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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 1

CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

RED NACIONAL UNIVERSITARIA


UNIDAD ACADÉMICA DE SANTA CRUZ

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA


TERCER SEMESTRE

SYLLABUS DE LA ASIGNATURA
ANÁLISIS INSTRUMENTAL

ELABORADO POR:

Dra. Lizeth Rivera Martinez


Ing. Mauricio Javier Patiño Calle

GESTIÓN ACADÉMICA II/2019

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

UDABOL
UNIVERSIDAD DE AQUINO-BOLIVIA
Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01

VISIÓN DE LA UNIVERSIDAD

Ser la universidad líder en calidad educativa.

MISIÓN DE LA UNIVERSIDAD

Desarrollar la educación superior universitaria con calidad y


Competitividad al servicio de la sociedad.

Estimado(a) estudiante:

El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes, quienes han
puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de enseñanza para brindarte una
educación de la más alta calidad. Este documento te servirá de guía para que organices mejor tus
procesos de aprendizaje y los hagas mucho más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y
cuidarlo.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

SYLLABUS

Asignatura: ANALISIS INSTRUMENTAL


Código: BTG-332
Requisito: BTG-232, BTG-233
Carga Horaria: 80 Horas / Semestre
Horas teóricas 40 horas
Horas Prácticas 40 horas
Créditos: 8

I. COMPETENCIAS GENERALES A LOGRAR:

Aplica los conocimientos teóricos y prácticos, acerca de los métodos instrumentales


modernos, que contribuyan en la manipulación adecuada de diversos equipos a fines a su
perfil profesional. También Aplica su criterio analítico para seleccionar el método instrumental
más adecuado para el análisis de medicamentos, alimentos, aditivos, etc. poniendo en
práctica su pensamiento lógico, crítico y la observación para desarrollar nuevas técnicas y
métodos analíticos dentro de la universidad y en su fuente laboral.

II. PROGRAMA ANALÍTICO DE LA ASIGNATURA.

UNIDAD I
ESTUDIO DEL ANALISIS INSTRUMENTAL
TEMA 1: INTRODUCCION AL ANALISIS INSTRUMENTAL
1. Introducción
2. Clasificación de los métodos analíticos
2.1. Métodos clásicos
2.2. Métodos instrumentales
2.3. Ventajas e inconvenientes de los métodos instrumentales
2.4. Importancia de las técnicas instrumentales en el campo farmacéutico
2.5. Clasificación de las técnicas instrumentales
3. Instrumentos para el análisis
3.1. Componentes básicos de los instrumentos
4. Concepto de señal/propiedad analítica.
5. Señal instrumental
6. El ruido

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6.1. Características y tipos


6.2. Fuentes de ruido
6.3. Eliminación del ruido

TEMA 2: METODOS DE CALIBRACION Y VALIDACION DE METODOS ANALITICOS


1. Parámetros característicos y selección de un método analítico.
2. Calibración de los métodos instrumentales.
3. Patrones analíticos.
4. Métodos de calibración:
4.1. Calibración externa,
4.2. Método de la adición de estándar,
4.3. Método del estándar interno.
5. Importancia de los blancos.
6. Calibración de equipos.
7. Validación de métodos analíticos
a) Exactitud
b) Precisión
c) El límite de detección
d) El límite de cuantificación
e) La especificidad,
f) La linealidad,
g) La sensibilidad
h) La robustez

UNIDAD II
INTRODUCCION A LOS METODOS ESPECTROSCOPICOS DE ANALISIS
TEMA 3: METODOS BASADOS EN LA INTERACCION DE LA RADIACION CON LA
MATERIA
1. Radiación electromagnética
1.1. Parámetros ondulatorios
1.2. Propiedades corpusculares de la radiación electromagnética
1.3. Espectro electromagnético
1.3.1. Interacción entre la materia y la energía radiante (ER)
1.3.2. Absorción de la radiación
1.3.3. Absorción molecular
1.3.4. Espectro de absorción
2. Componente de los instrumentos espectroscópicos
2.1 Fuentes de radiación
2.2. Selectores de longitud de onda
2.2.1. Filtros
2.2.2. Monocromadores
2.2.2.1. Componentes del monocromador
2.3. Recipientes para la muestra
2.4. Detectores:

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TEMA 4: POLARIMETRIA Y REFRACTOMETRIA


1. POLARIMETRIA:
1.1. Luz Natural y luz polarizada
1.2. Procedimiento de la polarización
1.3. Polarización por refracción doble
1.4. Actividad óptica
1.5. Polarímetro
1.6. Aplicaciones
2. REFRACTOMETRIA
2.1. Definiciones generales
2.2. Fundamento e La técnica
2.3. Refractometro de Abbe
2.4. Aplicaciones cualitativas
2.5. Aplicaciones cuantitativas

TEMA 5: ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA VISIBLE


1. Introducción
2. Grupos cromoforos y auxocromos
3. Análisis cualitativo y cuantitativo por espectrofotometría ultravioleta visible
4. Técnicas cualitativas
4.2.1. Análisis cualitativo
5. Procedimiento en el análisis cuantitativo
5.1. Errores en la determinación de concentración
6. Aplicaciones de la espectroscopia de absorción molecular UV-VIS
6.1. .Análisis de multicomponentes.

TEMA 6: ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION INFRARROJA


1. Introducción a la espectroscopia infrarroja
2. Instrumentación en la espectroscopia de absorción infrarroja
3. Manejo de muestras
4. Características de un espectro infrarrojo
5. Aplicaciones e la espectroscopia infrarroja

TEMA 7: ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION ATOMICA


1. Fundamento de la espectroscopia de absorción atómica
2. Instrumentación analítica
3. Elección de la longitud de onda
4. Interferencias
5. Corrección del ruido de fondo
6. Procesamiento de muestras para el análisis por EAA
7. Aplicaciones
8. Análisis cuantitativo por espectrofotometría de absorción atómica

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UNIDAD III
INTRODUCCION A LOS METODOS ELECTROQUIMICOS
TEMA 8: POTENCIOMETRIA
1. Potenciales de electrodo
2. Tipos de electrodo
3. Potenciómetros
4. Aplicación de la potenciometria
4.1. Titulaciones potenciométrica (Acido - base)

TEMA 9: CONDUCTIMETRIA
1. Conducción electrolítica
2. Conductancia
3. Medidas de conductividad
4. Aplicaciones farmacéuticas de la conductimetria
4.1. Titulaciones conductimetricas (Acido - base)

UNIDAD IV
METODOS FISICOS DE SEPARACION
TEMA 10: CROMATOGRAFIA PLANA
1. Generalidades
2. Cromatografía en papel (PC)
3. Cromatografía en capa fina (CCF) o (TLC)
3.1. Preparación de la cromatoplaca
3.2. Visualización de las manchas
3.3. Cálculo del factor de retención Rf
4. Cromatografía de alta eficacia en capa delgada (HPTLC)

TEMA 11: CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS


1. Cromatografía
2. Teoría de la columna
3. Parámetros intrínsecos de la columna
4. Eficacia de la columna
5. Evaluación de la calidad de la separación cromatografíca
6. Técnica de la cromatografía clásica en columna
7. Cromatografía de líquidos de alta eficacia HPLC
7.1. Componentes del cromatografo de líquidos
7.2. Acoplamiento del cromatografo de líquidos a detectores
7.3. Cromatograma
7.4. Identificación y cuantificación por HPLC/UV-VIS
7.5. Aplicaciones de la cromatografía de líquidos en farmacia
8. Derivatizacion para la cromatografía de líquidos
9. Cromatografía de adsorción

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10. Cromatografía de partición


11. Cromatografía de par iónico
12. Cromatografía de intercambio iónico
13. Cromatografía iónica
14. Cromatografía de exclusión

TEMA 12: CROMATOGRAFIA DE GASES


1. Características fundamentales de la cromatografía de gases
2. Cromatografo de gases
3. Acoplamiento del cromatografo de gases a detectores
4. Identificación y cuantificación por Cromatografía de gases/ FID
5. Aplicaciones de la cromatografía de gases

UNIDAD V
ESPECTROMETRIA DE MASAS
TEMA 13: ESPECTROMETRIA DE MASAS
1. Fundamento
2. Espectrómetro de masas
3. Fuentes de ionización en espectrometría de masas
4. Espectro de masas
5. Aplicaciones

III. ACTIVIDADES A REALIZAR DIRECTAMENTE EN LA COMUNIDAD.

i. Tipo de asignatura
Asignatura de Apoyo

ii. Resumen de los resultados del diagnóstico realizado para la detección de


los problemas a resolver en la comunidad.
En todo el país se consumen medicamentos de diferentes laboratorios, nacionales y
extranjeros que varían en precio, presentación, etc. A pesar que los medicamentos
legalmente comercializados tienen cierta seguridad con respecto al contenido de
principio activo muchos medicamentos de contrabando no garantizan la valoración del
componente activo

iii. Nombre del proyecto al que tributa la asignatura.


Análisis cuantitativo de principios activos de diferentes medicamentos, mediante
técnicas espectroscópicas.

iv. Contribución de la asignatura al proyecto.


Las técnicas analíticas instrumentales estudiadas a lo largo de la materia serán la base
para la determinación cualitativa y cuantitativa de los diferentes preparados.

