Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
EXPERIENCIA CURRICULAR:
BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR
2023-2
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
PRESENTACIÓN
El Laboratorio de Bioquímica es un área que procesa muestras clínicas para identificar la presencia
y/o determinar la concentración de un metabolito, enzima, producto o elemento que participa en
las vías metabólicas o reacciones químicas, dentro de los sistemas biológicos del organismo
humano, con la finalidad valorar y ayudar al diagnóstico clínico.
En el Laboratorio de Bioquímica de la Escuela de Medicina de la Universidad César Vallejo, se
realiza simulaciones de todos estos procesos de diagnóstico bioquímico y se analizan e interpretan
los resultados en el contexto de un caso clínico.
Está programado 14 reuniones prácticas en la experiencia curricular de Bioquímica y Biología
Molecular del II ciclo de Estudios del Programa Académico de Medicina.
INSTRUCCIONES GENERALES
su bata blanca y los equipos de protección personal, mascarilla, cofia o gorro y guantes. Solo se
tendrá una tolerancia de 5 minutos para el ingreso.
● Los estudiantes deberán cumplir en todo momento las normas de bioseguridad establecidas en
los protocolos.
● Los estudiantes tienen la obligación de cuidar todos los equipos y materiales del laboratorio, si
realizada.
DATOS GENERALES
2
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
● Ciclo de estudios: II
● Laboratorio: BIOQUÍMICA
● Docente(s):
SUMILLA
La experiencia curricular de Bioquímica y Biología Molecular forma parte del área de estudios
específicos es de naturaleza teórico práctica de carácter obligatorio y se orienta a capacitar al
estudiante en el estudio de los aspectos fundamentales de las diferentes reacciones bioquímicas
que se producen en el organismo humano teniendo como base principios de química general;
química orgánica e inorgánica; estructura propiedades funciones y metabolismo de aminoácidos
proteínas glúcidos nucleótidos y lípidos; enzimología; bioenergética y metabolismo oxidativo
molecular; así mismo en el estudio de la estructura celular funcionamiento de los orgánulos
celulares y su función a nivel molecular a mayor nivel de profundidad como los grandes complejos
de señalización multiproteicos en las células y los mecanismos por medio de los cuales las células
interactúan y se comunican entre sí.
COMPETENCIA ESPECÍFICA
Explica el diagnóstico presuntivo o definitivo del paciente asignado para elaborar el plan de
trabajo que incluya el tratamiento, pronóstico y prevención de los problemas de salud de mayor
frecuencia del individuo; mediante la elaboración de la historia clínica, considerando fundamentos
etiopatogénicos y fisiopatológicos, demostrando un buen manejo clínico y trato humanizado.
3
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
CONTENIDO
4
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Conocer las normas de bioseguridad en el laboratorio
Aplicar correctamente las normas de bioseguridad en el trabajo de laboratorio
II. MATERIALES
Instrumental:
Vasos de precipitación Micropipetas
Matraces Glucómetro
Mecheros de alcohol Tubos de ensayo
Gradillas
Reactivos:
Kits para pruebas bioquímicas
Equipos:
Destilador Estufa
Balanza analítica pH-metro
Espectrofotómetro Centrífuga
Balanza de dos cifras significativas Bañomaría
Cocina eléctrica Refrigerador
Potenciometro Destilador
Potenciometro Motor bomba
Refractometro Refractometro
Balanza de dos cifras significativas
Agitador magnético
Otros:
Manual de bioseguridad del laboratorio
Guía de práctica de laboratorio
1
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
2
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
• Demostrar la actividad enzimática de la amilasa salival.
• Demostrar la naturaleza proteica de la enzima amilasa.
II. MATERIALES
REACTIVOS: UTILIZAR 6 ML POR MESA DE TRABAJO
Muestra biológica: saliva
Solución de amilasa salival
Almidón al 1%
Sacarosa al 20 %
Rreactivo de Fehling,
Soluciones amortiguadoras con pH 6.6 (Buffer fosfato 0.1 M)
Lugol
Agua destilada 1 BOTELLA POR MESA
HCl [3 y 0.05 N]
NaOH [1 N]
NaCl [0.15 M]
Acido tricloroacético al 20%
Sulfato de cobre al 20%.
