Haro Orozco Liseth Veronica IP6

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

MEDICINA LAB-FCS-BQ
INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II
I. DATOS GENERALES
INFORME DE PRÁCTICA Nº 6
PERIODO ACADÉMICO mayo - octubre 2020
HORARIO DE LA PRÁCTICA: LUNES 07H00 a 10H00
FECHA DE REALIZACIÓN 13 de julio del 2020

DE LA PRÁCTICA:
FECHA DE ENTREGA DEL Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs

INFORME DE LA PRÁCTICA:
NOMBRE DE LA DOCENTE Se transcribe lo indicado en la guía de práctica
CURSO Primero
PARALELO A
GRUPO Nº 3
NOMBRES Y FIRMAS DE APELLIDOS Y CÉDULA FIRMA

LOS ESTUDIANTES NOMBRES
PARTICIPANTES COMPLETOS
En orden
alfabético
Estrada Estrada 060543008

Jonathan Apolo 1

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Insuati Parra 060488658

María Belén 0
Llerena Vargas 080275867

Sheyla Leonela 2
Llerena Pazmiño 060493563

Henry David 5
Llango López 060395138

Vanessa Lisseth 5
Layedra 060420817
Castañeda Katy 3
Cecibel
Haro Orozco 060391544

Liseth Verónica 8
OBSERVACIONES
(espacio exclusivo para la

docente)
CALIFICACIÓN
(espacio exclusivo para la

docente)

MEDICINA LAB-FCS-BQ
LUGAR DE LA PRÁCTICA Aula Virtual Bioquímica II
Zoom Pro
Microsoft Teams
Laboratorio de Bioquímica Facultad Ciencias de la

Salud/ LAB-FCS-BQ
UNIDAD SÍLABO No. 4. LAS ENZIMAS
RESULTADO DE Relaciona la función de las enzimas y catalizadores,

APRENDIZAJE mediante el estudio de su comportamiento biológico,
para determinar su participación en los varios procesos
metabólicos, con base científica y sustento axiológico
II. DESARROLLO
1. TÍTULO DE LA PRÁCTICA Reacciones cualitativas y cuantitativas de enzimas, para

interpretación de resultados y su importancia biomédica.
2. OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GENERAL Identificar cualitativa y cuantitativamente las enzimas,

interpretar resultados y establecer la importancia
biomédica.
2.2 OBJETIVOS EPECÍFICOS: 2.2.1 Describir y aplicar métodos cualitativos que permitan
establecer las propiedades y funciones de las
enzimas digestivas, amilasa salival, catalasa y
establecer su importancia en los procesos
metabólicos.
2.2.2 Describir y aplicar métodos cuantitativos

espectrofotométricos para determinar la
concentración de enzimas para diagnóstico clínico:

MEDICINA LAB-FCS-BQ
GOT –AST (Transaminasa Glutámica Oxal Acética –

Aspartato Alanino Transferasa) y Amilasa en
muestra sanguínea y establecer su importancia en
los procesos metabólicos.
3. MATERIALES – REACTIVOS – EQUIPOS:

4. MATERIALES – REACTIVOS – EQUIPOS:
A RETIRAR EN LABORATORIO
 4 gradillas
 20 tubos de ensayo grandes (traer el grupo)
 4 tubos de ensayo pequeños (traer el grupo)
 1 pipeta semiautomática de 100 -1000 ul
 1 pipeta semiautomática de 10 -100 ul
 4 pipetas de vidrio de 10 ó 5 ml
 1 pipeta Pasteur
 1 varilla de agitación
 1 vaso de precipitación de 250 ml
 2 erlenmeyers
 1 pera de succión
 1 embudo simple pequeño
 1 pizeta con agua destilada
 1 mortero con pistilo
 1 pinza metálica para tubo de ensayo
 1 espátula
 1 cronómetro
 1 termómetro
 1 mechero de bunsen con suministro de gas
 Parafilm para tapar 2 vasos de precipitación de 50 o 100 ml

MEDICINA LAB-FCS-BQ
 Papel filtro
 1 malla metálica
 Papel filtro
Kit de reactivos para cuantificar:
 GOT –ALT (TRANSAMINASA GLUTÁMICA OXAL ACÉTICA –
ASPARTATO ALANINO TRANSFERASA)
 AMILASA
 Reactivo de lugol (5 ml en un tubo de ensayo grande rotulado por cada
grupo)
 Reactivo de Benedict (5 ml en un tubo de ensayo grande rotulado por
cada grupo)
 Almidón (la solución fue preparada por cada grupo de estudiantes en la
primera práctica)
 Avena
Equipos
 Centrífuga
 Vórtex
 Espectrofotómetro
 Baño termostático
 Reverbero (dispensar vasos grandes) sobre una malla metálica para baño
maría
MATERIAL A TRAER EN EL GRUPO QUE NO SE RETIRA EN
LABORATORIO
GRUPALES:
 2 Franelas de 40 cm cada una
 1 frasco de cloro
 1 frasco de agua destilada de 500 ml
 1 frasco estéril (para torundas de algodón, pueden ser recipientes
plásticos de boca ancha)
 Torundas de algodón

MEDICINA LAB-FCS-BQ
 1 frasco de alcohol
 10 gasas estériles
 1 frasco de jabón líquido
 1 dermográfico (o marcador de material de vidrio)
 2 cepillos para lavar tubos de ensayo (pequeños de 5 ml y grandes de 10
ml)
 1 par de guantes de uso doméstico
 1 frasco con detergente (para lavado de materiales)
 1 recipiente de plástico para cortopunzantes con etiqueta de desechos
cortopunzantes y que indique el curso, paralelo y grupo (recipiente vacío
de los desinfectantes que utilice en casa con tapa, grande de plástico
grueso). Este recipiente lo entregan en el laboratorio si aún no lo hizo el
grupo.
 50 puntas azules
 50 puntas amarillas
 Tiras multipeg
 1 lavacara pequeña
 1 paquetes de toallas desechables
 Solución de almidón que se preparó en prácticas anteriores
 1 cápsula o comprimido de pancreatina (digenil o pankreoflat)
 2 inciensos
 2 vasos desechables transparentes pequeños
 1 porción pequeña de riñón de cerdo en estado fresco
(aproximadamente unos 20 g)
 1 porción pequeña de patata sin cáscara estado fresco
(aproximadamente unos 20 g)
 1 frasco pequeño de agua oxigenada
 1 tubo de tapa roja al vacío
 1 aguja vacuntainer
 1 cápsula

