LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

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Calificación:
Especialidad: Producción industrial de Alimentos.

PRACTICA NO. 2
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
OBJETIVO:
Demostrar que los ácidos concentrados descomponen los monosacáridos y los diluidos
hidrolizan a los demás.
FUNDAMENTO:
El hecho de que los monosacáridos sean estables frente a ácidos diluidos en caliente, hace
posible la recuperación cuantitativa de la mayor parte de los monosacáridos. Los ácidos
concentrados, sin embargo, descomponen la molécula produciendo furfurales (derivados
aldehídicos del furano). La glucosa calentada con HCI concentrado, produce 5-hidroxi-
metil-furfural produciéndose como resultado final de la reacción un característico color
negro. La sacarosa se hidroliza por ácidos diluidos con más facilidad que el resto de los
disacáridos. El ácido sulfúrico normal lo hidroliza rápidamente a 20° ,mientras la lactosa ha
de calentarse largo tiempo a 80° C. la hidrolisis de la sacarosa, produce una molécula de
glucosa y una de fructuosa. En el almidón, al final de la reacción, la aparición de un Fehling
positivo, nos indica que el almidón puede hidrolizarse por medio de ácidos diluidos y
temperatura, hasta obtención de sus compuestos unitarios.

MATERIALES:
5 tubos de ensaye 1 gradilla
7 pipetas 1 mechero
2 pinzas para tubo de ensaye 1 vaso de precipitados
REACTIVOS:

1) Solución de glucosa al 5%. 7) Solución de potasa: 10 g de KOH en

2) Solución de sacarosa al 5%.
3) Solución de almidón al 5%.
4) Solución de HCI concentrado: diluir
75 ml de H2O destilada.
5) Solución de HCI diluido: diluir 27 ml
de HCI químicamente puro en 73 ml de
H2O destilada.
6) Solución de sosa: 8 g de NaOH en 92
ml de H2O o destilada.
90 ml de H2O destilada.
8) DISOLUCIÓN DE ALMIDÓN: A 2.5 gr
de almidón agregue un poco de agua
fría hasta formar una pasta. Añada
gradualmente 0.5 g de ácido salicílico y,
finalmente, agua destilada caliente (sin
llegar a la ebullición), hasta 100 ml.
9) Solución diluida de iodo.
10) Papa cocida.
 PROCEDIMIENTO:
A: PRUEBA DEL ACIDO CLORHÍDRICO

1) Utilizando dos tubos de ensaye coloque: 3 ml de glucosa al 5% (tubo 1); 3 ml de

solución de sacarosa al 5% (tubo 2).
2) Agregue 3 ml de HCI concentrado, a cada tubo.
3) Hervir durante 10 minutos.
4) Observe el color del precipitado. En los dos casos es un precipitado fino, polvoriento.
5) Deje reposar los tubos, y observe.
6) filtre y repita la observación sobre el papel filtro.
7) Realice un fehling.
B: HIDROLISIS DE LA SACAROSA Y EL ALMIDÓN

1) En un tubo de ensaye (tubo 3) coloque 3 ml de solución de sacarosa al 5% y en otro

(tubo 4) coloque 6 ml de solución de almidon al 5%.
2) agrega a cada tubo 3 y 6 ml de HCI diluido respectivamente.
3) hervir durante 8 y 12 minutos cada tubo, respectivamente. Esta ebullición debe
ser suave y constante
4) deje reposar para que se enfrié.
5) neutralizar a continuación con 3 ml de solución de sosa o solución de potasa.
6) el producto del almidón divídalo en dos porciones en distintos tubos de ensaye.
Con la primera realizar una tinción de oído, como se indica en la practica 4.
7) con el producto de la sacarosa y la segunda porción del producto de almidón,
efectué un Fehling.
C: REACCIÓN DE IODO

1) Coloque en un tubo de ensayo 3 ml de la disolución de almidón, después de agitar

bien el frasco que contiene el reactivo.
2) Añadir 3 gotas de la disolución de iodo. Habrá cambio de color.
3) Calentarse suavemente sin llegar a la ebullición hasta que pierda el color que
aparece en el paso anterior.
4) Enfrié el tubo de ensaye al grifo. Observe.
5) Realice los mismos pasos con la papa cocida.

OBSERVACIONES Y RESULTADOS

Al realizar el proceso de hidrolisis de sacarosa, notamos que si existe la presencia de un

precipitado color rojo la prueba es positiva, en la práctica obtuvimos un color rojo ladrillo.

Mediante los resultados obtenidos al hidrolizar la sacarosa obtenemos una azúcar invertida
que es una mezcla de glucosa + fructosa.
Y al someter esta mezcla a la reacción de Fehling existe un resultado positivo ya que los dos
glúcidos son reductores.
En este caso la hidrólisis, tomando como referencia nuestra experiencia, puede llevarse a
cabo por acción de un ácido a temperatura elevada
 PRUEBA DE HIDROLISIS DE LA SACAROSA Y ALMIDON
Compuesto Característica Resultado
Almidón
C6H10O5

Coloración café-rojiza
Positivo
oscura

Sacarosa
C12H22O11

Precipitado rojo Positivo

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es el producto de la hidrolisis de la sacarosa?