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v. Actividades a realizar durante el semestre para la implementación del


proyecto.
Trabajo a realizar por Localidad, Incidencia social Fecha.
los estudiantes aula o
laboratorio
Designación a los Aula Organización y 02 al 05 de
diferentes grupos la planificación del mayo
muestra con la cual proyecto
desarrollara su
trabajo
Revisión bibliográfica Aula Información adecuada 02 al 05 de
para determinar la del tema basado en mayo
metodología analítica técnicas actuales, que
adecuada para la se desarrollan en
muestra problema nuestro medio.
Recolección de la Diferentes Concienciación a la 09 al 12 de
muestra, farmacias población y a los mayo
privadas e mismos estudiantes
institucionale sobre la utilización y
s riesgos sobre el
consumo de alimentos
expuestos a
plaguicidas.
selección del material Laboratorio Aplicación de los 09 al 12 de
a utilizar y puesta a de Análisis conocimientos y las mayo
punto de la instrumental practicas aprendidas en
metodología que se la materia
utilizara en el análisis
Defensa y Aula Verificar que los 16 de mayo
presentación de resultados están
resultados y correctamente
conclusiones al presentados
docente

COMPETENCIAS DE LOS CONTENIDOS TEORICOS

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CONTENIDO COMPETENCIA INDICADOR Y/O


TEMATICO GENERICA CRITERIO
METODOS DE CALIBRACION Y Aplica los conocimientos Elabora instructivos
VALIDACION DE METODOS teóricos y prácticos, de los descriptivos de uso de los
ANALITICOS métodos instrumentales diversos equipos
- Calibración de los métodos modernos, en la clase de estudiados en la
instrumentales
laboratorio y en su campo asignatura.
- Métodos de calibración
- Calibración externa laboral.
- Método de la adición de
estándar
- Método del estándar interno
- Validación de métodos
analíticos

METODOS BASADOS EN LA Aplica los conocimientos Elabora instructivos


INTERACCION DE LA RADIACION teóricos y prácticos, de los descriptivos y de uso, de
CON LA MATERIA instrumentos basados en la los instrumentos basados
- Radiación electromagnética en la radiación los cuales
radiación, en la clase de
- Espectro electromagnético son estudiados en la
- Absorción de la radiación laboratorio y en su campo asignatura
- Fuentes de radiación laboral.
- Monocromadores
- Recipientes para la muestra

POLARIMETRIA Y Conoce los Elabora instructivos


REFRACTOMETRIA fundamentos, las partes y las descriptivos y de uso, de
- Procedimiento de la funciones de los todos los potenciómetros
polarización potenciómetros y y refractómetros,
- Polarización por refracción refractómetros estudiados en estudiados en la
doble la asignatura para realizar asignatura
- Actividad óptica análisis dentro del laboratorio
- Polarímetro
- Aplicaciones
- Definiciones generales
- Fundamento e La técnica
- Refractometro de Abbe

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION Comprende Elabora instructivos

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MOLECULAR ULTRAVIOLETA los fundamentos de los descriptivos y de uso, de


VISIBLE métodos todos los espectrómetros
- Análisis cualitativo y cuantitativo espectrofotométricos y opera de absorción
por espectrofotometría los moleculares, estudiados
ultravioleta visible equipos de absorción en la asignatura
- Técnicas cualitativas molecular. para
- Procedimiento en el análisis cuantificar sustancias
cuantitativo presentes en
- Aplicaciones de la sólidos, líquidos y gases.
espectroscopia de absorción
molecular UV-VIS

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION Comprende Elabora instructivos


INFRARROJA los fundamentos de los descriptivos y de uso, de
- Introducción a la espectroscopia métodos todos los espectrómetros
infrarroja espectrofotométricos y opera de absorción infrarroja,
- Instrumentación en la los estudiados en la
espectroscopia de absorción equipos de absorción asignatura
infrarroja infrarroja, para
- Manejo de muestras cuantificar sustancias
- Características de un espectro presentes en
infrarrojo sólidos, líquidos y gases.
- Aplicaciones e la espectroscopia
infrarroja

ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION Comprende Elabora instructivos


ATOMICA los fundamentos de los descriptivos y de uso, de
métodos todos los espectrómetros
- Fundamento de la espectrofotométricos y opera de absorción atómica,
espectroscopia de absorción los estudiados en la
atómica equipos de absorción asignatura
- Instrumentación analítica atómica, UV Visible, etc. para
- Elección de la longitud de onda cuantificar sustancias
- Corrección del ruido de fondo presentes en
- Análisis cuantitativo por sólidos, líquidos y gases.
espectrofotometría de absorción
atómica

POTENCIOMETRIA Aplica los conocimientos Elabora instructivos


- Potenciales de electrodo teóricos y prácticos, de los descriptivos y de uso, de
- Tipos de electrodo potenciómetros estudiados, todos los potenciómetros,
- Potenciómetros estudiados en la
tanto en la clase de
- Aplicación de la potenciometria asignatura
laboratorio y como en su
Titulaciones
campo laboral.
potenciométrica (Acido
base)

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CONDUCTIMETRIA Aplica los conocimientos Elabora instructivos


- Conducción electrolítica teóricos y prácticos, de los descriptivos y de uso, de
- Conductancia conductímetros estudiados, todos los conductímetros,
- Medidas de conductividad estudiados en la
tanto en la clase de
- Aplicaciones farmacéuticas de asignatura
laboratorio y como en su
la conductimetría
campo laboral.
- Titulaciones conductimétricas
(Acido - base)

CROMATOGRAFIA PLANA Comprende los Elabora instructivos


- Cromatografía en papel (PC) fundamentos de los métodos descriptivos y de uso, de
- Cromatografía en capa fina cromatográficos y los aplica todos los cromatógrafos,
(CCF) o (TLC) para cuantificar estudiados en la
- Preparación de la cromatoplaca sustancias presentes en asignatura
- Cálculo del factor de líquidos y gases.
retención Rf
- Cromatografía de alta eficacia
en capa delgada (HPTLC
CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS Comprende los Elabora instructivos
- Cromatografía fundamentos de los métodos descriptivos y de uso, de
- Teoría de la columna cromatográficos y los aplica todos los cromatógrafos
- Parámetros intrínsecos de la para cuantificar de líquidos estudiados en
columna sustancias líquidas en los la asignatura
- Eficacia de la columna laboratorios dentro de su
- Identificación y cuantificación campo laboral
por HPLC/UV-VIS
- Aplicaciones de la
cromatografía de líquidos en
farmacia
- Derivatizacion para la
cromatografía de líquidos
- Cromatografía de adsorción
- Cromatografía de partición

CROMATOGRAFIA DE GASES Comprende los Elabora instructivos


- Características fundamentales fundamentos de los métodos descriptivos y de uso, de
de la cromatografía de gases cromatográficos y los aplica todos los cromatógrafos
- Cromatografo de gases para cuantificar de gases estudiados en
- Acoplamiento del cromatografo sustancias gaseosas en los la asignatura
de gases a detectores laboratorios dentro de su
- Identificación y cuantificación campo laboral
por Cromatografía de gases/
FID
- Aplicaciones de la
cromatografía de gases

ESPECTROMETRIA DE MASAS Comprende los Elabora instructivos

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- Fundamento fundamentos de los descriptivos y de uso, de


- Espectrómetro de masas espectrómetros de masas y todos los espectrómetros
- Fuentes de ionización en los aplica para cuantificar de masas estudiados en
espectrometría de masas sustancias en los análisis la asignatura
- Espectro de masas realizados en los laboratorios
- Aplicaciones dentro de su campo laboral

METODOLOGIA DOCENTE Y ESTRATEGIAS DE ENSEÑANZA

CONTENIDO: INTRODUCCION AL ANALISIS INSTRUMENTAL

S
E CRITERIOS
M SABERES BASICOS ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE RECURS DE
A OS EVALUACIO
N N
A
PROCEDIMENT ACTITUDINAL
AL
1 - Presentación del Participa Pizarra,
sílabo del curso, Participa en la activamente proyector
de la metodología, socialización del durante la multimedi
del sistema de sílabo. exposición a. Demuestra
evaluación y de la teórica Smartpho calidad,
bibliografía. Elabora el ne, responsabilid
cuestionario 1 Internet, ad y
- Visión global de la hoja de puntualidad.
asignatura, preguntas,
definición y laptop,
términos marcadore
asociados s

2 CONTENIDO: METODOS DE CALIBRACION Y VALIDACION DE METODOS


ANALITICOS
- Calibración de los Participa Pizarra,
métodos activamente proyector Demuestra
instrumentales durante la multimedi responsabil
- Métodos de exposición a. idad y
calibración teórica Smartpho puntualidad
- Calibración Elabora el ne,
externa cuestionario 2 Internet, Presenta el
- Método de la hoja de informe
adición de preguntas, respetando
estándar laptop, el esquema
- Método del marcadore del modelo
s del informe

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estándar interno Participa de un presentado


- Validación de conversatorio de en clase.
métodos analíticos la importancia de
resultados
analíticos, emite
opiniones.
Desarrolla
ejercicios sobre la
precisión,
exactitud y tipos
de errores.

3 CONTENIDO: METODOS BASADOS EN LA INTERACCION DE LA RADIACION CON


LA MATERIA
- Radiación Participa Pizarra,
electromagnética activamente proyector Presenta el
- Espectro durante la multimedi informe
exposición a. respetando
electromagnético Observa el PPT
el esquema
haciendo teórica Smartpho
- Absorción de la Presenta en
comentarios y Elabora el ne,
radiación preguntas. cuestionario 3 Internet, el tiempo
- Fuentes de hoja de
establecido,
radiación Realiza una con calidad
preguntas, y
- Monocromadore síntesis sobre los laptop,
métodos puntualidad
s marcadore los trabajos
espectroscópicos
- Recipientes para s individuales
de análisis y sus
la muestra principales y grupales.
teorías en grupos
de 3.

