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UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

Facultad de Ciencias.
Departamento de Química
2017-1

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA


GRUPO 3

Nestor A. Quintero Cód.: 25492563 Jaider J. Rincón Cód.: 02245512


neaquinteroro@unal.edu.co jaijrinconcha@unal.edu.co

En la práctica de Cromatografía en capa fina, se utilizaron en un primer momento 6 cromatoplacas con Silica como
adsorbente que cubría la superficie de una placa de vidrio de 7,8 cm x 2,5 cm. Se trabajó con 4 patrones seleccionados
(2, 3, 4, 5) que son: Sudan IV, m-Nitroanilina, Rojo de metilo, p-Nitrofenol, y una solución problema dada, con dos
patrones desconocidos disueltos. En cada una de las cromatoplacas, se traza una línea en lápiz de extremo a extremo
a una altura de 1,50 cm del borde inferior, y sobre esta se realiza la siembra de la muestra problema (No. 5) con un
capilar. Además, de la muestra problema se siembran 2 patrones en cada cromatoplaca, en el siguiente orden (2,3),
(4,5), de este modo se obtienen tres pares de cromatoplacas iguales. Posteriormente, se construyen 3 cámaras con 1
ml de un disolvente poco polar, así: Cámara No. 1: Tolueno, Cámara No. 2: Diclorometano, Cámara No.3: Metanol, se
tapa cada cámara con un vidrio superior y se espera un minuto para que el sistema se estabilice, luego se sumerge en
cada cámara por el borde inferior un par de cromatoplacas preparadas y unidas entre sí por el respaldo del soporte
de vidrio sin recubrimiento.
Al comenzar la elución, las moléculas del solvente (fase móvil) competirán con los solutos por su adsorción en la
superficie del granulo de adsorbente. El compuesto adsorbido más débilmente, será más fácil de desorber, y el solvente
lo remueve, arrastrándolo, a medida que avanza sobre la fase estacionaria, esto se evidencia en la figura 1.

Figura 1. Resultados para las 6 primeras placas. De izq. A der: con Tolueno, Diclorometano, metanol

Para poder medir el desplazamiento alcanzado por cada componente de la mezcla y por los patrones, con una medida
que resulte independiente del tiempo y de las dimensiones de la placa, se utiliza el concepto de Relación de frente
(Rf ), y se lo define como el cociente entre la distancia recorrida por el compuesto y la distancia recorrida por el solvente
de desarrollo [1].

𝑏 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑦


𝑅𝑓(𝑦) = =
𝑎 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒
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De la definición se desprende que el valor de (Rf ) es siempre menor o igual a la unidad. Los valores de (Rf ) para los
tres pares de cromatoplacas se presentan en la tabla No. 1.

COMPONENTE
Muestra problema
SOLVENTE
Sustancia Sudan IV M-Nitroanilina Rojo de metilo P-nitrofenol
Sustancia 2
1
0,43 0,24 0,43 0,26 - -
Tolueno
0,43 0,00 - - 0,00 0,12
0,67 0,00 0,69 0,00 - -
Diclorometano
0,60 0,00 - - 0,00 0,22
0,78 0,78 0,78 0,78 - -
Metanol
0,79 0,00 - - 0,90 0,79
Tabla 1. Rf determinados para las 6 primeras cromatoplacas.

En el análisis del resultado de los Rf determinados, se empieza por el poder adsorbente de la fase estacionaria, que
depende de su preparación. Los adsorbentes para capa delgada tienen cantidades variables de ligante, en este caso
la silica tiene un 13% de CaSO4, que permite mayor adherencia al soporte. La silica tiene un pH = 7 y la disminución
del poder adsorbente frente a muestras orgánicas se debe a que numerosos “sitios activos” de su superficie están
bloqueados por moléculas de agua [1]. El resultado de la difusión del soluto en el adsorbente es el ensanchamiento
de las manchas observadas en la capa, por esto, resulta importante que los puntos de siembra sean pequeños. Otro
factor importante es la homogeneidad de la capa, una capa irregular ocasionara recorridos más rápidos (en zonas
delgadas), o más lentos (zonas de mayor espesor), implicando un valor de Rf aleatorio e irreproducible, este caso se
ejemplariza en la cromatoplaca C2 (4,5) de la figura 1, en la cual se evidencia irregularidades en la superficie.

