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Facultad de medicina Xalapa.

PRCTICA 5
Antibiograma

Integrantes del equipo:


Daniel Arturo Escobedo Portilla.
Luis ngel Martnez Gonzlez.
Irving Alfonso Salazar Martnez.
Ricardo Amor Gabriel Aburto.
Jorge Pablo Hernndez Parra.

LABORATORIO DE MICROBIOLGA
65871
19 de Octubre de 2017
Objetivos
Conocer la importancia mdica que tiene el antibiograma
Elaborar correctamente un antibiograma a partir de cultivo de agar 110 y
agar Mueller Hinton
Determinar la sensibilidad que tienen las bacterias a los diferentes tipos de
antibiticos
Determinar la resistencia que tienen las bacterias a los diferentes tipos de
antibiticos
Seleccionar el antibitico ms viable para los diferentes tipos de cultivo

Fundamento
Sabemos que existen ciertos microorganismos bacterianos en nuestra flora
bucal y son completamente normales, dentro de la misma nos es posible hayar
distintos tipos de microbios que se diferencian por pertenecer a ciertas especies
bacterianas como Streptococcus, Lactobacillus, Actinomyces, Candida y
Mycolasma. Existen simbiticamente en las vas respiratorias del hospedero sin
significar una alerta o un problema para su homeostasis, a menos que se exponga
al hospedero bajo circunstancias especficas y se desencadenen varios riesgos
potenciales para su salud.
Cuando esto sucede, se precentan los sntomas que el mismo paciente puede
llegar a describir como dolorosos o incomodos en la regin del cuello; podemos
llegar a sospechar a cerca de la existencia anormal de un agente infeccioso en la
flora normal de las vas areas altas, es decir, la presencia de un microorganismo
distinto a los que se encuentra normalmente en simbiosis.
En estos mismos casos, la prctica pasada de tom como objetivo realizar el
exudado farngeo; en esta ocasin se llevar a cabo el respectivo antibiograma
(prueba de sensibilidad bacteriana), despus de haber sembrado los resultados de
la prctica anterior.
Las pruebas de sensibilidad bacteriana se realizan a traves del antibiograma, que
funge como medida de sensibilidad de una cepa bacteriana especfica a uno o
distintos antibiticos. La prctica del antibiograma es llevada a cabo in vitro, como
uno de los antecedentes requeridos para corroborar que in vivo un tratamiento
antibitico es competente o no. Es muy importante para efectuar los estudios
pertinentes a cerca de la progresin de la resistencia bacteriana para facilitar los
protocolos al llevar a cabo la antibioticoterapia.

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Materiales
1. Cajas de Petri de la prctica Exudado farngeo

2. Asas bacteriolgicas

3. Tubos de rosca con solucin salina

4. Aplicadores

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5. Mecheros
6. Pinzas de diseccin

7. Discos de sensibilidad bacteriana

8. Agares sal y manitol

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Desarrollo
1. Utilizando los agares utilizados en la prueba de Exudado farngeo se
procede a tomar una pequea muestra de las colonias que se formaron con
la ayuda de un asa bacteriolgica, todo el procedimiento debe llevarse a
cabo junto a un mechero para evitar que nuestras muestras se contaminen.

2. Una vez tengamos nuestra muestra recogida, procederemos a depositarla


en uno de los tubos de rosca con solucin salina intentando depositar en
ella la muestra.

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3. Se intentar homogeneizar la muestra, y se proceder a extraer un poco de
la mezcla con ayuda de un aplicador.

4. La muestra extrada se extender en uno de los agares proporcionados

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5. Una vez que se ha extendido la muestra en el agar, con ayuda de unas
pinzas de diseccin, se procede a colocar dentro de la caja Petri un disco
de sensibilidad bacteriana.

6. Se dejar que el microorganismo crezca, y se podrn observar los halos de


inhibicin bacteriana al agente determinado.