4 CONTENIDO: POLARIMETRIA Y REFRACTOMETRIA POLARIMETRIA:


- Procedimient Participa Pizarra,
o de la activamente proyector Presenta el
polarización durante la multimedi informe
exposición a. respetando el
- Polarización esquema
teórica Smartpho
por refracción Elabora el ne, Presenta en el
doble cuestionario 4 Internet, tiempo
- Actividad establecido, con
hoja de calidad y
óptica preguntas, puntualidad los
- Polarímetro laptop, trabajos
- Aplicaciones marcadore individuales y
- Definiciones s grupales.
generales
- Fundamento
e La técnica

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- Refractometr
o de Abbe

5 CONTENIDO: ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA


VISIBLE
o Análisis Participa Pizarra,
cualitativo Observa el PPT activamente proyector Presenta el
y haciendo durante la multimedi informe
comentarios y exposición a. respetando el
cuantitativ preguntas. esquema
teórica Smartpho
o por Realiza una síntesis Presenta en el
Elabora el ne,
espectrofo sobre los métodos
cuestionario 5 Internet, tiempo
tometría espectroscópicos de establecido, con
análisis y sus
hoja de calidad y
ultraviolet preguntas,
principales teorías puntualidad los
a visible en grupos laptop, trabajos
- Técnicas marcadore individuales y
cualitativas s grupales.
- Procedimiento
en el análisis
cuantitativo
- Aplicaciones de
la
espectroscopia
de absorción
molecular UV-
VIS

6 CONTENIDO: ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION INFRARROJA


- Introducción a la Participa Pizarra,
espectroscopia Observa el PPT activamente proyector Presenta el
infrarroja haciendo durante la multimedi informe
comentarios y exposición a. respetando el
- Instrumentación preguntas. esquema
teórica Smartpho
en la Realiza una síntesis Elabora el ne,
espectroscopia sobre los métodos
cuestionario 6 Internet, Presenta en el
de absorción espectroscópicos de hoja de
tiempo
análisis y sus establecido, con
infrarroja preguntas,
principales teorías calidad y
- Manejo de en grupos laptop, puntualidad los
muestras marcadore trabajos
- Características de s individuales y
un espectro grupales.
infrarrojo
- Aplicaciones e la
espectroscopia
infrarroja

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7 CONTENIDO: ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION ATOMICA


- Fundamento de Participa Pizarra,
la Observa el PPT activamente proyector Presenta el
espectroscopia haciendo durante la multimedi informe
comentarios y exposición a. respetando el
de absorción preguntas. esquema
teórica Smartpho
atómica
Elabora el ne,
- Instrumentación Realiza una síntesis
cuestionario 7 Internet, Presenta en el
analítica sobre los métodos tiempo
hoja de
- Elección de la espectroscópicos
análisis y sus
de
preguntas,
establecido, con
calidad y
longitud de onda principales teorías laptop, puntualidad los
- Corrección del en grupos marcadore trabajos
ruido de fondo s individuales y
grupales.
- Análisis
cuantitativo por
espectrofotometr
ía de absorción
atómica

8 CONTENIDO: POTENCIOMETRIA
- Potenciales de Participa Pizarra,
electrodo Observa el PPT activamente proyector Presenta en el
- Tipos de haciendo durante la multimedi tiempo
comentarios y exposición a. establecido el
electrodo trabajo con
preguntas. teórica Smartpho
- Potenciómetros Elabora el ne, orden, relación
- Aplicación de la de ideas y
Realiza una cuestionario 8 Internet,
coherencia.
potenciometria síntesis sobre lo hoja de
Titulacion mostrado en las preguntas, Expone
es ppts laptop, el avance del
potenciom marcadore proyecto con
étrica s claridad en sus
(Acido ideas y sustento
científico.
base)

9 CONTENIDO: CONDUCTIMETRIA
- Conducción Participa Pizarra, Presenta en el
. Observa el PPT activamente proyector tiempo
electrolítica
haciendo durante la multimedi establecido el
- Conductancia trabajo con
comentarios y exposición a.
- Medidas de orden, relación
preguntas. teórica Smartpho
conductividad Elabora el ne,
de ideas y
- Aplicaciones coherencia.
Realiza una cuestionario 9 Internet,
farmacéuticas de síntesis sobre lo hoja de Expone
la conductimetria mostrado en las preguntas, el avance del
- Titulaciones presentaciones laptop, proyecto con

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conductimetricas marcadore claridad en sus


(Acido - base) s ideas y sustento
científico.

1 CONTENIDO: CROMATOGRAFIA PLANA


0
- Cromatografía Observa el PPT Participa Pizarra, Presenta en el
haciendo activamente proyector tiempo
en papel (PC)
comentarios y durante la multimedi establecido el
- Cromatografía trabajo con
preguntas. exposición a.
en capa fina orden, relación
teórica Smartpho
(CCF) o (TLC) Realiza una Elabora el ne,
de ideas y
- Preparación de síntesis sobre lo cuestionario 10 coherencia.
Internet,
la cromatoplaca mostrado en las hoja de Expone
- Cálculo del factor presentaciones preguntas, el avance del
de retención Rf laptop, proyecto con
- Cromatografía marcadore claridad en sus
de alta eficacia s ideas y sustento
científico.
en capa delgada
(HPTLC
1 CONTENIDO: CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS
1
- Cromatografía Observa el PPT Participa Pizarra, Presenta en el
haciendo activamente proyector tiempo
- Teoría de la
comentarios y durante la multimedi establecido el
columna trabajo con
preguntas. exposición a.
- Parámetros orden, relación
teórica Smartpho
intrínsecos de la Realiza una Elabora el ne,
de ideas y
columna coherencia.
síntesis sobre lo cuestionario 11 Internet,
- Eficacia de la mostrado en las hoja de Expone
columna ppts preguntas, el avance del
- Identificación y laptop, proyecto con
cuantificación marcadore claridad en sus
s ideas y sustento
por HPLC/UV- científico.
VIS
- Aplicaciones de
la cromatografía
de líquidos en
farmacia
- Derivatizacion
para la
cromatografía de
líquidos
- Cromatografía
de adsorción
- Cromatografía

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de partición

1 CONTENIDO: CROMATOGRAFIA DE GASES


2
- Características Observa el PPT Participa Pizarra, Presenta en el
haciendo activamente proyector tiempo
fundamentales
comentarios y durante la multimedi establecido el
de la trabajo con
cromatografía de preguntas. exposición a.
orden, relación
teórica Smartpho
gases de ideas y
Realiza una Elabora el ne, coherencia.
- Cromatografo de síntesis sobre lo cuestionario 12 Internet,
gases mostrado en las hoja de Expone
- Acoplamiento del ppts preguntas, el avance del
cromatografo de laptop, proyecto con
gases a marcadore claridad en sus
detectores s ideas y sustento
científico.
- Identificación y
cuantificación
por
Cromatografía
de gases/ FID
- Aplicaciones de
la cromatografía
de gases

1 CONTENIDO: ESPECTROMETRIA DE MASAS


3
- Fundamento Observa el PPT Participa Pizarra, Presenta en el
haciendo activamente proyector tiempo
- Espectrómetro
comentarios y durante la multimedi establecido el
de masas trabajo con
preguntas. exposición a.
- Fuentes de orden, relación
teórica Smartpho
ionización en Realiza una Elabora el ne,
de ideas y
espectrometría coherencia.
síntesis sobre lo cuestionario 13 Internet,
de masas mostrado en las hoja de Expone
- Espectro de ppts preguntas, el avance del
masas laptop, proyecto con
- Aplicaciones marcadore claridad en sus
s ideas y sustento
científico.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

IV. EVALUACIÓN DE LA ASIGNATURA.

 PROCESUAL O FORMATIVA

Se realizarán por cada examen parcial 4 evaluaciones, ponderadas y promediadas


sobre los 40 puntos procesuales, entendiéndose por evaluación procesual cualquier
actividad realizada tanto en clase práctica o laboratorio, como teórica o de aula abierta
o brigada.

Las siguientes son actividades procesuales a ponderarse sobre 40 puntos cualesquiera:

 GIP´S o clases prácticas o de laboratorio, realizados y evaluados de la siguiente


manera:
- Asistencia: 10 puntos (por cada minuto de atraso se descontará 1 punto al
respecto, teniendo como tolerancia máxima 10 minutos).
- Presentación de un informe escrito y en grupo: 30 puntos (teniendo como
títulos a evaluar: Objetivos. Fundamento Teórico. Procedimiento.
Resultados. Conclusiones. Cuestionario).
- La ausencia a alguna práctica por parte del estudiante automáticamente
éste pierde el derecho a la presentación del informe, su nota procesual
será cero. En caso de licencia justificada el estudiante tendrá que
recuperar esa práctica en otro horario que realice la misma práctica, para
poder presentar con su grupo el informe correspondiente.
 Cuestionarios de Work Paper: a realizarse de forma escrita a mano con un
mínimo de 10 páginas. Trabajo impresos se evaluarán sobre 20 puntos.
 Exámenes prácticos a ser tomado durante las evaluaciones parciales de la
materia.
 Realización de Brigada en aula abierta cumpliendo así con el encargo social de
la Carrera y la Universidad, serán en primera instancia voluntarias, en caso
contrario de no haber grupos voluntarios las Brigadas se tornarán obligatorias.
 Y otras actividades como exposiciones, trabajos prácticos y de investigación,
dinámicas…

 DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA


(examen parcial y/o final)

 Se realizarán dos evaluaciones parciales y un examen final con contenido teórico


y/o práctico sobre 60 puntos cada uno.

V. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA

 “Principios de Análisis Instrumental”. D.A. Skoog, F.J. Holler, S.R. Crouch. 6ª Edición.
CENGAGE Learning Editores. México 2008.
 “Análisis Instrumental”. K.A. Rubinson, J.F. Rubinson. Ed. Prentice Hall. Madrid 2001.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

 “Análisis Instrumental”, R. Bermejo y A. Moreno. Ed. Síntesis. Madrid 2014.


 “Análisis Instrumental”. Algunos métodos fotométricos y electrométricos. Apuntes de
clases. Federman Castro Eusse. Colombia 2014.

BIBLIOGRAFÍA COMPLEMENTARIA

 “Laboratorio de Análisis Instrumental”. R. Herráez, M. Llobat. 1ª Edición. Editorial


Reverte. España 2010.
 “Análisis Instrumental”. M.I. Sierra, D. Pérez, S. Gomez. 1ª Edición. Netbiblo S.L.
España 2009.

