Práctica de laboratorio No.

1: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Benítez Llanos Andrés; Manrique Barrera Martha; Riaño García Natalia

Resumen

Los carbohidratos son moléculas orgánicas o biomoléculas de composición C, H, O que forman

cetonas o aldehídos polihidroxilados, estos se clasifican por el número de carbonos que poseen.
Aquí se pretende identificar diferentes tipos de carbohidratos en algunos alimentos mediante las
reacciones de Benedict, Selliwanoff, Lugol, entre otros teniendo como resultado una
caracterización más específica del tipo de carbohidrato que posee dicho elemento, lo cual es útil
para analizar la forma que podemos representar e interpretar procesos metabólicos, tanto
animales como vegetales.

Palabras clave: Identificación de carbohidratos, azúcares, reacciones, monosacáridos,

polisacáridos, oxidación, deshidratación.
Introducción
“Los carbohidratos constituyen un grupo de
compuestos que desempeñan papeles
estructurales y funcionales, así como
también son la principal fuente de carbono y heteropolisacáridos) que producen más de
energía para los organismos heterótrofos.”
(Universidad Autónoma de Nuevo Leon,
1987)
moléculas más pequeñas; disacáridos
formados por dos monosacáridos unidos
entre sí por enlaces glucosídicos1
oligosacáridos que contienen de dos hasta
diez unidades de monosacáridos y
polisacáridos (homopolisacáridos y
diez moléculas de monosacáridos por
hidrólisis. (Universidad de Bogotá Jorge
Tadeo Lozano, s.f.)

Están compuestos de carbono, hidrógeno y Para reconocer los distintos tipos de

carbono [Cn(H2O)n]. Si bien antiguamente se
les llamaba “Hidratos de carbono” se
demostró que el concepto era erróneo ya que
no contenía moléculas intactas de agua, es
por esto que ahora se les define como
“aldehídos o cetonas polihidroxilados, o bien,
derivados de ellos.” (Universidad Autónoma
de México, s.f.)
Aunque la glucosa es el carbohidrato más
abundante de la tierra, -los animales la
obtienen al comer plantas o alimentos que la
contienen y las plantas por un proceso de
fotosíntesis-, los carbohidratos presentan
tamaños moleculares muy diferentes y por
esto se pueden clasificar como
monosacáridos o azúcares simples, los
cuales no pueden ser hidrolizados a
carbohidratos se han definido diferentes
métodos, algunos de los cuales se usaron en
esta práctica.
 Reacción de Benedict: detecta la
presencia de azúcares reductores. Se
basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en
medio básico débil. Si la reacción es
positiva aparece un precipitado rojizo,
verde o amarillo. (Universidad de Alicante,
2017)
 Prueba de Barfoed: detecta la presencia
de monosacáridos. Este reactivo es
débilmente ácido y es reducido
únicamente por monosacáridos, se forma
como producto de reacción Óxido
cuproso. La prueba es positiva si se forma
un precipitado rojo ladrillo. (Universidad
de Alicante, 2017)

