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SYLLABUS DE LA ASIGNATURA
ANÁLISIS INSTRUMENTAL
ELABORADO POR:
U N I V E R S I D A D D E A Q U I N O B O L I V I A
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 2
CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA
UDABOL
UNIVERSIDAD DE AQUINO-BOLIVIA
Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01
VISIÓN DE LA UNIVERSIDAD
MISIÓN DE LA UNIVERSIDAD
Estimado(a) estudiante:
El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes, quienes han
puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de enseñanza para brindarte una
educación de la más alta calidad. Este documento te servirá de guía para que organices mejor tus
procesos de aprendizaje y los hagas mucho más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y
cuidarlo.
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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA
SYLLABUS
UNIDAD I
ESTUDIO DEL ANALISIS INSTRUMENTAL
TEMA 1: INTRODUCCION AL ANALISIS INSTRUMENTAL
1. Introducción
2. Clasificación de los métodos analíticos
2.1. Métodos clásicos
2.2. Métodos instrumentales
2.3. Ventajas e inconvenientes de los métodos instrumentales
2.4. Importancia de las técnicas instrumentales en el campo farmacéutico
2.5. Clasificación de las técnicas instrumentales
3. Instrumentos para el análisis
3.1. Componentes básicos de los instrumentos
4. Concepto de señal/propiedad analítica.
5. Señal instrumental
6. El ruido
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UNIDAD II
INTRODUCCION A LOS METODOS ESPECTROSCOPICOS DE ANALISIS
TEMA 3: METODOS BASADOS EN LA INTERACCION DE LA RADIACION CON LA
MATERIA
1. Radiación electromagnética
1.1. Parámetros ondulatorios
1.2. Propiedades corpusculares de la radiación electromagnética
1.3. Espectro electromagnético
1.3.1. Interacción entre la materia y la energía radiante (ER)
1.3.2. Absorción de la radiación
1.3.3. Absorción molecular
1.3.4. Espectro de absorción
2. Componente de los instrumentos espectroscópicos
2.1 Fuentes de radiación
2.2. Selectores de longitud de onda
2.2.1. Filtros
2.2.2. Monocromadores
2.2.2.1. Componentes del monocromador
2.3. Recipientes para la muestra
2.4. Detectores:
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UNIDAD III
INTRODUCCION A LOS METODOS ELECTROQUIMICOS
TEMA 8: POTENCIOMETRIA
1. Potenciales de electrodo
2. Tipos de electrodo
3. Potenciómetros
4. Aplicación de la potenciometria
4.1. Titulaciones potenciométrica (Acido - base)
TEMA 9: CONDUCTIMETRIA
1. Conducción electrolítica
2. Conductancia
3. Medidas de conductividad
4. Aplicaciones farmacéuticas de la conductimetria
4.1. Titulaciones conductimetricas (Acido - base)
UNIDAD IV
METODOS FISICOS DE SEPARACION
TEMA 10: CROMATOGRAFIA PLANA
1. Generalidades
2. Cromatografía en papel (PC)
3. Cromatografía en capa fina (CCF) o (TLC)
3.1. Preparación de la cromatoplaca
3.2. Visualización de las manchas
3.3. Cálculo del factor de retención Rf
4. Cromatografía de alta eficacia en capa delgada (HPTLC)
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UNIDAD V
ESPECTROMETRIA DE MASAS
TEMA 13: ESPECTROMETRIA DE MASAS
1. Fundamento
2. Espectrómetro de masas
3. Fuentes de ionización en espectrometría de masas
4. Espectro de masas
5. Aplicaciones
i. Tipo de asignatura
Asignatura de Apoyo
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S
E CRITERIOS
M SABERES BASICOS ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE RECURS DE
A OS EVALUACIO
N N
A
PROCEDIMENT ACTITUDINAL
AL
1 - Presentación del Participa Pizarra,
sílabo del curso, Participa en la activamente proyector
de la metodología, socialización del durante la multimedi
del sistema de sílabo. exposición a. Demuestra
evaluación y de la teórica Smartpho calidad,
bibliografía. Elabora el ne, responsabilid
cuestionario 1 Internet, ad y
- Visión global de la hoja de puntualidad.