INVESTIGACION
La aplicacin de un antibiograma en el cultivo del microorganismo
patognico nos facilita la interpretacin y la clasificacin de la sensibilidad, o en de
lo contrario la resistencia del microorganismo frente a los medicamentos que se
pudieran suministrar al paciente. Las primeras pruebas (1920-1930) de un
antibiograma se ligan histricamente con la aparicin de los antimicrobianos, con
el clculo de la concentracin mnima inhibitoria CMI, lo que permite relacionar al
agente patgeno y al medicamento del antibiograma mediante su respuesta
biolgica en sensible, intermedio o resistente.
Sensible: cuando el organismo es inhibido por el disco de medicamento en
una distancia considerable y especfica, se espera un xito en la terapia.
Intermedio: cuando la distancia de la cepa al disco de medicamento es
mediana entre la distancia que se considera inhibitoria y la que se considera
resistente, se habla de un tratamiento incierto, y posiblemente un fracaso.
Resistente: cuando la distancia de la cepa al disco de medicamento es muy
corta se considera un medicamento no funcional para este m.o.
Las distancias (halos de inhibicin) a las que inhibe un medicamento a un
microorganismo son especficas para este medicamento. Mientras a un

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medicamento se le considera inhibitoria cierta longitud a la cepa, a otro
medicamento esta distancia puede ser insuficiente para considerrsele inhibidor y
a la cepa sensible, es decir, un fracaso teraputico. Por lo tanto, estos halos de
inhibicin son distancias relativas con los que cada tipo de medicamento trabaja, y
se les llama puntos de corte, y son muy especficos. Los puntos de corte estn
determinados por los comits internacionales de cortes epidemiolgicos (cut-
offs ECOFF, EUCAST).
Hasta aqu, se conoce el sentido prctico para poner en marcha un tratamiento
exitoso a una enfermedad, sin embargo, el antibiograma tambin es una base
para la interpretacin completa de la actividad de la cepa microbiolgica. La
interpretacin del mecanismo de sensibilidad o el mecanismo de resistencia de un
microorganismo se lleva a cabo por su anlisis fenotpico. Para esto se necesita
conocer el gnero y la especie del microorganismo que produce la enfermedad y
despus el anlisis de los medicamentos empleados en cuanto a su mecanismo
de accin y el mecanismo de resistencia del microorganismo. Las resistencias
pueden ser prevalentes o adquiridas. La resistencia natural a un antimicrobiano
consiste en la inactividad de la molcula, mientras que una resistencia adquirida
es cuando el agente se ve modificado por mutacin, o adquisicin de genes. La
resistencia cruzada es la resistencia donde el microorganismo es resistente a
diferentes medicamentos de una misma familia, pero tambin a medicamentos de
otras familias. La resistencia asociada es el desarrollo de diferentes mecanismos
para la resistencia de diferentes antibiticos inclusive de diferentes familias.
La resistencia se puede desarrollar por mecanismos genticos, donde se hace a
notar la mutacin de un gen asociado a la transcripcin de estructuras sensibles al
frmaco. Otro mecanismo es la adquisicin de genes, esto sucede por la donacin
y adquisicin de informacin inter o intraespecie por lo que se hace una
cooperacin para la coexistencia de las especies. En cuanto a los mecanismos
bioqumicos, se encuentran, la produccin de enzimas que inactivan al frmaco,
impermeabilidad de la membrana bacteriana ante la presencia del frmaco, y la
efusin por transporte activo.

Conclusin
Con la presenta prctica se reconoci la importancia que tiene el
antibiograma en la prctica mdica para la elaboracin de tratamientos con
antibiticos, adems de valorar la necesidad de estas pruebas para la
investigacin epidemiolgica, ya que nos permite conocer la resistencia que van
desarrollando las bacterias a los antibiticos actuales.
Se logr realizar el antibiogama correctamente en la mayora de nuestros cultivos,
y esto nos permiti proceder a conocer los antibiticos que seran ms indicados
en un tratamiento de infeccin bacteriana de nuestros cultivos en agar 110 y agar
Muller Hinton.

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Se pudo conocer la sensibilidad y resistencia que presentaron las bacterias de
nuestros cultivos a los antibiticos, gracias a la correcta medicin medicin de los
halos de inhibicin, y con el apoyo de las tablas que se nos proporcion para
realizar la comparacin de los antibiticos.

REFERENCIAS

1. Lectura interpretada del antibiograma: una necesidad clnica [Internet].


Elsevier.es. 2010 [cited 17 October 2017]. Available from:
http://apps.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=13152315&pid
ent_usuario=0&pcontactid=&pident_revista=28&ty=21&accion=L&origen=elsevier&
web=www.elsevier.es&lan=es&fichero=28v28n06a13152315pdf001.pdf
2. El antibiograma [Internet]. Microinmuno.qb.fcen.uba.ar. [cited 17 October 2017].
Available from: http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioAntibioticos.htm
3. Prueba de sensibilidad bacteriana [internet]. Manual de prcticas de la
Universidad de Salamanca [cited October 17 2017]. Available from:
http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/A
ntibiograma.html