INSTRUMENTAL
Mechero de alcohol (3)
Tubos de ensayo
Vaso de precipitado (2 por MESA)
Pipetas 1 POR MESA
EQUIPOS
Baño María
3
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I II III IV V VI
NaOH 1N - 2.4 - - - -
HCl 3N - - 2.4 - - -
I II III IV V VI
Almidón al 1.0% en solución acuosa 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Buffer fosfato 0.1 M / pH 6.6 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
4
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Agregar enzima tratada, del 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6
sistema (A)
I II III IV V VI
Del sistema (B), extraer y agregar 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
5
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
6
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Evidenciar el efecto de iones activadores, pH, concentración de enzima, concentración de
sustrato, tiempo y temperatura sobre la velocidad de una reacción enzimática.
II. MATERIALES
REACTIVOS: UTILIZAR 8ML POR MESA DE TRABAJO
Solución de almidón
Solución de amilasa
Buffer acetato
Buffer fosfato
Buffer borato
Solución NaCl
Agua destilada 1 botella por mesa
Hielo (1 bolsa por practica)
Solución HCL
Solución yodada
Reactivos de Fehling.
INSTRUMENTAL
Tubos de ensayo
Gradillas (1 por mesa)
Pipetas 1 por mesa
Pinzas de madera (1 por mesa)
EQUIPOS
Micropipetas (1 por mesa)
Cocina eléctrica (1 por mesa)
Baño María
7
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Solución de almidón al 1 % 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Buffer fosfato 0.1M pH 6.6 5.0 5.0 5.0 - 5.0 - 5.0 5.0
Agua destilada 2.6 3.4 1.0 2.0 2.0 2.0 2.4 2.0
Mezclar y colocar los tubos del I al VII a incubación por cinco minutos a 37 °C.
Agregar: Amilasa Salival al 0.25% - 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.2 0.6
Mezclar por inversión y continuar la incubación por 20 minutos (computar el tiempo desde
el momento en que el preparado enzimático fue agregado a cada tubo)
Incubado correspondiente de 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
8
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
HCl 0.05N 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
Solución iodada 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
b. Observar los resultados de las reacciones de cada uno de los tubos, valorando los
cambios de coloración (azul oscuro, azul claro, sin color).
IV. CONCLUSIONES
9
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
I. OBJETIVOS
Evaluar el metabolismo de la glucosa para descartar resistencia a la insulina o diagnosticar
diabetes.
II. MATERIALES
REACTIVOS: UTILIZAR 8ML POR MESA DE TRABAJO
Tiras reactivas de glucosa 5 POR PRACTICA
250 ml de solución de glucosa al 30%
Agua destilada 1 BOTELLA POR MESA
INSTRUMENTAL
Cronómetro 1
Lancetas 2
Torundas de algodón 1 BOLSA POR MESA
Vaso de precipitado 2 por mesa
Hoja de papel milimétrico y Regla.
EQUIPOS
Glucómetro 1 POR PRACTICA
10
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
● Inmediatamente, se les administra, vía oral, 75 gr de glucosa en 250 ml de agua (con o sin
● Luego se toma una muestra a los 30, 60, 90 y 120 minutos y se determina la glicemia
● Trabajar en grupo y hacer una gráfica de glicemia vs tiempo con los resultados de la
práctica.
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
11
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
12
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Determinar que complejos de la cadena respiratoria son afectados por distintos
inhibidores.
II. MATERIALES
REACTIVOS: UTILIZAR 5ML POR MESA DE TRABAJO
Vaso de precipitación, tubos de ensayo, suero fisiológico, hoja de bisturí, estuche de
disección, mortero, arena gruesa, buffer fosfato pH 7, centrífuga, Hígado de cobayo,
(Succinato de sodio, Malonato de sodio, Cianuro de potasio, Bicloruro de mercurio)
Antimicina o fenobarbital, CO, ácido acético, NITRATO DE PLATA, Azul de metileno, Agua
destilada, aceite mineral, baño María.
13
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
2) Agitar los tubos y añadir 0,5 mL de aceite mineral suavemente por las paredes de cada
tubo.