1
Enlace glusosídico: compuestos con grupos pérdida de una molécula de agua para formar
OH, NH2 y SH que pueden reaccionar con el OH los compuestos llamados glicósidos.
del carbono anomérico de un monosacárido, con (Universidad del País Vasco, s.f.)
 Reacción de Molisch: reconoce todo tipo complicado conseguir técnicas de
de azúcares, los azúcares en medio ácido intercambio catiónico. (Food and Agriculture
fuerte se deshidratan formando furfutales Organization of the United Nations, s.f.)
los cuales reaccionan con el α-naftol y
originan complejos de intenso color. La Ahora hay columnas de HPLC2 que permiten
prueba es positiva si se forma un anillo una buena separación de mezclas de azúcar
violeta. (Instituto Nacional de Tecnologías son necesidad de preparar derivados.
Educativas y de Formación del
Profesorado, s.f.) Justificación
 Prueba de Selliwanoff: específica para las
cetosas, estas se deshidratan más Este laboratorio se justifica en la medida que,
rápidamente que las aldosas, dando podemos identificar y analizar las diferentes
furfutales, los cuales se condensan con el reacciones de carbohidratos, como lo son la
resorcinol produciendo un complejo Glucosa, la Ribosa, la Fructosa, la Lactosa
coloreado. Si la prueba es positiva se y el Almidón a reactivos que alteran sus
forma un color rojo cereza. (Instituto composiciones; permitiéndonos entender de
Nacional de Tecnologías Educativas y de cierto modo los papeles que juegan estas
Formación del Profesorado, s.f.) moléculas en procesos metabólicos en el
 Prueba con Lugol: permite reconocer organismo.
polisacáridos, particularmente el almidón
(coloración azul-violeta intenso) y Procedimiento
glicógeno y dextrinas (coloración roja).
(Universidad de Bogotá Jorge Tadeo Materiales
Lozano, s.f.)  12 Tubos de ensayo- gradilla
 2 Vasos de precipitados de 50 y 250 mL
La evolución de los métodos de análisis se  1 Agitador de vidrio
ha ido perfeccionando en paralelo a las  1 pipeta 10 mL
tecnologías analíticas. Al principio se  1 Pipeta Pasteur
establecieron técnicas físicas para el análisis  1 Pipeteador
de soluciones de sacarosa. Más tarde se  1 Mortero -pistilo
implementaron técnicas de colorimetría que
consistía en la comparación visual de las Reactivos
soluciones. (Food and Agriculture  Almidón, 1 %
Organization of the United Nations, s.f.)  Ribosa 1%
 Fructosa 1%
“Los diversos reactivos cromogénicos para  Glucosa 1%
las distintas clases de monosacáridos y los  Lactosa 2%
ácidos urónicos intervienen casi siempre en  Agua destilada
reacciones en ácidos concentrados, aunque  Harina de trigo (2 g)
la colorimetría se basa en métodos de  Miel 10 mL
reducción y en un pequeño número de casos  Ácido sulfúrico concentrado
en otras reacciones.” (Food and Agriculture  Reactivo de Lugol
Organization of the United Nations, s.f.)  Reactivo de Barfoed
 Reactivo de Molisch
La cromatografía, inicialmente en papel o  Reactivo de Benedict
placas de sílice, proporcionó buenos
resultados de separación, sin embargo era

2
HPLC: Cromatografía líquida de alta
resolución.
 Otros materiales
 Guantes
 Tapabocas
 Gafas de seguridad
Procedimiento 1: Identificación de
carbohidratos)
Se tomaron seis tubos de ensayo rotulados
respectivamente para cada muestra
(Glucosa, Ribosa, Almidón, Miel y Harina de
trigo) sumado a una prueba control (agua
destilada), agregando 1ml de cada
sustancia, posteriormente se adicionó 0.5ml
de reactivo de MOLISCH en cada una,
continuamente se aplicaron 3 gotas de ácido
sulfúrico por las paredes de los tubos de
ensayo y se mezcló cuidadosamente; Se
determinó positiva la prueba con
la presencia de un anillo violeta.
Procedimiento 2: Diferenciación entre
monosacáridos y disacáridos reductores)
Se tomaron seis tubos de ensayo rotulados
respectivamente para cada muestra
(Glucosa, Ribosa, Lactosa, Miel y Harina de
trigo) sumado a una prueba control (agua
destilada), agregando 0.5ml de cada
sustancia a excepción de la miel y la harina
de trigo que se manejaron con 1ml,
posteriormente se adiciono 1ml de reactivo
de BARFOED en cada una, continuamente
se depositaron los tubos en agua hirviendo
dentro de en un vaso de precipitado y se
aguardó unos minutos; Se determinó positiva
la prueba con la presencia de un precipitado
rojo ladrillo.
Procedimiento 3: Identificación de
polisacáridos)
Se tomaron seis tubos de ensayo rotulados
respectivamente para cada muestra
(Glucosa, Ribosa, Almidón, Miel y Harina de
trigo) sumado a una prueba control (agua
destilada), agregando 1ml de cada
sustancia, posteriormente se adicionaron 3
gotas de LUGOL en cada una; Se determinó
positiva la prueba con la presencia de una
coloración azul oscura intensa, casi negra.
Procedimiento 4: Identificación de
azúcares reductores)
Se tomaron seis tubos de ensayo rotulados
respectivamente para cada muestra
(Glucosa, Ribosa, Almidón, Miel y Harina de
trigo) sumado a una prueba control (agua
destilada), agregando 1ml de cada
sustancia, posteriormente se adicionaron 3
gotas de BENEDICT en cada una,
continuamente se depositaron los tubos en
baño María en ebullición dentro de en un
vaso de precipitado durante 3 minutos para
luego retirarlos y dejarlos enfriar; Se
determinó positiva la prueba con
la presencia de una coloración naranja o
amarillo oscuro.
Procedimiento 5: Identificación de
cetosas)
Se tomaron seis tubos de ensayo rotulados
respectivamente para cada muestra de
(Glucosa, Ribosa, Fructosa, Miel y Harina de
trigo) sumado a una prueba control (agua
destilada), agregando 0.5ml de cada
sustancia a excepción de la miel y la harina
de trigo que se manejaron con 1ml,
posteriormente se adicionaron 2ml del
reactivo de SELLIWANOFF ensayo y se
mezcló, continuamente se depositaron los
tubos en baño María en ebullición dentro de
en un vaso de precipitado durante 1 minuto;
Se determinó positiva la prueba con
la presencia de una coloración rojo cereza.
Resultados
A continuación se dan a conocer los
resultados de la práctica de cada uno de los
procedimientos, teniendo en cuenta que C=
Muestra control; += Resultado positivo; - =
Resultado negativo; ~ = Débilmente positivo;
T: se presentan trazas
 Identificación de carbohidratos Identificación de polisacáridos