asignatura, preguntas,
definición y laptop,
términos marcadore
asociados s
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- Refractometr
o de Abbe
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8 CONTENIDO: POTENCIOMETRIA
- Potenciales de Participa Pizarra,
electrodo Observa el PPT activamente proyector Presenta en el
- Tipos de haciendo durante la multimedi tiempo
comentarios y exposición a. establecido el
electrodo trabajo con
preguntas. teórica Smartpho
- Potenciómetros Elabora el ne, orden, relación
- Aplicación de la de ideas y
Realiza una cuestionario 8 Internet,
coherencia.
potenciometria síntesis sobre lo hoja de
Titulacion mostrado en las preguntas, Expone
es ppts laptop, el avance del
potenciom marcadore proyecto con
étrica s claridad en sus
(Acido ideas y sustento
científico.
base)
9 CONTENIDO: CONDUCTIMETRIA
- Conducción Participa Pizarra, Presenta en el
. Observa el PPT activamente proyector tiempo
electrolítica
haciendo durante la multimedi establecido el
- Conductancia trabajo con
comentarios y exposición a.
- Medidas de orden, relación
preguntas. teórica Smartpho
conductividad Elabora el ne,
de ideas y
- Aplicaciones coherencia.
Realiza una cuestionario 9 Internet,
farmacéuticas de síntesis sobre lo hoja de Expone
la conductimetria mostrado en las preguntas, el avance del
- Titulaciones presentaciones laptop, proyecto con
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de partición
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PROCESUAL O FORMATIVA
V. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA
“Principios de Análisis Instrumental”. D.A. Skoog, F.J. Holler, S.R. Crouch. 6ª Edición.
CENGAGE Learning Editores. México 2008.
“Análisis Instrumental”. K.A. Rubinson, J.F. Rubinson. Ed. Prentice Hall. Madrid 2001.
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BIBLIOGRAFÍA COMPLEMENTARIA
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Durante las últimas décadas han aparecido en el comercio sistemas analíticos automáticos
capaces de efectuar toda una serie de operaciones químicas y manipulaciones físicas con la
mínima intervención humana. Se han desarrollado ingeniosos aparatos que pueden medir
cantidades determinadas de muestra y reactivos, mezclarlos, llevarlos a la temperatura
deseada, efectuar separaciones, introducir la muestra tratada en espectrofotómetros,
cromatógrafos u otros instrumentos, así como finalmente registrar la señal correspondiente,
todo ello, de forma automática.
Los sistemas automáticos se diseñaron inicialmente para satisfacer las necesidades de los
laboratorios de análisis clínicos, donde era necesaria una gran cantidad de determinaciones
analíticas, con fines diagnósticos, preventivos, o como control de la evolución de pacientes
sometidos a algún tipo de tratamiento. Actualmente, estos sistemas automáticos se aplican
extensamente en los más diversos campos. En muchas industrias, el laboratorio de control
es, en cierto modo, la pieza clave de su funcionamiento, debido a la necesidad de realizar
análisis puntuales a lo largo del proceso de fabricación para controlar los materiales de
entrada, los productos parcialmente tratados y las especies finales.
Por otra parte, cada vez es más frecuente la incorporación de algún sistema automático para
llevar a cabo alguna operación específica dentro de los métodos instrumentales,
automatizando parcialmente la operación. Así, por ejemplo, el sistema de muestreo
automático es casi imprescindible en absorción atómica cuando se utiliza el horno de grafito
para la atomización de la muestra, pues solo así se consigue buena reproducibilidad.
* La velocidad con que se realizan los análisis suele ser significativamente más alta que
cuando se utilizan dispositivos manuales.
* Un analizador bien diseñado proporciona mayor precisión durante largos periodos de
tiempo de lo que lo haría un operador usando un instrumento manual.
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Los dispositivos automáticos son aquellos que efectúan unas acciones previamente
programadas para realizarse en unos puntos del proceso sin intervención humana. Así, por
ejemplo, un valorador automático registra una curva de valoración o simplemente interrumpe
la valoración en un punto por medio de un dispositivo mecánico o eléctrico, en lugar de
hacerlo manualmente. El sistema no toma decisiones, y la secuencia de operaciones es
siempre la misma.