3) Incubar a 37°C durante 30 minutos.
4) Observar e interpretar los resultados obtenidos.
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
14
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Evaluar la concentración de glucosa en la sangre pre y postprandial, por el método de
Glucosa oxidasa.
II. MATERIALES
Jeringas descartables de 5 ml, Algodón, Alcohol medicinal, Lancetas (POR MESA)
Tubos BD Vacutainer sin anticoagulante
Vasos de precipitado, Tubos de ensayo, gradillas, pipetas graduadas,
Micropipetas 1 POR MESA
Baño María, centrífuga, espectrofotómetro, glucómetro
Kit para Glucosa Wiener Lab.:
Reactivo A: Solución conteniendo glucosaoxidasa, peroxidasa, aminofenazona,
hidroxibenzoato y buffer fosfato pH: 7
Estándar: solución de glucosa 1g/l. (100 mg/dl)
máximo.
15
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
2) Una vez obtenidas las muestras, colocarlas en tubos de ensayo y dejarlas reposar durante
10 minutos.
3) Terminado el reposo, contrapesar los tubos conteniendo las muestras y centrifugarlos a
3000 RPM durante 10 minutos.
4) Finalizado el centrifugado separar el suero para trabajar la determinación.
5) Rotular previamente los tubos de ensayo y preparar el siguiente sistema agregando lo que
se indica:
COMPONENTES (en ml) TUBOS DE ENSAYO
Estándar -- 10 ul -- --
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Observar los resultados en cada uno de los tubos (considerar cambio de color).
Leer en espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco. Anotar
los resultados.
16
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
17
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Demostrar la acción de la lipasa pancreática sobre los triglicéridos y el efecto de las sales
biliares.
Evaluar la concentración sérica de triglicéridos por el método enzimático.
II. MATERIALES
REACTIVOS: UTILIZAR 8ML POR MESA DE TRABAJO
Aceite de oliva extra virgen 1 POR PRÁCTICA
Agua destilada 1 BOTELLA POR MESA
Buffer fosfato 0.1 M pH 8.0
Solución de sales biliares 1%
Solución de extracto pancreático 1%
Fenolftaleína
Solución de NaOH 0.1N
INSTRUMENTAL
Cronómetro 1
Hoja de papel milimétrico y Regla.
Gradillas 2 POR MESA
Material de vidrio: vasos, tubos de ensayo, pipetas milimétricas.
Equipo de extracción de muestra: guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5 cc.
(POR CADA MESA)
Equipos: centrífuga, baño maría, espectrofotómetro.
Micropipetas x 10 ul 1 POR LABORATORIO,
Kit para Triglicéridos Wiener Lab.:
Sol. Estándar: solución de glicerol 2.26 mmol/l (equivale a 2 g/l de trioleína).
Reactivo A: solución conteniendo buffer Good (pH 6.8), clorofenol, lipoproteinlipasa (LPL),
glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa (POD), adenosina trifosfato
(ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).
18
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Acción de la lipasa pancreática sobre los triglicéridos y efecto de las sales biliares
1) Preparar el siguiente sistema, empleando tubos de ensayo de 25 x 150 mm.
COMPONENTES Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4
Agua destilada 3 2 2 --
Mezclar cada uno de los tubos por inversión. Llevar a baño maría a 37 °C por 30
minutos, agitando de vez en cuando.
Al finalizar el tiempo de incubación retirar los tubos y agregar a cada uno 3 gotas de
fenolftaleína. Mezclar bien por inversión y realizar la titulación.
Titulación: empleando una pipeta dejar caer gota a gota, hidróxido de sodio (NaOH
0.1N) en el fondo de cada tubo, mezclar bien por inversión hasta la aparición de un
color rosado tenue persistente.
19
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Determinación de Triglicéridos.
La técnica empleada en la determinación de triglicéridos en sangre, es una técnica
enzimática basada en la siguiente reacción:
Lipoprotein
Triglicéridos glicerol + ácidos grasos;
lipasa
Glicerol kinasa
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP;
Glicerolfosfato
Glicerol-1-P + O2 oxidasa
H2O2 + dihidroxiacetonafosfato;
POD
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja
B S D
Estándar (ul) -- 10 --
2) Cálculos de resultados:
Cálculo del factor:
2 g /l
F=
S
20
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
21
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Evaluar la concentración sérica de colesterol total y colesterol LDL por el método
enzimático y la determinación de HDL, previa precipitación de las otras lipoproteínas.
