UNIVERSIDAD CATÓLICA DE LA PLATA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

BIOFÍSICA Y BIOQUÍMICA

​UNIDAD XIX: SANGRE

Objetivos Específicos:

1- Reconocer los diferentes constituyentes de la sangre y sus funciones.

2- Relacionar los conceptos de la unidad con el sistema circulatorio.

Contenidos:

Sangre: constituyentes. Hemoglobina. Estructura. Metabolismo de la hemoglobina.

Biosíntesis. Catabolismo. Porfirinas. Pigmentos biliares. Bilirrubina. Distintos tipos
de hemoglobinas. Proteínas plasmáticas. Funciones. Determinación de proteínas
del suero.

​ SANGRE

Introducción:
La sangre funciona como un sistema de transporte y distribución por el organismo que
distribuye nutrientes esenciales para los tejidos y al mismo tiempo elimina productos de
desechos.
Esta compuesta por una disolución acuosa que contiene moléculas de varios tamaños y
diversos elementos celulares.
Algunos de los componentes de la sangre cumplen una función importante en la defensa del
cuerpo contra agresiones externas y en la reparación de tejidos lesionados.
Es importante señalar que el plasma también es una ventana al metabolismo, dado que se
obtienen numerosas pruebas diagnósticas de laboratorio de bioquímica, hematología e
inmunología que se realizan en muestras plasmáticas.

PLASMA Y SUERO

El plasma es el ambiente natural de las células sanguíneas pero las mediciones químicas se
hacen en el suero.

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Los elementos que forman la sangre están suspendidos en una disolución acuosa que se
denomina plasma.El plasma es el sobrenadante obtenido por la centrifugación de una
muestra de sangre que se ha tratado con un anticoagulante para prevenir la coagulación de
los eritrocitos.
El suero es el sobrenadante obtenido si a una muestra de sangre se le permite coagular
(normalmente necesita entre 30-45 minutos) y después se centrifuga.En la práctica, los
anticoagulantes utilizados son el heparinato de Li o el EDTA.
Durante la coagulación, el fibrinógeno se convierte en fibrina como resultado del
procesamiento proteolítico de la trombina y, por lo tanto,una diferencia importante entre el
plasma y el suero es la ausencia de fibrinógeno en el suero.

Elementos formes que forman la sangre :

Estos son . Eritrocitos ( Glóbulos rojos)
Leucocitos ( Glóbulos blancos)
Trombocitos ( Plaquetas)

ERITROCITOS:

No son células completas, ya que no poseen núcleo ni organelas intracelulares.Son

vestigios celulares que contienen proteínas especificas e iones. Los eritrocitos son el
producto final de la eritropoyesis en la médula ósea, que está bajo el control de la
eritropoyetina producida por el riñón.
La hemoglobina se sintetiza en las células precursoras eritrocíticas , bajo un estricto control
dictado por la concentración de hemo, esta síntesis implica la quelación de hierro ferroso
(Fe​+2​) por 4 átomos de Nitrógeno en el centro de un anillo de porfirina
Las principales funciones del eritrocito son relativamente simples; consisten en suministrar
oxígeno a los tejidos y en ayudar en la eliminación de dióxido de carbono y protones
formados por el metabolismo hístico.
La forma bicóncava aumenta la proporción entre superficie y volumen del eritrocito, lo que
facilita el intercambio de gases. El eritrocito contiene componentes de citoesqueleto que
desempeñan una importante función en la determinación de su forma.
Alrededor de dos millones de eritrocitos entran en la circulación cada segundo
El lapso de vida del eritrocito normal es de 120 días; esto significa que poco menos de 1%
de la población de eritrocitos (~200 mil millones de células, o ~2 millones por segundo) será
reemplazado cada día

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El lapso de vida del eritrocito puede estar notoriamente acortado en diversas anemias
hemolíticas. En estas enfermedades se observa gran incremento del número de
reticulocitos, puesto que la médula ósea intenta compensar la desintegración rápida de
eritrocitos al aumentar la cantidad de eritrocitos jóvenes nuevos en la circulación.

LEUCOCITOS:

Son células cuya principal función es proteger al organismo de las infecciones.

La mayoría de los leucocitos se producen en la médula ósea , algunos en el timo y otros
maduran en varios tejidos.
Pueden controlar su propia síntesis segregando a la sangre señales peptídicas que
consecuentemente, actúan sobre las células precursoras de la médula ósea. Con el fin de
funcionar correctamente, los leucocitos pueden migrar fuera del torrente sanguíneo.
Existen diferentes tipos de leucocitos y cada uno cumple un rol diferente dentro de la función
protectora que cumplen en el organismo.

