Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas

Carrera: Bioquímica y Farmacia
Guía de Prácticas de Laboratorio de Bioquímica I

INFORME DE LABORATORIO
Práctica Título: Reacciones generales para identificar carbohidratos.
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Docente: Ing. Yaimé Delgado Arcaño, PhD
FECHA: 06 de septiembre de 2022
INTEGRANTES:
1. Alcívar Vargas Jessica Alexandra
2. Bravo Meléndez Samuel Andrés
3. Guzñay Muñoz Adrián Israel
4. Méndez Ortiz Dainelyn Janerlly
5. Orozco Macías María José
6. Valencia Villamar Xavier André

SEMESTRE: Cuarto PARALELO: BFA-S-CO-4-50 G3B-BQ1-PR -

Objetivos:
1. Realizar diferentes ensayos de identificación de carbohidratos.
2. Identificar los diferentes tipos de carbohidratos mediante el tiempo que demora la reacción.
Marco teórico/Fundamento
Los carbohidratos o hidratos de carbono, estas moléculas están formadas por tres elementos
fundamentales: el carbono, el hidrógeno y el oxígeno, este último en una proporción algo más baja.
Su principal función en el organismo de los seres vivos es la de contribuir en el almacenamiento y en
la obtención de energía de forma inmediata, sobre todo al cerebro y al sistema nervioso.
Gracias a su resistencia, es posible sintetizarlos en el exterior del cuerpo y utilizarlos para fabricar
diversos tejidos, plásticos y otros productos artificiales.

Su cuerpo descompone los carbohidratos en glucosa. La glucosa, o azúcar en la sangre, es la

principal fuente de energía para las células, tejidos y órganos del cuerpo. La glucosa puede usarse
inmediatamente o almacenarse en el hígado y los músculos para su uso posterior.

DIVISIÓN DE LOS CARBOHIDRATOS

Monosacáridos, se trata de azúcares simples, ejemplo:

Glucosa Fructosa
 Disacáridos, formado por la unión de dos monosacáridos, ejemplo:

Sacarosa Lactosa

Polisacáridos, estos son los carbohidratos más complejos, por lo que solo algunos pueden ser
usados por el organismo de los seres humanos, con el fin de producir energía.

Almidón Celulosa

Reactivos de laboratorio
- Fehling A
- Fehling B
- Reactivo de Molish
- Reactivo de Bial
- Reactivo de Seliwanoff
- Reactivo de Barfoed
- H2SO4 concentrado
- HCl al 10%
- NaOH al 10%
Preparación del reactivo de Fehling
- Solución A de Fehling: Sulfato de cobre 0,28 N (35 g de CuSO4.5H2O en 500 ml de agua destilada).
- Solución B de Fehling: Tartrato sódico-potásico 1,5 N (158 g en 500 ml) en hidróxido potásico 4 N (112 g
en 500 ml de agua destilada).
- Mezclar a partes iguales (el día de su uso) las soluciones A y B.

Preparación del reactivo de Molish

α - Naftol al 10% en etanol (Pesar 10 g de α-Naftol y diluir en 100 ml de etanol 96%)
 Preparación del reactivo de Bial:
- Se añaden 100 ml de HCl concentrado en 250 ml de agua destilada, (nunca hacer en sentido inverso).
- Adicionar 0,3 g de orcinol y 0,5 ml de FeCl3 al 10%.

Preparación del reactivo de Seliwanoff:

- Se disuelven 0,5 g de resorcinol en 100 ml de agua destilada.
- Añadir 3,3 ml de HCl concentrado.
- Una vez mezclado le añadimos agua destilada c.s.p 100 ml.

Preparación del reactivo de Barfoed:

- Pesar 13,3 g de acetato de cobre cristalizado en 200 ml de H2O destilada, filtrar si es necesario.
- Añadir 1,8 ml de ácido acético glacial (CH2COOH).

Materiales de laboratorio
- Tubos de ensayo
- Pipetas 
- Beakers

Equipos de laboratorio
- Balanza
- Hornilla eléctrica

Técnica/Procedimiento
Ensayo 1: Poder reductor de los azúcares
1. Tomar cuatro tubos de ensayo.
2. A cada tubo de ensayo, añadir: 1 ml de Fehling A + 1 ml de Fehling B.
3. Posteriormente, añadir 2 ml de cada muestra correspondiente a cada tubo de ensayo: lactosa,
fructosa, glucosa y sacarosa, previamente preparadas en una disolución al 1% (una muestra
en cada tubo).
4. Colocar en baño María hasta observación de cambio de color (aprox. 5 min).
5. Un azúcar es reductor por la formación de un precipitado de color rojo ladrillo (óxido cuproso) y
la decoloración de la solución.

