UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

CARRERA(S): Medicina Humana - Enfermería

PRÁCTICA DE LABORATORIO
CURSO: Química Orgánica
PROFESOR(A): Obregón Rodríguez, Yris del Pilar

INFORME DE
PRÁCTICA PRÁCTICA
N°: 6
TÍTULO: CROMATOGRAFÍA
INTEGRANTES:

 Parvina Huayanca, Margarita 100134055@cientifica.edu.pe - 100 %

 Sosa Quincho, Fernanda– 100115929@cientifica.edu.pe - 100 %

 Vargas Torres, Lizzet Xiomara 100106270@cientifica.edu.pe - 100 %

HORARIO DE PRÁCTICA

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: Domingo 16 de Setiembre de 2023

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: de Setiembre de 2023

LIMA - PERÚ
INTRODUCCION:

I. MARCO TEORICO:
 II. OBJETIVOS:

Identificación y purificación de mezclas complejas.

Aprender métodos para identificar y purificar mezclas de compuestos.
Validación de métodos de separación basados en diferencias en la distribución de compuestos
o velocidad de movimiento entre dos fases en estrecho contacto.

III. RESULTADOS Y EVALUACION:

1. Cromatografía en papel

Distancia
Compuesto A Compuesto B
(cm)

Muestra 7 3

Solvente 8 8

Rf 0.875 0.375

2. Cromatografía de capa fina (TLC)

Distancia
Compuesto A Compuesto B
(cm)

Muestra 6 4

Solvente 8 8

Rf 0.75 0.5
 EVALUACIÓN

Indique las partes un cromatograma desarrollado.

 Soporte : Sirve de apoyo o soporte de la fase
fija o estacionaria
 Muestra : Si tienen afinidad por la fase estacionaria,
se unirán a ella.
 Fase móvil : La fase que contiene los componentes de
la muestra,es disolvente o eluyente
 Fase fija o estacionaria: Es la mitad de la fase
móvil y también retiene la muestra.

¿La fase fija o estacionaria es la misma en la cromatografía de papel y en la de capa fina? Indique el nombre de
cada una de ellas.

 Cromatografía de papel: En este método, se utiliza papel como la fase estacionaria.

 Cromatografía en capa fina: Se aplica una capa fina de material absorbente (como gel de sílice o alúmina) sobre una
placa de vidrio, plástico o aluminio para que sirva como fase estacionaria.

¿Cuál de sus compuestos tiene mayor afinidad por la fase fija o estacionaria? ¿Cómo se determina esto?
¿Se pudo identificar el número de compuestos contenidos en su muestra problema? ¿Cómo?

Si un compuesto A tiene un mayor valor de Rf que Z, ¿esto es indicativo de que el primero tiene mayor afinidad
por la fase móvil o por la fase estacionaria? Explique.

Dibuje los cromatogramas desarrollados en papel y mediante cromatografía de capa fina (TLC). Con esta
información, calcule el valor de Rf en cada caso:
 3. Cromatografía en columna

PREGUNTAS QUE GUÍAN LA DISCUSIÓN

¿Cuál de los compuestos eluyó primero? ¿Por qué? Bosqueje su experimento y dibuje las estructuras químicas de sus
compuestos.

¿Cómo se podría comprobar que los compuestos eluidos son puros?

Las sustancias eluidas de una columna de cromatografía se consideran puras porque tienen un tiempo de elución definido.
Sin embargo, las mezclas de sustancias con muchas similitudes químicas pueden tener tiempos de elución cromatográfica
superpuestos similares.

¿La longitud y el diámetro de la columna cromatográfica son importantes para realizar la separación de mezclas o
no? Explique.

Sí, tanto la longitud como el diámetro de la columna son importantes para una separación eficaz de mezclas en
cromatografía. Estos parámetros afectan la solubilidad y la capacidad de separar los componentes de la mezcla.

¿Encontró alguna diferencia respecto a la cantidad de muestra sembrada entre las diferentes formas de cromatografía? ¿A
qué atribuye esto? Explique.
IV. DISCUSION:
 Manual de práctica de Química Orgán
ica

V. CUESTIONARIO N° 06

1. Esboce el esquema de un cromatograma desarrollado e indique cada una de sus partes.

2. ¿Cuáles son las diferencias entre la cromatografía de capa fina (TLC) y la de papel?
 Medios de separación:
I. TLC: en cromatografía de capa fina, el medio de separación es una capa fina de material adsorbente,
como gel de sílice o alúmina, recubierta sobre una placa de vidrio, plástico o aluminio.
II. Cromatografía en papel: El medio de separación es papel absorbente, generalmente celulosa, que
actúa como fase estacionaria.

