Informe Practica 2

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO LAB E201- BLOQUE E
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO
INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II
I. DATOS GENERALES
INFORME DE PRÁCTICA Nº 2
PERIODO ACADÉMICO 2022 – 2S
HORARIO DE LA JUEVES 10H00 a 13H00
PRÁCTICA:
FECHA DE REALIZACIÓN Segunda semana 17 de noviembre de 2022
DE LA PRÁCTICA:
FECHA DE ENTREGA DEL Tercera semana 24 de noviembre de 2022
INFORME DE LA
PRÁCTICA:
NOMBRE DE LA DOCENTE Dra. María Angélica Barba Maggi. Mgs.
CURSO Tercer Semestre
PARALELO A
GRUPO Nº 3
NOMBRES Y FIRMAS DE APELLIDOS Y CÉDULA FIRMA
LOS ESTUDIANTES NOMBRES
PARTICIPANTES COMPLETOS
Illicachi Tene 0650162829
Karen Fernanda
Jaya Guilcapi 0604505560

Vani Yadira
Jimenez 2300623754
Verdezoto Saul
Eduardo
Llomitoa 0550367221
Guaranda Brayan
Mauricio
López Muñoz 1500987878
Matheo Efrain
Ludeña Durán 2200336622

Nathaly Dayana
Martinez Rivera 0604989590

Josue Isaias
OBSERVACIONES
(espacio exclusivo para la
docente)
CALIFICACIÓN
(espacio exclusivo para la
docente)
LUGAR DE LA PRÁCTICA LAB E201- BLOQUE E Facultad de Ciencia de la Salud
Soporte material en el Aula virtual Bioquímica II
https://moodle.unach.edu.ec/course/view.php?id=34326#sectio
n-1
UNIDAD SÍLABO No. 1
RESULTADO DE Interpreta la base estructural, propiedades, funciones y
APRENDIZAJE clasificación de los compuestos nitrogenados, para analizar la
importancia biomédica en el metabolismo celular - general y la
generación de patologías, con base científica y sustento
axiológico
II. DESARROLLO
1. TÍTULO DE LA PRÁCTICA Determinación cuantitativa de compuestos nitrogenados no
proteicos: Ácido Úrico, Urea, BUN, Amoníaco, Creatinina,
Clearance de creatinina, Bilirrubinas
2. OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GENERAL Analizar compuestos nitrogenados no proteicos: Urea, BUN,
Amonio, Ácido úrico, Creatinina, Clearance de creatinina,
Bilirrubina, mediante la aplicación de métodos de análisis
cuantitativos.
2.2 OBJETIVOS EPECÍFICOS: 2.2.1 Aplicar el método enzimático colorimétrico
Ureasa/salicilato de punto final para la cuantificación
de Urea, obtener resultados e interpretar la
importancia biomédica.
2.2.2 Aplicar el método enzimático UV para la
cuantificación de Amoniaco, obtener resultados e
interpretar la importancia biomédica.
2.2.3 Aplicar el método enzimático colorimétrico PAP de
punto final para la cuantificación de Ácido úrico,
obtener resultados e interpretar la importancia
biomédica.
2.2.4 Aplicar el método colorimétrico – Reacción de Jaffé
de tiempo fijo para la cuantificación de Creatinina y la
depuración de Creatinina, obtener resultados e
2.2.5 Aplicar el método QCA para cuantificar Bilirrubina
Total, directa e indirecta, obtener resultados e
3. 3. MATERIALES – REACTIVOS – EQUIPOS:
➢ 4 gradillas
➢ 20 tubos de ensayo pequeños (trae el grupo)
➢ 1 pipeta semiautomática de 100 -1000 ul
➢ 1 pipeta semiautomática de 10 -100 ul
➢ 1 vaso de precipitación de 100 ml
➢ 1 cronómetro
➢ 1 probeta de 1000 ml
➢ Kit de reactivos para cuantificar urea, amoníaco, ácido úrico, creatinina, bilirrubina total y
directa
➢ Centrífuga
➢ Vórtex
➢ Espectrofotómetro
➢ Baño Térmostatizado
MATERIALES EN EQUIPO
➢ 2 Franelas de 40 cm cada una
➢ 1 frasco de cloro pequeño
➢ 1 frasco estéril (para torundas de algodón, pueden ser recipientes plásticos de boca ancha)
➢ Torundas de algodón
➢ 1 frasco de alcohol
➢ 5 gasas estériles
➢ 1 frasco de jabón líquido
➢ 1 dermográfico (o marcador de material de vidrio)
➢ 2 cepillos para lavar tubos de ensayo (pequeños de 5 ml y grandes de 10 ml)
➢ 1 par de guantes de uso doméstico
➢ 1 frasco con detergente (para lavado de materiales)
➢ 20 puntas azules
➢ 20 puntas amarillas
➢ 1 paquetes de toallas desechables
➢ 1 tubo al vacío de tapa roja (sin anticoagulante)
➢ 1 Aguja vacuntainer tapa verde
➢ 1 vendita o curita
➢ 1 Torniquete
➢ 1 Cápsula
➢ 1 jeringuilla
➢ 1 frasco alcohol antiséptico
MUESTRA: ORINA DE 24 HORAS RECOGIDA POR UN ESTUDIANTE
SELECCIONADO EN CADA EQUIPO Y MUESTRA SANGUÍNEA (SUERO). La sangre se
recoge en el laboratorio.
MATERIALES INDIVIDUALES
➢ 1 mascarilla
➢ 1 par de guantes de manejo de látex
➢ 1 cobertor de cabello (gorra para laboratorio)
➢ 1 mandil con el nombre del estudiante y sello de la universidad - Carrera de Laboratorio
Clínico
➢ 1 toalla de mano para uso personal
4. HERRAMIENTAS DIDÁCTICAS:
Materiales, reactivos, equipos de laboratorio, muestras y/ó especímenes biológicos, aula
virtual, Microsoft teams. recursos multimedia imágenes, videos, texto en guía de práctica,
registros de datos de práctica, informe de práctica, rúbrica de evaluación.
5. FUNDAMENTO TEÓRICO:
Creatinina
La creatinina se forma en el músculo a partir del fosfato de creatina por medio de deshidratación no
enzimática irreversible, y pérdida de fosfato; la excreción de creatinina en orina de 24 h es
proporcional a la masa muscular y participa la glicina, arginina y metionina participan en la
biosíntesis de creatina. La síntesis de creatina se completa mediante metilación del guanidoacetato
por la S-adenosilmetionina. (1)
Figura 1.Biosíntesis de la cretina y creatinina (1)
Creatinina Tasa filtración glomerular