Como criterio de identificación se dice, que si la sustancia problema y el patrón con que se la compara en la misma
corrida cromatografíca dan valores de Rf distintos, seguro no se trata del mismo compuesto. En cambio, si dan el
mismo valor de Rf, no se puede asegurar que sean idénticas [1]. En nuestro caso de experimentación, se puede afirmar
que si la sustancia problema y el patrón comparado en la misma cámara, tienen valores de Rf iguales, es el mismo
compuesto, puesto que se conoce que la muestra problema está compuesta por dos de los cuatro patrones utilizados
experimentalmente.

Las fuerzas con que los solutos se fijan al adsorbente resultan de la polaridad de los mismos. El índice de polaridad de
los solventes utilizados son: Tolueno 2.4, Diclorometano 2.1, Metanol 5.1. [2]. Un solvente de desarrollo muy polar,
como el metanol, tiene una fuerza de elución grande, y remueve a su paso a la muestra, que ya no queda ligada al
adsorbente, como se evidencia en la figura 1. Un desarrollo en el que dos o más componentes corren con el frente
del solvente, no sirve a los fines separativos, este es el caso de la cámara No. 3, en donde se descarta el metanol como
disolvente. En la cámara No. 2 con un solvente de polaridad intermedia entre tolueno y metanol, se evidencia que los
patrones 4 y 5 (Rojo de metilo y p-nitrofenol) obtienen un Rf muy pequeño comparado con la muestra problema,
pero el patrón 2 (Sudan IV), obtiene un Rf muy cercano al de la muestra y se infiere que los patrones existentes en la
muestra problema son de baja polaridad. En la cámara 1, con una atmosfera de Tolueno, que tiene el menor índice
de polaridad de los solventes utilizados, en esta se evidencia una separación de los componentes de la muestra
problema, además los Rf de los patrones 2 y 3, son muy similares a los Rf de la muestra.
Teniendo en cuenta el anterior resultado y como sugerencia de la profesora, se vuelve a repetir la corrida en la cámara
No.1 con tolueno.
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Figura 2. Comparación de la duplicación de la corrida de los patrones 2,3 y 4,5 en la cámara 1.

En la duplicación de la corrida cromatografica en la cámara 1, de los patrones 4 y 5 que se muestra en la figura 2, el


patrón 4 tiene mayor polaridad que el disolvente y por ende no se desplaza del punto de siembra, como si lo hacen
los componentes de la muestra problema; Para los patrones 2 y 3 se evidencia un desplazamiento muy similar con los
componentes de la muestra problema. El componente rojo de la mezcla tiene un Rf de 0.39 comparado con el Rf del
patrón 2 de 0.47, y el componente amarillo de la mezcla tiene un Rf de 0.24 comparado con el Rf del patrón 3 de
0.27.

De los resultados obtenidos del duplicado de la cámara 1, aunque no se obtuvo una separación satisfactoria
esperada, se infiere que la muestra problema No. 5, estaba compuesta por Sudan IV y m-Nitroanilina.

BIBLIOGRAFIA

[1] Galagovsky, L. Química orgánica, Fundamentos teorico-practicos. Quinta edición. Editorial Universitaria de
Buenos Aires. Buenos Aires. pag 128, 130, 137
[2] Stahl, E. Editor. 1970. Thin - layer Chromatography. A Laboratory Handbook, Second Edition, Fully revised and
expanded. Springer – Verlag Berlin, Heilderberg, New York. Pag 90-91.