MICROBIOLOGIA.

Etimología:
Micro: Pequeño
Bio: Vida
Logia: Estudio o tratado

Rama de la biología dedicada estudiar organismos visibles a través del

microscopio, como organismos procariotas y organismos eucariotas

Organismos Procariotas
 Material genético en el nucloide
 Conforman organismos celulares
 Citoesqueleto simple
 Ribosomas pequeños
 Reproducción por mitosis
 Flagelos

Organismos eucariotas
 Organelos membranosos
 Especializado en respiración y fotosíntesis
 ADN en el núcleo
 Cilios y flagelos
 Reproducción variada
 Citoesqueleto completo

Ciencia encargada de estudiar seres vivos microscópicos seres pequeños también

conocidos como los microbios, estos microorganismos se puede subdividir en
cuatro grupos:
1.-Bacterias. Microorganismos procariotas que se reproducen por división asexual
2.- Virus. Partículas infecciosas de pequeño tamaño
3.- Hongos. Organismos eucariotas pueden existir de forma unicelular como la
levadura y forma filamentosas como moho
* Existen hongos que pueden adoptar ambas morfologías a los cuales se le llaman
hongos dismórficos
4.-Parásitos. Microorganismos eucariotas algunos son unicelulares y otros
pluricelulares.

Historia de la microbiología.

1595- Zacharias Janssen

se le considera invertir en microscopio compuesto (2 lentes)
1665- Robert Hooke
Se le debe el nombre de la célula observa en el microscopio un corcho donde noto
poros que forman cavidades a las cuales llamó células.
1668- Francesco Redi
Demostró la hipótesis de la generación espontánea
1676- Anton Van Leeuwenhoek
Descubrió microorganismos los cuales llamó animálculos
1736- Carl Linnaeus
Sentó las bases de la taxonomía moderna y crea un sistema de nomenclatura
binominal
1789- Edward Jenner
Descubrió la vacuna contra la viruela
1838- Theodor Schwann
Demostró la Guerrero entre los reinos animales y vegetales, acuñó el término
metabolismo
1850- Louis Pasteur
Se le debe la técnica de la pasteurización
1866- Ernest Haeckel
Crea un taxon denominado moneres para agrupar las bacterias, fue el precursor
de la división entre las células procariotas y eucariotas
1867- Joseph Lister
Descubrió Antisépticos (alcohol agua oxigenada el antibacterial etc.) sustancia
medicamento que se usa para destruir o barrer los gérmenes que infecta a un
organismo.
1877- John Tyndall
Confirma la teoría de la biogénesis proceso fundamental de los seres vivos que
producen otros seres vivos
1880- Paul Erich
Contribuyó la teoría de la inmunidad de la cadena lateral la cual es una teoría para
explicar la respuesta inmune en células vivas
1881- Walter y Angelina Fanny Hesse
Surgimiento del agar-agar sustancia gelatinosa que viene de un polisacárido
obtenido de la pared celular de la salida de tipo Gelidium
1885- Christian Gram
Desarrolló su método de tinción de bacterias esta diferencia en dos grupos las
gran positivas las cuales retienen la atención de azul a violeta y las gram
negativas que se descoloren y se tiñen con safranina
1887- Julius Richard Petri
Inventó la placa de Pretty la cual se utiliza para el cultivo de microorganismos
1928- Alexander Fleming
Descubre la penicilina un antibiótico para el tratamiento de infecciones por
bacterias sensibles
1943- Max Delbrück
Crecimiento de bacteriófagos (virus que infectan a las bacterias)
1944- Oswald Avery y Maclyn McCarty
Descubren el ADN
1953- James Watson y Francis Crick
descubren la estructura molecular del ADN
1969- Robert Whittkaer
Clasificó los seres vivos en cinco reinos
1. Monera (bacteria)
2. Protistas (algas unicelulares y protozzos)
3. Plantas
 4. Animal
5. Fungí

1977- Carl Richard Woese

Creo la taxonomía molecular. está basada en la comparación entre especies de la
llamada secuencia del ARN Ribosomal
1997- Stanley Prusiner
Descubrió el PRION un nuevo agente infeccioso que está formado una proteína
priónica

Microscopio
El microscopio es un instrumento que permite observar objetos pequeños como
para ser vistos por la vista humana.
Micro= Pequeño
Scopio= Observar

o 1655.- Robert Hooke. Microscopio compuesto, este microscopio está

diseñado para examinar láminas tan finas que se transparenten.
o 1679.- Anton Van Leewenhoek. Microscopio simple, posee varios lentes de
aumento, este es el más básico.
o 1830.- Amici. Microscopio de luz polarizada contiene lentes de aumento.
Para sustancias cristalinas.
o 1930.- Ruska y Max Knoll. Microscopio eléctrico, utiliza electrones en vez
de fotones.

o 1932.- Frits Zernike. Microscopio de contraste de fases, Útil para observar

células vivas, no necesita la muestra.

Relación de la microbiología con otras ciencias.