Su producción es constante y se filtra libremente al túbulo renal, la cantidad que entre al túbulo
renal depende de la tasa de filtración glomerular y la concentración de creatinina.
Es una sustancia que no se reabsorbe y su secreción es despreciable y el aclaramiento plasmático de
la creatinina.
La concentración plasmática de la creatinina no depende de la producción porque es constante sino
depende de la cantidad de filtración glomerular
Se concluye que cuando la concentración plasmática de creatinina se encuentra aumentada, la tasa
de filtración glomerular esta disminuida la creatinina. (2)
Amoniaco
El amoníaco (NH3) amoniaco producido por las bacterias entéricas y que se absorbe hacia la sangre
venosa porta, y el amoniaco producido por los tejidos, se eliminan con rapidez de la circulación por
medio
del hígado, y se convierten en urea. La principal fuente de difusión de amoníaco es el tracto
gastrointestinal. (1)
Ácido úrico
El ácido úrico es un producto de desecho normal que se produce cuando el cuerpo descompone
sustancias químicas llamadas purinas. Las purinas son sustancias que se encuentran en las células
del cuerpo y también en algunos alimentos. Los alimentos con altos niveles de purinas incluyen el
hígado, las anchoas, las sardinas, los frijoles secos y la cerveza. (3)
El ácido úrico es el producto final del catabolismo de las purinas en humanos producido mediante la
acción enzimática de la xantino oxidorreductasa, el ácido úrico es principalmente excretado por los
riñones y su concentración plasmática depende del pH de la orina, como también de otros factores
tales como el volumen de orina, el volumen corporal, la función renal, dieta y el uso de ciertos
medicamentos, entre otros
La mayoría del ácido úrico se disuelve en la sangre y luego va a los riñones. Desde ahí, sale del
cuerpo a través de la orina. Si el cuerpo produce demasiado ácido úrico o no libera suficiente en la
orina, puede formar cristales que se forman en las articulaciones es inducida por cristales. Esto se
conoce como gota. La gota es una forma de artritis que causa inflamación dolorosa en y alrededor
de las articulaciones. Los niveles de ácido úrico altos también pueden causar otros problemas,
como cálculos renales e insuficiencia renal. (3)
Urea
Biosíntesis de la urea
Ocurren en los siguientes pasos:
1. Transaminación: todos los aminoácidos comunes, excepto la lisina, treonina, prolina e
hidroxiprolina participan en la transaminación. La transaminación no está restringida a grupos α-
amino, funcionan en la biosíntesis de aminoácidos (4)
2. Desaminación oxidativa de glutamato: cuando el grupo amino de un aminoácido se libera como
amoníaco, recibe el nombre de desaminación. De particular importancia es la desaminación
oxidativa. En esta reacción, el grupo amino es liberado en forma de amoníaco y se genera un 2-
oxoácido.
3. Transporte de amoniacos: los iones amonio que se generan durante el metabolismo celular o
bacteriano mayoritariamente no circulan libremente disueltos en la sangre, sino que lo hacen en
forma de aminoácidos y que son glutamina y alanina. (4)
El amonio, derivado principalmente de la desaminación de los grupos -amino de los aminoácidos
es muy tóxico y dañino especialmente para el sistema nervioso.
4. Reacciones del ciclo de la urea: la síntesis de urea se realiza en el denominado ciclo de la urea,
mediante un conjunto de enzimas que actúan coordinadamente. Aunque muchas de esas enzimas
suelen estar presentes en la mayor parte de los tejidos de los mamíferos, el ciclo funciona
únicamente en el hígado. En la producción de urea a partir de NH4+ intervienen cinco reacciones
enzimáticas, dos en la matriz mitocondrial y tres en el citosol. (1)
Reacciones que transcurren en la matriz mitocondrial:
• Síntesis de carbamilfosfato.
• Síntesis de citrulina.
• Síntesis de argininosuccinato.
• Rotura de argininosuccinato.
• Hidrólisis de arginina.
BUN
El nitrógeno ureico en sangre mide la cantidad de nitrógeno ureico en la sangre. La urea es un
producto de desecho que su cuerpo produce al descomponer las proteínas. Los riñones sanos
extraen la urea de la sangre
Así mismo el contenido de nitrógeno ureico en el torrente sanguíneo (BUN) (Blood urea nitrógeno,
por sus siglas en inglés) es la cantidad de nitrógeno circulando en forma de urea en el torrente
sanguíneo, también informa la situación renal. Una persona adulta tiene alrededor de 8.0 - 20.0 mg
de nitrógeno ureico por 100 ml de sangre. (1)
BUN (mg/dl) = Concentración de urea mg/(dl*0.467)
C urea (mg/dl) = BUN*2,14
Bilirrubina
La bilirrubina se considera como un marcador de función hepática y a la par de otras
determinaciones bioquímicas (transaminasas, fosfatasa alcalina y gama glutamil transferasa entre
otras).
La bilirrubina sucede principalmente en el hígado. Se divide en tres procesos:
a. Captación de bilirrubina por las células parenquimatosas del hígado