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VI. PLAN CALENDARIO

SEMANA ACTIVIDADES ACADÉMICAS OBSERVACIÓN

1ra. 22/02/16 - 26/02/16 Presentación de la materia  


Tema 1: Introducción al Análisis
2da. 29/02/16 - 04/03/16  
Instrumental
Tema 2: Métodos de calibración y
3ra. 07/03/16 - 11/03/16 validación de métodos  
Analíticos
Tema 3: Métodos basados en la
4ta. 14/03/16 - 18/03/16 interacción de la radiación con la  
materia
Tema 4: Polarimetría y
5ta. 21/03/16 - 25/03/16
Refractometría
Tema 5: Espectroscopia de
6ta. 28/03/16 - 01/04/16 absorción molecular ultravioleta
visible
Tema 6: Espectroscopia de Primeros
7ma. 04/04/16 - 08/04/16
absorción infrarroja Parciales
Primeros
8va. 11/04/16 - 15/04/16
Parciales
Tema 7: Espectroscopia de
9na. 18/04/16 - 22/04/16
absorción atómica
10ma. 25/04/16 - 29/04/16 Tema 8: Potenciometría
11ra. 02/05/16 - 06/05/16 Tema 9: Conductimetría
12da. 09/05/16 - 13/05/16 Tema 10: Cromatografía plana
Tema 11: Cromatografía de
13ra. 16/05/16 - 20/05/16
líquidos
14ta. 23/05/16 - 27/05/16 Tema 12: Cromatografía de gases
Tema 13: Espectrometría de Segundos
15ta. 30/05/16 - 03/06/16
masas Parciales
Segundos
16ta. 06/06/16 - 10/06/16
Parciales
17ma. 13/06/16 - 17/06/16 Retroalimentación
18va. 20/06/16 - 24/06/16 Evaluación final
19na. 27/06/16 - 01/07/16 Evaluación final
20ma. 04/07/16 - 08/07/16 2ª Instancias

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VII. WORK PAPER´S

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


WORK PAPER # 1
UNIDAD I PRIMER PARCIAL
FECHA DE ENTREGA: 5a semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 6a semana

METODOS AUTOMATICOS DE ANALISIS

Durante las últimas décadas han aparecido en el comercio sistemas analíticos automáticos
capaces de efectuar toda una serie de operaciones químicas y manipulaciones físicas con la
mínima intervención humana. Se han desarrollado ingeniosos aparatos que pueden medir
cantidades determinadas de muestra y reactivos, mezclarlos, llevarlos a la temperatura
deseada, efectuar separaciones, introducir la muestra tratada en espectrofotómetros,
cromatógrafos u otros instrumentos, así como finalmente registrar la señal correspondiente,
todo ello, de forma automática.

Los sistemas automáticos se diseñaron inicialmente para satisfacer las necesidades de los
laboratorios de análisis clínicos, donde era necesaria una gran cantidad de determinaciones
analíticas, con fines diagnósticos, preventivos, o como control de la evolución de pacientes
sometidos a algún tipo de tratamiento. Actualmente, estos sistemas automáticos se aplican
extensamente en los más diversos campos. En muchas industrias, el laboratorio de control
es, en cierto modo, la pieza clave de su funcionamiento, debido a la necesidad de realizar
análisis puntuales a lo largo del proceso de fabricación para controlar los materiales de
entrada, los productos parcialmente tratados y las especies finales.

Por otra parte, cada vez es más frecuente la incorporación de algún sistema automático para
llevar a cabo alguna operación específica dentro de los métodos instrumentales,
automatizando parcialmente la operación. Así, por ejemplo, el sistema de muestreo
automático es casi imprescindible en absorción atómica cuando se utiliza el horno de grafito
para la atomización de la muestra, pues solo así se consigue buena reproducibilidad.

Los sistemas automatizados presentan las siguientes ventajas:

* La velocidad con que se realizan los análisis suele ser significativamente más alta que
cuando se utilizan dispositivos manuales.
* Un analizador bien diseñado proporciona mayor precisión durante largos periodos de
tiempo de lo que lo haría un operador usando un instrumento manual.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

Esto se debe, fundamentalmente, a la gran reproducibilidad de las secuencias de tiempo que


se consigue con los instrumentos automatizados y a que las máquinas no se fatigan.
* Menores costos laborales, ya que, el personal encargado de un instrumento automatizado
puede tener menor grado de cualificación, y, por tanto, ser menos costoso, que el necesario
para desarrollar un método no automático.

Entre los inconvenientes, pueden citarse:

* Menor versatilidad que los sistemas no automáticos.


* La inversión inicial suele ser elevada, lo cual requiere que el volumen de trabajo sea lo
bastante grande para amortizar aquella inversión.

Sistemas automáticos y automatizados

La IUPAC distingue entre dispositivos automáticos y automatizados.

Los dispositivos automáticos son aquellos que efectúan unas acciones previamente
programadas para realizarse en unos puntos del proceso sin intervención humana. Así, por
ejemplo, un valorador automático registra una curva de valoración o simplemente interrumpe
la valoración en un punto por medio de un dispositivo mecánico o eléctrico, en lugar de
hacerlo manualmente. El sistema no toma decisiones, y la secuencia de operaciones es
siempre la misma.

Por otra parte, un dispositivo automatizado, se diseña para que un sistema de


realimentación* le permita tomar decisiones sin intervención humana. El control de un
proceso automatizado se lleva a cabo por medio de un dispositivo que consta, al menos, de
tres componentes: un elemento de percepción sensible a la variable a controlar, un sistema
que compare la variable medida con un valor de referencia y produzca una señal proporcional
a esa diferencia, y, finalmente, un dispositivo que actúe sobre algún mecanismo para reducir
la diferencia medida

CUESTIONARIO

1. Mediante un cuadro indique la clasificación de los métodos analíticos instrumentales


en función a las propiedades fisicoquímicas que el instrumento detecta.
2. Mencione las principales técnicas instrumentales utilizadas en la identificación y
determinación de estructuras químicas de compuestos medicinales
3. Mencione las principales técnicas instrumentales empleadas en estudios de
homogeneidad y pureza de productos farmacéuticos.
4. Investigue los principales componentes de un instrumento analítico y defina cada uno.
5. Investigue los componentes de una balanza electrónica, e indique el fundamento de su
funcionamiento.

6. Indique y desarrolle los tipos de errores en química analítica


7. Porque es importante validar un método analítico

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

8. Que es quimiometría, qué importancia tiene


9. Investigue como se calibra: una balanza analítica

10. Que es radiación electromagnética


11. Indique los fenómenos que pueden ocurrir por la interacción de la radiación
electromagnética con la materia
12. Defina:
Espectroscopia de absorción
Espectroscopia de emisión
Espectroscopia fotoacústica
Espectroscopia de fluorescencia
13. Diferencia entre nefelometría y turbidimetría
14. Que es un espectrofotómetro
15. Indique la importancia de la espectrofotometría ultravioleta visible en el área de las
ciencias farmacéuticas y bioquímicas
16. Diferencia entre un espectrofotómetro de haz sencillo y uno de haz doble
17. Indique las ventajas de un espectrofotómetro con detector de fotodiodos
18. Que es quimioluminiscencia, cuál es su diferencia con la fotoluminiscencia

19. Que es un refractómetro, cuál es su aplicación en farmacia


20. Qué tipo de análisis puede llevarse a cabo con un refractómetro
21. Que requisito debe cumplir una molécula para desviar el plano de luz polarizada
22. Dibuje una molécula orgánica quiral
23. Cuál es la importancia de conocer la actividad óptica de un principio activo

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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


WORK PAPER # 2
UNIDAD II SEGUNDO PARCIAL
FECHA DE ENTREGA: 11a Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 12a Semana

APLICACIONES DE ESPECTROMETRÍA DE MASA

Las aplicaciones son tan numerosas y abarcan tantos campos que resulta
complicado citarlas todas, a continuación veremos las más características:

Elucidación de la estructura de moléculas orgánicas y biológicas.


Determinación del peso molecular de péptidos, proteínas y oligonucleicos.
Identificación de los compuestos de cromatogramas en capa fina y papel.
Determinación de secuencias de aminoácidos en muestras de polipéptidos y
proteínas.
Detección e identificación de especies separadas por cromatrografía y electroforesis
capilar.
Identificación de drogas de abuso y sus metabolitos en sangre, orina y saliva.
Control de gases en enfermos respiratorios durante los procesos quirúrgicos.
Pruebas para confirmar la presencia de drogas en sangre de caballos de carreras y
en atletas olímpicos.
Datación de ejemplares en arqueología.
Análisis de partículas en aerosoles.
Determinación de residuos de pesticidas en alimentos.
Control de compuestos orgánicos volátiles en el agua de suministro

Aplicaciones cualitativas

Determinación del peso molecular de todas las sustancias que pueden volatilizarse
por la posición del pico correspondiente a la masa patrón.
Determinación de la formula molecular. Si el instrumento es de gran resolución
bastará la determinación precisa de su masa molecular para poder atribuirle una
fórmula empírica. Otras veces puede determinarse por la relación entre las alturas
del pico correspondiente a la masa patrón y la de los picos de los isótopos. Existe

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

una tercera forma que sería con la regla del nitrógeno, según la cual todas las
sustancias orgánicas con peso molecular par deben de contener un número par o
ningún átomo de N y los de número impar deben de contener un número impar. Por
el contrario los fragmentos moleculares por rotura de enlace, tienen una masa impar
si contienen cero o número par de átomos de N y masa par si el número de átomos
de N es impar.
Identificación de compuestos por su fragmentación patrón: la fragmentación de la
mayor parte de las moléculas produce un gran número de picos que permiten la
identificación de numerosos compuestos y el reconocimiento de ciertos grupos
funcionales de ellos. Se han descrito una serie de reglas generales que rigen los
procesos de fragmentación, los cuales son de gran utilidad para la determinación de
los espectros.
Identificación de productos de reacción o de productos metabólicos: se usa en
cinética química y en farmacología pudiéndose llegar a identificar impurezas y
metabolitos a concentraciones de pocas partes por millón.
Caracterización y análisis de polímeros: el polímero se piroliza en condiciones
controladas y los productos volátiles se hacen pasar a un espectrómetro para su
análisis.
Análisis de sangre: gracias a la rapidez del método, se puede emplear incluso como
control durante un proceso quirúrgico. Así se puede determinar a gran velocidad las
concentraciones hemáticas de monóxido y dióxido de carbono, oxígeno, nitrógeno,
gases anestésicos (como el NO).
Estudiar la abundancia de isótopos: Esta fue la finalidad con la que fue creada la
técnica y en la actualidad se usa para análisis por dilución de isótopos, estudios con
trazadores isotrópicos, estudiar la edad de las muestra por su proporción de
isótopos con la ventaja frente a los radiactivos que se pueden medir los isótopos no
radiactivos.