R= se produce por la descomposición química de la sacarosa (azúcar común) dos
subproductos, (Glucosa y fructosa). Por lo tanto, los productos cambian la dextro-
rotación a levo-rotación. La mezcla molar de la glucosa y fructosa así formada se llama
azúcar invertido. La enzima que produce la hidrólisis en la sacarosa se llama sacarasa o
invertasa. En presencia de (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir,
incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la
forman, glucosa y fructosa, que así son reductores

NOTA: Si existe la presencia de un precipitado color rojo la prueba es positiva

2. ¿Qué le sucede a los monosacáridos frente a la acción de ácidos concentrados?
Los monosacáridos son descompuestos en presencia de acidos concentrados y los
diluidos hidrolizan los demás
3. En nuestro organismo ¿Cómo se realiza la hidrolisis del almidón?
 CONCLUSIONES:

En este experimento pudimos observar diferentes formas para identificar la presencia de

carbohidratos en una muestra mediante reacciones químicas con diferentes reactivos, y
evaluando los resultados positivos o negativos identificamos los diferentes tipos de sacáridos
de acuerdo a la reacción a la que se refería, y diferenciamos las distintas reacciones en
base al fundamento en que se basan las mismas.

Los carbohidratos son biomoléculas que presenta grupo funcional carbonilo (aldehído y
cetona) y varios grupos hidroxilos en cada carbono. Los carbohidratos también llamados
azúcares, osas o sacáridos, son polihidróxialdehidos o polihidroxicetonas o compuestos
poliméricos que por hidrólisis producen polihidróxialdehidos y polihidroxicetonas.

La sacarosa al hidrolizarse libera a sus monosacáridos constituyentes: la glucosa y la

fructosa, debido a esto la sacarosa presento resultados positivos en la prueba para
disacáridos. Al hidrolizar la sacarosa obtuvimos la descomposición de la misma, en sus dos
monosacáridos componentes glucosa y fructosa.

Aplicando esta prueba pudimos conocer los componentes y características de la misma,

afirmando que es efectiva en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es
decir, incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la
forman, que sí son reductores.

Mediante la prueba de Fehling, cuya solución presento el viraje de coloración que indica
la presencia de azúcares reductores; con lo que pudimos comprobar satisfactoriamente el
fundamento de la prueba.
BIBLIOGRAFÍA

https://sites.google.com/site/trabajosbioquimicos/home/informe-identificacion-de-
azucares-laboratorio-de-bioquimica
http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/1020111502/1020111502.PDF
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/carbohidratos/hidrolisis-
de-la-sacarosa
https://es.scribd.com/doc/17151688/1-Hidrolisis-de-carbohidratos
ESQUEMAS
Lleva a cabo la siguiente actividad con tu equipo de trabajo tomando como referencia el
estudio de los carbohidratos. Para ello deberás traer pequeños vasos para gelatina, un
poco de almidón, reactivo de lugol y un pequeño gotero.

1. En el siguiente cuadro, organiza y relaciona la información obtenida, de manera

que te permita tenerla a tu alcance al momento del estudio del metabolismo
energético aerobio.

ESTRUCTURA UNIDAD FUNCIÓN ENLACE PRESENTE

ESTRUCTURAL
Lactosa Es un disacárido: es  Aportar energía al Al formarse el enlace entre
un disacárido organismo. los dos monosacáridos se
formado por la  Favorece el desprende una molécula de
unión de una desarrollo de agua.
molécula de ciertas bacterias
glucosa y otra de conformantes de la
galactosa. flora intestinal.
 Estimula la
absorción de calcio
y fósforo.
Maltosa Es un disacárido: Aporte energético Esta formado por dos
formado por dos celular. glucosas unidas por un
glucosas unidas por enlace glucosídico
un enlace
glucosídico
producido entre el
oxígeno del primer
carbono anomérico
de una glucosa y el
oxígeno
perteneciente al
cuarto carbono de
la otra.