Ensayo 2: Identificación de carbohidratos

1. Tomar cuatro tubos de ensayo.
2. A cada tubo de ensayo, añadir 0,5 ml de cada muestra: glucosa, sacarosa, fructosa y galactosa,
previamente preparadas en una disolución al 1% (una muestra en cada tubo).
3. Añadir aproximadamente 1 ml de agua.
4. Agregar 6 gotas de reactivo de Molisch en cada tubo.
5. Agregar 2 ml de H2SO4 concentrado.
6. La formación de un anillo color violeta en la interfase indica la presencia de carbohidratos.

Ensayo 3: Hidrólisis de la sacarosa

1. Preparar una disolución de sacarosa al 5%.
2. Colocar 1 ml de la solución de sacarosa a un tubo de ensayo.
 3. Agregar 1 ml de HCl al 10%.
4. Colocar en baño María por 15 min.
5. Neutralizar con NaOH.
6. Realizar la prueba de Fehling.

Ensayo 4: Identificación de pentosas

1. Tomar tres tubos de ensayo
2. A cada tubo de ensayo, añadir 2 ml de reactivo de Bial.
3. Añadir 0,5 ml de cada muestra correspondiente a cada tubo de ensayo: xilosa, lactosa, ribosa
(una muestra en cada tubo).
4. Colocar los tubos de ensayo en baño María hasta observar cambio de coloración.
5. La aparición de un color verde azuloso y totalmente transparente, indica la presencia de una
pentosa.

Ensayo 5: Prueba de Seliwanoff

1. Tomar tres tubos de ensayo.
2. A cada tubo de ensayo, añadir 2 ml de reactivo de Seliwanoff.
3. Añadir 1 ml de cada muestra correspondiente a cada tubo de ensayo: glucosa, fructosa y
sacarosa.
4. Colocar los tubos de ensayo en baño María por 5 minutos hasta observar cambio de coloración.
5. La aparición de un color rojo cereza, indica la presencia de un azúcar no reductor.

Ensayo 6: Identificación de monosacáridos

1. Tomar cuatro tubos de ensayo.
2. A cada tubo de ensayo, agregar 1 ml de glucosa 1% galactosa 1% maltosa 1% lactosa 1% (una
muestra en cada tubo)
3. En cada tubo de ensayo, adicionar 2,5 ml de reactivo de Barfoed
4. Mezclar y calentar en baño hirviente, contando los minutos y sacar del baño cada tubo
inmediatamente después que haya aparecido el precipitado rojo ladrillo de óxido cúprico.
5. Anotar el tiempo que corresponde a cada carbohidrato.
6. La aparición de un precipitado antes de los 6 minutos indica la presencia de un monosacárido,
un escaso precipitado rojo a los 9 y 12 minutos indica la presencia de lactosa o maltosa.
Resultados/Cálculos

REACTIVO MUESTRA OBSERVACIONES RESULTADO

Glucosa Leve color amarillo (-) cetosa
SELIWANOFF Fructosa Color amarillo (+) cetosa
Sacarosa Color amarillo (+) cetosa

REACTIVO MUESTRA OBSERVACIONES RESULTADO

A las 14:00 p.m. entró en
contacto con el baño, a
Galactosa 1% (+) monosacárido
las 14:05 p.m. ocurrió el
pptd rojo
A las 14:00 p.m. entró en
contacto con el baño, a
Glucosa 1% (+) monosacárido
las 14:06 p.m. ocurrió el
pptd rojo
BARFOED
A las 14:00 p.m. entró en
contacto con el baño, a
Maltosa 1% (-) monosacárido
las 14:021 p.m. ocurrió
un leve pptd rojo
A las 14:00 p.m. entró en
contacto con el baño, a
Lactosa 1% (-) monosacárido
las 14:23 p.m. ocurrió un
leve pptd rojo

Conclusiones
1. Para analizar el poder reductor de los azúcares, empleamos reactivo Felling. Este método se
basa en que los extremos reductores de los carbohidratos reaccionan en el Cu
2. La identificación de los carbohidratos se puede realizar mediante análisis cualitativo
3. El reactivo de Fehling solo dará positivo si existen extremos reductores de carbohidratos
4. El reactivo de Seliwanoff es útil para identificar cetohexsosas y cetopentosas.

Recomendaciones
1. Tener cuidado al utilizar la hornilla eléctrica
2. Utilizar guantes al momento del reactivo
3. Agregar las gotas necesarias del reactivo al tubo de ensayo
Bibliografía
Carbohidratos. (2015, April 12). Carbohidratos. Retrieved September 4, 2022, from CuidatePlus website:

https://cuidateplus.marca.com/alimentacion/diccionario/carbohidratos.html

Funciones/Carbohidratos. (2012, July 26). Retrieved September 4, 2022, from Portal Académico del CCH

website:

https://e1.portalacademico.cch.unam.mx/alumno/biologia1/unidad1/biomoleculas/funcionescarbohidratos

Anexos