CUESTIONARIO
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Las aplicaciones son tan numerosas y abarcan tantos campos que resulta
complicado citarlas todas, a continuación veremos las más características:
Aplicaciones cualitativas
Determinación del peso molecular de todas las sustancias que pueden volatilizarse
por la posición del pico correspondiente a la masa patrón.
Determinación de la formula molecular. Si el instrumento es de gran resolución
bastará la determinación precisa de su masa molecular para poder atribuirle una
fórmula empírica. Otras veces puede determinarse por la relación entre las alturas
del pico correspondiente a la masa patrón y la de los picos de los isótopos. Existe
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una tercera forma que sería con la regla del nitrógeno, según la cual todas las
sustancias orgánicas con peso molecular par deben de contener un número par o
ningún átomo de N y los de número impar deben de contener un número impar. Por
el contrario los fragmentos moleculares por rotura de enlace, tienen una masa impar
si contienen cero o número par de átomos de N y masa par si el número de átomos
de N es impar.
Identificación de compuestos por su fragmentación patrón: la fragmentación de la
mayor parte de las moléculas produce un gran número de picos que permiten la
identificación de numerosos compuestos y el reconocimiento de ciertos grupos
funcionales de ellos. Se han descrito una serie de reglas generales que rigen los
procesos de fragmentación, los cuales son de gran utilidad para la determinación de
los espectros.
Identificación de productos de reacción o de productos metabólicos: se usa en
cinética química y en farmacología pudiéndose llegar a identificar impurezas y
metabolitos a concentraciones de pocas partes por millón.
Caracterización y análisis de polímeros: el polímero se piroliza en condiciones
controladas y los productos volátiles se hacen pasar a un espectrómetro para su
análisis.
Análisis de sangre: gracias a la rapidez del método, se puede emplear incluso como
control durante un proceso quirúrgico. Así se puede determinar a gran velocidad las
concentraciones hemáticas de monóxido y dióxido de carbono, oxígeno, nitrógeno,
gases anestésicos (como el NO).
Estudiar la abundancia de isótopos: Esta fue la finalidad con la que fue creada la
técnica y en la actualidad se usa para análisis por dilución de isótopos, estudios con
trazadores isotrópicos, estudiar la edad de las muestra por su proporción de
isótopos con la ventaja frente a los radiactivos que se pueden medir los isótopos no
radiactivos.
Aplicaciones cuantitativas
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en este caso se obtienen directamente a partir de las alturas de los picos de los
espectros de masas. Se crean curvas de calibrado que nos permiten el análisis
cuantitativo gracias a la existencia de picos únicos para cada componente y cada
valor de m/z.
CUESTIONARIO
11. Indique que tipo de fuente (lámpara de cátodo hueco), utilizaría Ud., si desea
determinar plomo en agua
12. Qué importancia merece la espectroscopia de absorción atómica en las ciencias
bioquímicas y farmacéuticas
13. Si usted desea determinar residuos de plomo en sistemas biológicos (muestras
vegetales) que tratamiento aplicaría a su muestra, para identificar y cuantificar al metal
por EAA con atomizador de llama
14. Que es el efecto fotoeléctrico.
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pequeñas que un tamaño característico. El dilema surge porque las partículas que se
describen son tridimensionales.
El único objeto tridimensional que se puede describir mediante una sola cantidad es una
esfera.
A partir del diámetro de ésta se puede calcular con exactitud su área superficial y su
volumen. Si se conoce la densidad de una partícula esférica, se puede calcular también su
masa.
Otro problema básico con las mediciones del tamaño de partícula es que técnicas diferentes
dan con frecuencia resultados diversos para partículas tridimensionales.
Incluso si el diámetro de partícula se midiera de manera directa con un microscopio, ¿qué
dimensión se cuantificaría? Si la partícula fuera cúbica, tres dimensiones diferentes
(longitudes) se podrían tomar como el diámetro. Por ejemplo, la longitud máxima podría
desempeñar ese papel; esto equivaldría a decir que la partícula es una esfera con dicho
diámetro. O bien, la longitud mínima se podría tomar como el diámetro.