En el hígado, la bilirrubina se separa de la albúmina y se capta en la superficie sinusoidal de los
hepatocitos En el hígado, la bilirrubina se separa de la albúmina y se capta en la superficie
sinusoidal de los hepatocitos
b. conjugación de bilirrubina con glucuronato en el retículo endoplásmico

Al añadirle moléculas de ácido glucurónico, los hepatocitos convierten la bilirrubina Al añadirle
moléculas de ácido glucurónico, los hepatocitos convierten la bilirrubina
La enzima está localizada principalmente en el retículo endoplásmico, usa ácido UDP-glucurónico
como donador de glucuronosilo, y se denomina bilirrubinaUGT. El monoglucurónido de bilirrubina
es un intermediario, y después se convierte en el diglucurónido
3) secreción de bilirrubina conjugada hacia la bilis.
La bilirrubina conjugada se secreta hacia la bilis por medio de un mecanismo de transporte activo
MRP-2 también llamada transportador de anión orgánico multiespecífico (MOAT)
6. MÉTODOS CUANTITATIVOS
(enzimáticos, colorimétricos y volumétricos)
7. 7. PROCEDIMIENTO – FUNDAMENTO:
Se trabajará con una muestra de sangre recogida del mismo estudiante en tubo de tapa roja
(para separar suero) y la orina de 24 horas (llevar el espécimen completo al laboratorio para
cada grupo de trabajo).
RECOLECCIÓN DE MUESTRA DE ORINA DE 24 HORAS
A. Rotular con apellidos y nombres del paciente un recipiente completamente limpio de un
volumen aproximado de 3 litros
B. No deberá la persona estar en los días de menstruación
C. El primer día de la recolección se elimina la primera orina de la mañana en el inodoro
para que se vacíe la vejiga, se anotará en la etiqueta la fecha y hora de eliminación.
D. A partir de la segunda micción de la orina se recolectará en el recipiente durante todo el
día, noche y madrugada.
E. Se debe recoger la orina hasta las 24 horas siguientes de iniciada la recolección, se
marcará en la etiqueta la última hora de recolección.
F. Cerrar herméticamente el recipiente el llevar al laboratorio el día del examen
G. Se debe recoger la orina directo al frasco, si esto no es posible se recibirá la orina en un
recipiente completamente limpio y se transfiere al recipiente etiquetado.
ANALIZAR LOS MÉTODOS Y VIDEOS EN EL AULA VIRTUAL Y APLICARLOS EN EL
TRABAJO PRESENCIAL PARA CUANTIFICAR COMPUESTOS NITROGENADOS NO
PROTEÍCOS:
A. Cuantificación de Urea: Método GLDH completamente enzimático/Procedimiento partida
con muestra
B. Cuantificación de Amoniaco Enzimático UV
C. Cuantificación de Ácido Úrico: Método PAP enzimático colorimétrico
D. Cuantificación de Creatinina: Reacción de Jaffé, fotométrica colorimétrica
E. Cuantificación de Bilirrubina: Método Jendrassik – Grof
https://youtu.be/cLa1qqZyXEI (CUANTIFICACION DE UREA)
https://youtu.be/VXfYHedz9Eg (CUANTIFICACION DE AMONIACO)
https://youtu.be/vDTZkSy8UYs (CUANTIFICACION DE ÁCIDO ÚRICO)
https://youtu.be/_YRCpmSke7s (CUANTIFICACION DE CREATININA)
https://youtu.be/khei5dy3-mk (CUANTIFICACION DE BILIRRUBINA)
8. REGISTRO DE DATOS DE LA PRÁCTICA (ORIGINAL ANEXO):
9. 9. CÁLCULOS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
A) CUANTIFICACIÓN DE UREA
DATOS
Muestra 10µl
Longitud de Onda 600 nm
Concentración del estándar, calibrador o 50mg/dL
patrón Urea mg/dl
Absorbancia del Blanco 0,003 µl
Absorbancia del Estándar A1: 1,012
Absorbancia de la Muestra (suero) A1: 0,524
Valor referencial Urea en mg/dl (suero) 15-40 mg/dL
CÀLCULOS
Amuestra
x Cpatrón=mg/dL Urea
Apatrón
0,524
x 50mg/dL= 𝟐𝟓, 𝟖𝟖𝟗mg/dL Urea=Rango normal
1,012
CÁLCULO DEL BUN