Sacarosa Es un disacárido La sacarosa se El enlace que une los dos

formado por alfa- utiliza como monosacáridos es de tipo O-
glucopiranosa y combustible para la glucosídico. Además, dicho
beta- energía, al igual enlace es dicarbonílico ya
fructofuranosa. que utiliza otros que son los dos carbonos
carbohidratos más reductores de ambos
complejos. Durante monosacáridos los que
la digestión, el forman el enlace alfa(1-2) de
cuerpo alfa-D-glucosa y beta-D-
descompone los fructosa.
carbohidratos
como el almidón, la
fibra y la sacarosa
en la glucosa
molécula de azúcar
Almidón Es un polisacárido Su función es La amilosa es el producto de
compuesto por la cambiar en glucosa la condensación de D-
amilosa (en para ser utilizado glucopiranosas por medio de
proporción del 20 como energía para enlaces glucosídicos a(1,4),
%) y la amilopectina su cuerpo. La que establece largas
(80 %). glucosa es la forma cadenas lineales con 200-
utilizable de hidratos 2500 unidades y pesos
de carbono para su moleculares hasta de un
cuerpo. La glucosa millón. La amilopectina se
circula por todo el diferencia de la amilosa en
cuerpo en el que contiene ramificaciones
torrente sanguíneo, que le dan una forma
y obtiene molecular similar a la de un
absorbidos por las árbol; las ramas están unidas
células y se utiliza al tronco central (semejante
como fuente de a la amilosa) por enlaces a-
combustible. D-(1,6), localizadas cada 15-
25 unidades lineales de
glucosa.
Glucógeno Es un polisacárido El glucógeno es la Está formada por varias
formado por forma química en cadenas que contienen de 12
cadenas que se almacena la a 18 unidades de glucosa
ramificadas de glucosa en el unidas por enlaces
glucosa; no es hígado y funciona glucosídicos α-1,4; uno de los
soluble en agua, por como reserva extremos de esta cadena se
lo que forma energética que se une a la siguiente cadena
dispersiones obtiene del hígado mediante un enlace α-1,6-
coloidales. en caso de que el glucosídico, tal y como
cuerpo la requiera sucede en la amilopectina.
Celulosa Es un polisacárido Regula nuestro La celulosa se forma por la
compuesto tránsito intestinal y unión de moléculas de β-D-
exclusivamente de la absorción de glucosa mediante enlaces β-
moléculas de β- nutrientes. 1,4-O-glucosídico. Al
glucosa hidrolizarse totalmente se
obtiene glucosa. La celulosa
es una larga cadena
polimérica de peso molecular
variable, con fórmula
empírica (C6H10O5)n, con un
valor mínimo de n= 200.
2. Anota e identifica las características de los enlaces que presentan los
carbohidratos y relaciónalos con la enzima alfa-amilasa presente en la saliva.
Compruébalo realizando la siguiente actividad.

Tubo N° 1: coloca 2 ml de solución de almidón 0.1%, y agrega unas gotas de reactivo

de lugol.
Tubo N° 2: coloca 1 ml de saliva y 3 gotas de reactivo de lugol.
Tubo N° 3: coloca 2 ml de almidón al 0.1% y 1 ml de saliva.
Tubo N° 4: coloca 2 ml de almidón al 0.1 %, 1 ml de saliva y 3 gotas de reactivo de
lugol.
Tubo N° 5: coloca tiras de papel filtro y 3 gotas de reactivo de lugol.
Tubo N° 6: coloca tiras de papel filtro y 1 ml de saliva.
Tubo N° 7: coloca tiras de papel filtro, 1 ml de saliva y 3 gotas de reactivo de lugol.

3. Observa y comprueba si se cumplen los siguientes resultados.

Tubo N°1: el lugol pone de manifiesto a los enlaces alfa-glucosídicos del almidón.
Tubo N° 4: la saliva hidroliza a los enlaces alfa-glucosídicos del almidón y por lo tanto
éstos no se ponen de manifiesto con el lugol. Tubo N°5,6,7: los enlaces beta no se
hidrolizaron por acción de la saliva, por lo que el lugol lo continúa identificando.

4. Elabora con tu equipo un reporte escrito, en donde expliques:

¿por qué el humano no puede digerir o biodegradar el enlace beta-glucosídico?

¿qué observaste en los tubos 2 y 3?

5. Analiza las siguientes preguntas y contéstalas en tu reporte.

1) ¿qué utilidad tiene el enlace beta-glucosídico para el humano?

2) ¿por qué es común que se presente la intolerancia a la latosa?

R= La intolerancia a la lactosa es un trastorno que aparece después de la ingestión
de lactosa (el azúcar de la leche), como consecuencia de una deficiencia de
lactasa (la enzima que digiere la lactosa). Esta deficiencia provoca una
malabsorción de lactosa. El azúcar no absorbido llega al colon, donde es fermentado
por las bacterias colónicas, generando gases (hidrógeno, metano, etc.).
Una gran parte de las persona que creen tener intolerancia a la lactosa no presentan
en realidad malabsorción de lactosa, por lo que sus síntomas gastrointestinales
probablemente no tienen relación con el consumo de lactosa sino que se deben a la
presencia de enfermedades no diagnosticadas, tales como la enfermedad celíaca,
la enfermedad inflamatoria intestinal o el sobrecrecimiento bacteriano.

3) La fibra muscular tiene como principal función mantener saludable al aparato

digestivo, ¿cuál es su enlace glucosídico que abunda en ella?
4) ¿Cuál es la importancia de estudiar y conocer las características estructurales y
funcionales de los carbohidratos en los seres vivos?
R= Los carbohidratos juegan un papel muy importante en la nutrición. Tienen un rol
muy importante en el abastecimiento de energía para el funcionamiento del cuerpo.
Si la dieta no contiene suficiente carbohidrato, su cuerpo hará uso de más proteínas
para adquirir energía. Por lo tanto, los carbohidratos tienen la habilidad de conservar
la proteína.