II. MATERIALES
Material de vidrio: tubos de ensayo, pipetas milimétricas.
Equipo de extracción de muestra: guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5 cc.
(POR CADA MESA)
Equipos: centrífuga, baño maría, espectrofotómetro.
Micropipetas x 10 ul 1 POR LABORATORIO,
Kit para Colesterol Wiener Lab.:
Sol. Estándar: solución de colesterol = 200 mg/dl (2 g/l).
Reactivo A: solución conteniendo colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa (CHOD),
peroxidasa (POD), 4aminofenazona (4-AF) y buffer Good (conteniendo fenol y colato de
sodio).
Colesterol
Colesterol + O2 oxidasa
Colesten-3-ona + H2O2
POD
H2O2 + 4-AF + aceptor _______ quinonimina roja
22
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
2) Una vez obtenidas las muestras, colocarlas en tubos de ensayo y dejarlas reposar durante
10 minutos.
3) Terminado el reposo, contrapesar los tubos conteniendo las muestras y centrifugarlos a
3000 RPM durante 10 minutos.
4) Finalizado el centrifugado separar el suero para trabajar la determinación.
5) Para la determinación de colesterol total: En 3 tubos de ensayo marcados con B (Blanco), S
(estándar) y D (Desconocido), se debe colocar:
COMPONENTES TUBOS DE ENSAYO
B S D
Estándar (ul) -- 10 --
6) Cálculos de resultados:
Cálculo del factor:
2 g /l
F=
S
23
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Determinación de HDL-Colesterol
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente las
lipoproteínas de baja y muy baja densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de sulfato de
dextrán de PM 50.000 en presencia de iones Mg++. En el sobrenadante separado por
centrifugación, quedan las HDL y se realiza la determinación del colesterol ligado a las
mismas, empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/Peroxidasa con colorimetría
según Trinder (Fenol/4- Ami-nofenazona)
B S D
Estándar (ul) -- 20 --
24
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
2) Cálculos de resultados:
Cálculo del factor:
0.457 g /l
F=
S
Determinación de HDL-Colesterol
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL o βlipoproteínas) se separa del suero
precipitándolas selectivamente mediante el agregado de polímeros de alto peso
molecular. Luego de centrifugar, en el sobrenadante quedan las demás lipoproteínas (HDL
y VLDL); el colesterol ligado a las mismas se determina empleando el sistema enzimático
Colesterol oxidasa/ Peroxidasa con colorimetría según Trinder (Fenol/4AF). Por diferencia
entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se obtiene el colesterol
unido a las LDL.
25
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
B S D
Estándar (ul) -- 20 --
6) Cálculos de resultados:
Cálculo del factor:
0.624 g/l
F=
S
26
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
27
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Demostrar la acción de las enzimas digestivas proteolíticas del páncreas sobre la caseína
de la leche, determinado los productos (aminoácidos) con Biuret/ ninhidrina.
Evaluar la actividad enzimática de la transaminasa glutámico pirúvica o alanina
aminotransferasa
Evaluar la actividad enzimática de la transaminasa glutámico oxalacética o aspartato
aminotransferasa
II. MATERIALES
Guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5cc.( POR MESA Y ALUMNO)
REACTIVOS: UTILIZAR 3ML POR MESA DE TRABAJO
Caseína al 1% en buffer fosfato 0,1 M pH 81
Buffer fosfato 0,1 M pH 8 10 ml por mesa
Solución de extracto pancreático
Solución acuosa de ninhidrina al 0,25% saturada con butanol o biuret
Ácido tricloroacético al 10%
Solución de tripsina 20 mg%
Etanol absoluto 8ML POR MESA
INSTRUMENTAL
Tubos de ensayo 6 POR MESA
Pipetas milimetradas 2 POR MESA
Olla para baño de agua hirviendo
EQUIPOS
Baño maría
Kit para GPT Wiener Lab.
