Curso: FITOQUÍMICA

TEMA: PRACTICA 9: EXTRACCIÓN E IDENTIFICACION DE

LACTONAS SESQUITERPÉNICAS

PROFESOR: Mg. Q, F. DANIEL ÑAÑEZ DEL

PINO
ALUMNA: BETTY Y. HUAMAN
PURIHUAMAN

Ciclo: VIII

AÑO: 2022

EXTRACCIÓN E IDENTIFICACION DE LACTONAS

 SESQUITERPÉNICAS

I. INTRODUCCIÓN
Las lactonas sesquiterpénicas son metabolitos secundarios que se encuentran en
numerosas especies o familias de plantas. Estas moléculas han llamado la
atención de los científicos por el amplio espectro de actividades biológicas que
presentan como antiinflamatoria, antitumoral, citotóxica, antibacterial, antimalaria y
actividad neurotóxica y alérgica. Actualmente se realizan ensayos clínicos contra el
cáncer con tres lactonas sesquiterpénicas: la artemisina, el partenolido y la
tapsigargina. Los estudios de relación estructura-actividad realizados a estas
moléculas muestran características específicas en su estructura, que son las
responsables de sus efectos antitumorales y citotóxicos. Teniendo en cuenta estos
antecedentes, este trabajo tiene tuvo objetivo analizar las diferentes actividades
biológicas de germacranolidas, eudesmanolidas, guayanolidas, cadinanolidas y
pseudoguayanolidas, así como la relación estructura-actividad de las lactonas
sesquiterpénicas.1

Las lactonas se pueden considerar como esteres internos de los ácidos

hidroxicarboxilicos y se distingue entre lactonas alfa, beta, gama y delta de anillos
mayores. Las lactonas derivadas de los ácidos carboxílicos alifáticos se nombran
añadiendo el sufijo ólido al nombre del hidrocarburo no hidroxilado del mismo
número de átomos de carbonos.
OBJETIVOS:

 Extraer e identificar los flavonoides, compuestos fenólicos, taninos y

lactonas sesquiterpénicas presentes en hojas y flores de Matricaria
Chamomilla.

II. MARCO TEORICO

MATRICARIA CHAMOMILLA

Es una planta herbácea anual de 60 cm de alto, aromática, de delgada raíz, tallo

ramificado, hojas de pecíolo corto y con cabezuelas florales que pertenece a la
familia Astereaceae. Toda la planta exhala un olor penetrante y agradable con
pétalos blancos y centro amarillo. Gracias a la presencia de flavonoides en sus
flores y consecuentes propiedades antioxidantes de algunas polihidroxiflavonas es
que la manzanilla se usa en la subsistencia de grasas o jugos de frutas, trastornos
del sistema respiratorio, como quelante de metales y muchas otras propiedades
ventajosas para la salud humana.
PROPIEDADES
Las flores son usadas en infusión como antiespasmódica y sedante; además posee
propiedades calmantes, tónicas, digestivas, febrífugas, anti neurálgicas,
carminativas.2 Esta comúnmente indicada para dolores abdominales, cólicos
intestinales, hiper-meteorismo, afecciones nerviosas, cistitis, reumatismo,
inflamaciones bucales, furúnculos, abscesos, eczemas, conjuntivitis, hemorroides y
enfermedades infecciosas. De esta planta (de las flores) pueden obtenerse dos
derivados: el aceite esencial y los extractos hidro-alcohólico.
Entre los principales metabolitos de la Matricaria chamomilla tenemos a los
flavonoides como luteolol, apigenol y quercetina; Lactonas sesquiterpénicas
como la matricina, matricarina, precursoras del camazuleno alfa-bisabolol, óxidos
de bisabolol, óxido de bisabolona y sales minerales; por último, tenemos cumarinas
como umbeliferona, herniarina, mucilagos urónicos.
La Matricaria chamomilla también presenta compuetsos fenólicos y taninos

 Luteolol
FLAVONOIDES  Apigenol
 Quercetina
 Matricina
 Matricarina
LACTONAS SESQUITERPÉNICAS  Precursoras del camazuleno alfa-bisabolol
 Óxidos de bisabolol A, B y C
 Óxido de Bisabolona
 Sales minerales
 Umbeliferona
CUMARINAS  Herniarina
 Mucilagos Urónicos

LAS LACTONAS SESQUITERPÉNICAS O SESQUITERPENOS LACTÓNICOS

son compuestos químicos de naturaleza terpenoide caracterizados principalmente

por estructuras de 15 carbonos y enlazados comúnmente en posiciones en C6-C7
o C7-C8 a gamma-butirolactonas. Dichas estructuras lactónicas pueden presentar
configuración Cis o Trans y estar sustituidas en posición alfa por grupos alquilo,
Metileno exocíclos, entre otros.