Estos son: A) Leucocitos polimorfonucleares: a-Neutrófilos

b-Eosinófilos
c-Basófilos
B) Linfocitos
C) Monocitos

Cada uno de estos elementos tiene una función determinada en la respuesta inmune, la cual
depende de el agente extraño o antígeno que ingrese al organismo

Fórmula Leucocitaria normal

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Función de los leucocitos:

NEUTRÓFILOS Destruir pequeños organismos

BASÓFILOS Segregar histamina, mediar la respuesta

inflamatoria y segregar factor de activación
de las plaquetas

EOSINÓFILOS Destruir parásitos y participar en la reacción

alérgica

LINFOCITOS B Sintetizar anticuerpos

LINFOCITOS T Participar en la reacción inmunitaria

específica

MACRÓFAGOS Destruir organismos invasores

TROMBOCITOS:

Los trombocitos (plaquetas) no son verdaderas células, sino fragmentos unidos de

membrana derivados de los megacariocitos que se encuentran en la médula ósea.
Tienen un cometido fundamental en el proceso de coagulación sanguínea.
La circulación de la sangre en el sistema cardiovascular es esencial para el transporte de
gases, nutrientes, minerales,productos metabólicos y hormonas entre diferentes órganos.
También es esencial que la sangre no se escape excesivamente de los vasos sanguíneos
cuando sufren lesiones por traumatismos. Por lo tanto el organismo desarrolló un eficaz y
complejo mecanismo hemodinámico celular y bioquímico que limitan dichas pérdidas de
sangre formando tapones de plaquetas-fibrina en los lugares de la lesión vascular.
Es importante que estos mecanismos hemostáticos sean controlados por factores
inhibidores , de lo contrario, un coágulo exagerado de plaquetas -fibrina puede dar lugar a la
oclusión local de un vaso sanguíneo principal ( arteria o vena) en su lugar de origen
(trombosis) o puede romperse fuera y bloquear un vaso sanguíneo más adelante
(embolismo)

PROTEÍNAS PLASMÁTICAS:

En la actualidad se han aislado y caracterizado alrededor de 100 proteínas

Las proteínas purificadas difieren en su movilidad electroforética y peso molecular, también
son muy diferentes por su composición química; algunas contienen lípidos (lipoproteínas),
otras metales (transferrina, ceruloplasmina). La mayoría son glicoproteínas, presentando en
algunos casos variaciones genéticas.
Clasificación a las proteínas plasmáticas de acuerdo con sus funciones:
• Proteínas con función de transporte y asociados a sistemas buffer.
• Proteínas reactantes de fase aguda (se llaman así porque en situaciones de estrés,
procesos inflamatorios o traumatismos aumentan su concentración para compensar esos
estados).

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• Proteínas sintetizadas por el sistema inmunocompetente

METABOLISMO DEL GRUPO HEMO

El hemo, una ferroporfirina, es el grupo prostético de moléculas de gran importancia como

las hemoproteínas, entre ellas se encuentran:
- La hemoglobina, responsable del transporte de O​2​ en sangre
- La mioglobina, molécula de depósito de O​2 ​ en músculo .
- Citocromos, agentes de transferencia de electrones
- Diversas enzimas como catalasa, peroxidasa, etc

El grupo hemo está formado

por:
- Un ciclo tetrapirrólico,
derivado de la protoporfirina III
- Cuatro metilos en posición
1,3,5 y 8
- Dos vinilos en posición 2 y 4
- Dos restos propionatos en
posición 6 y 7
-Un átomo de Fe ferroso se
une a los pirroles
Más del 85% de la síntesis de
este grupo se realiza en las
células precursoras de los
eritrocitos de médula ósea, el
resto se lleva a cabo en otros
tejidos principalmente en el
hígado.

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BIOSÍNTESIS DE HEMO

El compuesto precursor, protoporfirina III se sintetiza a partir de Gly y succinil CoA en tres
etapas:
a- Síntesis del ácido alfa amino levulínico
b- Formación de porfobilinógeno
c- Síntesis de protoporfirinas
d- Adición del Fe

a- Síntesis de alfa amino levulínico

La reacción está catalizada por la alfa aminolevulinato sintasa ( ALA-Sintasa) y es el
principal sitio de control de la síntesis de porfirinas, en donde el producto final hemo ejerce
acción alostérica inhibitoria.
La hipoxia, la eritropoyetina, algunas hormonas esteroides, algunos fármacos y el alcohol,
en cambio, inducen la síntesis de alfa ALA Sintasa.