MEDICINA LAB-FCS-BQ
 1 torniquete
 1 curita
 1 goma de mascar sin azúcar
 6 jeringuillas de 5 ml
5. HERRAMIENTAS DIDÁCTICAS:
Aula virtual, recursos multimedia imágenes, videos, texto en guía de práctica, registros de
datos de práctica, formato de informe.
6. FUNDAMENTO TEÓRICO:
Las Enzimas
Las enzimas son biomoléculas de naturaleza proteica, participan en las reacciones

acelerando los procesos metabólicos (catálisis) que ocurren en niveles intra ó extra
celulares. Las variantes enzimáticas son: isoenzimas, heteroenzimas y aloenzimas. Las
enzimas no sufren cambios en su estructura al actuar como catalizadoras, teniendo la
capacidad de regeneración después de participar en las reacciones.
En el proceso de digestión, los alimentos contienen biomoléculas, las cuales deben ser
catabolizadas en compuestos y/ó estructuras moleculares más sencillas, para que sean
absorbidas a nivel del tubo digestivo y ser transportadas a los diferentes espacios celulares,
sitios en los que participarán en otros procesos metabólicos, lo que contribuyen al
mantenimiento de la homeostasis o a su vez participar en el anabolismo. En el caso
particular de los carbohidratos inician su proceso de digestión en la boca, lugar en el que
gracias a la presencia de la enzima amilasa salival, la cual cataboliza la degradación de
enlaces glucosídicos del almidón, generando: maltosa, glucosa y dextrinas de almidón que
poseen todos los enlaces.
La actividad enzimática se afecta por las siguientes condiciones:
1. Temperatura:
Las enzimas son termolábiles, al incrementar la temperatura en ciertos límites se


MEDICINA LAB-FCS-BQ
acelera la velocidad de la reacción, sin embargo, esta condición tiende a

desnaturalizar la enzima pro ser de naturaleza proteica, perdiendo así su actividad
biológica.
La temperatura, a la cual se observa la máxima actividad enzimática se denomina

Temperatura óptima.
2. pH:
Las enzimas de un estado ionizado (con carga) pueden cambiar a un estado neutro
(sin carga), lo cual influyen en la pérdida de su actividad biológica.
El pH al cual se observa, la máxima actividad enzimática se denomina pH óptimo.
3. Inductores e inhibidores:
Se produce una interacción del sustrato con la enzima. Los inhibidores tienen gran
utilidad en bioquímica, ya que ayudan a determinar la especificidad de la enzima
por el sustrato y el mantenimiento de la estructura activa de la enzima.
Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima.
De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, son: reversibles e

irreversibles
5.1. LA ENZIMA CATALASA
La enzima catalasa se la puede encontrar en casi todos los organismos vivos

expuestos al oxígeno, trabaja como antioxidante de muchas toxinas, alcoholes
como el etílico el metílico, formaldehído, nitritos, entre otros.
La función principal es facilitar la reacción de descomposición del peróxido de

hidrógeno (agua oxigenada)
H2O2 → 2H2O + O2
5.2. ENZIMAS DE IMPORTANCIA CLÍNICA PARA DIAGNÓSTICO MÉDICO
Se emplean las enzimas en altas investigaciones de laboratorio y en análisis

clínicos, actúan como reactivos biológicos y permiten la cuantificación de analitos o

MEDICINA LAB-FCS-BQ
compuestos de interés en sangre o en cualquier muestra biológica, las cuales

ayudan en el diagnóstico, pronóstico y tratamiento.
Una clasificación resume a las enzimas de acuerdo con la reacción química que
catalizan:
 Oxidorreductasas: Las oxidorreductasas son enzimas que catalizan la

transferencia de electrones desde una molécula donante (el agente reductor o la
molécula oxidada) a otra aceptora (el agente oxidante o la molécula reducida).
Imagen 1. Oxidorreductasa. Obtenido de:

http://www.biorom.uma.es/contenido/UPV_EHU/enzimas/enz13.htm#c1
1. Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo químico (distinto del

hidrógeno) de un sustrato a otro.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Imagen 2. Transferasa. Obtenido de:

http://www.biorom.uma.es/contenido/UPV_EHU/enzimas/enz13.htm#c1
2. Hidrolasas: Catalizan a ruptura de un determinado enlace introduciendo una

molécula de agua.
Imagen 3. Hidrolasa. Obtenido de: https://es.slideshare.net/pedroalvarez3/enzimas-

3395566
3. Liasas: Catalizan la ruptura de enlaces carbono con carbono, oxígeno,

nitrógeno o azufre, para formar un doble enlace generalmente.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Imagen 4. Liasa. Obtenido de: https://www.biologuias.com/base-molecular/enzimas/
4. Isomerasas: Cataliza las reacciones donde hay un cambio de posición de

algún grupo a otra parte de la misma molécula, se clasifican dependiendo del tipo
de grupo que cambian de posición y del tipo de sustrato.
Imagen 5. Isomerasa. Obtenido de: https://www.biologuias.com/base-

molecular/enzimas/
5. Ligasas: Catalizan la síntesis de nuevas moléculas por unión entre otras. Si la

energía la consiguen por hidrólisis de ATP se denominan sintetasas y si es gracias
a otras fuentes de energía sintasas (Biologuias, 2013).
Imagen 6. Ligasa. Obtenido de : https://www.biologuias.com/base-


MEDICINA LAB-FCS-BQ
molecular/enzimas/
Por significancia clínica pueden agruparse en:
 Enzimas séricas hepáticas
 Enzimas séricas pancreáticas
 Enzimas séricas en el infarto de miocardio
 Enzimas séricas perfil prostático
 Variante de enzimas Láctico Deshidrogenasas, etc.
 Las enzimas son proteínas con la función específica de acelerar las reacciones
químicas en las células. La mayoría de las enzimas y proteínas globulares, excepto
las ribozimas, que son enzimas ribonucleotídicas, unidades de ARN. Las enzimas
son los catalizadores más notables, debido a las propiedades que se describen a
continuación:
 Reacciones de catálisis en condiciones del entorno celular. Estas enzimas son

capaces de acelerar las velocidades de reacción en condiciones del entorno
celular, o a una temperatura de 37 grados C y un pH de 7,4 (valor de pH del
plasma sanguíneo). Los catalizadores químicos (como el platino y el níquel) solo
funcionan a temperaturas muy altas, presiones elevadas y valores de pH ácidos o
básicos. Estas enzimas se utilizan en condiciones extremas como catalizadores
químicos, la vida de los animales (como los mamíferos) no sería posible, pero
estas condiciones conducen inevitablemente a la destrucción celular.
 Tienen especificidad por su sustrato. A diferencia de dos catalizadores

químicos que no tienen especificidad para sus sustratos, porque las enzimas son
específicas para sus sustratos. Como la acción catalítica de las enzimas no
suspende la formación de contaminantes.
 Tienen un alto poder catalítico. Con enzimas, podemos acelerar la velocidad de

las reacciones químicas. En ausencia de enzimas, la mayoría de las reacciones
biológicas serían lentas, por lo que estas reacciones no ocurren debido a las

MEDICINA LAB-FCS-BQ
condiciones de temperatura y pH de las células. Por ejemplo, la hidratación del

dióxido de carbono (CO2) formando ácido carbónico (H2CO3) en la célula, puede
ocurrir en presencia de la enzima, sin embargo, esta reacción tardará mucho en
completarse, o que no sería compatible con las mismas necesidades de la célula.
La hidratación del CO2, catalizada por el dióxido de carbono, se produce a una
velocidad incomparablemente alta.
 Presentan regulación de su actividad catalítica. Las enzimas reguladoras