De manera alternativa, el volumen o el área superficial se podrían usar para calcular el
diámetro de la esfera equivalente. Todos los resultados que se obtengan mediante esta
técnica simple, la microscopía, serán diferentes pero correctos para la cantidad que se
evalúa.
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CUESTIONARIO
1. Que es cromatografía
2. Indique la clasificación de cromatografía
3. Indique las principales aplicaciones de la cromatografía en las ciencias bioquímicas y
farmacéuticas
4. Que es extracción en fase solida
5. Que es Clean – up
6. Que es cromatografía de fase normal y de fase reversa
7. Para llevar a cabo una corrida por Cromatografia liquida de alta resolución, que tipo de
solventes debe utilizarse, indique su grado químico.
8. Indique mediante un esquema los principales componentes del HPLC, desarrolle
cada una de ellas.
9. En cromatografía liquida de alta resolución HPLC, donde se produce la separación.
10. Que es elución, a que se llama elución en gradiente y elución isocratica, cual es la
diferencia
11. A que se llama tiempo de retención
12. Que es un cromatograma.
13. Indique los diferentes tipos de detectores que pueden acoplarse al cromatografo
líquido de alta resolución.
14. Como se realiza la identificación y la cuantificación en cromatografía liquida de alta
resolución, esquematice para hacer más objetiva su respuesta.
15. Que requisitos debe de cumplir un compuesto químico para ser separado por
cromatografía de gases
16. Indique los diferentes componentes que tiene un cromatografo de gases
indicando la función que cumple cada una de ellos
17. Que es resolución en cromatografía, de que depende la resolución en
cromatografía de gases
18. Indique los diferentes tipos de detectores que pueden acoplarse a un
cromatografo de gases, señalando en cada caso el fundamento del detector y
los tipos de compuestos químicos que detecta.
19. Indique el significado de: GC/MS, GC/FID, GC/NPD, GC/ECD
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Describe y aplica las normas que rigen el trabajo Cumple las normas de bioseguridad de
seguro dentro del laboratorio de química a fin de acuerdo a lo establecido en la universidad
prevenir daños en la integridad física del personal para la prevención de accidentes laborales al
y de las instalaciones. momento de la manipulación de reactivos y
muestras biológicas.
FUNDAMENTO:
La implantación de un Programa de Seguridad en el Laboratorio de química es de vital
importancia, ya que antes de iniciar cualquier trabajo es aconsejable analizar cuáles riesgos
pudieran presentarse, desde la manipulación inicial de las muestras objeto de análisis, hasta
el desecho final de los productos. La protección de la integridad de los laboratorios trae
aparejado la protección de los equipos, las muestras, el medio ambiente, la información, la
documentación y la salud de los trabajadores que laboran en ellos. Para lograr este objetivo
es necesario desarrollar e implantar un Programa de Seguridad que cubra todos los
aspectos relacionados con toda la actividad que se realiza dentro del laboratorio.
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PROCEDIMIENTO:
Trabaje con orden, limpieza y sin prisa.
Mantenga los mesones de trabajo limpios y sin productos, libros, cajas o accesorios
innecesarios para el trabajo que se está realizando.
Utilice las campanas extractoras de gases siempre que sea posible.
No utilice nunca un equipo de trabajo sin conocer su funcionamiento.
Antes de iniciar un trabajo asegúrate de que el montaje está en perfectas condiciones.
Si el trabajo lo requiere, usa los equipos de protección individual determinados
(guantes, gafas).
Utilice siempre gradillas y soportes.
No trabaje separado de las mesas.
Al circular por el laboratorio debes ir con precaución, sin interrumpir a los que están
trabajando.
No efectúe pipeteos con la boca: emplea siempre un pipeteador.
No utilice vidrio agrietado, el material de vidrio en mal estado aumenta el riesgo de
accidente.