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 ​ b- Formación de Porfobilinógeno

El alfa aminolevulinato formado dentro de la mitocondria debe pasar al citosol para cumplir
la segunda etapa catalizada por la alfa aminolevulinato deshidrogenasa también llamada
porfobilinógeno sintasa, esta enzima es inhibida por metales pesados. El grupo hemo
también es inhibidor de esta enzima .
Dos moléculas de alfa amino levulínico reaccionan para formar porfobilinógeno, con pérdida
de una molécula de agua..Este compuesto tiene el grupo pirrol

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c- Formación de porfirina:

Cuatro moléculas de porfobilinógeno se unen para formar el anillo tetrapirrólico de

uroporfirinógeno III y I.
El III será el precursor del grupo hemo, el cual sufre descarboxilaciones y oxidación hasta
convertirse en Protoporfirina III que luego a través de la ferroquelatasa se convierte en el
grupo Hemo
Las reacciones que me permiten la formación del grupo hemo a partir del porfobilinógeno
ocurren en el citosol y luego ingresa nuevamente a la mitocondria para terminar la formación
del grupo hemo en la matriz mitocondrial.

d-Adición de hierro

La etapa final es la incorporación del fe ferroso a la protoporfirina para formar el hemo.la

reacción es catalizda por la ferroquelatasa, también llamada hemo sintasa, la cual se halla
en la matriz mitocondrial
La mayoría del hemo sintetizado se utiliza para la síntesis de hemoglobina y el resto para la
formación de mioglobina y otra hemoproteínas

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CATABOLISMO DEL GRUPO HEMO

La vida promedio de los glóbulos rojos es de 120 días, luego son destruidos por el sistema
retículo endotelial
Debe tratarse separadamente los destinos de la proporción proteica globina y del grupo
prostético hemo
La globina es tratada como toda la proteínas que cumplen su ciclo en el organismo, esto es,
es hidrolizada en sus aminoácidos constituyentes, los que son reutilizados
en nuevas síntesis.
El hemo sufre transformaciones específicas en varias etapas que se llevan a cabo en SRE,
hígado e intestino

Etapas del SRE

La fase inicial se lleva a cabo en células del sistema retículo endotelial, principalmente en
hígado, bazo y médula ósea
Un sistema multienzimático cataliza oxidaciones que convierten el hierro ferroso en férrico y
uno de los carbonos del de los grupos pirroles en CO , esto produce la apertura del anillo
tetrapirrólico. participan en esta reacción O​2​ y NADPH . El hierro es separado de inmediato
el cual es reutilizado por el cuerpo.
El producto de estas reacciones es un pigmento de color verde llamado biliderdina
el cual se transforma luego en bilirrubina, pigmento de color amarillo naranja
la bilirrubina es tóxica y pasa a circulación, como este compuesto es insoluble en agua es
transportada en sangre unida a la albúmina
El hígado del recién nacido, todavía inmaduro, es incapaz de metabolizar eficientemente la
bilirrubina, la concentración de este pigmento se eleva durante los primeros días de
vida.Cuando la concentración de hiperbilirrubinemia alcanza concentraciones superiores a la
capacidad de la albúmina para fijarla, escapa hacia la célula y puede ocurrir cuadros tóxicos.

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Etapa hepática

Al llegar al hígado es separada la bilirrubina de la albúmina penetrando en células por

difusión facilitada.Una vez dentro del hepatocito, la bilirrubina se une a proteínas aceptoras
que la atrapan en el citosol..
En la célula la bilirrubina es conjugada con moléculas polares y convertida en un producto
hidrosoluble, apto para ser excreta y vehiculizado en la bilis.El proceso de conjugación
consiste en la adición de restos de ácidos glucurónicos
En condiciones fisiológicas toda la bilirrubina conjugada es excretada en la bilis

Bilirrubina directa e indirecta

La bilirrubina directa es diglucurónido de bilirrubina, es decir,el producto soluble en agua

formado durante el pasaje del pigmento por la célula hepática.
La bilirrubina indirecta , en cambio, corresponde al pigmento formado en el SRE, aún no
conjugado con el glucuronato
En el plasma sanguíneo normal existe una pequeña cantidad de bilirrubina, casi en su
totalidad en forma indirecta que está transportada por la albúmina.
La concentración normal es de 1,0 mg por dL

Etapa Intestinal

Al llegar al tracto intestinal la bilirrubina conjugada es hidrolizada y bilirrubina libre sometida

a la acción reductora del sistema enzimático de las bacterias anaeróbicas del la flora
intestinal, el cual luego de sucesivas transformaciones es convertido en un compuesto
incoloro, estercobilinógeno, el cual es eliminado parcialmente con la materia fecal.