 Bacteriología. Estudio de bacterias y enfermedades que lo provocan.
 Física. analiza las características de la energía el tiempo y la materia.
 Geografía. Obtiene datos estadísticos sobre los virus que se desarrollan en
cada lugar, así como la mortalidad.
 Historia. Expone la aparición de los primeros microorganismos, así como su
evolución.
  Matemáticas. permite analizar datos obtenidos del trabajo en laboratorio.
 Micología. Estudia la morfología clasificación taxonomía estructura, estudio
y reproducción de cómo se relaciona con humanos.
 Parasitología. estudio de parásitos.
 Química. Estudia la composición estructura y propiedades de la materia, así
como sus cambios y reacciones químicas.
 Virología. Análisis de virus, clasificación y estructura y forma de infectar.

Estructura bacteriana

1.- Definición de bacteria

Las bacterias son organismos unicelulares muy pequeños y relativamente
sencillos cuyo material genético no rodeado por una membrana nuclear especial
por ello se llaman procariotas.
2.- Estructura bacteriana
Cómo ya se mencionó anteriormente las bacterias son seres unicelulares
procariotas y estructuralmente están constituidas por:
-Elementos obligados: Están presentes en todas las bacterias y son
indispensables para la vida de la bacteria. Son la pared celular membrana
plasmática citoplasma ribosomas y la región nuclear.
-Elementos facultativos: pueden estar o no presentes en la bacteria y son cápsula
flagelos pelos endosporas inclusiones citoplasmática

2.1 Elementos obligados

2.1.1 Pared celular

A) Definición
Es el límite externo de la célula tiene una estructura rígida parecido a la pared
celular de las células vegetales. es de gran importancia en el laboratorio de
análisis clínico.
B) Funciones principales
o Protege a la bacteria de cambios extremos adversos.
o Ayuda a mantener la morfología de las células.
o Proporciona la bacteria resistencia a los antibióticos.
 o Permite el paso selectivo de algunas sustancias.
o Proporciona la especificidad de grupo y de tipo en la sistemática bacteriana.
o Está implicada en la patogenicidad de la bacteria.

C) Estructura y composición
Las bacterias han clasificado durante mucho tiempo como bacterias gram (+) y
gram negativas (-), en función de su comportamiento frente a la tinción de Gram.
El hecho de qué se comportan como Gram (+) [Se tiñen de color violeta oscuro] O
como Gram (-) [Color rosa] se debe a su pared celular.
La pared celular de las gram (+) es mono estratificadas y está compuesta por
mureína polisacáridos proteínas y ácidos teicoicos. Bajen lípidos el péptidoglicano
presente formado por una monocapa eso es un componente importante que
supone el 50% del peso seco de algunas células bacterianas.
La pared celular de las gram (-) es biestratificada, la primera capa está constituida
por morena y la segunda capa está formada por polisacáridos proteínas
fosfolípidos lípidos aquí no hay ácidos teicoicos y el peptidoglicano está en poca
cantidad.
La mureína también llamada péptidoglicano, está compuesta por cadenas de
ácido N- acetil muramico (NAM) y ácido N- acetil glucosamina (NAG) unidas entre
sí por puentes peptidicos.
La pared celular de las Gram (+) es más rica en mureina que las gran (-), existen
además otras bacterias que no son sensibles a la tinción de Gram, debido a que
presentan una pared bacteriana de composición distinta, son las llamadas ácido-
alcohol resistentes.
Existen también otras bacterias que no presentan pared celular, una son las
pertenecientes al género mycoplasma o bacterias patógenas y otras son las
bacterias, que habitualmente si tienen pared (forma S) pero la han perdido (forma
L).

2.1.2 Membrana plasmática

•Definición
Es una delgada estructura que se extiende por dentro de la pared celular,
encerrando al citoplasma de la célula
•Funciones
o Actúa como barrera selectiva
o Interviene en la degradación de nutrientes y la producción de energía
 o En algunas bacterias se encuentran pigmentos y enzimas implicados en la
fotosíntesis
o Está compuesta por fosfolípidos y proteínas, aunque también presentan
glucolípidos. Los fosfolípidos forman una doble capa que engloban las
proteínas globulares que se disponen plegadas de forma irregular
•Mesosomas
Son plegamiento de la membrana plasmática estos son grandes irregulares no
existen en las células eucariotas y se encargan de dirigir la duplicación del ADN
bacteriano y de realizar la respiración

2.1.3 Citoplasma
• Definición
Es todo lo que hay en el interior de la membrana plasmática
• Funciones
Engloba los orgánulos celulares, incluyendo el núcleo, ribosomas, depósitos de
reserva, llamadas inclusion vacuolas etc.
• Composición
Formado por un 80% de agua, enzimas, iones y algunos principios inmediatos

2.1.4 Región nuclear

•Definición
Se trata de una sonda en el interior del citoplasma bacteriano donde se acumula el
ácido nucleico
• Funciones
El ácido nucleico transmite la información genética de las células sobre estructuras
y funciones celulares
• Estructura y composición
Es un núcleo difuso ya que no está rodeado de ninguna membrana también
contiene una única molécula de ADN vi catenaria o formando cromosomas.
•Plasmidos
Además del ADN cromosómico pueden existir unas estructuras denominadas
plásmido están formadas por moléculas circulares de ADN extracromosomatico
bicateriano. Tambien:
Replican en independiente
Pueden transmitirse de una bacteria a otra por conjunción
Porta genes muy importantes que determinan actividades como la resistencia
antibióticos tolerancia metales tóxicos y la síntesis de enzimas