Tome los tubos de ensayo con pinzas o con los dedos (nunca con las manos). El vidrio
caliente no se diferencia del frío.
Compruebe cuidadosamente la temperatura de los recipientes que hayan estado
sometidos a calor, antes de cogerlos directamente con las manos.
No fuerce directamente con las manos cierres de botellas, frascos, llaves de paso, etc.
que se hayan obturado. Para intentar abrirlos emplea las protecciones individuales o
colectivas adecuadas: guantes, gafas, campanas.
Desconecte los equipos, agua y gas al terminar el trabajo.
Deje siempre el material limpio y ordenado. Recoge los reactivos, equipos, etc. al
terminar el trabajo.
Emplee y almacene sustancias inflamables en las cantidades imprescindibles.
Las campanas de gases son un medio de protección colectiva y no deben utilizarse
para almacenar productos.
Como norma higiénica básica, el personal debe lavarse las manos al entrar y salir del
laboratorio y siempre que haya habido contacto con algún producto químico.
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Debe llevar en todo momento la ropa de trabajo abrochada y los cabellos recogidos,
evitando colgantes o mangas anchas que pudieran engancharse en los montajes y
material del laboratorio. No se debe trabajar separado de la mesa o la poyata, en la
que nunca han de depositarse objetos personales.
El personal de nueva incorporación debe ser inmediatamente informado sobre las
normas de trabajo, plan de seguridad y emergencia del laboratorio, y características
específicas de peligrosidad de los productos, instalaciones y operaciones de uso
habitual en el laboratorio.
Está prohibido fumar, llevar maquillaje, beber e ingerir alimentos en el laboratorio.
Evite llevar lentes de contacto, si se detecta una constante irritación de los ojos y
sobre todo si no se emplean gafas de seguridad de manera obligatoria. Es preferible el
uso de gafas de seguridad, graduadas o que permitan llevar las gafas graduadas
debajo de ellas.
RESULTADOS
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Qué entiendes por bioseguridad
2. Menciona cual es el riego biológico existente al manipular material orgánico vivo
3. Explique cómo debe ser la construcción adecuada de un laboratorio
4. Dibuje y explique al menos 10 cuadros de señalizaciones que debe tener en laboratorios
5. Qué se entiende por barrera biológica
6. Qué materiales, soluciones y otros, debe tener como mínimo un botiquín de primeros
auxilios
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7. Qué diferencias existen entre este modelo de bioseguridad para bioquímica con
bacteriología.
8. Cómo se clasifican los objetos peligrosos antes de ser desechados.
9. Precise las medidas de prevención que debe conocer el personal que labora en los
laboratorios.
10. Qué indicaciones se establecen en caso de accidente
FUNDAMENTO TEÓRICO
PROCEDIMIENTO
Repaso oral de todos los materiales a utilizar.
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RESULTADOS
Explique acerca de la precisión y errores que presentan todos los materiales volumétricos.
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
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Ácido nítrico
Ácido fosfórico
Hidróxido de sodio
FUNDAMENTO TEÓRICO
Instalar la balanza en un lugar libre de vibraciones, flujo de aire y lejos de la radiación solar,
siguiendo las instrucciones de instalación del manual del proveedor.
Limpieza y ajuste:
1. Limpiar la balanza después de terminar los pesajes, con un pincel apropiado y un paño
suave.
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2. Ajustar la balanza cada día que se vaya a utilizar y luego de un cambio de lugar.
3. Registre la Hora y fecha de Limpieza, calibre y ajuste de la balanza, para mantener la
trazabilidad del proceso.
Precauciones y recomendaciones:
1. No coloque agua ni metales corrosivos directamente sobre el platillo de la balanza.
2. No exponga la balanza a objetos magnetizados.
3. Evite conectar equipos que produzcan mucho ruido muy cerca de a la balanza
4. La balanza debe estar nivelada y colocada en un sitio donde se prevengan las
vibraciones, grandes fluctuaciones de temperatura, rayos directos de sol y corrientes
de aire.
PROCEDIMIENTO
- Pesar 10 veces un objeto determinado… Calcular: Promedio… Desviación
estándar… Error aleatorio %... Compare los resultados con la precisión real de la
balanza del laboratorio.
