P

PRÓXIMA
NÚM. DE DOCUMENTO: INSTRUCTIVO:
REVISIÓN:
Instructivo para preparación de medio de
IIV-0X 60.02.23
cultivo LGI

REVISIÓN: SECCIÓN APLICABLE DE LA NORMA:

0
OBJETIVO: Definir los pasos a seguir para preparar medio de cultivo LGI
ALCANCE: Aplica para la producción de BIO LARGE.

PASOS A SEGUIR: OPERACIÓN A REALIZAR

Matraz Erlenmeyer de 6 litros

Potenciómetro
Balanza de precisión.
Barra de agitación
Parrilla de agitación
Papa comercial
Probeta de 500 mL o 1 litro
Jarra de plástico de 5 litros

Parilla eléctrica
Materiales y reactivos Algodón
Gasas
Aluminio
Cinta masking
Tijeras
Plato de plástico
Tubos conicos de 50ml
 HACER SOLUCIONES STOCK DE CADA REACTIVO PARA LA
PREPARACION DEL MEDIO LGI.
DE ACUERDO CON LA SIGUIENTE FORMULA
PREPARACIÓN DE SE ESTABLECE LA CANTDA DE GRAMOS POR LITRO PARA
SOLUCIONES STOCK (calculo) CADA SOLUCION STOCK.
Quedando como resultado cantidad de 5g de cada uno de los
rectivos para las soluciones stock

Para la preparación de soliciones stock se recomienda seguir los siguientes paso

1. Pesar en una balanza de presición 5g de cada reactivo utilizando una espatula de metal
PREPARACIÓN DE producto del envase original. Evitar el derrame de ractivo.
SOLUCIONES STOCK 2. En un tubo conico de 50ml previamente lavado, agregar el reactivo pesado luedo agega
completar los 50ml, utilizando la graducción propia del tuvo como referencia.
3. Posteriormente cerrar los tubos y rotular con elnombre del reacvtivo y con el porcenta
encuentra
 Para la preparación de medio de cultivo LGI se requiere los siguientes ingredientes
- K2HPO4 0.8 g/L = A 4ml de solución stock
- KH2PO4 2.4 g/L = A 24ml de solución stock
- MgSO4 0.8 g/L = A 4ml de solución stock
-Na2MoO4 0.008 g/L = A 0.08ml de solución stock
-FeCl 0.8 g/L= A 0.8ml de solución stock
CaCl2 0.8 g/L= A 0.8ml de solución stock
Azucar 400 g/L
1. Para la preparación de 4L de medio LGI se utiliza un matraz enlenmeyer de 6L l
2. Agregar 2L de agua destilada al matraz.
Preparación de medio de cultivo 3. Luego se miden los volúmenes de las soluciones stock utilizando pipetas o micro
depediendo del volumen de cada uno y se van agregando al matraz de 6L.
LGI 4. Se pesan los 400g de azúcar y se agregan al matraz.
5. Una vez que se agregaron los volúmenes correspondientes de cada reactivo y los
azúcar, se completa el volumen de agua en el matraz.
6. Se le coloca un tapon de algodón. Y un pedazo de aluminio para tapar la boca de
7. Posteriormente se esteriliza el matraz con el medio formulado en una autoclave p
1.5psi a una temperatura de 110°C
8. Al termino del ciclo de esterilización se saca el matraz y se deja enfriar el medio
se puede guardar en refrigeración o temperatura ambiente. Asegurar muy bien el ta
algodón para evitar que se destape e matraz.

Equipo de seguridad: Bata de

Actividades de 5S: Mant

Equipo y herramienta a utilizar:
 PLANTAMEX S.A DE C.V.
PRÓXIMA ELABORÓ: REVISÓ:
REVISIÓN: NOMBRE Y PUESTO NOMBRE Y PUESTO
Ivan Galindo Santiago
60.02.23
Analista de Investigación de Campo Coordinador de investigación y desarrollo de ca

NORMA: FECHA: FECHA:

06.10.22
e cultivo LGI

REALIZAR FOTOS O FIGURAS

Agua destilada K2HPO4

KH2PO4
MgSO4 . 7H2O
Na2MoO4
FeCl3
CaCl2. 2H2O
Azúcar
 %(𝑚/𝑣)=(𝑔 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜)/𝑚𝑖
𝑥100 ⃗

(𝑔𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 ) =((%)

(𝑚𝑙) )/100

(gde soluto ) =(10%)(50ml)/

100

(gde soluto)=5 g

omienda seguir los siguientes pasos:

o utilizando una espatula de metal para sacar el

tar el derrame de ractivo.
egar el reactivo pesado luedo agegar agua hasta
n propia del tuvo como referencia.
bre del reacvtivo y con el porcentaje al que se
uiere los siguientes ingredientes por litro:

a un matraz enlenmeyer de 6L limpio y seco.

stock utilizando pipetas o micropipetas

ando al matraz de 6L.
az.
ondientes de cada reactivo y los gramos de
z.
e aluminio para tapar la boca del matraz.
o formulado en una autoclave por 15min a

atraz y se deja enfriar el medio de cultivo,

biente. Asegurar muy bien el tapon de

Bata de laboratorio, guantes de nitrilo y lentes de seguridad, cubrebocas

Mantener en orden las áreas de trabajo y limpiar después de trabjar.

Campana de flujo laminar y autoclave.
E C.V.
INSTRUCTIVO
REVISÓ: APROBÓ:
NOMBRE Y PUESTO NOMBRE Y PUESTO

Coordinador de investigación y desarrollo de campo

FECHA: FECHA:

FOTOS O FIGURAS
ridad, cubrebocas

pués de trabjar.
ve.