3. ¿Cómo se puede determinar las posiciones de sustancias incoloras en un cromatograma?

Detección bajo luz ultravioleta : Muchos compuestos orgánicos y orgánicos naturales absorben la luz
ultravioleta a ciertas longitudes de onda. Utilizar una lámpara UV para iluminar el cromatograma puede
revelar la presencia de sustancias incoloras

4. ¿Cómo se determina que un solvente es ideal para realizar una separación cromatográfica
en una muestra desconocida?

 Conocer la naturaleza de la muestra

 Pruebas preliminares

 Polaridad del solvente

8 Autores: Fukusaki, A.;

Curihuamán, J.
 Manual de práctica de Química Orgán
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5. Mencione las aplicaciones potenciales que tendría la cromatografía en cada una de sus
especialidades.

 Cromatografía de Gases (GC) : Se describe la cromatografía de gases y

su acoplamiento con la espectrometría de masas, técnicas que
constituyen una herramienta potente para separar, identificar y
cuantificar los componentes volátiles y semivolátiles de mezclas
complejas
 Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia : Cuantificación de
medicamentos y metabolitos en la investigación farmacéutica.
Análisis de compuestos orgánicos en muestras ambientales y de aguas.

6. Explique el significado de los siguientes valores de Rf: 0.05, 0.5 y 0.98.

 Rf 0,05: significa que la sustancia se mueve muy poco en relación con la fase móvil. Esto indica que
la sustancia es muy polar
 Rf 0,5: significa que la sustancia se movió a la mitad de la distancia total recorrida por el solvente.Rf
0,98: significa que la sustancia se ha movido casi hasta el final de la placa de cromatografía o
columna

7. Uno de sus compañeros se encuentra realizando cromatografía de capa fina de una muestra
problema y nota que su valor de R f es de 0.1. ¿Está de acuerdo con que el solvente escogido
permite un buen desarrollo de la cromatografía o no? Justifique apropiadamente.

Un valor de Rf de 0.1 indica que la sustancia en cuestión ha recorrido una distancia

relativamente corta en la cromatografía en comparación con la distancia total recorrida
por el solvente (fase móvil). En este caso, la sustancia se ha retenido bastante en la fase
estacionaria y no ha avanzado mucho con la fase móvil.

8. Indague y explique con detalle cuales métodos utilizaría para localizar las bandas de
adsorción cuando se eluyen sustancias incoloras en una columna cromatográfica.
Reactivos de Detección Cromatográfica :
 UV-Vis : Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis) es uno de las más populares técnicas
analíticas porque es muy versátil y capaz de detectar casi cualquier molécula. Con
espectroscopía UV-Vis, la luz de UV-Vis se pasa a través de una muestra y se mide la
transmitancia de la luz por una muestra. De la transmitancia (T), la absorbancia se puede
calcular como A =-log (T).

9 Autores: Fukusaki, A.;

Curihuamán, J.
 Manual de práctica de Química Orgán
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 Fluorescencia : Si la sustancia incolora exhibe fluorescencia, se puede utilizar un detector de

fluorescencia para detectarla. La fluorescencia es un fenómeno físico en el que una molécula
emite luz cuantizada como resultado de la excitación de sus electrones a un estado de mayor
energía.

9. Señale algunas aplicaciones prácticas de la cromatografía en columna.

 Purificación de Compuestos Orgánicos

 Purificación de Biomoléculas

10. Realice un resumen breve acerca de la cromatografía líquida de alto desempeño o High
Performance Liquid Chromatography (HPLC).

La Cromatografía Líquida de Alto Desempeño (HPLC) es una técnica analítica avanzada

utilizada para separar, identificar y cuantificar componentes en una muestra líquida. Presenta
una alta precisión , detectores específicos y una cuantificación precisa .

VI. CONCLUSION

 La cromatografía es una técnica muy utilizada porque permite la separación,

identificación y determinación de componentes químicos en mezclas complejas.
Cabe señalar que ningún otro método de separación es tan potente y tan
utilizado.

 La cromatografía en capa fina tiene un proceso similar a la cromatografía en

papel con las ventajas de un desarrollo más rápido, una mejor separación y la
capacidad de elegir diferentes adsorbentes.