Tabla 1 Resultado experimental: Identificación de Tabla 3 Resultado experimental: Identificación de

carbohidratos polisacáridos
Muestra Tubos de ensayo Muestra Tubos de ensayo
1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6
Agua destilada C Agua destilada C
Glucosa 1% - Glucosa 1% -
Ribosa 1% - Ribosa 1% -
Almidón 1% + Almidón 1% +
Miel + Miel ~
Harina de trigo + Harina de trigo +
*Reacción con reactivo de Molisch en medio *Reacción con reactivo Lugol. Fuente: Autores
ácido. Fuente: Autores
Imagen 2 Resultado experimental: Identificación
Imagen 1 Resultado experimental: Identificación de polisacáridos
de carbohidratos

Fuente: Autores
Fuente: Autores
Identificación de azúcares reductores
Diferenciación entre monosacáridos y
disacáridos reductores Tabla 4 Resultado experimental: Identificación de
azúcares reductores
Tabla 2 Resultado experimental: Diferenciación Muestra Tubos de ensayo
entre monosacáridos y azúcares reductores 1 2 3 4 5 6
Muestra Tubos de ensayo Agua destilada C
1 2 3 4 5 6 Glucosa 1% +
Agua destilada C Ribosa 1% +
Glucosa 1% - Almidón 1% ~
Ribosa 1% - Miel +
Almidón 1% - Harina de trigo T
Miel + *Reacción con reactivo Benedict. Fuente: Autores
Harina de trigo -
Imagen 3 Resultado experimental:
*Reacción con reactivo de Barfoed
Identificación de azúcares reductores
Fuente: Autores

Fuente: Autores
 Identificación de cetosas oxidación; se identificó como monosacárido
reductor (resultado positivo) la miel, mientras
Tabla 5 Resultado experimental: Identificación de que las muestras con glucosa, ribosa,
cetosas almidón, harina de trigo resultaron negativas
Muestra Tubos de ensayo aplicando dentro de la clasificación
1 2 3 4 5 6 inmediata de disacáridos reductores, pues la
Agua destilada C prueba evalúa el tiempo requerido para
Glucosa 1% - generar una tinción.
Ribosa 1% - En el siguiente procedimiento usando el
Fructosa 1% + reactivo lugol, se observó como polisacárido
Miel + la muestra con miel, harina de trigo;
Harina de trigo + débilmente positivo el almidón y como
*Reacción con reactivo de Selliwanoff. Fuente: negativos la glucosa y la ribosa, ya que son
Autores monosacáridos.