2.1.5 Ribosomas
•Definición
Son orgánicos celulares presentes en eucariotas y procariotas en las bacterias son
muy abundantes, dando aspecto granulado a su citoplasma
•Funciones
Síntesis de proteínas
• Estructura y composición
Normalmente se encuentran en grupos de tres o cuatro unidos por un filamento de
ARN mensajero denominado poliribosomas
Cada ribosoma tiene dos subunidades de 30 y 50 S. La letra S corresponde a
unidades Svedberg e indica la velocidad relativa de sedimentación.
Los ribosomas de las células procariotas son de 70 ese mientras que los de las
eucariotas son de 80 ese en su composición entra a formar parte del ARN
ribosomal y proteínas de distinta naturaleza.

2.2 Elementos facultativos

2.2.1 Inclusiones citoplasmáticas

A) Definición
Son elementos que aparecen en el citoplasma de las bacterias y que no tienen
una estructura uniforme.
B) Funciones
  Se utilizan como depósitos de reserva.
 Intervienen en funciones de regulación.

C) Tipos
Hay dos clases
1.- Gránulos de reserva, que pueden ser:
 Lipidicos: acumulan lipidos; se tiñen con colorante de Sudán
 Corpúsculos metacromáticos: acumulan fosfáto inorgánico. Tienen
importante valor diagnóstico para la identificación de Corynebacterium
diphtheridae. Se tiñen con azul metileno.
 De polisacáridos: principalmente glucógeno y almidón. Se tiñen con yodo.
 Gránulos de azufre.
 Carboxisomas: contienen una enzima esencial para algunos tipos de
bacterias
2.- Vacuolas, constituidas por acúmulos de gases o líquidos rodeados de
membranas.

2.2.2 Flagelos
A) Definición
Son largos apéndices filamentosos. Mucho más frecuentes en los bacilos que en
los cocos, donde su presencia es bastante rara.
B) Funciones
Responsables de la movilidad bacteriana.
C) Estructura
Tienen 3 partes: filamento, codo y corpúsculo basal.
D) Tipos de bacterias en función de sus flagelos.
a) Monótricas: un solo flagelo en el extremo de la bacteria.
b) Lofótricas: dos o más flagelos en un extremo de la bacteria.
c) Anfitricos: un grupo de flagelos en un extremo de la bacteria y otro grupo en el
otro extremo.
d) Peritricos: flagelos distribuidos en toda la superficie de la bacteria.
2.2.3. Pelos o fimbrias.
A) Definición
Son elementos rígidos constituidos por una proteina.
Son cortos, muy numerosos y están distribuidos sobre toda la superficie. Son más
frecuentes en Gram- que en Gram+
B) Funciones
a) Capacidad de fijación a superficies. la proporcionan los pelos comunes.
b) Sirven también como un sistema de intercambio de información genética por
conjugación. La proporcionan los pelos sexuales.

2.2.3 Endosporas
A) Definición
Aparecen sólo en los bacilos.
Son una forma de resistencia que adoptan algunas bacterias ante situaciones
adversas, tales como deficiencia nutricional, desecación, frio, temperaturas
elevadas y agentes químicos.
Se forman por un proceso de esporulación o esporogénesis. Pueden permanecer
latentes durante cientos de años y volver a formar una vegetativa por un proceso
denominado germinación.
B) Estructura
Tiene una estructura muy compleja, constituida por diversas capas.
C) Localización de endoesporas
Pueden localizarse en la zona central, subterminal o terminal de la bacteria.
Dependiendo de su tamaño, pueden o no deformar el bacilo.

2.2.5. Cápsula

A) Definición
Es la estructura que rodea la pared bacteriana. Se visualiza con la tinción negativa
(Tinta china)
B) Funciones
a) Regula el intercambio de agua, iones y nutrientes.
b) Sirve como almacén externó de nutrientes.
c) Actúa como defensa frente a anticuerpos, fagos y células fagocitadas. De
hecho, una bacteria pierde la virulencia al perder la cápsula.
d) Por su contenido en agua, protege la desecación.
e) Permite la formación de colonias, ya que habitualmente una cápsula engloba
más de una bacteria.
C) Estructura y función
Su composición es a base de polímeros glúcidos: ácido D glutámico, glucosa,
ácido uronico, ácido glucoronico y acetil glucosamina; también pueden aparecer
polipeptidos.