CLASIFICACIÓN
Se clasifica en función de su esqueleto carbocíclico: Germacranólidos,
Guayanólidos, Pseudoguayanólidos, Eudesmanólidos, Elemanólidos

PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS Y FARMACOLÓGICA

Son sustancias amargas, de farmacología poco estudiada pero provenientes de

plantas usualmente reportadas como medicinales, por lo que es probable que sean
los agentes medicinales. Por lo general, las sesquiterpenlactonas son lo
suficientemente polares para ser insolubles en éter de petróleo, aunque también
son insolubles en agua. El etanol o metanol caliente las disuelve, pero son aún más
solubles es cloroformo o éter etílico; estas propiedades son utilizadas para
extraerlas y separarlas de otros compuestos.

Además, poseen actividad antitumoral, citotoxica y antimicrobiana.

Propiedades físico-químicas

o Incoloras o ligeramente coloreadas

o Sólidos cristalinos
o Solubilidad variable

III. MATERIALES Y MÉTODOS

MATERIALES
Tubos de ensayo, Gradilla de metal, Pipeta serológica 2mL, 5mL, Bagueta,
Espátula, Trípode, Rejilla de asbesto, Pro pipeta, Beacker 250 mL, Mechero de
bunsen, Goteros Pasteur, Probeta 250mL, Embudo de vidrio, Matraz 250mL,
Pinza de madera, Campana extractora, Balanza analítica. Beacker 250 mL,
Mechero de bunsen, Trípode, Rejilla de abesto, Bagueta, Probeta 250 mL,
Balanza analítica, Rotavapor, Termometro
Reactivos

Acetato de etilo, Hexano, Acetato de plomo 5%, Ácido acético glacial,

Cloroformo, Etanol, Diclorometano. Hidroxamato férrico, HCl Q.P.,
KOH 10%., Clorhidrato de hidroxilamina, Ácido pícrico, Etanol,
Hidróxido de sodio, Nitrato de plata, Amoniaco, Nitroprusiato de sodio,
Piridina, 3,5 dinitrobenzoico.

MATERIAL VEGETAL

El material vegetal seco (hojas y flores) de Matricaria Chamomilla

(Manzanilla)

IDENTIFICACION DE LACTONAS SESQUITERPÉNICAS

Ensayo de hidroxamato férrico: En un tubo de ensayo se mezcló

hidroxilamina clorhídrica e hidróxido de potasio, la mezcla se agregó a otro
tubo con 1 ml del extracto etanólico obtenido por reflujo. Se calentó hasta la
obtención de un color naranja, una vez enfriado se aciduló con HCl
finalmente se puso a reacción con FeCl3 siendo positivo en caso diese
coloración violeta.

Ensayo de Baljet: Se preparó el reactivo de Baljet con NaOH y ácido pícrico

saturado, y se agregó 1 ml de reactivo a 1 ml de extracto etanólico. La
identificación positiva es demostrada por colores que varían entre naranja y
rojo oscuro.

Prueba de Tollens: El extracto fue tratado en un tubo de ensayo, con

reactivo de Tollens. Para la reacción positiva se presenta un espejo de plata.

COMPUESTOS FENÓLICOS

Ensayo con Cloruro Férrico: A partir de 1 ml de extracto etanólico se

realizó una prueba de identificación cualitativa colorimétrica para
compuestos fenólicos, en la cual se utilizó el método de cloruro férrico
agregando 0.5 ml (FeCl3 al 5%). Un cambio de color azul o verde oscuro
indica la presencia de compuestos fenólicos.
Ensayo con Hidróxido de Sodio: Una segunda prueba de identificación
cualitativa fue llevada a cabo con 1 ml del extracto y 1 ml de NaOH 0.01N, la
coloración positiva varía entre un color más amarillento a uno anaranjado
rojizo.

IDENTIFICACION DE METABOLITOS:

PROCEDIMIENTO:

1. Ensayo con hidroxamato férrico: A 1ml del extracto de Matricaria

chamomilla le agregamos etanol y posteriormente una solución de
clorhidrato de hidroxilamina 10% y KOH 0,5N. Calentamos la mezcla
hasta que aparezca una espuma de color transparente. Se enfría y
acidula con HCl 20%, luego se añade cloruro férrico 1% y observamos la
coloración.