- Pesar 5 veces un objeto que conozcan su peso verdadero… Calcular:
Promedio… Error sistemático absoluto… Error sistemático relativo….
- Explique sus resultados… de acuerdo a ellos está o no está calibrada la balanza
de nuestro laboratorio…
RESULTADOS
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
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FUNDAMENTO TEÓRICO:
El material volumétrico de vidrio se calibra midiendo la masa de un líquido (por lo general
agua destilada), de densidad y temperatura conocida, que está contenido (o transferido) en
el material volumétrico que se quiere calibrar.
Todo el material volumétrico debe estar libre de fugas antes de calibrarse, las buretas y las
pipetas no necesitan secarse, los matraces aforados deben escurrirse bien y secarse a
temperatura ambiente. El agua utilizada para la calibración debe estar en equilibrio térmico
con los alrededores. Esta condición se alcanza recogiendo el agua para la calibración con
anterioridad, anotando su temperatura a intervalos frecuentes y esperando hasta que ya no
existan cambios en ella
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MATERIALES Y REACTIVOS
Agua destilada
Matraz erlenmeyer de 250 ml
Vaso precipitado
Pipeta aforada de 10 ml
Probeta de 100 ml
Matraz aforado de 50 ml
Balanza analítica
PROCEDIMIENTOS:
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atemperada a 20°C, con mucho cuidado de no derramar una sola gota de agua sobre
la balanza, registrar el P2
4. Calcular la masa de agua transferida por diferencia de pesadas P2-P1
5. Calcular el volumen transferido (volumen real)
6. Repetir 10 veces el procedimiento y calcular el volumen medio
7. Calcular promedios, precisión, errores…
CÁLCULOS:
Realice los cálculos pertinentes para comprobar si los materiales volumétricos están o no
calibrados, con ayuda del:
volumen del material volumétrico,
peso promedio del agua,
temperatura del agua,
densidad del agua y
la precisión del material volumétrico
RESULTADOS
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
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FUNDAMENTO TEÓRICO
Las micropipetas o pipetas de pistón se carga y descarga merced a la acción del dedo pulgar
sobre su pistón, en cuyo extremo opuesto se coloca una punta de plástico desechable
llamada también puntera. Con ellas se evita la succión de los líquidos biológicos y el
consiguiente riesgo de contagio de enfermedades, y succionar disolventes orgánicos u otros
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líquidos que produzcan vapores tóxicos o sean venenosos. Su volumen puede ser fijo o
variable.
Las micropipetas presentan tres posiciones que puede adoptar el émbolo: la normal de
reposo, la intermedia de aspiración y la de presión a fondo de dispensación.
Estas pipetas se cargan apretando el émbolo hasta la posición intermedia y luego se afloja la
presión para llenar la punta o puntera. Para descargarlas, se aprieta el émbolo hasta el
fondo. Algunas tienen acoplado un dispositivo para expulsar la puntera una vez utilizada.
PROCEDIMIENTO
Utilizar diferentes micropipetas entre aquellas de volúmenes fijos así como de volúmenes
variables…
RESULTADOS
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Indique y explique acerca de los elementos de una micropipeta.
2. Explique cómo se realiza el llenado y la expulsión de la muestra al medirla con la
umicropipeta.
3. Cómo se realiza el mantenimiento de las micropipetas?
4. Investigue acerca de las normas ISO DIS 8655 y 12650 sobre el calibrado de las
micropipetas.
5. Qué es una puntera y para qué se la utiliza?
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FUNDAMENTO:
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Todas las moléculas son capaces de absorber radiación electromagnética de una frecuencia
o de un intervalo de frecuencias características de cada molécula.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; el color de las
sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que
incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no
absorbida, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe longitud de
ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del
infrarrojo. La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la
estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química.
MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz aforado de 500 mL. 2
Matraz aforado de 100 mL. 5
Vaso de precipitado de 100 mL. 2
Varilla de vidrio 2
Micro espátula metálica 2
Tubos de lectura para espectro 10
Piceta con H2O destilada 1L.