Morfología de las bacterias

Una de las ciencias fundamentales para la identificación de las bacterias es por su

forma y agrupación.
Son 3 formas fundamentales de las bacterias:
 Las esféricas o redondas ramadas cocos.
 Las cilíndricas o bastoncillos llamados bacilos.
 Las que tienen forma ondulada o en espiral denominados espírilos.
COCOS: Este tipo de bacterias, pueden generar en el cuerpo de los seres
humanos, ciertas infecciones por ejemplo en la piel. Un aspecto bastante
interesante es que pueden estar solas, al juntarse con otras esferas e ir formando
una especie de cadenas importante mencionar, que las enfermedades aparecen,
cuando las bacterias van aumentando su cantidad dentro del organismo, mientras
que si su cantidad es muy pequeña son relativamente indefensas.
Lanceolados arriñonados:
 Staphylococcus: Pueden agruparse semejando racimos, este puede
ocasionar infecciones de la piel.
 Streptococcus: Estas bacterias crecen en cadenas o pares, donde cada
división celular ocurre a lo largo de un eje. Existen dos grupos que causan
infecciones en las personas: Grupo A y Grupo B.
  Diplococcus pneumoniae: Generalmente, se presenta n forma de diplococo.
aunque existen algunos factores que pueden inducir la formación de
cadenas. Esta es causante de la neumonía.
 Gaffkya tetragena: Está se presenta en un grupo de cuatro.

ESPIRALES: Muchas de estas bacterias también presentan un conjunto de

flagelos en ambos extremos. Gracias a ellos estas bacterias pueden experimentar
movimiento rotacional, y desplazarse a alta velocidad. Son bacterias
gramnegativas en forma de espiral.

 Treponema Pallidium: Es una especie de bacteria, del género Treponema,

compuesto entre ocho y veinte espirales enrollados, además que de sus
vueltas el espiral son más apretadas, lo que le da un movimiento de
rotación. Su estructura básica consiste en un filamento axial incluido un
cilindro helicoidal de citoplasma.
 Espiroqueta: son un filó de bacterias gramnegativas que tienen células
alargadas y enrolladas helicoidalmente. Poseen una membrana externa
formada por múltiples capas llamada "envoltura celular" que rodea
completamente el cilindro protoplasmático.

BACILOS: Son bacterias de cuerpo alargado que pueden encontrarse en distintos

ambientes. Numerosos bacilos resultan patógenos para las personas, aunque no
todos repercuten de manera negativa. Se caracterizan por tener uno de sus
diámetros más largos que los anteriores. Los bacilos se suelen dividir en: Bacilos
grampositivos y Bacilos gramnegativos.

 Bordella pertussis: Estos son tan cortos que se le llaman coco bacilos ya
que su forma es una combinación de bacilo y coco. Los humanos son los
únicos hospederos conocidos.
 Bacterinema botulinum: El botulismo es una enfermedad causada por esta
bacteria, esta puede entrar en el organismo debido a las heridas o por
ingerir a través de alimentos. Produce esporas que se encuentran en los
alimentos mal conservados o mal enlatados. Además, se genera una
toxina, que al ingerirla puede causar una intoxicación grave.
 Fusobacterium Sp: Estos son muy adelgazados. Pueden ocasionar las
siguientes enfermedades: enfermedades periodontales, sindrome de
Lemierre, orofaringitis, y úlcera de piel tropical. Son bacterias
gramnegativas, anaerobias y de aspecto filamentoso.
  Clostridium tetani: Se caracteriza con un solo extremo abultado. Es una
bacteria letal formador de esporas, y anaerobia. Encontrada en los hogares
del ser humano y en la comida, en forma de esporas o como parásito en el
tracto gastrointestinal de animales, es causante de infecciones muy graves
en los humanos, y provoca la enfermedad del tétanos.
 Vibrio cholerae: Es una bacteria gramnegativa con forma de bastón curvo
qué provoca el cólera en humanos.
 Corynebacterium Diphtheriae: También conocido como bacilo de klebs-
loffler. Es el bacilo causante de la difteria es una bacteria grampositiva,
aerobia. Este bacilo tiene forma de bastón recto o ligeramente curvado y
con ambos extremos abultados, no esporulado, no capsulado y carente de
movilidad.

3.TAMAÑO Y MORFOLOGÍA DE LAS BACTERIAS

3.1. Tamaño
Las bacterias son de tamaño pequeño, por lo que para su observación es preciso
utilizar el microscopio óptico.
Su tamaño se mide en um (0.000001m) y oscila entre los 0.2 y 2 μm.
3.2. Morfologia
La morfología nos da una información primaria sobre el tipo de bacteria, pero no
de forma concluyente.
Las formas básicas son esférica (coco), bastoncillo o cilindrica (bacilo), helicoidal
(espirilo), en forma de coma (Vibrio), espiral (espiroqueta), estrella y cuadrangular.
Los cocos pueden aparecer:
 Aislado
 En parejas (diplococos)
 En cadenas (estreptococos)
 En racimos (estafilococos)
 En formas cubicas de 8 elementos (Sarcinas)
Los bacilos pueden aparecer también:
 Aislados
 En parejas (diplobacilos)
 En cadena (estreptobacilos)
Algunos bacilos se parecen tanto a los cocos que se llaman cocobacilos.