(enzimas alostéricas y reguladas covalentemente) tienen acciones catalíticas
reguladas de acuerdo con las necesidades metabólicas de las células. Las
moléculas que se unen a la estructura proteica de la enzima alostérica, regulando
su actividad catalítica, se denominan moduladores, efectores o reguladores. Los
moduladores pueden activar e inhibir la actividad catalítica (Bitstream, 2011).
Estructura de las enzimas
Las enzimas son proteínas globulares formadas por una o más cadenas
polipeptídicas plegadas, creando una “hondonada” donde encaja el sustrato y tiene
lugar la reacción. Esta zona de la enzima se denomina centro activo y sólo unos
pocos aminoácidos están implicados en él. La proximidad de los aminoácidos en el
centro activo está determinada por la estructura terciaria, aunque también pueden
ocupar posiciones adyacentes en la estructura primaria.
En una enzima con estructura cuaternaria, los aminoácidos del centro activo pueden
encontrarse incluso en diferentes cadenas. La configuración tridimensional del centro
activo es complementaria a la del sustrato y posee una distribución complementaria
de sus cargas sobre la superficie de unión. Es decir, si una región del sustrato tiene
una carga negativa, la zona correspondiente del centro activo tendrá una carga
positiva y viceversa.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Imagen 7. Sitio activo. Obtenido de:

https://www.eugenomic.com/es/home/genomica/glossary/s/Sustrato.html
Partes del sistema enzima sustrato: Comprende sustancias que participan en la

reacción catalizada por enzimas.
 Sustrato: Molécula o moléculas sobre las cuales actúa la enzima.
 Producto: Moléculas resultantes de la acción de la enzima sobre el sustrato.
 Holoenzima: Resulta de la unión de la apoenzima y la coenzima.
 Apoenzima: De naturaleza proteica, peso molecular elevado, no dializable y

termolábil. Es la enzima propiamente dicha.
 Coenzima: Es el componente del sistema enzimático que contiene peso

molecular bajo, se une débilmente a la apoenzima.
 Cosustrato: De similares características a las coenzimas, se diferencian en

que estas si se consumen durante la actividad de la enzima.
 Activadores: Habitualmente son iones de magnesio, calcio, potasio, sodio,

aceleran la actividad de la encima y la velocidad de la reacción
Inhibidores
Los inhibidores son sustancias que disminuyen, o incluso anulan, la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas, puede ser de algunos tipos: por competencia y
por no competencia.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Inhibición competitiva
Algunos compuestos inhiben la actividad enzimática ocupando temporalmente el centro

activo de la enzima. Esta forma de regulación se conoce como inhibición competitiva, ya
que el inhibidor (compuesto parecido al sustrato) y el sustrato compiten por unirse al
centro activo. La inhibición competitiva es reversible. El resultado de la competencia en
cada momento depende de cuántas moléculas de sustrato y de inhibidor estén presentes.
Inhibición no competitiva
En la inhibición no competitiva, el inhibidor que no necesita parecerse al sustrato se une a

la enzima en un sitio distinto al centro activo. La unión del inhibidor no competitivo a la
enzima no bloquea la fijación del sustrato e inactiva la enzima, este presente o no el
sustrato. Al igual que la inhibición competitiva, la inhibición no competitiva es reversible
(Khan, 2009).
Imagen 8. Inhibición por competencia y por no competencia. Obtenido de:

https://es.khanacademy.org/science/biology/energy-and-enzymes/enzyme-regulation/a/enzyme-

MEDICINA LAB-FCS-BQ
regulation
Bibliografía
Biologuias. (2013). Enzimas. Obtenido de Biologuias: https://www.biologuias.com/base-

molecular/enzimas/
Bitstream. (2011). Enzimas. Obtenido de Handle:

https://addi.ehu.es/bitstream/handle/10810/14292/4-
%20Cap%C3%ADtulo%20I.%20Las%20enzimas.pdf?sequence=4&isAllowed=y
Khan. (2009). Regunación enzimática. Obtenido de Khanacademy:

https://es.khanacademy.org/science/biology/energy-and-enzymes/enzyme-
regulation/a/enzyme-regulation
7. MÉTODOS:
Cualitativos y Cuantitativos
8. PROCEDIMIENTO – FUNDAMENTO:
Rotular 2 vasos desechables pequeños transparentes como A y B respectivamente
Rotular 9 tubos de ensayo grandes como: A, B, C, D, E, F, G, H e I respectivamente
8.1. PODER DE LAS ENZIMAS DIGESTIVAS
1. Los vasos desechables pequeños transparentes que ya fueron rotulados: A
yB
Vaso A (será el vaso, para control)
Vaso B (será el vaso para la prueba desconocida)
2. En los vasos A y B pesar 5.0 g de avena respectivamente.
3. Triturar completamente una cápsula de pancreatina (digenil o pankreoflat) en
el mortero.
4. Añadir 50 ml de agua destilada en los vasos A y B, mezclar. Establecer
características organolépticas: color, aspecto- consistencia y registrar datos,

MEDICINA LAB-FCS-BQ
observaciones
5. Inmediatamente añadir solo al vaso B el contenido de la cápsula de
pancreatina (digenil o pankreoflat), que fue previamente triturada, mezclar
con una varilla a de agitación.
6. Dejar en reposo 30 minutos
7. Trascurrido el tiempo de reposo, establecer características organolépticas:
color, aspecto- consistencia y registrar datos, observaciones y llegar a
conclusiones.
8.2 PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS
ENZIMAS
A. PREPARACIÓN DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN
DE SUS PROPIEDADES
Tubos de ensayo: A, B, C, D, E, F, G, H, I
1. Seleccione un estudiante del grupo, el cual deberá enjuagar su boca con
tres buchadas de agua destilada, masticará un trozo de papel filtro, o una
goma de mascar sin azúcar estimulando la salivación.
2. En el TUBO A: El estudiante irá depositando la saliva que segrega, a
través de un pequeño embudo simple, hasta obtener 2 ml de saliva
aproximadamente.
3. Una vez obtenida la saliva adicionar 6 ml de agua destilada (Esta solución
se denominará “solución de enzima base”), mezclar, será está solución
la que se utilizará para las siguientes experiencias de la práctica.
4. En el TUBO B: Adicionar 1 ml de agua destilada y 4 ml de solución de
almidón al 5%, mezclar en vórtex 5 segundos
5. En el TUBO C: Colocar 1 ml de agua destilada, añadir 4 ml de solución de
almidón al 5% y 4 ml de la “solución de enzima base” que estaba
contenida en el tubo A, mezclar en vórtex 5 segundos y someter a
ebullición durante 5 minutos. Retirar el tubo de ensayo del baño de agua.
Realizar las siguientes pruebas indicadas en la tabla:
PRUEBA DE LUGOL: El lugol es una PRUEBA DE BENEDICT: permite

solución de Iodo – (Di Iodo disuelto en identificar a los azucares reductores
Ioduro de potasio), permite identificar (contienen un OH libre del Carbono
almidones dando un color azul violeta o anomérico, en medio alcalino reduce
púrpura profundo. Determina la el Cobre (Cu 2+) a Cu+, produciendo un

MEDICINA LAB-FCS-BQ
presencia o alteración del almidón u precipitado rojo ladrillo de óxido

otros polisacáridos. cúprico (Cu2O). En este experimento
se indica la presencia de glucosa y
maltosa, producto de la hidrólisis del
almidón. El reactivo de Benedict
consta de: Sulfato cúprico, Hidróxido
de sodio, Sulfato de Sodio y
Carbonato anhidro de sodio.
TUBO D TUBO E TUBO F TUBO G