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Ciclo enterohepático

Parte de los productos derivados de la reducción de bilirrubina en intestino se reabsorbe y

por vía portal vuelve al hígado, que los oxida, regenera glucurónidos de bilirrubina y los
excreta nuevamente en la bilis hacia el intestino, cerrándose así el ciclo entero hepático

Pigmentos urinarios

No todos los pigmentos reabsorbidos son transformados y reexcretados por hígado hacia el
intestino, algunos pasan a la circulación general y son eliminados por el riñón .En orina, el
compuesto se denomina urobilinógeno, que por oxidación origina la urobilina

Ictericia
Distintos cuadros patológicos pueden alterar el catabolismo del grupo hemo.Esto provoca un
aumento de la concentración de bilirrubina , el cual pasa a los tejidos y les da un color
amarillento , a esto se lo denomina ictericia, ocurre cuando los valores de bilirrubina supera
los 2 a 2,5 mg por dl.
Esto puede ocurrir por:
- Hemólisis exagerada
- Obstrucción de las vías biliares
- Insuficiencia hepática

En el caso de los recién nacidos, la hiperbilirrubinemia es debida fundamentalmente a la

incapacidad del hígado para captar y conjugar bilirrubina .Se elevaba la indirecta o no
conjugada en sangre lo cual puede tener efectos tóxicos, particularmente en cerebro
(kernicterus)

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PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

La función fundamental de la sangre en el mantenimiento de la homeostasis y la facilidad

con la cual puede obtenerse sangre, han significado que el estudio de sus constituyentes ha
sido esencial en el desarrollo de la bioquímica y la bioquímica clínica.
El plasma consta de agua, electrolitos, metabolitos, nutrientes, proteínas y hormonas. La
composición de agua y electrolitos del plasma es prácticamente la misma que la de todos
los líquidos extracelulares.
Las proteínas del plasma en realidad son una mezcla compleja que comprende proteínas no
sólo simples sino también conjugadas, como glucoproteínas y diversos tipos de
lipoproteínas.
Cumplen funciones diferentes, incluido el transporte de lípidos,hormonas, vitaminas y
minerales,así como en la actividad y el funcionamiento del sistema inmunológico.
Dentro de estas proteínas, las más abundante son:
- La albúmina representa el 55% de las proteínas de la sangre, contribuye de manera
importante a mantener la osmótica del plasma y transporte de lípidos y hormonas
esteroides.
- Las globulinas constituyen el 38% de las proteínas de la sangre y transportan iones,
hormonas y lípidos que ayudan a la función inmunológica.
- El fibrinógeno comprende el 7% de las proteínas de la sangre; la conversión de
fibrinógeno en fibrina insoluble es esencial para la coagulación de la sangre.
- El resto de las proteínas plasmáticas (1%) son proteínas reguladoras, como enzimas,
proenzimas y hormonas .
Todas las proteínas de la sangre se sintetizan en el hígado, excepto las gama globulinas.
La electroforesis es el método de uso más frecuente para analizar proteínas plasmáticas, ya
que me permite la separación de albúmina, alfa 1,alfa 2, beta y gammaglobulinas
Hay muchos tipos de electroforesis, en cada una de las cuales se usa un medio de apoyo
diferente, el más utilizado es el de acetato de celulosa.
Las proteínas al estar formadas por aminoácidos, tienen carga + y - ,en la electroforesis se
aplica un campo eléctrico para separar las proteínas en grupos de tamaño, forma y carga
similares. Su uso permite la resolución, después de tinción,de las diferentes proteínas
plasmáticas, luego se pueden cuantificar de manera conveniente por medio del uso de
aparatos de escaneo densitométricos. En muchas enfermedades se encuentran cambios
característicos de las cantidades de una o más de estas proteínas .

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TRABAJO PRÁCTICO

1- Qué diferencia hay entre plasma y suero

2- Cuáles son los elementos formes de la sangre y qué función cumple cada uno

3- Cuáles son las principales proteínas plasmáticas y por qué proceso pueden ser
separadas. ¿Para qué sirve la separación y cuantificación de proteínas séricas

4- A partir de qué compuestos se realiza la síntesis del grupo Hemo ¿En qué parte/s de la
célula se lleva a cabo?

5- Qué es la bilirrubina directa e indirect

6- Cuáles son los pasos en que se realiza la síntesis del grupo hemo

7- A través de qué compuesto/s se elimina el grupo hemo

8- Explicar los procesos del catabolismo del grupo hemo

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