DATOS
Factor
Concentración de Urea mg/dl 25,889mg/dL Urea
Cálculo Concentración BUN 25,872 C.urea mg/d/L
Interpretación de Resultado Sobrepasa su valor del rango
establecido
BUN (mg/dl) = Concentración de urea mg/dl * 0,467

BUN (mg/dl)= 25,889mg/dL Urea x 0,467 =12,090 BUN mg/dl
C urea (mg/dl) = BUN * 2,14
C urea (mg/dl)= 12,090 BUN mg/dl x 2,14= 25,872 C.urea mg/d/L
B) CUANTIFICACIÓN DE AMONÍACO
DATOS
Muestra 100ml
Longitud de Onda 340nm
Concentración del estándar, calibrador o 400µl
patrón Amoníaco mg/dl
Absorbancia del Estándar A1: 0,180 A2: 0,172
Absorbancia de la Muestra (suero) A1: 0,095 A2:0,093
Valor referencial Amoníaco en mg/dl -10-47 µmol/L
(suero) -0,17-0,80 µg/ml
-0,017-0,080 mg/dL
CÀLCULOS
CONCENTRACIÓN DEL AMONÍACO =

(Mu𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎𝐴1 − Mu𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎𝐴2 ) − (Blanco𝐴1 − 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜𝐴2 )
x Conc. estándar
(Estánda𝑟𝐴1 − Estándar𝐴2 ) − (Blanco𝐴1 − 𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜𝐴2)
(0,095−0,093)−(0,002−0,002)
Conc. del amoníaco = (0,180−0,172)−(0,002−0,002) x 0,39ug/dL=
0,097 ug/dL de amoníaco
C) CUANTIFICACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO

DATOS
Muestra 1000µl
Concentración del estándar, calibrador o 6 mg/dL
patrón Ácido Úrico en mg/dl
Absorbancia del Estándar 0,208 µl
Absorbancia de la Muestra (suero hombre) 0,213 µl
Valor referencial mg/dl suero 3,5-7,2 mg/dL
CÀLCULOS
Amuestra
x Cpatrón=mg/dL Ácido úrico
Apatrón
0,213
x 6mg/dL= 6,144mg/dL Ácido úrico=Rango normal
0,208
D) CUANTIFICACIÓN DE CREATININA
DATOS
Volumen de orina 24 horas 900 ml
Muestra 100µl
Concentración del estándar, calibrador o 2 mg/dL
patrón Creatinina mg/dl
Absorbancia del Estándar A1: 0,078 A2:1,189
Absorbancia de la Muestra Suero A1:0,068 A2:1,911
Absorbancia de la Muestra Orina de 24 A1:0,159 A2:0,519
horas
Valor referencial Creatinina en mg/dl suero 0,70-1,20 mg/dL
Valor referencial Creatinina en mg/dl orina: 11-20mg/kg
,Valor Referencial de la Depuración de 97-137 mL/min
creatinina
CALCULOS
(𝐴2 −𝐴1) 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

x Cpatrón=mg/dL Creatinina
(𝐴2 −𝐴1 )𝑃𝑎𝑡𝑟ó𝑛
(1,911−0.068)
x 2mg/dL= 3,317 mg/dL Creatinina Suero
(1,189−0,078)
(0,519−0,159)
x 2mg/dL= 0,648 mg/dL Creatinina Orina de 24h
(1,189−0,078)
Depuración de la prueba
mg creatinina/dl ORINA x ml24h

mL/min=𝑚𝑔 𝑐𝑟𝑒𝑎𝑡𝑖𝑛𝑖𝑛𝑎/𝑑𝐿 𝑠𝑢𝑒𝑟𝑜 𝑥 1440𝑚𝑖𝑛
3,317mg creatinina/dL ORINA x 900ml de orina de 24h

mL/min= =3,199mL/min
0,648 𝑚𝑔 𝑐𝑟𝑒𝑎𝑡𝑖𝑛𝑖𝑛𝑎/𝑑𝐿 𝑆𝑈𝐸𝑅𝑂 𝑥 1440𝑚𝑖𝑛
E) CUANTIFICACIÓN DE BILIRRUBINA
DETALLE DATOS - RESULTADOS