3.2.1. Morfología bacteriana

La forma de las bacterias viene dada por la rigidez de su pared. Hay dos tipos de
morfologia fundamentales.
 Cocos: Formas esféricas.
 Esferoides, ovoides, lanceolados, reniformes.
 Agrupaciones: Diplococos: Dos cocos juntos, como Neisseria meningitidis
 Estreptococos: Cadenas, como Streptococcus pyogenes Tetrada: Cuatro
cocos
 Sarcina: 8cocos en forma de cubo, como micrococcus. Estafilococos: En
racimo, como Staphilococcus aureus.
 Bacilos: Forma alargada
 Rectos, ahusados, ramificados, curvos, espirales.
 Agrupaciones: Diplococos, estreptobacilos, en empalizada
 Bacterias que no son ni cocos ni bacilos: cocobacilo: Shigella

TAXONOMÍA Y NOMENCLATURA BACTERIANA

La importancia para conocer diferencias mínimas de cada microorganismo
infeccioso se adapta de manera específica a un modo particular de transmisión, un
mecanismo para infectar al hospedador humano (colonización) y un mecanismo
para usar enfermedades (patología).
La identificación y nomenclatura son tres áreas independientes, cada área es
crucial para el objetivo final de estudiar con exactitud las enfermedades
infecciosas.

1. Aislar y diferenciar microorganismos específicos entre una mezcla de flora

microbiana compleja.
2. Verificar las propiedades especiales de un cultivo en un entorno clínico.
3. Aislar el microorganismo causal de una enfermedad.

Criterios para clasificar a las bacterias.

Los criterios adecuados para fines de clasificación bacteriana incluyen muchas
propiedades. Una de ellas es el crecimiento de un medio bacteriológico.
El cultivo general de la mayor parte de las bacterias requiere un medio con
abundantes nutrientes metabólicos, estos medios por lo general comprenden agar,
una fuente de carbono y un hidrolizado ácido o una fuente de material biológico
sometida a la degradación enzimática. Los medios pueden ser selectivos o no
selectivos.

Sistema de clasificación:
 Claves: organizar los rasgos bacterianos de una manera que permite la
identificación eficaz de los organismos, los grupos se dividen en subgrupos
en subgrupos más pequeños con base a la presencia (+) ausencia (-).
 Taxonomía numérica: sistema para clasificar capas bacterianas.
Clasificación filogenética: comprende las relaciones evolutivas entre
bacterias, son medidas realizadas entre dos organismos que comparten un
ancestro. .
 RNA ribosómico: al comparar la secuencia de nucleótidos del RNA
ribosómico, se observaron relaciones evolutivas entre organismos muy
divergentes con lo que se descubrió un reino nuevo, las arqueobacterias.

Hongos
Los hongos son eucariotas con un nivel de complejidad biológica superior al de las
bacterias. Portan esporas y tienen reproducción tanto sexual como asexual. Los
hongos pueden ser unicelulares, o se pueden diferenciar y hacer multicelulares
mediante el desarrollo de filamentos con ramificación larga. Adquieren nutrientes
mediante absorción, pero carecen de la clorofila de las plantas, además portan un
genoma haploide o diploide (existen hongos patógenos que forman parte de la
flora humana normal).

Clasificación:
 Protozoos flagelados. Tiene forma alargada y poseen una especie de cola
que lleva el nombre de flagelos aunque su movilidad suele ser muy
reducida. Trypanosoma Cruzi, Euglena, Trichomonas.
 Protozoos ciliados. Habitan en aguas dulces estancadas: lagunas o charcos
de agua donde se encuentra gran variedad de materia orgánica.
Balantidium, Colpoda Paramecium.
  Protozoos esporozoos. Viven dentro de las células de los seres vivos (es
decir que son huéspedes). Loxodes, Plasmodium vivax, Plasmodium
falciparum.
 Protozoos rizópodos. Se desplazan con movimientos citoplasmáticos.
Presentan una especie de falsos pies. Ameba, Entamoeba coli, lodamoeba.

TINCIONES

Tinción acidorresistente
Las bacterias acidorresistentes son aquellas que conservan la carbolfucsina
(tiroxina básica disuelta en una mezcla de agua, alcohol y fenol) incluso cuando se
decolora con ácido clorhídrico en alcohol.
Un frotis de células sobre una laminilla se cubre con carbol fucsina y se calienta en
baño María.
Se lleva a cabo la decoloración con una mezcla de ácido alcohol y por último se
aplica una tinción de contraste (azul o verde).
Las bacterias acidorresistentes adquieren un color rojizo en tanto que otras células
adquieren el color del segundo colorante.

Tinción de flagelos
Los flagelos son demasiado delgados (de 12 a 30 nm de diámetro) para que sean
visibles en el microscopio de luz.

Peros u presencia y distribución pueden demostrarse al tratar las células con una
suspensión coloidal inestable de sales de ácido tánico, lo que causa la
precipitación intensa sobre las paredes celulares y flagelos, por ello, es que los
flagelos son visibles.
En las bacterias peritricas los flagelos forman haces durante el movimiento y tales
haces pueden tener un grosor que hace que sea posible observarlos en células
vivas en la microscopía de campo oscuro o de contraste de fases.
Tinción de la cápsula
La presencia de la cápsula por lo común se demuestra por procedimientos de
tinción negativa o modificaciones de tales procedimientos. Uno de estos métodos
de "tinción de la cápsula" (método de Welch) implica el tratamiento con solución
de violeta de genciana caliente seguido de un lavado con solución de cobre.
Este se utiliza para eliminar el exceso de colorante por las técnicas
convencionales
de lavado con agua causarían la disolución de la cápsula.
Las sales de cobre también proporcionan color al fondo, con el resultado de que la
célula y el fondo adquieren un color azul oscuro y la cápsula tiene un color azul
oscuro y la cápsula tiene un color mucho más pálido.

