MÉTODOS

DE
CALIBRACIÓN
 Calibración

Conjunto de operaciones para establecer, bajo

ciertas condiciones específicas, la relación entre las
señales producidas por un instrumento analítico y
los correspondientes valores de concentración o
masa de los patrones de calibrado.

Los patrones de calibrado son cantidades de analito conocidas,

cuya respuesta al instrumento se utiliza para comparar con la
respuesta de la muestra.
 Curva de Calibración

Gráfico que representa la respuesta de un

método analítico en función de la concentración
o masa de los patrones.
Respuesta

Respuesta lineal

Intervalo lineal
CC
 Sensibilidad
Capacidad de un método para detectar un cambio en la
concentración del analito.

SENSIBILIDAD DE CALIBRACIÓN: Es la pendiente de la curva de calibración.

dR A mayor pendiente mayor sensibilidad.

m Depende de los factores instrumentales .
dC

SENSIBILIDAD ANALÍTICA: Es el cociente entre la pendiente de la curva de

calibración y la desviación estándar de la señal.

m dR dC 1 Desventaja: debe ser evaluada en

j   cada concentración de interés ya que
SR SR SC
SR varía con C.
 Límite de Detección
Es un número con unidades de concentración o de masa que
simboliza el más bajo nivel de concentración o de masa que el
procedimiento puede detectar como distinto del blanco.

Se define como la concentración de analito a la

cual su señal es igual a la señal del blanco más
tres veces la desviación estándar del blanco.
Respuesta

y  mC  yB yLDD  yB  3kSB
yB+3SB

3kSB
CLDD 
yB m
CLDD CC
Dónde k es el factor de confianza
generalmente se utiliza, k=3
 Límite de Cuantificación
Se define de manera análoga al LDD pero es la
concentración de analito a partir de la cual se pueden
realizar determinaciones cuantitativas con el
procedimiento analizado.

Dónde k es el factor de
yLDD  yB  10
k SB confianza generalmente
se utiliza, k=10

Observación:
Nunca se puede afirmar que un analito no está presente en la muestra.
Se puede decir que no es detectado o que su concentración está por
debajo del LDD.
 Intervalo de utilidad de la
Curva de Calibración
[CLDC,CLDL]
Concentración del Límite de Cuantificación y
Concentración del Límite de Linealidad
Respuesta

CLDC CLDL CC
 Método de Calibración Directa
(Estándar externo)
Se realiza una curva de calibración y se emplea el método de
regresión lineal por cuadrados mínimos
Suposiciones: Relación lineal entre señal y concentración
La incertidumbre en la concentración de los patrones es
desestimable
Todas las mediciones tienen la misma desviación estándar
(sin importar el valor)

Condición: la matriz de los patrones debe ser parecida a la de la muestra.

Efecto Matriz: juega un rol muy importante, es el cambio que experimenta
una señal analítica debido a la presencia de otras sustancias presentes en la
muestra, además del analito. Es un efecto multiplicativo ya que altera la
pendiente de la recta.
 Método de Patrón Interno
(Estándar Interno)
Cantidad conocida de un compuesto diferente del analito,
ausente en la muestra y que se añade a ésta.
Para hacer las determinaciones se compara la señal del
analito con la señal del patrón interno

UTILIDAD, cuando:
La cantidad de muestra analizada varía
La respuesta del instrumento varía
Hay pérdidas inevitables de muestra
 Método de Patrón Interno
(Estándar Interno)
Se mide la respuesta relativa del detector a una muestra de
cantidad conocida de patrón y analito
Se grafica la relación entre
Aa/
la respuesta del analito y el AEI

estándar interno vs. la

relación de las
concentraciones.
Ca/CEI

Para ser estandar interno, no debe interferir con el analito, no

debe estar previamente en la muestra, debe responder en
forma similar al analito ante la modificación de cualquier
variable y debe tener concentraciones similares al analito
 Método de Agregado de Patrón o
Adición de Estándar
Consiste en añadir cantidades conocidas de analito al problema
cuyo contenido de analito se quiere saber. Se agregan volúmenes
crecientes y se diluye todo a un mismo volumen final.
Se utiliza cuando la composición de la muestra es desconocida
y/o compleja. Toma en cuenta el efecto matriz.

Suposiciones: El agregado de la solución patrón no modifica el efecto de

la matriz, este efecto es el mismo en la solución original y en
la diluida.
La respuesta del detector es lineal.
Todas las mediciones tienen la misma desviación estándar
(sin importar el valor)
 Método de Agregado de Patrón o
Adición de Estándar
Volumen de Volumen de
la muestra la solución
original patrón

 VM VP 
Señal  k  C
 AV  C P 

Volumen

 VT 
Total
T Muestra +
Patrón

Concentración
del analito en Concentración
la muestra del analito

Respuesta
patrón
agregado a la
muestra
Señal de la
muestra

Se extrapola la recta hasta

señal cero y se reemplaza en
la ecuación.  V
  C A M


CC
Patrón  VP 
 C P 
 VT   VT 
Control de calidad – Gráfico control
Es un gráfico en el que se presentan consecutivamente los
valores de las medias muestrales para un determinado
método o proceso de manera de tomar una acción correctiva
lo mas rápido posible.

Gráfico de Shewhart

Requiere una distribución

normal de los resultados y una
desviación estándar constante

Se estiman la media
poblacional (µ) y la
desviación estándar (σ) de
los datos muestrales
 110 %

LSA

80 %
LS

LII
M

LI
Método de Recuperación o Fortificación
Se agrega una cantidad determinada de patrón del mismo
analito a medir en al menos una de las muestras a
Aseguramiento de la Calidad

determinar. Luego se calcula el porcentaje de

Fecha
X 100

25/02/2014
24/02/2014
03/02/2014
24/01/2014
14/01/2014
03/01/2014
20/12/2013
M
Valor Fortificado medido

16/12/2013
13/12/2013
12/12/2013
13/11/2013
06/11/2013
Valor Fortificado real

29/10/2013
recuperación como:

02/09/2013
27/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
95

85

75
115

105

90

80
110

100

Valor medio

Fecha
25/02/2014
03/02/2014
24/01/2014
14/01/2014

LSA
20/12/2013

LS

LII
M

LI
16/12/2013
% Recuperación=
13/12/2013
12/12/2013
13/11/2013
06/11/2013
29/10/2013
02/09/2013
27/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
02/08/2013

0.2000

0.0000
Rango

Fecha
25/02/2014
03/02/2014
24/01/2014
14/01/2014
20/12/2013
16/12/2013
13/12/2013
12/12/2013
13/11/2013
06/11/2013
29/10/2013
02/09/2013
27/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
02/08/2013

2.70

2.50

2.30

2.10

1.90

1.70

1.50
Valor medio