BILIRRUBINA TOTAL
Longitud de onda 546 nm
Factor para el cálculo Bilirrubina directa (mg/dl) 1,0 mg/dL
Absorbancia del Blanco 0,003µl
Absorbancia de la muestra 0,198 µl
Valor referencial mg/dl suero (adultos) 1,0 mg/dL
BILIRRUBINA DIRECTA
Longitud de Onda 546 nm
Factor para el cálculo Bilirrubina directa (mg/dl) 0,25 mg/dL
Absorbancia de la muestra 0,069 µl
Valor referencial mg/dl suero (adultos) y otras 0,25mg/dL
edades
CALCULOS
Bilirrubina Total
Abs.PR x 10,8= mg bilirrubina total /dL
0,198mg/dL x 10,8 = 2,13 mg bilirrubina total/dL

Bilirrubina Directa
Abs.PR x 14,4 = mg bilirrubina directa/ dL
0,069mg/dL x 14,4=0,993 mg bilirrubina directa/dL
10. CUESTIONARIO/TAREAS/PREGUNTAS:
11. Establezca la importancia Biomédica del estudio los compuestos Nitrogenados No

proteicos: Ácido Úrico, Urea, Creatinina y Amoníaco.
La importancia más grande que tiene su determinación es que cualquier elevación en suero puede
ser señal muy importante de un trastorno renal ya que el riñón es el órgano de nuestro cuerpo
encargado de eliminarlos. (1)
La urea se sintetiza en el hígado a partir de C02 y amoniaco producido por la desaminación de
aminoácidos; así es como se elimina la mayoría del exceso de nitrógeno en nuestro cuerpo; la
urea pasa a la sangre y se excreta por el glomérulo, siendo reabsorbida en parte por los túbulos
renales. (1)
La creatinina es un compuesto nitrogenado que no presta ninguna función útil en nuestro
organismo ya que es un producto de desecho del metabolismo del fosfato de creatinina, es el
último paso de una vía catabólica y gracias a esto es que es muy importante para medir el grado
de deterioro de la funcionalidad renal, no depende de la dieta, no es afectada por la diuresis ni por
el metabolismo, por lo que sus valores en suero son muy constantes; todos estos factores no los
tiene el nitrógeno ureico; la determinación tanto de la creatinina como del nitrógeno ureico son
las principales fuentes de información que tiene el laboratorio para valorar la función renal, la
creatinina es filtrada por la membrana glomerular y no es excretada ni reabsorbida por los túbulos
renales. (1)
12. Explique el fundamento de cuantificación los compuestos nitrogenados no proteicos:

Ácido Úrico, Urea, Creatinina y Amoníaco.
En el hombre, el producto final de la degradación de bases púricas es el ácido úrico. De la
degradación del ADN y ARN en las células se producen nucleótidos. La degradación de
nucleótidos de purina ocurre principalmente en hígado. En general los nucleótidos de purina son
sometidos a hidrólisis catalizada por nucleotidasas existentes en las células, que dejan libres los
nucleósidosadenosina y guanosina. (2)
La adenosina por acción de la enzima adenosina desaminasa forma inosina. Posteriormente, por
acción del nucleósido fosforilasa, la inosina es separada y libera hipoxantina. La hipoxantina es
oxidada a xantina por acción de la enzima xantina oxidasa. Finalmente, la xantina es oxidada
nuevamente por la xantina oxidasa y se forma ácido úrico. (2)
La creatina es una sustancia presente en músculo esquelético, miocardio y cerebro, tanto libre
como unida a fosfato (fosfocreatina o creatinafosfato). A partir de la fosfocreatina se forma la
creatinina por medio de la deshidratación no enzimática irreversible y pérdida de fosfato. La
excreción de creatinina en orina es proporcional a la masa muscular. La medición de la creatinina
se utiliza como un marcador de la función renal. (2)
El Amoníaco es un producto tóxico del metabolismo del nitrógeno que se debe quitar de nuestro
cuerpo. El ciclo de la urea o el ciclo de la ornitina convierten exceso de amoníaco en la urea en
las mitocondrias de las células de hígado. La urea forma, después entra en la secuencia de la
sangre, es filtrada por los riñones y excretada final en la orina. (3)
Desde el punto de vista bioquímico, el ciclo de la urea (CU) es una vía metabólica de varios
pasos, que resulta en la conversión de dos moléculas de amonio y una de bicarbonato en urea. (3)
13. En qué consiste y como se calcula el BUN e indique la importancia biomédica