2. Ensayo de Baljet: mezclamos dos soluciones antes de poner en

contacto con 1ml del extracto (Solucion A: 1ml de ácido pícrico sol.
Saturada y solución B: 1ml de NaOH 0,01N). Luego observamos la
coloración.

3. Prueba de Tolles: Agregamos el Rx. De Tollens

(AgNO3/NaOH/Amoniaco) a 1ml del extracto y observamos.

RESULTADOS:
Obtención de las lactonas sesquiterpénicas

 El material seco y molido se extrae por medio del método Soxhlet,

utilizando como solvente el cloroformo.
 El extracto concentrado se redisuelve en etanol caliente y se añade
solución acuosa de acetato de plomo al 5%, con lo cual se
precipitan sustancias más polares.
 Luego de filtrar, el filtrado se concentra y se somete a precipitación con
Acetato de plomo al 5%.
 1. El ensayo con el hidroxamato férrico es positivo ya que observamos
cloración violeta oscuro y en teoría debería ser violeta.

hidroxamato ferrico causando un cambio en la coloración que da café o violeta cuando la prueba es positiva

2. La identificación con el ensayo de Bajlet dio positivo a

serquiterpenlactonas ya que teóricamente debe dar coloraciones de naranja
a rojo oscuro y el nuestro dio color naranja.
Se tratan con dos soluciones que se mezclan en iguales volúmenes antes de
usarse. Solución A: 1g De ácido pícrico en 100mL de etanol; solución B:
10 g De hidróxido de sodio en 100 mL de agua destilada.

3. La prueba de Tollens dio positivo a lactonas α, β y β, γ- insaturadas

formando un pequeño espejo de plata.

Las lactonas reducen el

reactivo de Tollens (AgNO3 /NaOH / Amoniaco) formando un espejo de plata.

 Ensayo de Ensayo de Baljet Prueba de Tollens
hidroxamato férrico
reacción positiva para lactonas reacción positiva para lactonas
reacción positiva para
sesquiterpenicas con Baljet sesquiterpenicas con Tollens
lactonas sesquiterpenicas con
hidroxamato férrico

Ensayo con Reacción con

Ensayo con
Hidróxido de Sodio Dicromato de Potasio
Cloruro Férrico
reacción positiva
reacciónpara
positiva
compuestos
para taninos con
reacción positiva para compuestos
fenólicos dicromato
con hidróxido
de potasio
de sodio.
fenólicos con cloruro férrico

Reacción con
Acetato de Plomo

reacción positiva para taninos con

acetato de plomo

CROMATOGRAFIA
RESULTADOS

1. Con la ayuda de una bagueta se extrae una pequeña porción del extracto
seco de las Hojas de Manzanilla y se prepara una solución sobresaturada
con el etanol.

Disolver el extracto de Para obtener una buena muestra, el

manzanilla en 0.5 ml de etanol extracto tiene que estar muy concentrado

Preparar los capilares Extracto de hojas

Hacer 15 veces el
para el sembrado de manzanilla
sembrado de las hojas de
la manzanilla (+ a

2. En la cuba cromatografica con la fase móvil se espera que se realice el

recorrido dejando un espacio de 1cm en la parte superior de la placa. Poner
en la estufa para el secado y poder realizar el revelado.

Preparar en la cuba cromatografica observamos el recorrido de la placa

con cloroformo y acetona. en forma regular
 Luego volvemos a poner a la UV, pasamos con vapores de amoniaco
lo utilizamos para confirmar si hay presencia de flavonoides

3. Debido a que la MP no dio (+) en la práctica anterior en alcaloides, todo se

hace revelar con H2SO4 al 50 % (debido a que concentrado no asperja, por
eso se baja) para ayudar a encontrar moléculas esteroidales.

Luego preparamos el revelador de Revelamos toda la placa con el

H2SO4 10ml y agua homogenizamos revelador de H2SO4 para ayudar a
confirmar si hay presencia de esteroides

Llevamos de nuevo a la luz UV y

observamos que aparece otra mancha Llevamos a secar la placa a la
fosforescente arriba, posiblemente estufa para volver a poner en la luz
sean moléculas esteroidales UV
 RESULTADO FINAL:

Se observó por medio de la cromatografía en capa fina las manchas

características de las lactonas en la hoja de manzanilla y también 2 manchas que
posiblemente sean moléculas esteroidales. Asimismo, la presencia de 2
flavonoides en la muña cuando se reveló con H2SO4 al 50%.