Tinción de nucleótidos
Los nucleótidos se pueden teñir con la tinción de Feulgen, un método específico
para el DNA,
La tinción de feulgen es una técnica de tinción que se usa para identificar material
cromosómico o ADN en células.

Tinción de esporas
Las esporas se observan de la manera más simple como cuerpos refringentes
intracelulares en suspensiones celulares no teñidas o como áreas incoloras en
células teñidas por métodos convencionales.
La pared de la espora es relativamente impermeable, pero puede lograrse que el
colorante penetre la espora mediante el calentamiento de la preparación. La
misma impermeabilidad que sirve para evitar la decoloración de la espora después
de un tratamiento con alcohol es suficiente para decolorar células vegetales.
Más tarde puede aplicarse un segundo colorante.
Las esporas a menudo se tiñen con verde de malaquita o carbolfucsina.

TINCIÓN DE GRAM
1. Muestra fijada de bacterias en una porta
2. Colorante con violeta de Genciana.
3. Fijador: Lugol (fija el colorante).
4. Decoloración con alcohol-acetona.
5. colorante de contraste: Safranina.

Las bacterias Gram + resisten a la coloración violeta, mientras que las Gram-se
decoloran y captan el color de contraste, la pared de ambos es diferente.

TÉCNICA DE TINCIÓN
1. Extender, secar y fijar por calor.
2. Cubrir la extensión con solución cristal violeta un minuto.
3. Lavar con agua destilada y escurrir.
4. Cubrir con Lugol un minuto.
5. Lavar con agua.

6. Cubrir la extensión con solución de Safranina un minuto.

7. Lavar con agua y dejar secar.
8. Observar al microscopio con objetivo de inmersión.

Resultados
> Gram+= azul violeta
> Gram-rojo-rosado

Tinción acidorresistente
Las bacterias acidorresistentes son aquellas que conservan la carbolfucsina
(tiroxina básica Disuelta en una mezcla de agua, alcohol y fenol) incluso cuando
se decolora con ácido clorhidrico en alcohol.
Un frotis de células sobre una laminilla se cubre con carbol fucsia y se calienta en
baño María. Se lleva a cabo la decoloración con una mezcla de ácido- alcohol u
por último se aplica una tinción de contraste (azul o verde).
METABOLISMO MICROBIANO
¿Qué es el microorganismo microbiano?
Es un conjunto de procesos por los cuales un microorganismo obtiene la energía y
nutrientes que necesita para vivir y reproducirse.

Funciones del metabolismo microbiano.

 Formar las subunidades
 Proporcionar la energía necesaria para todos aquellos procesos procesos
que la requieren.
 Obtener energia química de las moléculas combustibles. Convertir los
nutrientes exógenos en precursores de los componentes macromoleculares
de la célula.

 Formar y degradar biomoléculas necesarias para las funciones

especializadas de las células.

Participación del metabolismo en la biosintesis y crecimiento

La biosíntesis es el conjunto de reacciones degradativas de los nutrientes para
obtener energía o para convertirlos en unidades.
El origen biosintético de los bloques de construcción data de unos cuantos
precursores llamados "Metabólicos focales".
El crecimiento microbiano requiere la polimerización de bloques bioquímicos de
construcción para dar origen a proteínas, ácidos nucleicos y lípidos.
El crecimiento exige una fuente de energía metabólica para la síntesis de enlaces
anhidridos y para la conservación de los gradientes transmembrana de iones y
metabolitos.

Componentes del metabolismo microbiano

El metabolismo tiene dos componentes: catabolismo y anabolismo.
  Catabolismo: consta de procesos que albergan energía liberada a partir de
la degradación de compuestos y utilizando esa energía para sintetizar ATP.
 Anabolismo: comprende procesos que utilizan la energía almacenada en el
ATP para sintetizar y formar las subunidades de macromoléculas que
componen la célula.

Catabolismo
Conjunto de degradaciones en las que obtenemos energia.
Existen 2 procesos para obtener la energía a partir de los microorganismos
heterótrofos.

 Glucólisis.
 Respiración.

Anabolismo
Sintesis enzimática de macromoléculas a partir de compuestos sencillos con
consumo de energía.
Clasificación de los microorganismos
-Fuente de energía
 Fototrofia: energía solar.
 Quimiotrofos: energía de reacciones químicas (quimiolitotrofas,
quimioorganotrofas).

-Fuente de electrones
 Litotrofia: compuestos inorgánicos. Organotrofos: compuestos orgánicos.

-Fuente de carbono
 Autotrofia: CO2 única fuente de carbono.
 Heterotrofia: no pueden usar CO2 como única fuente de carbono.