La prueba de nitrógeno ureico en sangre (BUN, por sus siglas en inglés) mide la cantidad de
nitrógeno ureico en la sangre. La urea es un producto de desecho que su cuerpo produce al
descomponer las proteínas. Los riñones sanos extraen la urea de la sangre. Cuando los riñones n
La mayor parte del cuerpo está conformada por agua. Riñón Nefrones Metabolitos tóxicos:
amoníaco, urea y compuestos nitrogenados funcionan bien, la concentración de BUN aumenta.
(4)
Orina
Filtran 125 mL de agua. El volumen normal de orina (adulto) 400 a 2,000 mL. El volumen de
orina puede variar en pacientes con: - Poliuria volumen urinario (2,5 L/24 horas en adultos) -
Oliguria volumen urinario (200 mL/24 horas en adultos) (5)
Urea
Producto del metabolismo proteico, sintetizada en el hígado. Principal compuesto de desechos
nitrogenado de la orina. Su peso molecular 60 KDa. El 90% se elimina por filtración glomerular y
luego se reabsorbe el 40 – 70% en el túbulo proximal acompañando al agua. (5)
Cálculos (Suero, plasma)
Muestras superiores a 500 mg/dL de urea deben diluirse 1:2 con solución salina y repetir el
ensayo. Multiplicar los resultados por 2.
Importancia
Una prueba de BUN se hace para: Ver si sus riñones están funcionando normalmente. Ver si su
enfermedad renal está empeorando. Ver si el tratamiento de su enfermedad renal está
funcionando. (6)
Una prueba de BUN se hace para:
• Ver si sus riñones están funcionando normalmente.
• Ver si su enfermedad renal está empeorando.
• Ver si el tratamiento de su enfermedad renal está funcionando.
• Verificar si hay una deshidratación grave. La deshidratación generalmente hace que los
niveles de BUN se eleven más que los niveles de creatinina. Esto causa una proporción
elevada entre el BUN y la creatinina. (6)
14. Esquemáticamente represente el metabolismo de los compuestos (ácido úrico, urea,

creatinina, amonio)
15. En qué consiste y como se realiza el Clearance de la creatinina, indique la importancia

biomédica.
El aclaramiento de la creatina consiste en medir las concentraciones de creatina tanto en sangre
como en la orina de 24 horas, para calcular la cantidad de creatina se ha eliminado de la
circulación al pasar por el riñón hacia la orina, permitiendo este cálculo la evaluación global de la
sangre que se ha filtrado a nivel renal en las 24 horas.
Se debe realizar el aclarado con los datos del cálculo glomerular (ml/min) esto dividido para la
creatinina en orina y creatinina en suero y multiplicado por la diuresis (ml/min)
La determinación de la creatinina en suero sirve para el diagnóstico y el control de enfermedades
renales agudas y crónicas, así como para la estimación del filtrado glomerular. La concentración
de creatinina en orina puede emplearse como una magnitud de referencia de la excreción de
analito.
16. Explique la formación de bilis y sus funciones

Son productos terminales anfipáticos del metabolismo del colesterol ocurriendo en los
hepatocitos. La primera vía interviene en 80 a 90% de la síntesis de los ácidos biliares. Sobresale
la participación de tres enzimas: colesterol 7 alfa hidroxilasa, esterol 12 alfa hidroxilasa y esterol
27 hidroxilasa; mediante la vía alterna se forma el ácido quenodesoxicólico. Aquí, la 7 alfa
hidroxilasa precede de la formación de diferentes oxiesteroles que metabolizan las enzimas CYP7
B1 y CYP39 A1. El ácido litocólico se conjuga con glicina o taurina y puede sulfatarse en
carbono 3. Estos productos divalentes no se reabsorben en forma eficiente y nunca constituyen
más del 5% del acervo de sales biliares en forma normal; el ácido ursodeoxicólico se encuentra
en mínimas concentraciones. Una vez que se sintetizan, estos ácidos se conjugan con glicina y
taurina, lo que mejora su solubilidad. Estos ácidos biliares en conjugación se encuentran como
sales aniónicas llamadas sales biliares
La bilis es decisiva para la digestión y absorción de grasas; como vía importante de eliminación
de toxinas, carcinógenos, drogas y sus metabolitos (xenobióticos). También es la ruta principal de
excreción de compuestos endógenos y de sus productos metabólicos (endobióticos), como:
colesterol, bilirrubina y hormonas
17. Explique estructura y función de Hemoglobina

La hemoglobina está compuesta por una proteína denominada globina y un compuesto
denominado hemo. El hemo está compuesto por hierro y un pigmento denominado porfirina, que
le da a su sangre el color rojo. Una de sus funciones vitales es su participación en el intercambio
gaseoso de oxígeno y dióxido de carbono entre los pulmones y los tejidos.
18. Explique metabolismo integro de la Bilirrubina

Cabe recalcar que la bilirrubina se origina a partir de las moléculas que contienen hemo. El 80%
del hemo proviene de la hemoglobina liberada de los glóbulos rojos o también conocidos como
eritrocitos senescentes y de la eritropoyesis ineficaz y el resto corresponde a fuentes enzimáticas
no eritroides. Con lo antes mencionado se determina que con el conocimiento de la bioquímica de
las porfirinas y el grupo hemo es fundamental para la compresión de las diversas funciones de las
hemoproteínas en el organismo, y patologías asociadas a las mismas.
Las porfirinas son compuestos cíclicos formados por la unión de 4 anillos pirrólicos enlazadas
por puentes metenilo.
Es importante conocer las proteínas que están formados con el grupo hemo:
• Hemoglobinas
• Mioglobinas
• Citocromos
• Catalasas
19. Explique la importancia del Sistema fagocítico mononuclear