Aplicaciones cuantitativas

Para la determinación cuantitativa de los componentes de una mezcla es


conveniente que cada uno de ellos presente por lo menos un pico que difiera
claramente de los demás. La calibración se realiza por comparación de los picos con
patrones adecuados. Las alturas de los picos son directamente proporcionales a las
presiones parciales de los componentes volatilizados en la muestra.
Las aplicaciones cuantitativas de la espectrometría de masas para análisis
cuantitativo son de dos tipos:

Determinación cuantitativa de especies moleculares o tipos de especies moleculares


en muestras orgánicas, biológicas y ocasionalmente inorgánicas: normalmente tales
análisis se llevan a cabo haciendo pasar la muestra a través de una columna
cromatrográfica o de electroforesis capilar y posteriormente por el espectrómetro.
Determinación de la concentración de elementos en muestras inorgánicas y, en
menor medida, de muestras orgánicas y biológicas: las concentraciones de analito

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en este caso se obtienen directamente a partir de las alturas de los picos de los
espectros de masas. Se crean curvas de calibrado que nos permiten el análisis
cuantitativo gracias a la existencia de picos únicos para cada componente y cada
valor de m/z.

CUESTIONARIO

1. Qué importancia tiene la espectroscopia de absorción visible en el análisis de los


diferentes metabolitos secundarios propios del cuerpo humano
2. Que es un grupo cromóforo
3. Que es un grupo auxócromo
4. Que es derivatizacion, cuál es su finalidad.
5. Qué diferencia hay entre un espectrofotómetro y un colorímetro
6. Convertir los siguientes datos de transmitancia en absorbancia
a) 25.5%
b) 0.567%
c) 32.8%
d) 3.58%
e) 0.085
f) 53.82%

7. Indique la importancia de la espectroscopia de absorción infrarroja en el control de


calidad de materia prima y principios activos de uso farmacéutico.
8. Que información brinda el espectro infrarrojo en el análisis de compuestos químicos
orgánicos?, que tipo de muestras pueden estudiarse por este método?
9. Investigue las frecuencias de los máximos de absorción en el infrarrojo de los
principales grupos funcionales orgánicos.
10. A que se denomina zona de la huella dactilar de una molécula en espectroscopia
infrarroja.

11. Indique que tipo de fuente (lámpara de cátodo hueco), utilizaría Ud., si desea
determinar plomo en agua
12. Qué importancia merece la espectroscopia de absorción atómica en las ciencias
bioquímicas y farmacéuticas
13. Si usted desea determinar residuos de plomo en sistemas biológicos (muestras
vegetales) que tratamiento aplicaría a su muestra, para identificar y cuantificar al metal
por EAA con atomizador de llama
14. Que es el efecto fotoeléctrico.

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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


WORK PAPER # 3
UNIDAD III TERCER PARCIAL
FECHA DE ENTREGA: 16a Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 17a Semana

INTRODUCCIÓN AL ANÁLISIS DEL TAMAÑO DE PARTÍCULA

La información del tamaño de partícula es muy importante para muchos proyectos de


investigación y procesos industriales, por esa razón varias técnicas analíticas se encargan de
proveer los datos relacionados con este aspecto.
Algunas dan sólo un tamaño promedio, mientras que otras proporcionan una distribución
completa del tamaño de partícula. Por consiguiente, el primer paso cuando se efectúa un
análisis de tamaño de partícula es elegir la técnica analítica apropiada, como ser: dispersión
de luz láser de ángulo bajo, dispersión de luz dinámica y fotosedimentación.
El método específico de determinación del tamaño de partícula elegido depende del tipo de
información que se requiere acerca del tamaño y también de las propiedades químicas y
físicas de la muestra. Además de las tres técnicas que se mencionó, se aplican de manera
común el
cribado molecular, la conductancia eléctrica, la microscopía, la cromatografía hidrodinámica
molecular, el conteo de oscurecimiento de luz, el fraccionamiento de flujo de campo, la
anemometría Doppler y la espectrometría ultrasónica. Cada uno de los métodos de
determinación del tamaño de partícula tiene sus propias ventajas y desventajas para
muestras y análisis particulares.

El análisis del tamaño de partícula presenta un dilema singular. En general, se trata de


describir el tamaño de partícula mediante una sola cantidad, como diámetro, volumen o área
superficial. La distribución del tamaño de partícula es una gráfica del número de partículas
que tienen un valor único de la cantidad elegida frente a la misma cantidad o bien una
distribución acumulada que representa la fracción de partículas más grandes o más

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

pequeñas que un tamaño característico. El dilema surge porque las partículas que se
describen son tridimensionales.
El único objeto tridimensional que se puede describir mediante una sola cantidad es una
esfera.
A partir del diámetro de ésta se puede calcular con exactitud su área superficial y su
volumen. Si se conoce la densidad de una partícula esférica, se puede calcular también su
masa.

¿Cómo se trabaja entonces con partículas no esféricas?


Los métodos usuales son suponer que las partículas son esféricas y después proceder como
si lo fueran o se puede convertir la cantidad medida en la de una esfera equivalente.

Otro problema básico con las mediciones del tamaño de partícula es que técnicas diferentes
dan con frecuencia resultados diversos para partículas tridimensionales.
Incluso si el diámetro de partícula se midiera de manera directa con un microscopio, ¿qué
dimensión se cuantificaría? Si la partícula fuera cúbica, tres dimensiones diferentes
(longitudes) se podrían tomar como el diámetro. Por ejemplo, la longitud máxima podría
desempeñar ese papel; esto equivaldría a decir que la partícula es una esfera con dicho
diámetro. O bien, la longitud mínima se podría tomar como el diámetro.
De manera alternativa, el volumen o el área superficial se podrían usar para calcular el
diámetro de la esfera equivalente. Todos los resultados que se obtengan mediante esta
técnica simple, la microscopía, serán diferentes pero correctos para la cantidad que se
evalúa.

Ciertas técnicas de medición requieren también características físicas, como densidad e


índice de refracción.
Por ejemplo, la información del índice de refracción es necesaria para métodos que se basan
en la dispersión de la luz, pero por lo general se requieren densidades para los que se basan
en la sedimentación.
Por lo común se hacen suposiciones acerca de estas cantidades a menos que estén
disponibles valores medidos.
Dichas suposiciones pueden de nuevo conducir a discrepancias en los tamaños de partícula
reportados.

Antes de elegir una técnica de determinación del tamaño de partícula, es aconsejable


examinar las muestras con un microscopio porque con él se puede estimar la variedad de
tamaños y formas presentes. La mayor parte de los métodos para determinar las
dimensiones de una partícula son sensibles a la forma de ésta y están limitados respecto al
intervalo de tamaños de partícula.
Las que tienen formas más o menos esféricas se miden con más exactitud. Las agujas y
otras geometrías que difieren significativamente de la forma esférica se analizan por lo
común mediante un microscopio.
Para muchas técnicas, los tamaños de partícula se obtienen mejor al suspenderlas en un
líquido en el cual son insolubles. El líquido puede producir una suspensión que es

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homogénea en concentración y bastante uniforme en tamaño para introducirla en el


instrumento de determinación de tamaño de partícula. Las suspensiones en líquido inhiben
también cualquier fuerza cohesiva que pudiera generar la coagulación o aglomeración de las
partículas. Los líquidos elegidos deben ser químicamente inertes hacia los materiales con los
que entra en contacto en el instrumento.

CUESTIONARIO

1. Que es cromatografía
2. Indique la clasificación de cromatografía
3. Indique las principales aplicaciones de la cromatografía en las ciencias bioquímicas y
farmacéuticas
4. Que es extracción en fase solida
5. Que es Clean – up
6. Que es cromatografía de fase normal y de fase reversa

7. Para llevar a cabo una corrida por Cromatografia liquida de alta resolución, que tipo de
solventes debe utilizarse, indique su grado químico.
8. Indique mediante un esquema los principales componentes del HPLC, desarrolle
cada una de ellas.
9. En cromatografía liquida de alta resolución HPLC, donde se produce la separación.
10. Que es elución, a que se llama elución en gradiente y elución isocratica, cual es la
diferencia
11. A que se llama tiempo de retención
12. Que es un cromatograma.
13. Indique los diferentes tipos de detectores que pueden acoplarse al cromatografo
líquido de alta resolución.
14. Como se realiza la identificación y la cuantificación en cromatografía liquida de alta
resolución, esquematice para hacer más objetiva su respuesta.

15. Que requisitos debe de cumplir un compuesto químico para ser separado por
cromatografía de gases
16. Indique los diferentes componentes que tiene un cromatografo de gases
indicando la función que cumple cada una de ellos
17. Que es resolución en cromatografía, de que depende la resolución en
cromatografía de gases
18. Indique los diferentes tipos de detectores que pueden acoplarse a un
cromatografo de gases, señalando en cada caso el fundamento del detector y
los tipos de compuestos químicos que detecta.
19. Indique el significado de: GC/MS, GC/FID, GC/NPD, GC/ECD

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20. Cuál es la finalidad de emplear rampas de temperatura en cromatografía de


gases
21. Como se realiza la identificación en cromatografía de gases.
22. Que es un cromatograma.
23. Indique los tipos de sistemas de ionización de muestras que poseen los
espectrómetros de masas
24. Que es un espectrómetro de masas de alta resolución
25. Investigue electroforesis uni y bidireccional
26. Explica acerca de la electroforesis de ADN
27. De ejemplos acerca de las aplicaciones de la electroforesis en el laboratorio (sobre
todo en el estudio de las globulinas)

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 1
TÍTULO: Normas de Bioseguridad
FECHA DE ENTREGA: 2ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 3ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO

Describe y aplica las normas que rigen el trabajo Cumple las normas de bioseguridad de
seguro dentro del laboratorio de química a fin de acuerdo a lo establecido en la universidad
prevenir daños en la integridad física del personal para la prevención de accidentes laborales al
y de las instalaciones. momento de la manipulación de reactivos y
muestras biológicas.