Sol. Estándar: solución de piruvato de sodio 2 mmol/l.
Reactivo A: solución con 200 mM de dl-alanina y 2 mM de α-cetoglutarato en buffer
fosfatos 100 mM, pH 7,4
28
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I II III
I II III
29
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I II III
Agitar continuamente.
B D
30
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Unidades (U/l)
0 0.217 0.000
9 0.264 0.047
18 0.339
25 0.384
31
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
37 0.464
46 0.519
56 0.563
79 0.679
113 0.786
B D
32
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
0 0.223 0.000
7 0.269 0.046
12 0.295
20 0.327
28 0.358
37 0.389
33
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
48 0.426
81 0.510
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
34
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
- Evaluar la concentración sérica de urea por el método de la ureasa.
- Evaluar la concentración sérica de creatinina por el método de la reacción de Jaffé.
II. MATERIALES
Tubos de ensayo, pipetas milimétricas, gradillas,
Guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5cc.( POR MESA Y ALUMNO)
Centrífuga, micropipetas x 10 ul 1 POR LABORATORIO, baño maría, espectrofotómetro.
Kit para Úrea Wiener Lab.
Sol. Estándar: solución de urea = 0.60 g/l (28.04 mg/dl de BUN).
Reactivo A: Solución conteniendo buffer fosfatos 200 mmol/l, ácido salicílico 750
mmmol/l. nitroprusiato de sodio 20 mmol/l y EDTA 10 mmol/l.
Reactivo B: solución concentrada de hipoclorito de sodio 10 mmol/l en hidróxido de sodio
0.1 mol/l
Reactivo C: ureasa ≥ 75 U/ml en solución glicerada.
Kit para Creatinina Wiener Lab.
Sol. Estándar: solución de creatinina = 20 mg/l.
Reactivo A: Ácido pícrico 41.4 mmol/l.
Reactivo B: Buffer glicina/NaOH 1mol/l.
Ureasa
Urea CO2 + NH3;
pH
NH3 + Salicilato + Hipoclorito Alcalino
Indofenol (verde)
35
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
B S D
Estándar (ul) -- 10 --
6) Cálculos de resultados:
Cálculo del factor:
0.60 g /l
F=
S
36
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
B S D
37
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
● Suero = 8 a 14 mg/l
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
38
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Realizar la medición sérica de ácido úrico mediante la enzima uricasa
II. MATERIALES
Tubos de ensayo, gradillas, pipetas milimétricas
Guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5 cc .( POR MESA Y ALUMNO)
Centrífuga, micropipetas x 10 ul 1 POR LABORATORIO, baño maría, espectrofotómetro.
Kit para Ácido Úrico Wiener Lab.
Sol. Estándar: solución de ácido úrico 10 mg/dl.
Reactivo A: viales conteniendo uricasa (UOD), peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y
ferrocianuro de potasio.
Reactivo B: solución de diclorohidroxibenceno sulfónico (DHS) en buffer fosfatos pH 7.4.
Reactivo de Trabajo: disolver el contenido de un vial de Reactivo A en un frasco de
Reactivo B. Enjuagar varias veces el vial con Reactivo B. Mezclar hasta disolución
completa. Homogeneizar y fechar.
URICASA
Ácido Úrico + 2 H2O + O2 Alantoína + H2O2 + CO2
POD
2 H2O2 + 4-AF + 3,5-DHS Quinonimina
1) Extracción de muestras: previa limpieza de la zona con alcohol, se extraerá 5 cc de sangre
de la flexura del codo con jeringa hipodérmica de 5 cc y aguja N° 20, de un paciente en
ayunas.
2) Colocar la muestra de sangre en un tubo de ensayo, dejar reposar por 10 minutos,
contrapesar y luego centrifugar a 3500 RPM durante 5 minutos.
3) Finalizada la centrifugación sacar el tubo de ensayo que contiene la muestra y extraer el
suero correspondiente.
4) Preparar el siguiente sistema:
39
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Muestra (suero) -- -- 20 ul
Estándar -- 20 ul --
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
40
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Determinar las concentraciones séricas de proteínas totales y fraccionadas.