Hay que entender que fagocitar es la capacidad de llevar a cabo la fagocitosis es una acción
esencial en las respuestas inmunitarias innata y adaptativa, especialmente porque está involucrada
en la eliminación de patógenos, de hecho, es la primera línea de defensa ante una infección. Las
sustancias químicas también atraen glóbulos blancos que se “comen” los microorganismos y
células muertas o dañadas. El proceso mediante el cual estos glóbulos blancos rodean engulle y
destruyen sustancias extrañas, y las células en su conjunto son llamadas fagocitos. Los monocitos
son un tipo de leucocitos tienen la labor de identificar a los agentes externos y posteriormente
eliminarlos mediante un proceso celular. Se encargan de desechar a los tejidos muertos para
poder devolver la funcionalidad al tejido afectado.
20. Explique la Importancia Biomédica de Bilirrubina

La importancia biomédica surge en el marcador de disfunción hepática, colestasis o enfermedad
hemolítica. Una variedad de factores limita la sensibilidad y la especificidad de la medición de la
bilirrubina para detectar anormalidades: lipemia, hemólisis, exposición a la luz visible y el estado
de ayuno. La bilirrubina es una sustancia amarillenta que se forma durante el proceso normal de
descomposición de los glóbulos rojos viejos por el cuerpo. Se encuentra en la bilis, un líquido
segregado por el hígado que ayuda a digerir los alimentos. En bioquímica la bilirrubina es un
producto de desecho proveniente del metabolismo de la hemoglobina. Los hematíes viejos,
defectuosos o dañados, son retirados por unas células fagocíticas.
21. Método de “JENDRASSIK – GROF” para la determinación “in vitro” de la Bilirrubina

Es un método que miden los niveles de bilirrubina directa y la total, es un proceso de dos pasos.
Se añade un reactivo a la muestra de sangre, que reacciona con la bilirrubina directa. Esto
produce un cambio de color, que es medido por el bilirrubinómetro. Se agrega un acelerador para
liberar la bilirrubina indirecta de las proteínas. De esta manera se puede calcular la bilirrubina
total, la bilirrubina indirecta y la bilirrubina directa.
1. GRÁFICOS:
Imagen 1
Colocación de la muestra de orina de 24 horas en una probeta

Imagen 2
Extracción del plasma sanguíneo por pipeteo

Imagen 3
Colocación del plasma sanguíneo en un tubo de ensayo

Imagen 4
Pipeteo de muestras
Imagen 5
Utilización del espectrofotómetro para la lectura de las absorbancias

Imagen 6
Pipeteo de los insertos

Imagen 7
Colocación de las muestras en el baño maría

2. OBSERVACIONES:
• Se pudo observar y comprender la cantidad de variables que pueden afectar al resultado

concreto de cada una de las pruebas realizadas en el laboratorio
• Se analizo desde un punto de vista técnico la perfecta calibración y el uso de los

implementos y maquinaria dentro del laboratorio, sus funciones y características principales.
• Se pudo compartir y entender la importancia del trabajo en equipo, así como el valorar cada
una de las diferentes interacciones en un ambiente similar al laboral.
3. CONCLUSIONES:
• Se aplico de manera correcta todos los métodos necesarios para la obtención de valores exactos en
cada una de las pruebas, en los métodos dominados entre los cuales destacan, pero no se limitan,
podemos encontrar por ejemplo el método enzimático colorimétrico Ureasa/salicilato y al
comprender este mismo se logró la correcta cuantificación de la Urea.
• Se comprendió cada uno de los métodos propuestos, así como a un nivel sistemático se pudo
analizar cada una de las reacciones que dan los resultados dispuestos para la determinación de
cada valor de interés.
4. SUGERENCIAS:
• Como principal sugerencia a tomar en cuenta, podemos seguir una serie de parámetros
necesarios para conseguir un resultado real y que pueda ser cuantificado, es importante
entender el modo correcto en el cual se debe realizar cada una de las pruebas que vayan
a ser determinadas
• Es muy necesario el abarcar todo el conocimiento previo que pueda facilitarnos la
realización de las diferentes pruebas que se han realizado, esto con el fin de entender
de manera completa cada uno de los factores que generan variabilidad en los resultados
• Como sugerencia final cabe destacar que una lectura comprensiva hacia el inserto de cada uno de
los reactivos es vital para poder conseguir resultados con un casi perfecto grado de credibilidad
5. TERMINOLOGÍA:
• Uremia: Acumulación de productos de desecho en la sangre por la incapacidad de los
riñones de eliminarlos.
• Fagocitosis: Proceso por el cual un fagocito (tipo de glóbulo blanco) rodea y destruye
sustancias extrañas (como bacterias) y elimina las células muertas.
• Hiperucemia: Es la elevación del ácido úrico en la sangre y es el principal factor de
riesgo de gota, aunque la mayoría de los pacientes que la presentan están asintomáticos
y no la desarrollan.
• Taurina: Es un aminoácido presente en los alimentos como carnes, lácteos, pescados y
leche materna.
• Citrulina: La citrulina es un aminoácido que fue encontrado por primera vez en la sandía. Se
considera no esencial porque nuestro cuerpo puede producirlo de manera natural, sin embargo,
podemos incrementar sus niveles comiendo alimentos que lo contengan o tomando suplementos.
1. BIBLIOGRAFÍA:
2. MURRAY RK, BENDER DA, BOTHAM KM, KENNELLY PJ, RODWELL VW, WEIL
PA. HARPER BIOQUIMICA ILUSTRADA. 29th ed. praga JdL, editor. México; 2013
3. doctorsonebook. Youtube. [Internet].; 2017 [citado el 23 de noviembre del 2022. Disponible