Pipetas de 1 mL. 2
Pipeta de 2 mL 2
Colorante rojo 10 g.
PROCEDIMIENTOS:
1. Preparar 500 mL. de solución de permanganato de potasio al 0,02 M como colorante
rojo.
2. A partir de la solución anterior realice diluciones: 1/50… 1/100… 1/200… 1/300
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CÁLCULOS:
RESULTADOS
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
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2. Observe los espectros del permanganato de potasio, según la longitud de onda ¿son
idénticos?, en que se diferencian,
3. ¿Qué es el blanco, cuál es su importancia en las medidas espectrofotométricas?
4. ¿Qué tipo de celdas deben utilizarse en la región espectral ultravioleta y visible, en
cada caso indique porque?
5. ¿Convierta la concentración del permanganato de potasio en ppm?
6. ¿Qué es la matriz de la muestra?
7. ¿Indique los cuidados para manejar el espectrofotómetro?
8. ¿Convierta las diferentes diluciones realizadas del permanganato de potasio en ppm?
9. ¿Dibuje el espectrofotómetro del laboratorio indicando sus componentes?
10. ¿Qué diferencia hay entre un espectrofotómetro, un fotómetro y un colorímetro?
FUNDAMENTO
El espectro de absorción de una especie química, es una constante física que puede
emplearse para la caracterización de compuestos químicos que absorben radiación
ultravioleta visible. Una vez encontrado el espectro de absorción de la especie química
analizada, se procede a la determinación de la longitud de onda óptima, longitud en la cual
la absorbancia presenta su mayor valor, o menor en el caso de transmitancias.
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MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz aforado de 500 mL. 2
Matraz aforado de 100 mL. 5
Vaso de precipitado de 100 mL. 2
Varilla de vidrio 2
Micro espátula metálica 2
Tubos de lectura para espectro 10
Piceta con H2O destilada 1L.
Pipetas de 1 mL. 2
Pipeta de 2 mL 2
Permanganato de potasio 5 g.
PROCEDIMIENTOS:
RESULTADO
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO:
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FUNDAMENTO
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MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz aforado de 100 ml 6
Vaso de precipitado de 100 mL . 2
Varilla de vidrio 1
Micro espátula metálica 1
Piceta con H2O 1L.
Tubos de lectura para espectro 10
Pipeta de 1 mL. 1
Pipeta de 2 mL. 1
Balanza analítica 1
Espectrofotómetro UV/VIS 14
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PROCEDIMIENTOS:
1. De acuerdo a los datos de las anteriores prácticas sobre las lecturas de absorbancias
del permanganato de potasio y las respectivas concentraciones en ppm de las
distintas diluciones realizadas…
2. Grafique la curva de calibración, en papel milimetrado, tomando en cuenta que la
concentración debe ir en el eje x y las absorbancias en el eje y dentro de un eje de
coordenadas.
3. Utilice mínimos cuadrados, o en el mejor de los casos una hoja Excel, para encontrar
la ecuación de la línea recta.
4. Calcule la concentración de algunas muestras por interpolación empleando su curva
de calibración.
CÁLCULOS
Utilice las absorbancias del permanganato de potasio de acuerdo a su longitud de
onda óptima hallada en la práctica anterior. Además de las diluciones empleadas convertidas
en ppm
RESULTADOS:
CONCLUSIÓN
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FUNDAMENTO
La cromatografía de capa fina o (TLC) es una técnica que emplea como fase estacionaria
una capa delgada de gel de sílica o alúmina adherida a un soporte de vidrio o aluminio.
Para llevar a cabo esta técnica se disuelve una pequeña cantidad de la mezcla a separar
y, con la ayuda de un capilar, se deposita sobre la parte inferior de la placa. La
cromatoplaca se introduce en un recipiente cerrado que contiene unos mililitros de
disolvente (fase móvil) dejando que el disolvente ascienda por capilaridad, de modo que
los componentes de la mezcla experimentan un proceso de adsorción desorción, lo que
provoca que unos avancen más rápidamente que otros.
MATERIALES Y REACTIVOS
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CONCLUSIONES
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