UNIVERSIDAD DE OCCIDENTE

UDO

Clase: Bacteriología Médica.

Laboratorio # 6: Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana.

Autor:
Thelma Lorena Salgado.
Turno Sabatino 3er año Bioanálisis Clínico.
Docente: Lic. Tania Paisano.
Fecha: 24 Septiembre 2022
Introducción:

Se emplea al término sensibilidad microbiana (antibiograma) para describir aquella situación en

la que los microorganismos como bacterias u hongos no son capaces de crecer en presencia
de uno o varios fármacos antimicrobianos. El antibiograma se realiza para bacterias y hongos,
una vez se sabe que estos microorganismos son los responsables de una infección mediante el
cultivo correspondiente. La prueba determina la eficacia de un agente antimicrobiano frente a
un microorganismo que ocasiona la infección y/o determina si el microorganismo ha
desarrollado resistencia a ciertos antibióticos. Los resultados de esta prueba son útiles para
seleccionar el fármaco o la combinación de fármacos que sean más efectivos para tratar la
infección.

La resistencia de la bacteria es el principal obstáculo para la eficacia terapéutica de los

antibióticos, pues no solo anular la acción curativa si se manifiesta en el curso del tratamiento,
sino que tiene a larga consecuencias más graves para el conjunto de la población, ya que
provoca la desaparición de las cepas susceptibles y la propagación de las resistentes. Ese es
el motivo por el cual la determinación de la sensibilidad de las bacterias a los antibióticos haya
adquirido tanta importancia y sea indispensable para hacer de los antibióticos un uso racional y
para preservar la eficacia de este grupo de agentes tan valioso de agentes terapéuticos. El
conocimiento de la sensibilidad a los antibióticos, del microorganismo causante de una
enfermedad, no es solo importante para hacer la selección inicial del agente terapéutico
correspondiente, sino que además en aquellos casos en los cuales el paciente presente a
intolerancia a determinado fármaco, permite seleccionar el más adecuado para este paciente
en particular.

Los antibiogramas son métodos in vitro que determina la susceptibilidad de los microrganismo
a una variedad de agentes microbianos, bajo condiciones de laboratorio específica y
estandarizada.
Objetivo general:

1. Determinar la importancia clínica de las pruebas de susceptibilidad microbiana.

2. Realizar un ensayo e sensibilidad de un cultivo bacteriano a los antibióticos, usando el
método de Kirby Bauer.
3. Realizar la interpretación de resultados en cuanto a la sensibilidad y resistencia
microbiana.  
Informes: 
 
1. ¿Cuál es la finalidad de las pruebas de susceptibilidad? 
La razón fundamental de una prueba de sensibilidad es la de realizar una predicción a
través de una prueba in vitro, observar la respuesta del paciente a un determinado
antibiótico, la evolución de la infección y detectar una resistencia relevante del organismo
que está causando este proceso infeccioso

2. ¿Qué significa sensibilidad y resistencia cuando se interpreta un antibiograma? 

Sensible: significa que el crecimiento del microorganismo está inhibido a la concentración

sérica del fármaco que se alcanza utilizando la dosis habitual.
Intermedia: significa que el crecimiento del microorganismo está inhibido solamente a la
dosis máxima recomendada.
Resistente: significa que el microorganismo es resistente a los niveles séricos del fármaco
que se alcanzan normalmente.

3. ¿En qué casos las pruebas de susceptibilidad requerirán de medios de cultivos distintos
al de Mueller Hilton? 
El medio base recomendado para realizar un antibiograma por difusión es el agar Mueller
Hinton por: Su reproducibilidad aceptable. Baja concentración de inhibidores, condición
crítica para evaluar sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclina. El crecimiento satisfactorio de
patógenos no fastidiosos.

 El medio que se usa es agar sangre con sangre de caballo al 5% y con una base de
Müeller-Hinton o puede utilizarse agar HTM o agar chocolate suplementado.