FUNDAMENTO:
La implantación de un Programa de Seguridad en el Laboratorio de química es de vital
importancia, ya que antes de iniciar cualquier trabajo es aconsejable analizar cuáles riesgos
pudieran presentarse, desde la manipulación inicial de las muestras objeto de análisis, hasta
el desecho final de los productos. La protección de la integridad de los laboratorios trae
aparejado la protección de los equipos, las muestras, el medio ambiente, la información, la
documentación y la salud de los trabajadores que laboran en ellos. Para lograr este objetivo
es necesario desarrollar e implantar un Programa de Seguridad que cubra todos los
aspectos relacionados con toda la actividad que se realiza dentro del laboratorio.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

Con el fin de llevar a cabo exitosamente la seguridad en el laboratorios se debe establecer


medidas generales de obligatorio cumplimiento, no sólo para el personal que labora en ellos,
sino también para aquél que requiere de los servicios y/o recursos del laboratorio. Asimismo
hay que establecer medidas relacionadas con la manipulación y el uso de las sustancias
químicas, la manipulación y preparación de las muestras que pudieran ser tóxicas,
inflamables, explosivas o dañinas, implementar un plan para el tratamiento y la disposición de
los residuos, medidas para evitar riesgos con el uso de los equipos, así como para la
protección de la información y toda la documentación.

PROCEDIMIENTO:
 Trabaje con orden, limpieza y sin prisa.
 Mantenga los mesones de trabajo limpios y sin productos, libros, cajas o accesorios
innecesarios para el trabajo que se está realizando.
 Utilice las campanas extractoras de gases siempre que sea posible.
 No utilice nunca un equipo de trabajo sin conocer su funcionamiento.
 Antes de iniciar un trabajo asegúrate de que el montaje está en perfectas condiciones.
 Si el trabajo lo requiere, usa los equipos de protección individual determinados
(guantes, gafas).
 Utilice siempre gradillas y soportes.
 No trabaje separado de las mesas.
 Al circular por el laboratorio debes ir con precaución, sin interrumpir a los que están
trabajando.
 No efectúe pipeteos con la boca: emplea siempre un pipeteador.
 No utilice vidrio agrietado, el material de vidrio en mal estado aumenta el riesgo de
accidente.
 Tome los tubos de ensayo con pinzas o con los dedos (nunca con las manos). El vidrio
caliente no se diferencia del frío.
 Compruebe cuidadosamente la temperatura de los recipientes que hayan estado
sometidos a calor, antes de cogerlos directamente con las manos.
 No fuerce directamente con las manos cierres de botellas, frascos, llaves de paso, etc.
que se hayan obturado. Para intentar abrirlos emplea las protecciones individuales o
colectivas adecuadas: guantes, gafas, campanas.
 Desconecte los equipos, agua y gas al terminar el trabajo.
 Deje siempre el material limpio y ordenado. Recoge los reactivos, equipos, etc. al
terminar el trabajo.
 Emplee y almacene sustancias inflamables en las cantidades imprescindibles.
 Las campanas de gases son un medio de protección colectiva y no deben utilizarse
para almacenar productos.
 Como norma higiénica básica, el personal debe lavarse las manos al entrar y salir del
laboratorio y siempre que haya habido contacto con algún producto químico.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

 Debe llevar en todo momento la ropa de trabajo abrochada y los cabellos recogidos,
evitando colgantes o mangas anchas que pudieran engancharse en los montajes y
material del laboratorio. No se debe trabajar separado de la mesa o la poyata, en la
que nunca han de depositarse objetos personales.
 El personal de nueva incorporación debe ser inmediatamente informado sobre las
normas de trabajo, plan de seguridad y emergencia del laboratorio, y características
específicas de peligrosidad de los productos, instalaciones y operaciones de uso
habitual en el laboratorio.
 Está prohibido fumar, llevar maquillaje, beber e ingerir alimentos en el laboratorio.
 Evite llevar lentes de contacto, si se detecta una constante irritación de los ojos y
sobre todo si no se emplean gafas de seguridad de manera obligatoria. Es preferible el
uso de gafas de seguridad, graduadas o que permitan llevar las gafas graduadas
debajo de ellas.

RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1. Qué entiendes por bioseguridad
2. Menciona cual es el riego biológico existente al manipular material orgánico vivo
3. Explique cómo debe ser la construcción adecuada de un laboratorio
4. Dibuje y explique al menos 10 cuadros de señalizaciones que debe tener en laboratorios
5. Qué se entiende por barrera biológica
6. Qué materiales, soluciones y otros, debe tener como mínimo un botiquín de primeros
auxilios

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

7. Qué diferencias existen entre este modelo de bioseguridad para bioquímica con
bacteriología.
8. Cómo se clasifican los objetos peligrosos antes de ser desechados.
9. Precise las medidas de prevención que debe conocer el personal que labora en los
laboratorios.
10. Qué indicaciones se establecen en caso de accidente

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 2
TÍTULO: Uso adecuado de los materiales de laboratorio
FECHA DE ENTREGA: 3ª y 4ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 5ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Puntualiza la función de cada material de Realiza y analiza procesos imprescindibles
laboratorio empleados en procesos más comunes en el laboratorio, como medir temperatura,
según establece el fabricante. calentamiento de tubos a fuego directo y a
baño María, uso del mortero, uso de la
pipeta.

FUNDAMENTO TEÓRICO

PROCEDIMIENTO
Repaso oral de todos los materiales a utilizar.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

- Cómo pipetear correctamente


- Cómo medir la temperatura
- Explique la forma de calentamiento de tubos de ensayo a fuego directo
- Cómo preparar un baño María y como calentar sustancias en el
- Uso adecuado del mortero

RESULTADOS
Explique acerca de la precisión y errores que presentan todos los materiales volumétricos.

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. ¿Qué entiende por cristalería de laboratorio?


2. Nombre los componentes del vidrio "Pyrex".
3. ¿Cómo se clasifica la cristalería general, investigue los más usados en el laboratorio de
bioquímica?
4. Nombre y dibuje los diferentes tipos de cristalería de medición volumétrica, al menos 15?
5. ¿Cuáles son las características de la cristalería de medición volumétrica?
6. ¿Cuáles son las diferencias entre en erlenmeyer y un frasco de kitasato?
7. ¿Cómo es una bureta?
8. Describa las características de los tubos de ensayo.
9. ¿Cómo son las placas de "Petry"?
10. ¿Cuánto miden las láminas portaobjetos y los cubreobjetos?
11. Explique las diferentes causas de error en que puede incurrirse durante el pipeteo.
12. ¿Para qué se utilizan los vasos de precipitado o Beaker?
13. ¿Qué materiales de laboratorio se fabrican de porcelana, de madera, de plástico y
metálicos, investigue al menos 5 de cada tipo y dibújelo?
14. Describa los cuidados y el manejo a tener en cuanto, cuando utilice los siguientes
equipos:
 un microscopio óptico,
 una macrocentrífuga,
 la balanza analítica,
 un baño maría y
 un espectrofotómetro.
15. Investigue los diferentes usos y cuidados que hay que tener en cuenta con los principales
reactivos:
 Ácido clorhídrico
 Ácido sulfúrico

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

 Ácido nítrico
 Ácido fosfórico
 Hidróxido de sodio

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GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 3
TÍTULO: Uso adecuado de la balanza analítica
FECHA DE ENTREGA: 5ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 6ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Describe el uso correcto de la balanza analítica Relaciona e interpreta medidas de exactitud
para el desarrollo del procedimiento de y precisión de la función que emplea la
calibración. balanza analítica para la deducción si esta
calibrado según normas de calidad.

FUNDAMENTO TEÓRICO

El estudiante deberá desarrollar un instructivo de operación de la balanza analítica, indicando


de forma detallada cada uno de los pasos a seguir desde la forma de encender, el
procedimiento de pesada, el mantenimiento…

Instalar la balanza en un lugar libre de vibraciones, flujo de aire y lejos de la radiación solar,
siguiendo las instrucciones de instalación del manual del proveedor.

Limpieza y ajuste:
1. Limpiar la balanza después de terminar los pesajes, con un pincel apropiado y un paño
suave.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

2. Ajustar la balanza cada día que se vaya a utilizar y luego de un cambio de lugar.
3. Registre la Hora y fecha de Limpieza, calibre y ajuste de la balanza, para mantener la
trazabilidad del proceso.

Precauciones y recomendaciones:
1. No coloque agua ni metales corrosivos directamente sobre el platillo de la balanza.
2. No exponga la balanza a objetos magnetizados.
3. Evite conectar equipos que produzcan mucho ruido muy cerca de a la balanza
4. La balanza debe estar nivelada y colocada en un sitio donde se prevengan las
vibraciones, grandes fluctuaciones de temperatura, rayos directos de sol y corrientes
de aire.

PROCEDIMIENTO
- Pesar 10 veces un objeto determinado… Calcular: Promedio… Desviación
estándar… Error aleatorio %... Compare los resultados con la precisión real de la
balanza del laboratorio.
- Pesar 5 veces un objeto que conozcan su peso verdadero… Calcular:
Promedio… Error sistemático absoluto… Error sistemático relativo….
- Explique sus resultados… de acuerdo a ellos está o no está calibrada la balanza
de nuestro laboratorio…

RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. Cuáles son los pasos para realizar una pesada analítica


2. Como se calibra una balanza analítica
3. Investigue la precisión de la balanza analítica de nuestro laboratorio
4. Investigue el peso máximo y el peso mínimo de la balanza analítica utilizada en
nuestro laboratorio
5. Cuáles son las precauciones a ser tomadas en cuenta para realizar una pesada
analítica

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

6. Como influye la temperatura durante la operación de pesada


7. Cuáles son los pasos para iniciar el encendido de la balanza
8. Como se realiza la operación de tarado
9. En los materiales utilizados para pesar cuál cree que es más preciso y por qué
10. Cómo verifica si la balanza analítica está correctamente calibrada

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 4
TÍTULO: Calibración de material volumétrico
FECHA DE ENTREGA: 8ª y 9ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 10ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Describe el fundamento para la calibración del Interpreta la exactitud y precisión de los
material volumétrico de uso común en el análisis materiales volumétricos con la finalidad de
químico cuantitativo poder deducir si se encuentra calibrado
según normas de control de calidad.

FUNDAMENTO TEÓRICO:
El material volumétrico de vidrio se calibra midiendo la masa de un líquido (por lo general
agua destilada), de densidad y temperatura conocida, que está contenido (o transferido) en
el material volumétrico que se quiere calibrar.