BACTERIAS EN EL AGUA Y LOS ALIMENTOS

La contaminación microbiológica es responsable del más del 90% de las
intoxicaciones y transmisión de enfermedades por el agua. Los principales
microorganismos que se transmiten a través del agua engloban a las bacterias,
virus y protozoos, aunque existen también otros organismos que pueden ser
transmitidos en el agua potable, pero su probabilidad de transmisión es muy baja.

Protozoos
Pueden aparecer de manera más frecuente y son responsables de epidemias. Los
dos más comunes son el Cryptosporidium y Giardia Lamblia. El primero está
ampliamente distribuido en la naturaleza y es portado por todo tipo de animales,
incluyendo animales de compañía y animales de granja. Además, el
Cryptosporidium se protege en el ambiente formando unas esporas conocidas
como ooquistes que le permiten vivir largos períodos de tiempo hasta que son
ingeridos. La principal via para contraer una Cryptosporidium es la vía fecal-oral.
La sintomatologia incluye diarreas, fiebre, dolores abdominales, náuseas y vómitos
siendo grave en personas inmunodeprimidas. La Giardia Lamblia al igual que el
Cryptosporidium se encuentra en un rango amplio de animales donde vive
libremente en los intestinos. En el agua está en forma de quistes que son capaces
de sobrevivir largos periodos de tiempo. Este parásito produce una enfermedad
denominada giardiasis que afecta al estómago provocando una diarrea
acompañada de cólico con malestar general.
Existen otros protozoos causantes de enfermedades tales como Entamoeba
Histolytica, causante de la disentería amébica, o Naegleria Fowleri, causante de la
meninge-encefalitis amébica. La frecuencia de estas infecciones es muy baja.

Bacterias
Son el grupo más importante de presencia en las aguas potables y las más
importantes en cuanto a número de epidemias causadas. La mayor parte de la
contaminación bacteriana causante de infecciones está asociada a la
contaminación del agua. Las bacterias más comunes son: Salmonella Typhi
listeria monocytogenes, Vibrio Cholerae, Escherichia coli, Leptospira interrogans,
las cuales provocan la fiebre tifoidea, gastroenteritis, cólera, diarreas y
leptospirosis respectivamente.

Intoxicación alimentaria causada por bacterias

La intoxicación alimentaria sucede luego de ingerir alimentos contaminados por
bacterias, los sintomas de la intoxicación alimentaria son básicamente los mismos
que los de una infección gastrointestinal: calambres abdominales, náusea,
vómitos, diarrea y fiebre. Las bacterias que causan la intoxicación alimentaria no
se ven, huelen ni tienen sabor.
 Salmonelosis: Es una enfermedad bacteriana que afecta el aparato
intestinal es producida por consumir huevos, carne de ave y otros productos
de animales contaminados.
 Campylobacter: Es una infección que se presenta en el intestino delgado es
producida por ingerir leche y carne o de ave cruda o mal cocinada y agua
contaminada.
 Escherichia coli: Es un grupo de bacterias que viven regularmente en los
intestinos de los niños y adultos. La carne bovina molida poco cocinada es
una fuente común de esta, las enfermedades se asocian con el consumo de
leche no pasteurizada, carne mal cocida, frutas y vegetales frescos pero
contaminados.

Alimentos más comunes donde encontramos bacterias

 Carne de cerdo: (cualquier enterobacteria) Escherichia coli, Salmonella,

parásito Taenia Solium mejor conocido como solitaria.
 Carne de iguana: Salmonella y Escherichia coli. Ostiones. Infecciones por
estafilococos.
 Carne de res: Taenia saginata, es un parásito que puede llegar a medir de
Pescado: Salmonella y Escherichia Coli. 10-12 m.

Bacteria de agua

 Escherichia coli.
 Salmonella.
 Enterobacter o bien entero bacteria: género de bacterias muy difundidas en
la naturaleza, ya que son poco exigentes nutricionalmente, resistentes a los
agentes ambientales y tienen gran capacidad de variación genotípica. Se
localizan en el intestino del hombre y de los animales, en el suelo, las
aguas y las plantas.
 Estreptococos Fecalis: Es una bacteria Gram positiva comensal, que habita
el tracto gastrointestinal de humanos y otros mamíferos, puede causar
infecciones comprometidas en humanos.
  Klebsiella.
 Vibrio Cholerae: El cólera es una infección intestinal aguda causada por la
ingestión de alimentos o agua contaminados por la bacteria Vibrio
Cholerae., Tiene un periodo de incubación corto, entre menos de un día y
cinco días, y la bacteria produce una enterotoxina que causa una diarrea
copiosa, indolora y acuosa que puede conducir con rapidez a una
deshidratación grave y a la muerte si no se trata prontamente. La mayor
parte de los pacientes sufren también vómito.

AGENTES ANTIMICROBIANOS

¿Qué son los agentes antimicrobianos?

Sustancia química producida por un ser vivo o derivado sintetico.
Se define como un producto del metabolismo microbiano que es capaz de matar o
inhibir el crecimiento de otros microorganismos.