10 Autores: Fukusaki, A.;

Curihuamán, J.
 Manual de práctica de Química Orgán
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VII. BIBLIOGRAFIA

 Gutiérrez Bouzán, MC y Droguet, M. (2002). La cromatografía de gases y la espectometría de

masas: identificación de compuestos causantes de mal olor. Gutiérrez, MC; Droguet, M." La
cromatografía de gases y la espectrometría de masas: identificación de compuestos causantes
de mal olor". Boletín Intexter, julio de 2002, núm. 122, pág. 35-41.
https://upcommons.upc.edu/handle/2099/2733
 Ultraviolet-Visible (UV-Vis) Spectroscopy: Principle and Uses. (2018, septiembre 12).
Jove.com. https://www.jove.com/es/v/10204/ultraviolet-visible-uv-vis-spectroscopy-
principle-and-uses?language=Spanish
 Reactivos para la detección mediante fluorescencia. (s/f). Wakolatinamerica.com. Recuperado
el 24 de octubre de 2023, de https://www.wakolatinamerica.com/blog-reactivos/noticias-
wako/post/reactivos-para-la-deteccion-mediante-fluorescencia/



11 Autores: Fukusaki, A.;

Curihuamán, J.
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ica

12 Autores: Fukusaki, A.;

Curihuamán, J.
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13 Autores: Fukusaki, A.;

Curihuamán, J.
 CRITERIOS QUE SE TOMARÁN EN CUENTA
PARA LAEVALUACIÓN DE LOS INFORMES
DE
PRÁCTICA

COMPETENCIA DESCRIPCIÓN DEL NIVEL DE COMPETENCIA

Identifica un problema, especificando las variables que lo
Solución de Problemas N1 - SP1
constituyen.
CRITERIO LOGRADO EN PROCESO NO LOGRADO
Realiza la introducción teórica y
Realiza la Realiza la introducción Realiza la introducción teórica y
señala el (los) objetivo(s) de la
introducción teórica y señala el (los) señala el (los) objetivo(s) de la
práctica deficientemente, con
teórica y objetivo(s) de la práctica práctica incorrectamente, con
una cantidad importante de
objetivo(s) de correctamente. errores u omisiones menores.
errores y omisiones.
la práctica
3 - 2 puntos 2 – 1 punto 1 – 0 puntos
Describe incorrectamente el Describe deficientemente el
Describe el procedimiento
procedimiento experimental procedimiento experimental sin
Realiza el experimental mediante
mediante diagramas de flujo; se utilizar diagramas de flujo y/o se
procedimiento diagramas de flujo de modo
evidencian errores y omisiones evidencian abundantes errores y
experimental correcto y comprensible.
menores. omisiones.
4 – 3 puntos 3 – 1 puntos 1 - 0 puntos
Describe, analiza y discute los
Describe, analiza y discute Describe, analiza y discute los
resultados obtenidos
correctamente la totalidad resultados obtenidos
incorrectamente, pero se
de los resultados obtenidos deficientemente; existen
consideran las estructuras
considerando las estructuras omisiones y errores abundantes
Análisis y químicas, reacciones pertinentes
químicas, reacciones en las estructuras químicas y
discusión de y las citas bibliográficas
pertinentes y las citas reacciones pertinentes.
resultados correspondientes a lo largo de
bibliográficas Asimismo, las citas
todo el informe. Se evidencia
correspondientes a lo largo bibliográficas son inexistentes a
errores y omisiones teóricas
de todo el informe. lo largo de todo el informe.
menores.
5 – 4 puntos 4 – 1 puntos 1 – 0 puntos

Desarrolla entre el 90 – 100 Desarrolla entre el 50 – 90 % Desarrolla menos del 50 % del

Desarrollo de % del cuestionario. del cuestionario. cuestionario.
cuestionario
4 – 3 puntos 3 – 1 puntos 1 – 0 puntos
Realiza conclusiones Realiza conclusiones
Realiza conclusiones
Realiza apropiadas y lista al menos incoherentes y/o de escaso
incoherentes y/o sin asidero, y
conclusiones y CINCO referencias sustento, y lista al menos
no lista referencias confiables en
lista sus confiables en estilo CUATRO referencias
estilo Vancouver.
fuentes Vancouver. confiables en estilo Vancouver.
4 – 3 puntos 3 – 1 puntos 1 – 0 puntos

14 Autores: Fukusaki, A.;

Curihuamán, J.
15 Autores: Fukusaki, A.;
Curihuamán, J.