CUESTIONARIO

1. Desarrollar otros métodos para la identificación de lactonas

Método de cromatografía de capa fina: Para la identificación de lactonas

se utiliza generalmente cromatofolios de aluminio de silicagel dotados con
indicadores UV a 254 nm.
se utiliza como reactivo revelador yodo, el cual forma complejos coloreados,
con los componentes orgánicos (con tonos amarillo-marrón). Asimismo,
existe otro reactivo revelador bastante utilizado, es el ácido sulfúrico, que
reacciona con los componentes orgánicos, produciendo manchas negras.
 Método cromatografía de columna: es un método general para la
identificación de sustancias, es utilizado para separación y purificación de
diferentes compuestos orgánica que se encuentren en estado sólido o
líquido.

Método de cromatografía de alta resolución: técnica utilizada para

separar sustancias, consiste en una fase estacionario que es la silica y la
fase móvil actúa como portador de la muestra.

INCLUYE TAMBIÉN LO SIGUIENTES

 Cloroformo: metanol
 Cloroformo: éter etílico
 Diclorometano: isopropanol
 Diclorometano: dioxano
 Tolueno: acetato de etilo
 Actualmente se puede analizar por cromatografía liquida de alta
 definición (HPLC)

Como agentes reveladores están:

SELECTIVOS
  Reactivo legal: (el reactivo revelador está constituida por: piridina,
nitropusiatode sodio 0.5% e hidróxido de sodio 2 N) las lactonas
insaturadas presentan una coloración rojo oscuro.
 Reactivo baljet: (el reactivo revelador tiene una mezcla similar en
volúmenes de ácido pícrico/etanol al 95% e hidróxido de sodio al 10%)
las lactonas insaturadas presentan una coloración naranja a rojo.

NO SELECTIVOS

 Ácido sulfúrico concentrado y calentamiento

 Vapores de yodo
 Luz ultravioleta a 254 nanómetros
 Permanganato de potasio al 1 %

2. Indicar las aplicaciones farmacológicas de las lactonas

sesquiterpénicas.

Drogas con lactonas sesquiterpénicas es usadas tradicionalmente como

antiinflamatorias, antibacterianas, antifúngicas, antiartríticas, antimigrañosa,
antiparasitarias, vermífugas, en soriasis, etc. Pocos estudios.
Interés potencial elevado: gran reactividad reacciona con los grupos tiólicos y
amínicos de diversas enzimas de forma irreversible (al reaccionar se dan las
actividades farmacológicas).

SANTONINA

Fue usada durante mucho tiempo como ascaricida, para eliminar toda clase de
gusanos y para tratar la retención de orina y la enuresis causada por atonía de
diferentes orígenes. Su uso fue abandonado debido a sus efectos tóxicos. Con
 el transcurrir de los años la investigación sobre esta STL demostró que poseía
actividad antinflamatoria, antipirética y analgésica (al Harbi et al., 1994)

ARTEMISININA

Se utilizan en el tratamiento de la malaria contra cepas resistentes de Plasmodium

falciparum. Se han informado otras actividades para este compuesto como la
actividad leishmanicida (Lezama Dávila et al., 2007; Ghaffarifar et al., 2015)

PARTENÓLIDO

Esta hierba es conocida con los nombres vulgares de feverfew o Santa María,
según el país, utilizada en Europa por centurias para el tratamiento de la migraña,
fiebre y artritis (Chaturvedi, 2011). El partenólido posee efecto anti proliferativo e induce
selectivamente la apoptosis en células cancerosas de melanoma, pecho, colon,
pulmón y leucemia entre otras.
 COSTUNÓLIDO

Se trata de un germacranólido presente en las raíces de Saussurea lappa, una

hierba de la medicina tradicional china con propiedades anticáncer y
antiinflamatorias.
Posee un amplio rango de bioactividades: antidiabética y antioxidante (Eliza et al., 2009, 2010),

antinflamatoria (Butturini et al., 2014), antiulcerogénica , anticlastogénica

(Zheng et al., 2016) (Cheon et al.,

2014) y una actividad anticáncer potencial.