Imagen 4 Reacción experimental: Identificación En la prueba realizada con el reactivo

de cetosas Benedict se identificaron como azúcares
reductores las muestras con ribosa, glucosa
y miel, como débilmente positivo el almidón
y en la harina de trigo se evidenció la
presencia de trazas.

Finalmente, con el reactivo Selliwanoff se

identificaron como cetosas las muestras con
fructosa, miel y harina de trigo, como
negativas se observaron la glucosa y la
ribosa, ya que el funcionamiento de prueba
se basa en la velocidad de deshidratación de
Fuente: Autores las cetosas, superior a la de las aldosas, por
tanto, estas últimas son aldosas.
Análisis

Para la caracterización de carbohidratos Cuestionario

solubles e insolubles en agua, se utilizó
reactivo de Molisch, se identificaron como
carbohidratos las muestras de: harina de
trigo; como azúcares, el almidón (soluble) y
la miel, cuya reacción consiste en la
deshidratación en medio ácido formando
furfural u otros derivados y se visualiza como
un anillo violeta. Por otro lado se obtuvieron
como negativos las muestras con glucosa y
ribosa, conocidas como carbohidratos
originalmente, sin embargo, esto pudo
deberse a una contaminación o alteración de
la muestra.
a. ¿Qué grupos funcionales están presentes
en los carbohidratos?
Los elementos presentes en los
carbohidratos son Carbono, Hidrógeno y
Oxígeno (C, H, O).
También se puede encontrar:
 Grupo hidroxilo (-OH) de los alcoholes
 Grupo carbonilo o aldehído (H-C=O)
 Cetona (C=O). (Ramírez & Martínez, s.f.)
Figura 1 Grupos funcionales presentes en
los carbohidratos

En la prueba realizada para identificar los

monosacáridos y disacáridos reductores;
estos últimos llamado así por su fácil

Fuente: Universidad Nacional Autónoma de

México
b. ¿Qué quiere decir que un carbohidrato
sea reductor?
Azúcares que poseen su grupo carbonilo
(grupo funcional) intacto y a través del
mismo pueden reaccionar como
3
reductores con otras moléculas.
Presenta mutorrotación (cambio
espontáneo entre las dos formas cicladas
α y β). (Ramírez & Martínez, s.f.)
c. ¿De qué disacáridos y polisacáridos hace
parte la glucosa?
Hace parte de la celulosa, quitina,
glucógeno y almidón.
d. ¿En dónde se encuentra la celulosa y qué
papel desempeña?
Forma parte de la pared de la célula
vegetal y funciona como sostén.
e. ¿Qué es la quitina y dónde se encuentra?
Es un componente del exoesqueleto de
los artópodos, pared celular de los
hongos, órganos de animales como
quetas de anélidos,
Es un agente floculante para tratamiento
de agua, agente para curar heridas,
espesante y estabilizador de alimentos y
medicamentos.
f. ¿Cuál es la composición química de los
reactivos Lugol, Benedict y Molisch?
 Lugol: Di-yodo (I2) y Yoduro de potasio
(KI) diluido en 1L de agua destilada.
(EcuRed, s.f.)
 Benedict: Sulfato cúprico, hidrato de
sodio, carbonato anhidro de sodio,
hidrato de sulfato de solio y/o cloruro.
NaOH para alcalinizar el medio.
(Labbox, 2011)
 Molisch: α-naftol al 5% en etanol de
96%.
3
Agente reductor: cede electrones a un agente
oxidante.
Conclusiones
Se identificaron los diferentes tipos y
características de los carbohidratos a partir
de las evaluaciones con algunos reactivos
reconociendo así la importancia de estos en
procesos metabólicos, tanto animales como
vegetales
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United Nations. (s.f.). Examen de los
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f
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http://depa.fquim.unam.mx/amyd/arc
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f
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Universidad del País Vasco. (s.f.). El enlace
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Biomoléculas:
http://www.ehu.eus/biomoleculas/hc/
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