de calentamiento. (Pag… 118).

TINCIÓN DE WRIGHT
La tinción de Wright es una técnica que se emplea generalmente para la diferenciación
de elementos celulares de la sangre y es clasifica cada como una tinción policromática,
dado que puede teñir compuestos ácidos o básicos presentes en una célula. El reactivo
de Wright está compuesto por eosina y azul de metileno, cuando éste se oxida se
conoce como azur B a una concentración de 0.8 g/L empleando como solvente alcohol
metílico. La eosina es un colorante ácido que tiene afinidad por componentes alcalinos.
La tonalidad resultante de la tinción con eosina es rosada-anaranjada para citoplasmas,
y rojo intenso en el caso de los eritrocitos.21,20 El típico color de los núcleos celulares,
mayoritariamente morado, se basa en la interacción molecular entre eosina y un
complejo azul de metileno-DNA. La intensidad de la coloración depende del contenido
de azur B y de la relación con la eosina amarilla. El resultado de la tinción puede ser infl
uido por diferentes factores, como el valor del pH de los colorantes y de la solución
amortiguadora, esto debido a que la tinción se funda menta en la relación de las
características ácido-base, y la variación de estos factores podría cambiar las
características tintoriales de la muestra a teñir al verse favorecida por características
más ácidas o básicas.21 Las muestras útiles para su uso son el frotis de sangre
periférica y frotis de médula ósea. Los diferentes colores que se observan en la célula
provocan el llamado efecto Romanowsky, que tiñe de púrpura a los núcleos y gránulos
neutrofílicos y de color rosa al citoplasma. Los ácidos nucleicos se tiñen de azul,
permitiendo así distinguir a los parásitos en el interior de los eritrocitos. Esta tinción es
utilizada en la búsqueda de Plasmodium spp. (Pag… 4).

5. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Roberto C. González Meléndez Briseida Elizalde Cuevas Marian Estefanía Cortés

Cruz Manuel Orduña Sánchez Roberto C. González Meléndez Briseida Elizalde Cuevas
Marian Estefanía Cortés Cruz Manuel Orduña Sánchez, las tinciones básicas en el
laboratorio de microbiología un enfoque gráfico, Universidad nacional autónoma de
México facultad de estudios superiores zaragoza, 2020, (Pag… 85).
2. Bauman, R, Microbiología con Enfermedades por Sistema Corporal, educación
Pearson, 2014, (Pag… 2).
3. Roberto C. González Meléndez Briseida Elizalde Cuevas Marian Estefanía Cortés
Cruz Manuel Orduña Sánchez Roberto C. González Meléndez Briseida Elizalde Cuevas
Marian Estefanía Cortés Cruz Manuel Orduña Sánchez, las tinciones básicas en el
laboratorio de microbiología un enfoque gráfico, Universidad nacional autónoma de
México facultad de estudios superiores zaragoza, 2020, (Pag… 118).
4. Forbes BA, Sahm D, Weissfeld A. Bailey & Scott. Diagnóstico microbiológico. 12a
ed. Editorial Médica Panamericana S.A.; 2009. (Pag… 4).