II. MATERIALES
Tubos de ensayo, gradillas, pipetas milimétricas
Guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5 cc .( POR MESA Y ALUMNO)
Centrífuga, micropipetas x 10 ul 1 POR LABORATORIO, baño maría, espectrofotómetro.
Kit para Proteínas Wiener Lab.
Sol. Estándar: solución de albúmina y globulinas de origen bovino, con título conocido de
proteínas. Proteínas: 6 g/dl.
A. Reactivo A: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en hidróxido de sodio 875 mmol/l y alquilil
aril poliéter (AAP).
- B. Reactivo B: solución de 3,3´,5,5´-tetrabromo cresolsulfon ftaleína (en polioxietilén
lauril éter).
41
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
B S D
42
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
B S D
43
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rubrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Vademecum Wiener Lab, Rosario, Argentina.
3) Harrison, Medicina Interna, 19 edición, 2016.
I. OBJETIVOS
Demostrar las alteraciones en la expresión genética mediante ejercicios de mutaciones.
II. MATERIALES
Lapiceros, ejercicios impresos, PC o laptop, hojas de trabajo.
44
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
2) El proto-oncogen BRAF tiene 190753 pb, a partir del nucleótido 5001 hasta 195753 del
ADN. A partir de este gen resulta el ARNm conformado por 18 exones. El ARNm tiene 2947
pb
45
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
AT ATA TTT CTT CAT GAA GAC CTC ACA GTA AAA ATA GGT GAT TTT GGT CTA GCT ACA GTG
601 602 603 604 605 606 607 608 609 610 611 612 613 614 615 616 617 618 619 620
AAA TCT CGA TGG AGT GGG TCC CAT CAG TTT GAA CAG TTG TCT GGA TCC ATT TTG TGG ATG
AT ATA TTT CTT CAT GAA GAC CTC ACA GTA AAA ATA GGT GAT TTT GGT CTA GCT ACA GAG
601 602 603 604 605 606 607 608 609 610 611 612 613 614 615 616 617 618 619 620
AAA TCT CGA TGG AGT GGG TCC CAT CAG TTT GAA CAG TTG TCT GGA TCC ATT TTG TGG ATG
46
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
4) Identifica los nuevos codones que se forman en las mutaciones encontradas en el exón 15
del proto-oncogen BRAF, de acuerdo a la Imagen 2.
5) Interpreta las mutaciones y relaciona los tipos de cánceres con los cuales están asociadas.
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Del Castillo V, Uranga RDZafra G. Genética Clínica. 2da. Ed. México D.F.: Editorial el
Manual Moderno S.A. de C.V.; 2019
3) Jorde LB, Carey JC, Bamshad MJ. Genética Médica. 5ta ed. Barcelona: Elsevier Inc.; 2016.
http://biomodel.uah.es/lab/cibertorio/analysis/trans.htm
https://web.expasy.org/translate/
47
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Realizar la medición sérica de hemoglobina empleando sangre total.
Realizar la determinación sérica de bilirrubina total y directa.
II. MATERIALES
Tubos de ensayo, gradillas, pipetas milimétricas
Guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5 cc .( POR MESA Y ALUMNO)
Centrífuga, micropipetas x 10 ul 1 POR LABORATORIO, baño maría, espectrofotómetro.
Kit para Hemoglobina Wiener Lab.
Sol. Estándar: Metahemoglobina disuelta en reactivo hemoglobina. (18 g/dl).
Reactivo de Drabkin: Ferricianuro de potasio 0.6 mM, cianuro de potasio 0.7 mM, sterox-
SE 1 ml/l.
Kit para bilirrubinas Wiener Lab.
Sol. Estándar: solución de bilirrubina = 1 mg/l.
Reactivo A: solución acuosa de benzoato de cafeína 0,13 mol/l, tamponada y estabilizada.
Reactivo B: solución de ácido sulfanílico 29 mmol/l y ácido clorhídrico 0.17 mol/l.
Reactivo C: solución de nitrito de sodio 0.07 mol/l.
Diazorreactivo: de acuerdo al volumen de trabajo, mezclar 1 parte de Reactivo C con 21
partes de Reactivo B. Rotular y fechar.