1. Medir 2 ml de 3. Medir 2 ml de 1. Medir 2 ml 1. Medir 2 ml
la solución del la solución del de la solución de la solución
tubo B tubo C. del tubo B. del tubo C.
2. Añadir 5 4. Añadir 5 gotas 2. Añadir 1 ml 2. Añadir 1 ml
gotas de de lugol. de reactivo de de reactivo de
lugol. Registrar Benedict, Benedict,
Registrar observaciones mezclar en mezclar en
observacione y llegar a vórtex 5 vórtex 5
s y llegar a conclusiones segundos llevar segundos llevar
conclusiones a ebullición en a ebullición en
Baño María 5 Baño María 5
minutos. minutos.
Registrar Registrar
observaciones y observaciones y
llegar a llegar a
conclusiones conclusiones.
B. ENZIMA CATALASA
Triturar una pequeña cantidad (10 g aproximados de riñón de cerdo en estado
fresco) en un mortero y proceder como sigue en la tabla:
A. DETERMINACIÓN DE LA B. DESNATURALIZACIÓN DE LA
PRESENCIA DE ENZIMA ENZIMA CATALASA EN TEJIDO
CATALASA EN TEJIDO ANIMAL ANIMAL
TUBO H TUBO I
1. Colocar aproximadamente 5 g de 1. Colocar aproximadamente 5 g de
riñón de cerdo fresco riñón de cerdo fresco
2. Someter a cocción frente a la llama

MEDICINA LAB-FCS-BQ
2. Encender un incienso de un mechero, durante este

procedimiento cuidar que los
3. Añadir 2 ml de agua oxigenada
vapores que se desprenden, se
4. Enseguida acercar a la boca del dirijan en posición contraria a los
tubo el incienso, mientras se estudiantes.
produce el burbujeo, cuidando que
3. Dejar que el tubo enfríe brevemente.
no se moje el incienso. Registrar
datos, observaciones y llegar a 4. Encender un incienso
conclusiones. 5. Añadir al tubo 5 ml de agua
oxigenada
6. Enseguida acercar a la boca del
tubo el incienso, mientras se
produce el burbujeo, cuidando que
no se moje el incienso. Registrar
datos, observaciones y llegar a
conclusiones.
C. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA –
TEMPERATURA MÁXIMA DE CATÁLISIS
1. Rotular 2 erlenmeyers A, B
2. Pesar 10 g de riñón de cerdo, triturar y colocar en el erlenmeyer A.
3. Pesar 10 g de patata, triturar y colocar en el erlenmeyer B.
4. Cubrir con parafilm y colocar 1 termómetro con cuidado
5. Añadir a cada erlenmeyer 10 ml de agua oxigenada (el agua oxigenada
debe añadirse una vez que vaya terminando la reacción de cada
erlenmeyer, es decir no añadir a los dos al mismo tiempo)
6. Enseguida medir la temperatura inicial (tiempo 0 minutos)
7. Simultáneamente encender el cronómetro medir las variaciones de
temperatura en intervalos de 0.5 minutos (durante 5 minutos).
8. Registrar datos, observaciones, realizar gráficas (Tiempo Vs. Temperatura
máxima de catálisis enzimática) y llegar a conclusiones.
8.3 CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS
CLÍNICO
Revisar y aplicar los métodos dispuestos en el Aula virtual. Se recoge la muestra
de sangre en tubo de tapa roja al vacío, se coagula la sangre y se centrifuga 10

MEDICINA LAB-FCS-BQ
min a 3000 rpm, para separar el suero a un tubo limpio y seco.

En el suero sanguíneo aplicar los métodos para cuantificación de:
1. Amilasa: Método enzimático colorimétrico /CINETICO

De conformidad con lo descrito en el Método Cromatest de Linear Chemicals “En
este ensayo directo la α-amilasa cataliza la hidrólisis del sustrato 2-cloro-p-
nitrofenil-α-D-maltotriósido (CNP-G3) a pH 6,0 en 2-cloro-p-nitrofenol (CNP) y
glucósidos libres”
α-amilasa
10 CNP-G3 9 CNP + 1CNP-G2
+ G3 + G
2. AST(GOT) Aspartato aminotransferasa (Transaminasa Glutámica
Oxalacética): Método enzimático UV/CINETICO
De conformidad con lo descrito en el Método Cromatest de Linear Chemicals “La
aspartato aminotransferasa (AST/GOT) cataliza la transferencia del grupo amino
del aspartato al cetoglutarato con la formación de glutamato y oxalacetato. Este
último es reducido a malato por la malato deshidrogenasa (MDH) en presencia de
nicotinamido adenin dinucleótido reducido (NADH)”
L-Aspartato + 2- AST/GOT L-Glutamato +

Cetoglutarato Oxalacetato
+
Oxalacetato + NADH + MDH L-Malato + NAD
+
H
9. REGISTRO DE DATOS DE LA PRÁCTICA (ORIGINAL ANEXO):
9. ANEXO/ DATOS OBTENIDOS EN LA APLICACIÓN EXPERIMENTAL:

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
REPORTE DE DATOS OBTENIDOS EN LA PRÁCTICA

MEDICINA LAB-FCS-BQ
9.1 PODER DE LAS ENZIMAS DIGESTIVAS
A B A B
0 minutos (inicio) 30 minutos de reacción
Color: Blanco Color: Blanco Color: Blanco Color: Crema
Aspecto - Aspecto - Aspecto - Aspecto -

Consistencia: Consistencia: Consistencia: Consistencia:
Turbio - ojuela Turbio - ojuela Turbio - ojuela Turbio – ojuela
de avena avena de avena integra desintegrada,
integra parcialmente lechoso
diluida
9.2 PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS

ENZIMAS
A. PREPARACIÓN DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN DE SUS
PROPIEDADES
Color: Color: Gris Color: celeste Color:

Transparente anaranjado
Aspecto Aspecto Aspecto Aspecto

Consistencia: Consistenci Consistencia: Consistencia
a: :
Transparente Transparente
Turbio Turbio
B. ENZIMA CATALASA
DETERMINACIÓN DE LA DESNATURALIZACIÓN DE LA
TUBO H TUBO I

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Se presenta burbujeo al colocar el No se produce reacción

agua oxigenada
El incienso no aviva la flama
El incienso aviva la flama
C. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA – TIEMPO Vs-

TIEMPO (min) TEMPERATURA (° C)
A (riñón) B (patata)
0 21.0 21.0
0.5 21.5 21.5
1.0 22.0 22.0
1.5 22.5 22.5
2.0 23.0 23.0
2.5 23.5 23.0
3.0 24.0 23.0
3.5 24.0 23.0
4.0 24.0 23.0
4.5 24.0 23.0
5.0 23.5 22.5
9.3 CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS

CLÍNICO
1. CUANTIFICACIÓN DE AMILASA
AMILASA a 37 °C
Longitud de Onda
Factor para el cálculo a 37

°C

MEDICINA LAB-FCS-BQ
BLANCO Absorbancia (A): 0.000
MUESTRA A (inicial): 0.300
A (1 minuto):0.305
A (2 minuto):0.310
A (3 minuto):0.314
Valor Referencia
Interpretación de
Resultados
2. CUANTIFICACIÓN DE AST(GOT) Aspartato aminotransferasa
(Transaminasa Glutámica Oxalacética
AST/GOT a 37 °C
Longitud de Onda
Factor para el cálculo a 37

°C
A (1 minuto): 0.409
A (2 minuto): 0.412
A (3 minuto): 0.417
Valor Referencia
FIRMA DE LA DOCENTE:

MEDICINA LAB-FCS-BQ
…………………………………………………………………………………
Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs
10. CÁLCULOS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

Poder de las enzimas digestivas:
A B A B
0 minutos (inicio) 30 minutos de reacción
Color: Blanco Color: Blanco Color: Blanco Color: Crema
Aspecto - Aspecto - Aspecto - Aspecto -

Consistencia: Consistencia: Consistencia: Consistencia:
Turbio - ojuela Turbio - ojuela Turbio - ojuela Turbio – ojuela

de avena avena de avena integra desintegrada,
integra parcialmente lechoso
diluida
Interpretación de resultados:
0 minutos:
Tubo A: Presenta color blanco y turbidez gracias a que la avena se encuentra mezclada
con el agua, la ojuela de avena se encuentra íntegra por la ausencia de enzimas
digestivas.
Tubo B: Presenta color blanco y turbidez gracias a que la avena se encuentra mezclada
con el agua, la ojuela de avena se encuentra parcialmente diluida gracias a que las
enzimas amilasa, proteasa y lipasa (enzimas digestivas) que forman parte de la capsula
de pancreatina ya han empezado la degradación.
30 minutos:
Tubo A: Presenta las mismas características que en el minuto cero debido a que no se le

MEDICINA LAB-FCS-BQ
agrego ninguna enzima digestiva y como tal no hubo degradación de la ojuela de avena.
Tubo B: Se puede observar claramente la acción de las enzimas digestivas de la capsula

de pancreatina, se ha desintegrado la ojuela de avena en el tiempo transcurrido dándole a
la preparación un color crema-lechoso.
PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS

ENZIMAS
Color: Color: Gris Color: celeste Color:

Transparente anaranjado
Aspecto Aspecto Aspecto Aspecto

Consistencia: Consistenci Consistencia: Consistencia
a: :
Transparente Transparente
Turbio Turbio
Tubo D: La solución toma un color violeta obscuro (positivo para almidón) porque el
almidón va atrapando el Yodo haciendo que el color característico del Yodo se concentre.
Si se aplica calor durante 5 minutos al tubo D tomaría el color transparente mencionado
en los resultados debido a que el calor provoca que la hélice que contenía al yodo se
desarme.
Tubo E: El almidón se hidroliza en presencia de la amilasa salival dando como resultado

glucosa (monosacárido), la prueba de Lugol (reacciona con polisacáridos) da negativo en
esta reacción dado que el almidón se hidroliza por la presencia de la amilasa salival
pasando a ser glucosa (monosacárido),
La hidrolisis del almidón le da el color gris y consistencia turbia.
Tubo F: El color celeste (debido a la coloración azulada del reactivo de Benedict) y


MEDICINA LAB-FCS-BQ
consistencia trasparente indican que la prueba de Benedict salió negativa, se debe a que
Benedict indica la presencia de azucares reductores como la glucosa, pero en este caso
no existe la hidrolisis del almidón.
Tubo G: La amilasa salival hidroliza al almidón produciéndose la glucosa y maltosa, esta

al ser azucares reductores reaccionaran con el reactivo de Benedict dando la prueba
como positivo, esto determina su color anaranjado y consistencia turbia.
ENZIMA CATALASA
DETERMINACIÓN DE LA DESNATURALIZACIÓN DE LA
TUBO H TUBO I
Se presenta burbujeo al colocar el No se produce reacción

agua oxigenada
El incienso no aviva la flama
El incienso aviva la flama
Tubo H: Se presenta el burbujeo gracias a que la enzima catalasa descompone el

peróxido de hidrógeno, el burbujeo corresponde al oxígeno liberado en la reacción, al
acercar la boca del tubo al incienso se aviva la flama por el oxígeno liberado en la
reacción.
Tubo I: Debido a que la muestra fue sometida a cocción la enzima catalasa se

desnaturalizó y como tal al agregar el peróxido de hidrógeno no va a ocurrir la reacción,
no existe liberación de oxígeno y no se aviva la flama del incienso.
ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA – TIEMPO Vs-


MEDICINA LAB-FCS-BQ
TIEMPO (min) TEMPERATURA (° C)
A (riñón) B (patata)
0 21.0 21.0
0.5 21.5 21.5
1.0 22.0 22.0
1.5 22.5 22.5
2.0 23.0 23.0
2.5 23.5 23.0
3.0 24.0 23.0
3.5 24.0 23.0
4.0 24.0 23.0
4.5 24.0 23.0
5.0 23.5 22.5
A (riñón) : Se puede evidenciar la actividad de la catalasa, la temperatura va aumentando

de acuerdo va ocurriendo la reacción, al minuto 0 la reacción inicia con una temperatura
de 21 grados, se evidencia como la temperatura aumenta de manera constante y en la
misma mediad cada medio minuto hasta llegar el tercer minuto donde adquiere 24 grados,
desde este punto la temperatura se mantiene constante hasta el minuto 4.5 y disminuye
para el minuto 5, con esto podemos determinar que la temperatura máxima de catálisis de
la enzima catalasa del riñón al descomponer el H2O2 es 24 grados C.
B (patata): Gracia a la actividad de la catalasa la temperatura va aumentando de acuerdo

va ocurriendo la reacción, al minuto cero la temperatura es de 21 grados C. y aumenta de
manera constante y en la misma medida cada medio minuto hasta llegar al minuto 2 en
donde adquiere 23 grados C., desde este punto la temperatura se mantiene constante

MEDICINA LAB-FCS-BQ
hasta el minuto 4.5 a partir de donde empezó a bajar. Así se puede determinar la
temperatura máxima de catálisis de la enzima catalasa de la patata al descomponer el
H2O2 es de 23 grados C.
CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS CLÍNICO
1. CUANTIFICACIÓN DE AMILASA
AMILASA a 37 °C
Longitud de Onda 405 nm
Factor para el cálculo a 37 °C 3591
A (1 minuto):0.305
A (2 minuto):0.310
A (3 minuto):0.314
Valor Referencia Suero, plasma
< 86 U/L (1,43 ukat/L)
Orina:
< 470 U/L (7,83 ukat/L)
Interpretación de Resultados Cálculos: Se calcula los

incrementos y se promedia, en este
caso la absorbancia del blanco es
cero y como tal no se resta a las
otras absorbancias.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
A1-Ainicial= 0.305-0.300= 0.005
A3-A2= 0.314-0.310= 0.004
Promedio: (0.004+0.005)/2= 0.0045
Cálculo de la concentración de la
enzima amilasa
U/L = ΔA/min x 3591
U/L= 0,0045 * 3591
U/L= 16,16
Interpretación: La concentración de
amilasa en el suero sanguíneo es de
16,16 U/L, los valores normales
dicen que la concentración en suero
y plasma debe ser de <86 U/L, por tal
el valor obtenido se encuentra dentro
de los valore normales, significa que
el páncreas está funcionando
correctamente.
2. CUANTIFICACIÓN DE AST(GOT) Aspartato aminotransferasa (Transaminasa

Glutámica Oxalacética
AST/GOT a 37 °C
Longitud de Onda 340 nm
Factor para el cálculo a 37 °C 3333