en : https://youtu.be/tqa9yPC2HTE.
4. Marco. youtube. [Internet].; 2015 [Citado el 22 de Noviembre del 2022. Disponible en:
https://youtu.be/hDCaopLYwEs.
5. Garcia Pérez MA. EL CICLO DE LA UREA Valencia: Universidad de valencia; 1994
6. medlineplus. medlineplus. [Internet].; 2021 [citado el 23 de Noviembre del 2022.

Disponible en : https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/niveles-de-
amoniaco/.
7. Murray, R., (2013), Bioquímica de Harper Ilustrada 29 a ed, México, DF: Editorial Manual
Moderno.
8. Citrulina ¿Qué beneficios nos aporta? [Internet]. Nutrición Starlabs. [citado el 24 de

noviembre de 2022]. Disponible en: https://www.gostarlabs.com/blog/noticias/citrulina-que-
beneficios-nos-aporta

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO LAB E201- BLOQUE E

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

Jaya Guilcapi 0604505560

Ludeña Durán 2200336622

Martinez Rivera 0604989590

Figura 1.Biosíntesis de la cretina y creatinina (1)

Creatinina Tasa filtración glomerular

a. Captación de bilirrubina por las células parenquimatosas del hígado

b. conjugación de bilirrubina con glucuronato en el retículo endoplásmico

CÁLCULO DEL BUN

BUN (mg/dl) = Concentración de urea mg/dl * 0,467

CONCENTRACIÓN DEL AMONÍACO =

0,097 ug/dL de amoníaco

C) CUANTIFICACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO

(𝐴2 −𝐴1) 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

mg creatinina/dl ORINA x ml24h

3,317mg creatinina/dL ORINA x 900ml de orina de 24h

DETALLE DATOS - RESULTADOS

0,198mg/dL x 10,8 = 2,13 mg bilirrubina total/dL

Abs.PR x 14,4 = mg bilirrubina directa/ dL

0,069mg/dL x 14,4=0,993 mg bilirrubina directa/dL

11. Establezca la importancia Biomédica del estudio los compuestos Nitrogenados No

12. Explique el fundamento de cuantificación los compuestos nitrogenados no proteicos:

13. En qué consiste y como se calcula el BUN e indique la importancia biomédica

• Ver si sus riñones están funcionando normalmente.

• Ver si su enfermedad renal está empeorando.

• Ver si el tratamiento de su enfermedad renal está funcionando.

14. Esquemáticamente represente el metabolismo de los compuestos (ácido úrico, urea,

15. En qué consiste y como se realiza el Clearance de la creatinina, indique la importancia

16. Explique la formación de bilis y sus funciones

17. Explique estructura y función de Hemoglobina

18. Explique metabolismo integro de la Bilirrubina

19. Explique la importancia del Sistema fagocítico mononuclear

20. Explique la Importancia Biomédica de Bilirrubina

21. Método de “JENDRASSIK – GROF” para la determinación “in vitro” de la Bilirrubina

Colocación de la muestra de orina de 24 horas en una probeta

Extracción del plasma sanguíneo por pipeteo

Colocación del plasma sanguíneo en un tubo de ensayo

Utilización del espectrofotómetro para la lectura de las absorbancias

Pipeteo de los insertos

Colocación de las muestras en el baño maría

• Se pudo observar y comprender la cantidad de variables que pueden afectar al resultado

• Se analizo desde un punto de vista técnico la perfecta calibración y el uso de los

3. doctorsonebook. Youtube. [Internet].; 2017 [citado el 23 de noviembre del 2022. Disponible

5. Garcia Pérez MA. EL CICLO DE LA UREA Valencia: Universidad de valencia; 1994

6. medlineplus. medlineplus. [Internet].; 2021 [citado el 23 de Noviembre del 2022.

8. Citrulina ¿Qué beneficios nos aporta? [Internet]. Nutrición Starlabs. [citado el 24 de

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