Determinación de Hemoglobina
El método en que se basa la prueba es el de la cianmetahemoglobina. Los eritrocitos son
lisados por acción de un agente tensioactivo presente en el reactivo, liberando su
contenido de hemoglobina en la solución. La hemoglobina liberada es oxidada a
metahemoglobina por el ferricianuro, siendo esta última convertida en
48
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
B D
49
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Determinación de Bilirrubina
La fundamentación del método empleado se basa en que la bilirrubina reacciona
específicamente con el ácido sulfanílico diazotado (reacción de Ehrlich) produciendo un
pigmento de color rojo-violáceo (azobilirrubina) que se mide a 530 nm. Si bien la
bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo, la bilirrubina
no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador acuoso (reactivo A) que
posibilite su reacción. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina total (conjugada
y no conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafeína al medio de
reacción.
1) Para la determinación de Bilirrubinas: En 3 tubos de ensayo marcados con B (Blanco), D
(Directa) y T (Total), se debe realizar lo siguiente:
COMPONENTES TUBOS DE ENSAYO
B D T
50
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
51
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
52
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
I. OBJETIVOS
Determinar el efecto de las soluciones isotónicas, hipotónicas e hipertónicas sobre las
membranas celulares.
Determinar la concentración sérica de calcio y hierro, empleando el método de
colorimetría directa.
II. MATERIALES
REACTIVOS: UTILIZAR 3ML POR MESA DE TRABAJO
Alcohol yodado
Solución salina al 5% (solución hipertónica)
Solución salina al 0,9% (solución isotónica)
Solución salina al 0,4% (solución hipotónica)
Kit para Calcio Wiener Lab.:
Sol. Estándar: solución de calcio 10 mg/dl.
Reactivo A: solución de o-cresolftalein complexona y 8-hidroxiquinolina (agente quelante).
Reactivo B: solución de aminometil propanol (buffer)
Reactivo Único: Mezclar partes iguales de reactivo A y reactivo B
Kit para Hierro Wiener Lab.:
S. Estándar: solución de hierro en hidroxilamina clorhidrato 500 ug/dl.
Reactivo A: buffer acetato pH 4.0, hidroxilamina clorhidrato.
Reactivo B (color): solución de ferrozina, clorhidrato de hidroxilamina.
INSTRUMENTAL
Jeringas descartables de 5 ml
Algodón 1 BOLSA POR MESA
Alcohol medicinal 1 POR MESA
Tubos BD Vacutainer con EDTA 3 POR MESA
Vasos de precipitado 2 POR MESA
Láminas portaobjeto Y laminillas cubreobjeto 1 CAJA POR PRÁCTICA
53
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
54
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
AMP (8-Hq)
o-CPC + 2 Ca++ ——————> o-CPC(Ca)2 (color magenta)
B S D
55
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
B D
56
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Luego se agrega:
IV. CONCLUSIONES
El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados
obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio.
La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos.
V. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
57
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
VI. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega,
España, 2011
3) Huamán-Saavedra J. Laboratorio clínico. Procedimiento e interpretación, 2 edición Edit.
Universitaria. Trujillo, 2018
ANEXOS
CRITERIO DESCRIPTORES
Introduc El informe presenta un El informe demuestra un El informe presenta El informe presenta
ción preciso y minucioso entendimiento limitado de conceptos bien redactados un entendimiento
(3 pts) entendimiento de los los conceptos científicos pero superficiales o sus incorrecto de los
conceptos científicos esenciales en el párrafos son exactamente conceptos científicos
esenciales en el laboratorio. laboratorio. igual al de otros informes. esenciales en el
Cada enunciado esta Uno o dos enunciados y/o Tres o más párrafos no laboratorio.
refrendado por una cita párrafos no está están refrendados por una Ningún enunciado
bibliográfica de renombre o refrendado por una cita cita bibliográfica esta refrendado por
actualizada (últimos 5 años). bibliográfica de renombre actualizada (últimos 5 una cita bibliográfica.