MEDICINA LAB-FCS-BQ
A (1 minuto): 0.409
A (2 minuto): 0.412
A (3 minuto): 0.417
Valor Referencia Adultos:
-37 °C hasta 40 U/L (0,67 ukat/L)
-30 °C hasta 25 U/L (0,42 ukat/L)
Interpretación de Resultados Cálculos: Se calcula los

incrementos y se promedia, en este
caso la absorbancia del blanco es
cero y como tal no se resta a las
otras absorbancias.
A1-Ainicial= 0.406-0.409= 0.003
A3-A2= 0.412-0.417= 0.005
Promedio: (0.003+0.005)/2= 0.004
Cálculo de la concentración de
AST/GOT
U/L = ΔA/min x 3333
U/L= 0,004 x 3333
U/L= 13,33
Interpretación: La concentración de

MEDICINA LAB-FCS-BQ
AST(GOT) en el suero sanguíneo es

de 13,33 U/L, los valores normales
es hasta 40 U/L, por lo tanto el valor
obtenido se encuentra entre los
valores normales dando a saber que
paciente no ha sufrido un infarto de
miocardio recientemente, no posee
enfermedades musculares, distrofia
muscular o dermatomiositis
3. CUESTIONARIO/TAREAS/PREGUNTAS:
1. Defina que es una enzima
Las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Las
enzimas son catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse en una reacción,
aumentan notablemente su velocidad. No hacen factibles las reacciones imposibles, sino
que solamente aceleran las que espontáneamente podrían producirse. Ello hace posible
que en condiciones fisiológicas tengan lugar reacciones que sin catalizador requerirían
condiciones extremas de presión, temperatura o pH. (Mañas, 2020)
2. ¿Qué es el almidón y cómo está formado, hasta que compuestos se cataboliza en

el metabolismo?
El almidón es la sustancia con la que las plantas almacenan su alimento en raíces (yuca),
tubérculos (patata), frutas y semillas (cereales). Pero, no sólo es una importante reserva
para las plantas, también para los seres humanos tiene una alta importancia energética,
proporciona gran parte de la energía que consumimos los humanos por vía de los
alimentos.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
El almidón está realmente formado por una mezcla de dos sustancias, amilosa y
amilopectina, que sólo difieren en su estructura: la forma en la que se unen las unidades de
glucosa entre sí para formar las cadenas. Pero esto es determinante para sus propiedades.
Así, la amilosa es soluble en agua y más fácilmente hidrolizable que la amilopectina (es
más fácil romper su cadena para liberar las moléculas de glucosa).
¿Cómo actúa la amilasa salival sobre el almidón? y porqué es importante tanto el

almidón como la amilasa salival en el metabolismo?
La enzima amilasa degrada el almidón para así formar azúcares más simples como la
glucosa, es decir, de moléculas complejas pasa a moléculas simples. Las moléculas de
glucosa atraviesan la pared intestinal y posteriormente llegan a la sangre.
Aunque se asume que la α–amilasa es multifuncional, sólo se han reportado tres funciones
importantes:
1. Ayuda a romper la molécula de almidón en unidades más cortas como glucosa y así
contribuir al proceso de la digestión de carbohidratos.
2. Se une a la bacteria Streptococcus viridans localizada en la cavidad oral (común en
nuestra boca), logrando bloquear el 50% de la actividad de la enzima (a través de romper
moléculas de almidón), por lo que la glucosa obtenida se utiliza como fuente de alimento
para la bacteria convirtiéndola en ácido láctico. Este ácido propicia el proceso de la caries.
¡Por eso hay que lavarse los dientes!
3. La enzima se une a otro tipo de bacterias para ayudar a la limpieza bacteriana de
nuestra cavidad oral.
3. ¿Explique el fundamento de la prueba de Lugol sobre los almidones?
El reactivo de Lugol es una disolución compuesta por yodo y yoduro potásico, es una
prueba cualitativa que sirve para determinar si en una solución de azúcares no reductores
existen polisacáridos, particularmente el almidón y si éste presenta una alteración, además,
este último es una mezcla de amilosa yamilopectina. Cuando el almidón se pone en
contacto con unas gotas de Lugol, toma un color azul violeta característico (Córdova J,

MEDICINA LAB-FCS-BQ
2019).
El almidón absorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa, la cual desaparece al
calentar porque rompe la estructura que se ha producido, pero vuelve aparecer al enfriar.
2.3. Reactivo de Lugol como oxidante El reactivo de Lugol además es oxidante por tener
yodo que, en presencia de reductores, pasa a ión yoduro, con un potencial de reducción
estándar (Sánchez M; Martín M; Pinto G, 2013).
Hernández E. (2012). Detección de la presencia de almidón en los alimentos.

Biología Humana. Recuperado de:
http://biohmikaestefi.blogspot.com/2012/03/deteccion-de-la-presencia-de-
almidon-en.html
4. ¿Explique el fundamento de la prueba de Benedict sobre los almidones?
La reacción identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del carbono
anomérico), como la glucosa, la celobiosa, la maltosa y la lactosa. En soluciones
alcalinas pueden reducir el que tiene color azul , que precipita la solución
alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.
Componente del reactivo de Benedict:
 Citrato de Sodio
 Carbono anhidro de Sodio
 Sulfato cúprico
 Además, se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
En el medio alcalino el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse
por efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) a su forma de , este nuevo ion se
observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso ( ).
La reacción se puede dar gracias a que el azúcar en medio alcalino se encuentre en

forma lineal, puesto que la azúcar en solución se encuentra en forma de anillo, una vez
se encuentra en forma lineal puede reaccionar con el ion cúprico (Torres, 2013).
5. ¿Cuál es la fuente de la que se extrae la enzima catalasa?
La catalasa se obtiene a partir de microorganismos, su función es convertir/degradar el

agua oxigenada/peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno. La reacción ocurre
espontáneamente, la enzima que cataliza esta reacción es la catalasa, se encuentra en
animales y vegetales, la catalasa es un enzima que podemos observar sobre todo en
organismos aeróbicos, cuyo peso molecular lo podemos situar entre los 210-280 kd. Esta
enzima se encuentra en el interior de los peroxisomas, y es en ellos donde ejerce su
función antioxidante. Esta función será más alta en el hígado y en los riñones, en
cambio, será más baja o incluso nula en el tejido nervioso. También puede ejercer su
función en el tejido conectivo, aunque esta será baja.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
6. ¿Cuál es el sustrato sobre el que actúa la enzima catalasa? Mediante reacción

indique la acción de la catalasa sobre el sustrato peróxido de hidrógeno H2O2
La Catalasa es una enzima que se encuentra en todos los organismos vivos expuestos
al oxígeno, ya que cumple funciones de antioxidante frente a muchas toxinas, alcoholes
como el etílico el metílico, formaldehído, nitritos, entre otros.
Su función principal es catalizar la reacción de descomposición del peróxido de

hidrógeno (agua oxigenada).
Al ejercer su acción sobre el agua oxigenada (H2O2) la separa en agua (H2O) y oxígeno
catalasa
molecular (O2), que se resume en la siguiente reacción:
2H2O2  2H2O + O2
7. ¿Cuál es la importancia biomédica de la enzima catalasa en el organismo?
Papel biológico y bioquímico
La catalasa cumple un papel vital en el metabolismo, eliminando especies altamente

reactivas del oxígeno, como el peróxido de hidrógeno (H2O2), que pueden ser perjudiciales
para las proteínas, los ácidos nucleicos y los lípidos de las células. Las especies reactivas
del oxígeno, conocidas como ROS en inglés Reactive Oxigen Species son productos de la
ruptura o excitación de la molécula de oxígeno y causan el estrés oxidativo de las células.
En ellas, la catalasa se encuentra en unos orgánulos llamados peroxisomas (80%) y en el
citoplasma (20%). (Enzima catalasa | La Guía de Química, 2010)
El peróxido se origina durante la reducción de dioxígeno(O2) en agua (H2O), por la

dismutación del radical superóxido y por acción de otras enzimas, las oxidasas.
(CATALASA – ChemEvol, s. f.)