DEHIDROLEUCODINA

Reduce la inflamación y el daño gastrointestinal inducido por etanol, protegiendo la

mucosa gástrica in vivo (Guardia et al., 2003) . Posee actividad inhibitoria del crecimiento de
las formas infectivas de T. cruzi y de promastigotes de Leishmania mexicana (Jiménez

Ortiz et al., 2005) ; Barrera et al., 2008). También se ha informado acerca de la actividad de este
compuesto sobre cepas multirresistentes de Pseudomonas aeruginosa (Mustafi et al., 2015).

HELENALINA

Las actividades biológicas descriptas para la helenalina (6) comprenden la

actividad citotóxica (Grippo et al., 1992), hepatoprotectora, antinflamatoria, antioxidante ( Lin et
al., 2014) y antimicrobiana frente a Staphylococcus aureus (Boulanger et al., 2007)

ÁRNICA

(Árnica montana)

TAPSIGARGINA
Útil en el tratamiento de enfermedades pulmonares, catarro, fiebre y para
afecciones reumáticas. Este compuesto demostró ser un poderoso liberador de
histamina y un co-carcinógeno promotor de cáncer de piel en ratones (Andersen et al., 2016)

ARGLABINA

La arglabina demostró actividad citotóxica promisoria en diferentes líneas celulares

y se obtuvieron derivados semisintéticos mediante la incorporación de átomos de
cloro, bromo y grupos amino y epoxi en la molécula que incrementaron su actividad
antitumoral. Uno de estos derivados, la dimetilamino arglabina, se encuentra en
ensayos clínicos Fase I y II para el tratamiento de cáncer de pulmón, hígado y
ovario (Lone et al., 2015)

Art emisi a glabella

 CINAROPICRINA

Es un agente antifotoenvejecimiento (Tanaka et al., 2013), muestra actividad citotóxica en

líneas celulares de leucemia (Cho et al., 2004) y posee actividad antiespasmódica (Emerdorfer et
al., 2005).

Cynara scolymus o Cynara cardunculus scolymus

3. Realizar las interpretaciones químicas de cada reacción

ENSAYO CON HIDROXAMATO FÉRRICO

El clorhidrato de hidroxilamina
más hidróxido de sodio y ácido
clorhídrico reacciona con la
lactona para formar el ácido
hidroxamico
El tricloruro ferrico reacciona con
el acido hidroxamico para formar
el complejo ferrico responsable
de la coloración violeta
 ENSAYO DE BALJET

El acido pícrico en medio básico reacciona con la

lactona para formar un complejo de color anaranjado

PRUEBA DE TOLLENS

El ion plata +1 al reaccionar con la lactona insaturada se reduce

a plata metálico que se observa como espejo de plata

PRUEBA DE TOLLENS: LACTONAS INSATURADAS

El nitroprusiato de sodio que presenta Fe +4 sufre una reducción a Fe +2 al

reaccionar con la lactona insaturadas observándose una coloración violeta.
 ENSAYO DE KEDDE

Fundamento. El ácido 3,5-dinitrobenzoico en medio básico reacciona con el doble

enlace de la lactona produciendo la oxidación de la lactona y la reducción de ella
formando el ácido 3,5-diaminobenzoico responsable de la coloración violeta

CONCLUSIONES

Las lactonas sequiterpénicas constituyen un importante grupo de

compuestos naturales con una variedad de actividades biológicas
interesantes cuya investigación química y farmacológica debe profundizarse
para poder así ser empleadas como prototipos para el desarrollo de nuevas
drogas útiles a la terapéutica.

Las lactonas sesquiterpénicas contienen activos de muchas plantas

medicinales de la familia Astaraceae, constituyen un grupo de terpenoides
C-15 con un anillo lactónico y contienen el agrupamiento α-metilén-γ-lactona
al hacerlas reaccionar con un reactivo producen coloraciones que permiten
observar formación de coloración dando a reconocer una lactona
determinada.
BIBLIOGRAFÍA

https://ri.conicet.gov.ar/bitstream/handle/11336/120348/CONICET_Digital_Nro.8907dbe1-fdce-40d9-
b45b-b1c67d12cdf0_A.pdf?sequence=2&isAllowed=y

https://www.studocu.com/pe/document/universidad-norbert-wiener/quimica-organica-iii/pre-informe-
extraccion-de-lactonas-sesquiterpenlactonas/15907595

https://www.studocu.com/pe/document/universidad-norbert-wiener/farmacia-y-bioquimica/practica-
12-sdffadfasdf/37811169

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