La información es expresada o actualizada (últimos 5 años). La información La información esta
en las propias palabras de los años). La información está relacionada pero no desordenada y no
estudiantes, llevando una lleva una secuencia lógica, dilucida los tópicos motivo lleva una secuencia
secuencia lógica y ordenada. pero con cierto desorden de la práctica. (1) lógica. (0)
(3) o está incompleta. (2)
Objetivo Los objetivos de estudio ó del El o los objetivos de Los objetivos de estudio o Los objetivos de
(1 pts) experimento están estudio o del experimento del experimento están estudio o del
claramente definidos y no están claramente parcialmente definidos o experimento son
presentados. (1) identificados ni son irrelevantes. (0.5) erróneos o están mal
presentados. (0.7) planteados. (0)
58
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Material Todos los materiales usados Casi todos los materiales La mayoría de los Muchos materiales
(1 pts) en el experimento son usados en el experimento materiales usados en el están descritos sin
descritos clara y precisa- son descritos clara y experimento están precisión o no están
mente. Los bosquejos de los precisamente. Un descritos con precisión. No del todo descritos.
aparatos y la preparación son bosquejo identificado de hay bosquejo alguno o si (0)
ordenados, fáciles de leer y un aparato está incluido. lo hay no está identificado.
están completamente (0.7) (0.5)
identificados. (1)
Métodos Los procedimientos están Los procedimientos están Los procedimientos están Los procedimientos
(2 pts) enlistados en orden con pasos enlistados en orden, pero enlistados, pero no están no enlistan en forma
claros y parecen ser los pasos no están en un orden lógico o son precisa todos los
reproducibles. Cada paso está enumerados y/o no son difíciles de seguir porque pasos del
enumerado, detallado y es oraciones completas. Se hay errores o el texto es experimento.
una oración completa. incluye diagramas e narrativo. Se incluye No hay suficientes
Se incluye diagramas e ilustraciones ordenadas diagramas o ilustraciones detalles para
ilustraciones identificadas de pero no están etiquetadas que no facilitan la reproducir los
una manera ordenada y lo que no facilita la comprensión del procedimientos (0)
precisa. (2) comprensión del experimento (0.5)
experimento. (1)
Resultad Los datos están bien Los datos presentados en Los datos no son Los datos no son
os representados en forma clara tablas y/o gráficas, son presentados en tablas y demostrados o no
Datos y precisa en tablas y/o correctos pero son difíciles gráficas, o éstas están son precisos. (0)
(3 pts) gráficas. Las gráficas y las de entender o interpretar. dispuestos de manera
tablas están numeradas y Las gráficas y tablas no imprecisa por lo que los
tituladas. (3) están numeradas, ni datos son de difícil
tituladas. (2) ubicación e interpretación.
(1)
Discusió La relación entre las variables La relación entre las La relación entre las La relación entre las
n es discutida y las variables es discutida y las variables es discutida, variables no es
Análisis tendencias/patron son tendencias/patrones pero ni los patrones, discutida. (0)
(6 pts) analizados lógicamente. Las analizados lógicamente, tendencias o predicciones
predicciones y/o explicaciones basado en los datos. No son hechos basados en los
son hechas sobre lo que hay predicciones y/o datos. No usa citas
podría pasar si los resultados explicaciones hechas bibliográficas. (2)
fuesen cambiados o sobre lo que podría pasar
diferentes. Usa citas si los resultados fuesen
bibliográficas. (6) diferentes.
Usa citas bibliográficas. (4)
Conclusi La conclusión es clara, precisa La conclusión es imprecisa La conclusión está No hay conclusión
ón y concisa. Incluye los aun cuando incluye los incompleta e incluye de incluida en el
(3 pts) descubrimientos que apoyan descubrimientos que manera parcial lo que fue informe. (0)
la hipótesis, posibles fuentes apoyan la hipótesis y lo aprendido del
de error y lo que se aprendió que se aprendió del experimento. (1)
del experimento. (3) experimento. (2)
59
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA
Referenc Todas las fuentes Una fuente bibliográfica es Dos fuentes bibliográficas Tres o más fuentes
ias bibliográficas son citadas citada incorrectamente, son citadas bibliográficas son
Bibliográ correctamente según las según las normas de incorrectamente, según citadas in
ficas normas de Vancouver. (1) Vancouver. (0.7) las normas de Vancouver. correctamente. (0)
(1 pts) (0.5)
60