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Reducción del dioxígeno a agua. Generación de ROS, a partir de oxígeno en estado

triplete, mediante redistribución electrónica o por reducción secuencial con un electrón.
Modificado de Apel K y Hirt H. 2004.
Además de la catalasa, en la eliminación del peróxido intervienen las peroxidasas y las

peroxirredoxinas (I y II), las cuales actúan sobre el sustrato reducido.
Dentro de la catalasa encontramos tres grupos:
 Las catalasas monofuncionales. Tienen el grupo hemo y se hallan en procariotas y

eucariotas.
 Las Mn-catalasas. Sustituyen el grupo hemo por manganeso y las encontramos en
procariotas anaerobios.
 Las catalasas peroxidasas que realiza las funciones de catalasa y peroxidasa. Se
encuentran en bacterias y hongos.
Actividad enzimática
En esta reacción, dos moléculas de peróxido mediante la acción de la catalasa producen

dos moléculas de agua y una molécula de oxígeno. De este modo se evita la formación del
radical hidroxilo y el oxígeno singlete, los cuales contribuyen al estrés oxidativo de la célula.
(Miranda, s. f.)

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Dismutación del peróxido de hidrógeno.
Una de las moléculas de peróxido cede electrones (dador) y la otra molécula acepta
electrones (aceptor). La reacción consta de dos etapas:
1. La catalasa es oxidada por el peróxido siendo el resultado una molécula de agua y el

compuesto I, intermediario de la reacción global y formado por un grupo ferroxilo y un
radical catiónico de porfirina.
2. La otra molécula de peróxido restante reduce al complejo I, es decir devuelve a la
catalasa a su forma original. De esta reducción se origina una molécula de agua y otra
de oxígeno.
Además, la catalasa puede llevar a cabo actividad enzimática a modo de peroxidasa,

oxidando ciertos compuestos como el etanol, metanol, ácido fórmico y fenoles. Para ello,
una molécula de peróxido actúa como agente oxidante. Un ejemplo de este tipo de
actividad enzimática de la catalasa sería la reacción del peróxido con el etanol, que tiene
como producto principal el acetaldehído, implicado en los efectos del alcohol (etílico) en
humanos.
La catalasa, aunque posee una gran capacidad de destruir el peróxido, su afinidad por este
es baja por lo que el enzima requiere altas concentraciones del sustrato para activarse.
(Rodriguez, s. f.)
8. Indique en la tabla la información para el siguiente grupo de enzimas de interés

clínico:

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Enzimas séricas hepáticas
Enzimas séricas pancreáticas
Enzimas séricas en el infarto de miocardio
Enzimas séricas perfil prostático
Variante de enzimas Láctico Deshidrogenasa


MEDICINA LAB-FCS-BQ


MEDICINA LAB-FCS-BQ
4. GRÁFICOS:
5. OBSERVACIONES:
 Es necesario contar con todo el conocimiento previo necesario, como tal no se

presentarán inconvenientes al momento de utilizar los diferentes instrumentos y al
momento de manipular los reactivos.
 En las reacciones se pudo observar la presencia enzimática de algunos alimentos

y además el como dichas enzimas pueden verse afectadas exponer el contenido a
diferentes circunstancias.
 Las enzimas se desnaturalizan al calor y no presentan actividad.
 Mientras que el alimento que contiene la enzima no es sometido cocción, esta

podrá reaccionar si se aplica el peróxido de hidrógeno.
 La prueba de Lugol da positivo para almidones presentándose un color violeta

obscuro.
6. CONCLUSIONES:
 Las enzimas son moléculas esenciales para el normal funcionamiento del

organismo, además cualquier tipo de causa que afecte su normal funcionamiento
puede desencadenar graves problemas.
 Es importante el saber aplicar correctamente los diferentes métodos de

cuantificación de carbohidratos, a su vez la correcta interpretación de los
resultados determinará las condiciones reales del paciente al igual que el
tratamiento a seguir de ser necesario.
 Para la cuantificación de enzimas tanto en sangre como en orina es importante

determinar las propiedades de los reactantes al igual que las diferentes
condiciones que pueden intervenir en la obtención de resultados, así los resultados
son de mayor confiabilidad y se evitan los falsos positivos y falsos negativos.
 Contar con los instrumentos adecuados no significa resultados correctos, se debe


MEDICINA LAB-FCS-BQ
conocer cómo funcionan y manejarlos de manera adecuada.
7. SUGERENCIAS:
 Tomar seguir las medidas de seguridad adecuadas al momento de manipulas lo

reactivos químicos.
 Utilizar vestimenta protectora al momento de realizar los exámenes a las muestras.
 Leer las etiquetas de cada frasco para conocer sus propiedades además de su
nivel de peligrosidad en caso de contacto directo.
 Los aparatos e instrumentos que son utilizados deben ser adecuadamente

limpiados luego de los exámenes al igual que el lugar utilizado.
8. TERMINOLOGÍA:
 Termolábil: Que se destruye al alcanzar una temperatura más o menos elevada.
Fuente: https://www.lexico.com/es/definicion/termolabil
 Centrífuga: Es una máquina que pone en rotación una muestra para separar por
fuerza centrífuga sus componentes o fases (generalmente una sólida y una
líquida), en función de su densidad.
Fuente: https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-ampliado/que-es-una-
centrifuga
 Agitador Vórtex: Un mezclador de vórtice, o agitador de tubos vortex, es un

dispositivo simple utilizado comúnmente en los laboratorios para mezclar pequeños
viales de líquido.
Fuente: https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-
instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/agitador-vortex-agitador-tubos-vortex.html
 Matraz de Erlenmeyer: es un recipiente de vidrio que se utiliza en los

laboratorios, tiene forma de cono y tiene un cuello cilíndrico, es plano por la base.
Se utiliza para calentar líquidos cuando hay peligro de pérdida por evaporación.

MEDICINA LAB-FCS-BQ
Fuente: https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-
instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/matraz-erlenmeyer.html
9. BIBLIOGRAFÍA:
Mañas, J. M. (5 de Agosto de 2020). ehu.eus. Obtenido de ENZIMAS:
http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz1.htm
Torres, O. (2013). REACCION DE BENEDICT - BIOQUIMICA.

https://sites.google.com/site/bioquia9/reaccion-de-benedict
García, A. Catalasa. Recuperado de:

http://www3.uah.es/chemevol/index.php/catalasa/#:~:text=La%20catalasa
%20es%20un%20enzima,donde%20ejerce%20su%20funci%C3%B3n%20
antioxidante.
Gómez, M. (2017). Almidón. Recuperado de:

http://rincondelaciencia.educa.madrid.org/Curiosid/Rc-58.html
Andrade, E. (2016). Acción de la amilasa sobre el almidón. Recuperado de:

http://biologia3518.blogspot.com/2016/11/accion-de-la-amilasa-sobre-el-
almidon.html
Pérez, P. (2017). Saliva y enzima alfa amilasa: esenciales para la digestión.