4. Investigue las tablas de susceptibilidad de acuerdo a la NCCLS. 

5. Realice una lista de agentes bacterianos que se emplea el método Kirby-Bauer para
susceptibilidad microbiana.  

6. Elabore el reporte del antibiograma.  

La interpretación de un antibiograma es la categorización clínica del microorganismo

en SENSIBLE, INTERMEDIO (SENSIBLE CUANDO SE INCREMENTA LA
EXPOSICIÓN) o RESISTENTE. Ésta nos va a informar de las posibilidades de éxito
terapéutico con el antimicrobiano utilizado en su dosis habitual o incrementada.

La lectura interpretada del antibiograma consiste en el análisis del patrón de

sensibilidades para así intentar predecir los mecanismos de resistencia que pudieran
estar presentes. Conocer éstos nos permitirá por un lado deducir la sensibilidad a
algunos antibióticos no probados, así como en su caso la recategorización clínica de
algunos otros.

Para realizar la lectura interpretada del antibiograma es necesario conocer el espectro

de los antimicrobianos, ciertas características farmacocinéticas y farmacodinámicas y su
relación, así como los principales mecanismos de resistencia a los antimicrobianos.
 Clásicamente su finalidad ha sido tanto clínica como epidemiológica. En la práctica
clínica, guiándonos en la elección del antimicrobiano más acertado, permitiéndonos bien
una optimización del uso de antimicrobianos con respecto a la elección empírica
(realizando una terapia dirigida con un antibiótico activo frente a ese microorganismo
pero de menor espectro y/o toxicidad) bien una terapia secuencial (completando vía oral
un tratamiento iniciado de forma parenteral). En el ámbito  epidemiológico, en el control
de infecciones por bacterias resistentes y el establecimiento de políticas de
antimicrobianos, si bien en la actualidad los métodos de estudio genómico están 
comenzando a reemplazar a la interpretación fenotípica en este último campo.

Conocer los principales fenotipos de resistencia de las bacterias más comunes en la

práctica clínica nos va a resultar de utilidad a la hora de elegir de forma empírica el
antimicrobiano así como su dosis más adecuada, resultando en unas mayores
probabilidades de éxito terapéutico y una disminución en la selección de resistencias.

7. ¿Qué es y que indican los halos de inhibición? 

En un método simple de resumirse es la zona alrededor de un disco de antibiótico
en un antibiograma en el que no se produce crecimiento bacteriano en una placa de
agar inoculada con el gérmen. Es una medida de la potencia del antibiótico frente al
gérmen.
 8.  Por que para algunos microorganismos se utiliza Agar Mueller Himton suplementado
con sangre de carnero? Mencione algunos ejemplos.  
Cuando se suplementa con sangre de carnero al 5%, permite realizar las pruebas de
sensibilidad a los antimicrobianos en especies de estreptococos. También, con el agregado
de sangre puede utilizarse para el cultivo y aislamiento de microorganismos nutricional-
mente exigentes.

sirve para analizar la sensibilidad de los neumococos y otros estreptococos a los antibióticos

y las sulfonamidas en el caso de las cepas que necesitan sangre para crecer.

 La baja concentración de timina– timindina (inhibidores de la sulfonamida) limita el

crecimiento alrededor de los discos, lo que permite medir con mayor precisión las zonas de
inhibición.

9. Si los discos de antimicrobianos no se colocan en una placa de Agar Mueller Himton

dentro de los 15 minutos a la inoculación, que es lo más posible que ocurra? 

Las zonas de inhibición podrían volverse demasiado pequeñas.

10. ¿Qué pasaría si al colocar un antimicrobiano accidentalmente cae en posición

inadecuada, regresaría el antimicrobiano a su lugar? 

No, se debe retirar y colocar uno nuevo en el lugar adecuado para evitar la alteración del caldo
y del halo de inhibición.