Todo el material volumétrico debe estar libre de fugas antes de calibrarse, las buretas y las
pipetas no necesitan secarse, los matraces aforados deben escurrirse bien y secarse a
temperatura ambiente. El agua utilizada para la calibración debe estar en equilibrio térmico
con los alrededores. Esta condición se alcanza recogiendo el agua para la calibración con
anterioridad, anotando su temperatura a intervalos frecuentes y esperando hasta que ya no
existan cambios en ella

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

Aunque la calibración parezca un proceso directo se debe evaluar numerosas variables


importantes de estas la principal es la temperatura que influye en la calibración de dos
formas: la primera y más importante es que el volumen ocupado por una determinada masa
de líquido varia con la temperatura; la segunda estriba en que el volumen del material es
variable a la tendencia del vidrio a contraerse o dilatarse con los cambios de temperatura.

Todo el material volumétrico esta calibrado a un temperatura especificada de 20°C y para


utilizarse de una forma determinada debido a la modificación del volumen de los líquidos y
del vidrio con los cambios de temperatura, se deben volver a calibrar los materiales
volumétricos cuando vaya a utilizarse a temperaturas diferentes de aquella para la que fueron
calibrados

El material volumétrico para laboratorio se clasifica en clase A y clase B de acuerdo al error


máximo permitido en general el error máximo permitido para la clase B es el doble del
permitido para la clase A.

MATERIALES Y REACTIVOS
Agua destilada
Matraz erlenmeyer de 250 ml
Vaso precipitado
Pipeta aforada de 10 ml
Probeta de 100 ml
Matraz aforado de 50 ml
Balanza analítica

PROCEDIMIENTOS:

Calibración de una pipeta aforada:


1. Enjuagar la pipeta aforada con abundante agua destilada
2. Lavar un vaso precipitado, secarlo y pesar con exactitud de miligramos y registrar el
P1
3. Cargar la pipeta con agua destilada atemperada a 20°C, y dejar caer sobre el vaso
precipitado, registrar el P2
4. Calcular la masa de agua transferida por diferencia de pesadas P2-P1
5. Calcular el volumen transferido (volumen real)
6. Repetir 10 veces el procedimiento y calcular el volumen medio
7. Calcular promedios, precisión, errores…

Calibración de un matraz volumétrico y/o Probeta


1. Enjuagar el material a calibrar con abundante agua destilada
2. Secarlo y pesar con exactitud de miligramos y registrar el P1
3. Cargar el material a calibrar hasta su volumen indicado (aforo en el caso de un matraz
o balón aforado, o el máximo volumen en el caso de una probeta) con agua destilada

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

atemperada a 20°C, con mucho cuidado de no derramar una sola gota de agua sobre
la balanza, registrar el P2
4. Calcular la masa de agua transferida por diferencia de pesadas P2-P1
5. Calcular el volumen transferido (volumen real)
6. Repetir 10 veces el procedimiento y calcular el volumen medio
7. Calcular promedios, precisión, errores…

CÁLCULOS:

Realice los cálculos pertinentes para comprobar si los materiales volumétricos están o no
calibrados, con ayuda del:
 volumen del material volumétrico,
 peso promedio del agua,
 temperatura del agua,
 densidad del agua y
 la precisión del material volumétrico

RESULTADOS

CONCLUSIÓN

CUESTIONARIO

1. Investigue otros métodos empleados para la calibración de material volumétrico.


2. Que es una micropipeta, como se calibra.
3. Investigue sobre el Instituto Boliviano de Metrología IBMETRO
4. Investigue sobre la ISO 17025

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

5. Investigue acerca de la calibración de una bureta


6. Busque un cuadro con las densidades del agua desde 0 a 100º C, en g/ml
7. Cuál cree qué ha sido el factor común de error en esta práctica
8. Qué incluye el control de calidad además de los materiales calibrados
9. Qué diferencias hay entre los materiales volumétricos clase A y clase B
10. Tome como muestra la pipeta aforada clase A de nuestro laboratorio e investigue
qué significan todos los números, letras, símbolos que ésta trae impresa.

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 5
TÍTULO: Uso de la Micropipeta y su Control
FECHA DE ENTREGA: 10ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 11ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Correlaciona los principios fundamentales con los Adquiere destreza en la manipulación de las
descritos según el fabricante de las micropipeta y micropipetas o pipetas automáticas.
su aplicación en el proceso analítico de las Investiga y analiza formas de calibración de
reacciones químicas asociadas con unidades de las micropipetas según normas ISO 8655
volúmenes.

FUNDAMENTO TEÓRICO

Las micropipetas o pipetas de pistón se carga y descarga merced a la acción del dedo pulgar
sobre su pistón, en cuyo extremo opuesto se coloca una punta de plástico desechable
llamada también puntera. Con ellas se evita la succión de los líquidos biológicos y el
consiguiente riesgo de contagio de enfermedades, y succionar disolventes orgánicos u otros

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

líquidos que produzcan vapores tóxicos o sean venenosos. Su volumen puede ser fijo o
variable.
Las micropipetas presentan tres posiciones que puede adoptar el émbolo: la normal de
reposo, la intermedia de aspiración y la de presión a fondo de dispensación.
Estas pipetas se cargan apretando el émbolo hasta la posición intermedia y luego se afloja la
presión para llenar la punta o puntera. Para descargarlas, se aprieta el émbolo hasta el
fondo. Algunas tienen acoplado un dispositivo para expulsar la puntera una vez utilizada.

PROCEDIMIENTO

Utilizar diferentes micropipetas entre aquellas de volúmenes fijos así como de volúmenes
variables…

Realice 10 pipeteadas y pesadas adecuadamente


Calcule promedios, desviación estándar, errores aleatorio y/o sistemático
Determine si las micropipetas utilizadas en el laboratorio están o no calibradas.

RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1. Indique y explique acerca de los elementos de una micropipeta.
2. Explique cómo se realiza el llenado y la expulsión de la muestra al medirla con la
umicropipeta.
3. Cómo se realiza el mantenimiento de las micropipetas?
4. Investigue acerca de las normas ISO DIS 8655 y 12650 sobre el calibrado de las
micropipetas.
5. Qué es una puntera y para qué se la utiliza?

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

6. Dibuje las micropipetas utilizadas en el laboratorio e indique sus partes


7. Investigue las precisiones con las que normalmente suelen trabajar las micropipetas
8. Qué es y para qué se utiliza un dispensador
9. Dibuje un dispensador
10. Convierta los siguientes volúmenes según convenga de ml a ul o viceversa:
534 ml =
7 ul =
54 ml =
1850 ul =
68 ul =
244 ul =
0,730 ml =
1,50 ml =
37 ul =
0,085 ml =

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 6
TÍTULO: Espectro de absorción visible de un colorante
FECHA DE ENTREGA: 11ª y 12ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 13ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Razona las bases fundamentales de la Relaciona valores de concentración,
espectrofotometría ultravioleta visible asociado a absorbancia y transmitancia con el espectro
los principales componentes del de absorción visible de un colorante.
espectrofotómetro Describe la función de cada componente del
espectrofotómetro y su uso en lecturas de
concentración.

FUNDAMENTO:

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

Todas las moléculas son capaces de absorber radiación electromagnética de una frecuencia
o de un intervalo de frecuencias características de cada molécula.

Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; el color de las
sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que
incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no
absorbida, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe longitud de
ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del
infrarrojo. La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la
estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química.

La utilidad de la absorción de la radiación electromagnética en química analítica se basa en


la capacidad y en la relación que existe entre el número de moléculas capaces de absorber y
a cantidad de energía absorbida por ellas dando lugar a lo que se conoce como curva de
absorción. En la curva de absorción se establece una relación entre A o %T y la longitud de
onda, tal tipo de curva es útil tanto para seleccionar la longitud de onda más adecuada para
una medida cuantitativa de un absorbente, tomando en cuenta este punto de máxima
absorción se puede construir una curva de concentración, manteniendo fija la longitud de
onda de máxima absorbancia. Muchos compuestos tienen espectros característicos de
absorción en la región visible y ultravioleta y esto hace posible la identificación de dichos
materiales en una mezcla.

Cuando las moléculas reciben energía, se pueden producir transiciones electrónicas. El


estado energético de una molécula está definido principalmente por su estado energético
electrónico. Si la energía de la radiación electromagnética es igual a la diferencia entre dos
determinados niveles energéticos de la molécula sobre la que incide, entonces esta absorbe
radiación; es decir incorpora la energía radiante a su propia energía si es diferente se emite.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz aforado de 500 mL. 2
Matraz aforado de 100 mL. 5
Vaso de precipitado de 100 mL. 2
Varilla de vidrio 2
Micro espátula metálica 2
Tubos de lectura para espectro 10
Piceta con H2O destilada 1L.
Pipetas de 1 mL. 2
Pipeta de 2 mL 2
Colorante rojo 10 g.

PROCEDIMIENTOS:
1. Preparar 500 mL. de solución de permanganato de potasio al 0,02 M como colorante
rojo.
2. A partir de la solución anterior realice diluciones: 1/50… 1/100… 1/200… 1/300

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

3. Proceder a calibrar el espectrofotómetro en la longitud de onda de partida, la


calibración se realizara según indique el manual del equipo
4. Realice la lectura de las transmitancias de cada solución en el rango de longitudes de
onda señalado en la tabla adjunta.
5. Convierta las transmitancias leídas en absorbancias, coloque los resultados en una
tabla según la longitud de onda

CÁLCULOS:

RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. ¿Qué es el espectro de absorción, como lo determina en el laboratorio, y para que lo


determina?

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

2. Observe los espectros del permanganato de potasio, según la longitud de onda ¿son
idénticos?, en que se diferencian,
3. ¿Qué es el blanco, cuál es su importancia en las medidas espectrofotométricas?
4. ¿Qué tipo de celdas deben utilizarse en la región espectral ultravioleta y visible, en
cada caso indique porque?
5. ¿Convierta la concentración del permanganato de potasio en ppm?
6. ¿Qué es la matriz de la muestra?
7. ¿Indique los cuidados para manejar el espectrofotómetro?
8. ¿Convierta las diferentes diluciones realizadas del permanganato de potasio en ppm?
9. ¿Dibuje el espectrofotómetro del laboratorio indicando sus componentes?
10. ¿Qué diferencia hay entre un espectrofotómetro, un fotómetro y un colorímetro?