Recuperado de: sabermas.umich.mx/archivo/articulos/235-numero-27/421-
saliva-y-enzima-alfa-amilasa-esenciales-para-la-
digestion.html#:~:text=Aunque%20se%20asume%20que%20la,de%20la%20
digestión%20de%20carbohidratos.
Pérez, D (2018). Enzimas hepáticas. Recuperado de:

https://www.intramed.net/contenidover.asp?contenidoid=93082
Llanos, C. (2017). Enzimas séricas pancreáticas. Recuperado de:


MEDICINA LAB-FCS-BQ
https://med.unne.edu.ar/sitio/multimedia/imagenes/ckfinder/files/files/Carrera-
Medicina/BIOQUIMICA/enzimas.pdf
Gonzales, D. (2018). Análisis diagnóstico del infarto del miocardio. Recuperado de:
https://www.cun.es/enfermedades-tratamientos/pruebas-
diagnosticas/diagnostico-infarto-agudo-miocardio
Lozada, T. (2017). Antígeno prostático especifico. Recuperado de:

file:///C:/Users/llere/Downloads/Dialnet-
AntigenoProstaticoEspecificoYFosfatasasAcidasIYIIC-6143844%20(1).pdf
López, S. (2018). Láctico Deshidrogenasas. Recuperado de:

http://www3.uah.es/chemevol/index.php/lactato-deshidrogenasa/
CATALASA – ChemEvol. (s. f.). ChemEvol.

http://www3.uah.es/chemevol/index.php/catalasa/#:%7E:text=2.-
,Papel%20biol%C3%B3gico%20y%20bioqu%C3%ADmico,los%20l%C3%ADpidos
%20de%20las%20c%C3%A9lulas.
Enzima catalasa | La Guía de Química. (2010, 25 octubre). La Guía.

https://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa
Miranda, E. C. M. (s. f.). Enzimas que participan como barreras fisiológicas para eliminar
los radicales libres: II. Catalasa. SciELO.
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-03001996000200001
Rodriguez, J. L. (s. f.). Catalasa. Academia.

https://www.academia.edu/34192530/Catalasa
Hernández E. (2012). Detección de la presencia de almidón en los alimentos. Biología

Humana. Recuperado de: http://biohmikaestefi.blogspot.com/2012/03/deteccion-de-
la-presencia-de-almidon-en.html
Córdova J. (2019). Fundamento de prueba de Benedict y Lugol. Course Hero.


MEDICINA LAB-FCS-BQ
Recuperado de: https://www.coursehero.com/file/41069718/dlscribcom-fundamento-

de-prueba-de-benedict-y-lugolpdf/
Sánchez M, Martín M, Pinto G. (2013). Reactivo de Lugol: Historia de su
descubrimiento y aplicaciones didácticas. Scielo. Recuperado de:

http://www.scielo.org.mx/pdf/eq/v24n1/v24n1a6.pdf
Biologuias. (2013). Enzimas. Obtenido de Biologuias: https://www.biologuias.com/base-

molecular/enzimas/
Bitstream. (2011). Enzimas. Obtenido de Handle:

https://addi.ehu.es/bitstream/handle/10810/14292/4-
%20Cap%C3%ADtulo%20I.%20Las%20enzimas.pdf?sequence=4&isAllowed=y
Khan. (2009). Regunación enzimática. Obtenido de Khanacademy:

https://es.khanacademy.org/science/biology/energy-and-enzymes/enzyme-
regulation/a/enzyme-regulation
Recuerden que cantidad no refleja calidad.
Cuando se requieren videos se entregan en cd junto al informe y se suben a una página de

YouTube y se copia la dirección en el informe

MEDICINA LAB-FCS-BQ
PORTADA DE CD PARA TRABAJOS, VIDEOS, OTROS
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO
BIOQUÍMICA II
CURSO: Primero PARALELO: A GRUPO No. 3
APELLIDOS Y NOMBRES DE LOS ESTUDIANTES
Estrada Estrada Jonathan Apolo
Haro Orozco Liseth Verónica
Insuati Parra María Belén
Layedra Castañeda Katy Cecibel
Llango López Vanessa Lisseth
Llerena Vargas Sheyla Leonela
Llerena Pazmiño Henry David
TEMA: Práctica N°6: Extracción sanguínea
FECHA: 05 de julio de 2020


MEDICINA LAB-FCS-BQ

Haro Orozco Liseth Veronica IP6

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Haro Orozco Liseth Veronica IP6

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

PERIODO ACADÉMICO mayo - octubre 2020

HORARIO DE LA PRÁCTICA: LUNES 07H00 a 10H00

FECHA DE REALIZACIÓN 13 de julio del 2020

FECHA DE ENTREGA DEL Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs

NOMBRE DE LA DOCENTE Se transcribe lo indicado en la guía de práctica

NOMBRES Y FIRMAS DE APELLIDOS Y CÉDULA FIRMA

Estrada Estrada 060543008

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

Insuati Parra 060488658

Llerena Vargas 080275867

Llerena Pazmiño 060493563

Llango López 060395138

Haro Orozco 060391544

(espacio exclusivo para la

(espacio exclusivo para la

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

LUGAR DE LA PRÁCTICA Aula Virtual Bioquímica II

Laboratorio de Bioquímica Facultad Ciencias de la

UNIDAD SÍLABO No. 4. LAS ENZIMAS

RESULTADO DE Relaciona la función de las enzimas y catalizadores,

1. TÍTULO DE LA PRÁCTICA Reacciones cualitativas y cuantitativas de enzimas, para

2.1 OBJETIVO GENERAL Identificar cualitativa y cuantitativamente las enzimas,

2.2.2 Describir y aplicar métodos cuantitativos

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

GOT –AST (Transaminasa Glutámica Oxal Acética –

3. MATERIALES – REACTIVOS – EQUIPOS:

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

Las enzimas son biomoléculas de naturaleza proteica, participan en las reacciones

La actividad enzimática se afecta por las siguientes condiciones:

Las enzimas son termolábiles, al incrementar la temperatura en ciertos límites se

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

acelera la velocidad de la reacción, sin embargo, esta condición tiende a

La temperatura, a la cual se observa la máxima actividad enzimática se denomina

El pH al cual se observa, la máxima actividad enzimática se denomina pH óptimo.

Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima.

De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, son: reversibles e

5.1. LA ENZIMA CATALASA

La enzima catalasa se la puede encontrar en casi todos los organismos vivos

La función principal es facilitar la reacción de descomposición del peróxido de

5.2. ENZIMAS DE IMPORTANCIA CLÍNICA PARA DIAGNÓSTICO MÉDICO

Se emplean las enzimas en altas investigaciones de laboratorio y en análisis

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

compuestos de interés en sangre o en cualquier muestra biológica, las cuales

 Oxidorreductasas: Las oxidorreductasas son enzimas que catalizan la

Imagen 1. Oxidorreductasa. Obtenido de:

1. Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo químico (distinto del

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE

INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA II

Imagen 2. Transferasa. Obtenido de:

2. Hidrolasas: Catalizan a ruptura de un determinado enlace introduciendo una