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 7
TITULO: Determinación de la longitud de Onda optima del
permanganato de potasio
FECHA DE ENTREGA: 14ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 15ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Describe la importancia de la determinación de la Manipula datos de absorbancia y
longitud de onda óptima en el análisis cualitativo transmitancia para la búsqueda la longitud de
y cuantitativo de especies químicas. onda optima de un colorante con la finalidad
de mostrar los rangos de espectros de otros
analitos.

FUNDAMENTO

El espectro de absorción de una especie química, es una constante física que puede
emplearse para la caracterización de compuestos químicos que absorben radiación
ultravioleta visible. Una vez encontrado el espectro de absorción de la especie química
analizada, se procede a la determinación de la longitud de onda óptima, longitud en la cual
la absorbancia presenta su mayor valor, o menor en el caso de transmitancias.

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

La importancia de conocer la longitud onda óptima de las especies químicas, es debido a


que en ese valor de longitud de onda se realizara el análisis cuantitativo, es decir la
determinación de concentraciones

MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz aforado de 500 mL. 2
Matraz aforado de 100 mL. 5
Vaso de precipitado de 100 mL. 2
Varilla de vidrio 2
Micro espátula metálica 2
Tubos de lectura para espectro 10
Piceta con H2O destilada 1L.
Pipetas de 1 mL. 2
Pipeta de 2 mL 2
Permanganato de potasio 5 g.

PROCEDIMIENTOS:

Utilizando las lecturas de transmitancia y/o absorbancias de la anterior práctica, analice y


determine la longitud de onda óptima del manganeso en el permanganato de potasio.

RESULTADO

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO:

1. ¿Qué es la longitud de onda óptima, como se lo determina, y para que se lo


determina?

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

2. ¿Investigue los factores que pueden producir un desplazamiento de la longitud de


onda óptima de las especies químicas que absorben radiación ultravioleta visible?
3. ¿Cuál es la longitud de onda óptima del manganeso?
4. ¿Investigue longitudes de onda óptimas de los siguientes metabolitos de la sangre:
glucosa, urea, creatinina, ácido úrico, proteínas totales, albúmina, bilirrubina,
triglicéridos?
5. ¿Dos compuestos o analitos diferentes, pueden tener la misma longitud de onda, si…
no… por qué?
6. ¿Por qué se prefiere más utilizar la absorbancia que la transmitancia en la
determinación de la longitud de onda óptima?
7. ¿Investigue el intervalo de longitudes de onda que presenta el espectrofotómetro de
nuestro laboratorio?
8. ¿Si un analito no encuentra su longitud de onda óptima en el espectrofotómetro de
nuestro laboratorio, qué significa, qué haríamos al respecto?
9. ¿En la práctica como hallaríamos una longitud de onda óptima más precisa y exacta?
10. ¿Qué cuidado muy importante (en el procedimiento) hay que tomar en cuenta para la
determinación de la longitud de onda óptima?

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 8
TÍTULO: Curva de calibración
FECHA DE ENTREGA: 15ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 16ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Establece los aspectos fundamentales de la Estructura mediante cálculos de
espectrofotometría en el análisis cuantitativo de concentración para la elaboración de curvas
la concentración de un analito empleando la de calibrado.
curva de calibración. Utiliza conceptos para diferenciar entre
muestras patrón, muestra blanco y muestra
desconocida.
Interpreta la curva de calibrado como método
de control de calidad para la determinación
de concentración de un analito.

FUNDAMENTO

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

En general una curva de calibración es el conjunto de concentraciones que describen el


intervalo de trabajo, en el cual se cuantificará el compuesto a analizar.
Desde el punto de vista de la espectrofotometría la curva de calibración es aquella en la que
se establece una relación entre absorbancia y/o transmitancia con las concentraciones, su
empleo es necesario en los trabajos cuantitativos en los que hay que calcular la
concentración del absorbente.
Siempre que sea posible es aconsejable la construcción de una curva de calibración que
cubra la zona de concentraciones que se van a encontrar en la práctica. La construcción de
tal curva debe ser la fase primera de montar y estandarizar en cualquier procedimiento
fotométrico.
Las concentraciones pueden representarse en cualquier tipo de unidades de medida (mg/dl,
molaridad, ppm, etc.) sin embargo, la forma más conveniente es emplear para las curvas las
mismas unidades que se usarán para expresar el resultado final.
Para la construcción de las curvas de calibración se necesitan mínimo tres puntos. El primero
es el cero, el segundo una concentración intermedia que se encontrará en la práctica y el
último una concentración alta. Cada punto experimental debe prepararse de manera
independiente (a partir de una solución estándar se preparan diferentes concentraciones y
cada una se procesa de acuerdo a la técnica elegida).
Es aconsejable hacer varios duplicados para cada punto y tener mayores precauciones en la
técnica para trazar la curva que habitualmente se emplean para las determinaciones de
rutina.
Una vez que se han colocado los puntos experimentales conocidos sobre papel milimetrado
se realiza la gráfica uniendo los puntos con una regla trasparente a través de una línea, que
sea la que mejor los represente. Si el compuesto sigue la ley de Lambert-Beer se obtiene una
línea recta.
Las concentraciones de los problemas se pueden leer entonces directamente a partir de la
curva, la cual se comprobará cada vez mediante la determinación de uno o más estándares.
Según la ley de Lambert-Beer, la absorbancia está en función de la concentración; a mayor
absorbancia mayor es la concentración de una solución.
La grafica resultante se denomina curva de calibración. Una vez medida la absorbancia de la
muestra analizada, la curva permite hallar su concentración por simple interpolación.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Matraz aforado de 100 ml 6
Vaso de precipitado de 100 mL . 2
Varilla de vidrio 1
Micro espátula metálica 1
Piceta con H2O 1L.
Tubos de lectura para espectro 10
Pipeta de 1 mL. 1
Pipeta de 2 mL. 1
Balanza analítica 1
Espectrofotómetro UV/VIS 14

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

PROCEDIMIENTOS:

1. De acuerdo a los datos de las anteriores prácticas sobre las lecturas de absorbancias
del permanganato de potasio y las respectivas concentraciones en ppm de las
distintas diluciones realizadas…
2. Grafique la curva de calibración, en papel milimetrado, tomando en cuenta que la
concentración debe ir en el eje x y las absorbancias en el eje y dentro de un eje de
coordenadas.
3. Utilice mínimos cuadrados, o en el mejor de los casos una hoja Excel, para encontrar
la ecuación de la línea recta.
4. Calcule la concentración de algunas muestras por interpolación empleando su curva
de calibración.

CÁLCULOS
Utilice las absorbancias del permanganato de potasio de acuerdo a su longitud de
onda óptima hallada en la práctica anterior. Además de las diluciones empleadas convertidas
en ppm

RESULTADOS:

Dilución Concentració Absorbancias


n
ppm
1/50
1/100
1/200
1/300
Muestra 1
Muestra 2

CONCLUSIÓN

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CUESTIONARIO

1. Realice las curvas de calibración que se les dará en la práctica…

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GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 9


TÍTULO: Cromatografía en capa fina
FECHA DE ENTREGA: 16ª Semana
PERÍODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana

COMPETENCIA INDICADOR Y/O CRITERIO


Aplica los aspectos fundamentales del proceso Describe el proceso de cromatografía y la
cromatográficos en la separación e identificación de las fases que se relacionan
identificación de compuestos químicos. para la separación de componentes de un
compuesto complejo

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CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

FUNDAMENTO

La cromatografía de capa fina o (TLC) es una técnica que emplea como fase estacionaria
una capa delgada de gel de sílica o alúmina adherida a un soporte de vidrio o aluminio.
Para llevar a cabo esta técnica se disuelve una pequeña cantidad de la mezcla a separar
y, con la ayuda de un capilar, se deposita sobre la parte inferior de la placa. La
cromatoplaca se introduce en un recipiente cerrado que contiene unos mililitros de
disolvente (fase móvil) dejando que el disolvente ascienda por capilaridad, de modo que
los componentes de la mezcla experimentan un proceso de adsorción desorción, lo que
provoca que unos avancen más rápidamente que otros.

MATERIALES Y REACTIVOS

 Cromatoplaca de silicagel o alúmina


 Cámara cromatografica
 Capilar de hematocrito
 Mechero de alcohol
 Papel filtro
 Pipeta de 10 ml
 Lápiz negro
 Regla
 Tijera
 Metanol p.a.
 Agua destilada.

PROCEDIMIENTO

1. Cortar las cromatoplacas con una tijera limpia con 15 cm de longitud y 5 cm de


ancho.
2. Trazar una línea base con la ayuda de un lápiz negro de grafito
3. Preparar el capilar para la siembra con un mechero de alcohol
4. Cargar la muestra y realizar la siembra sobre la línea base y dejar secar.
5. Preparar la cámara cromatografía con una mezcla de disolventes (metanol: agua
1:1)
6. Dejar saturar la atmosfera con el disolvente dentro de la cámara cromatográfica
7. Colocar la cromatoplaca dentro de la cámara cromatografica y dejar correr el
disolvente hasta una altura de 1cm antes de llegar al extremo superior.
8. Si las manchas de los analitos no son separados, utilice yodo como agente
revelador, (el yodo sublima a temperatura ambiente), puede también carbonizar la
muestra con ácido sulfúrico y calor para revelar las manchas
9. Las muestras deben correr junto a un estándar para llevar a cabo la identificación
por comparación

U N I V E R S I D A D D E A Q U I N O B O L I V I A
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 52
CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA

RESULTADOS

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son las principales causas de la falta de calidad en los diagnósticos de


laboratorio?
2. ¿Cuáles son los objetivos del control para la garantía de la calidad?
3. Enumere los indicadores del control interno.
4. ¿Cómo se controla la precisión de los resultados?
5. ¿Cuáles son las principales fuentes de error?
6. ¿Cuáles son los principales aspectos en cada una de las fuentes de errores?
7. ¿Qué aspectos se describen en el manual de normas y procedimientos?
8. ¿Cómo se controlan los equipos e instrumentos?
9. ¿Qué aspectos han de tenerse en cuenta para el control de los medios de cultivo?
10. Explique cómo se controla el estado de los colorantes y los reactivos.

U N I V E R S I D A D D E A Q U I N O B O L I V I A

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