PROPIEDADES DE ANTIMICROBIANO IDEAL

o Tixicidad selectiva
o Acción bactericida
o Efectivo contra gran número de organismos
o No debe ser alérgico
o No debe permanecer activo
o Debe ser hidrosoluble

CLASIFICACIÓN DE LOS ANTIBIÓTICOS

Betalactámicos, macrólidos, aminoglucosidos, tetraciclinas, polipeptidicos,

polienos.

BETALACTÁMICOS
Son una amplia clase de antibióticos incluyendo derivados de la penicilina,
obteniendo por un anillo B-lactámico especial de 4 miembros. Son agentes
bactericidas.
Subgrupos
o Penicilinas Clavamas .
o Cefalosporinas
o Monobactamas
o Carbapenemas

PENICILINA
Es el más utilizado con fines terapéuticos generales. Su estructura básica consiste
en un anillo de tiazolidina unido a un anillo betalactámicos. Mata las bacterias que
causan infecciones.
Se divide en:
o Penicilina G: Es efectiva contra la mayor parte de los microorganismos de
Gram positivos.
o Penicilina semisintetica: penicilina V, es más estable en un medio ácido, es
mejor absorbida en el tracto gastrointestinal.
o

CEFALOSPORINAS
Es el principal producto de fermentación del hongo cephalosporium. Tiene un
anillo betalactámico fusionado con un anillo de dihidrotiazina de miembros.

Se divide en generaciones:
A) Primera generación: bactericidas contra cocos Gram positivos.
B) Segunda generación: mayor acción contra los Gram negativos. eficaz
contra los bacilos Gram negativos y frente
C) Tercera generación: es más a los cocos Gram positivos.
D) Cuarta generación: tiene un amplio espectro de acción, comparado en la
tercera generación tiene una gran estabilidad contra beta-lactamasas.
E) Quinta generación: tiene mayor actividad contra streptococcus
Pneumoniae.
MONOBACTAMAS
A) Aztreonam: es un bactericida generado por bacterias Gram negativas, es
de espectro reducido, dado que solo actúa frente a bacterias Gram
negativas aerobias. Se usa para tratar infecciones severas, sangre, vías
urinarias, estómago y piel.
B) Carbapenemas: actúa como potente inhibidor de betalactamasas, de
bacterias Gram negativas. En su anillo presenta un átomo de carbono en la
posición 1.
C) Macrólidos: Relacionados entre sí por tener un anillo lactónico con azúcares
laminados. Son derivados sintéticos de la eritrosina. Son efectivos contra
los cocos aerobios y anaerobios Gram positivos.

AMINOGLUCOSIDOS
Consiste en azúcares aminados y un anillo aminociclitol. Neomicina: se usa para
tratar infecciones en lla piel. Se usa oralmente antes de una cirugía intestinal.

TETRACICLINA
Características principales: tiene una estructura de 4 anillos. Producida por el
género streptomyces, se usa para tratar el acné.

POLIPEPTIDICOS
Bacitracina: Es producida por cepas de bacillus subtilis (bacteria grampositiva) se
caracteriza por tener una cadena de aminoácidos, algunas veces circular. Se
indica contra las bacterias gram positivas. Se descubrió por medio de una herida.

POLIENOS
Contienen 3 o más dobles enlaces. El grupo incluye a los antibióticos
Nistatina. es producida por Streptomyces noursei y fue el primer anti fúngico,
debido a su toxicidad se usa en tratamientos de la piel e infecciones bucales.
Anfotericina: es producida por Streptomyces nodosus y también es tóxica.
(Causa daños en el riñón) Se usa en infecciones internas fúngicas.

OTROS ANTIBIÓTICOS
Cloranfenicol: posee una estructura simple (nitrobenceno) lo produce
Streptomyces venezuelae debido a su simplicidad, resulta más económica su
síntesis. Se usa en fiebre tifoidea, abscesos cerebrales e infecciones oculares.

ANTIBIÓTICOS BACTERIOSTÁTICOS
Macrólidos, tetraciclina, cloranfenicol.

ANTIBIÓTICOS BACTERICIDAS
Betalactámicos, aminoglucósidos, polipeptídicos, polienos.

AGENTES ANTIMICROBIANOS SINTÉTICOS

A) Trimetropin: se utiliza para tratar infecciones del tracto urinario, respiratorio
y gastrointestinal.
B) Nitrofuranos: Son derivados del furfural al que se le añade un grupo nitro.
Inhibe la síntesis de proteínas, se usa en infecciones urinarias.
C) Isoniazida: se usa para tratar la tuberculosis ya que es un bactericida frente
a mycobacterium tuberculosis, sólo frente a células en crecimiento.

QUINOLONAS
Son derivados de la quinina. El ácido nalidíxico es una quinolona que inhibe la
síntesis de DNA en bacterias G al inhibir el DNA quinasa. Usada contra las
infecciones del tracto urinario. Existen 4 generaciones.
A) Primera generación: presenta una actividad frente a bacterias Gram
negativas.
B) Segunda generación: pueden utilizar se en el tratamiento de cualquier tipo
de infección.
C) Tercera generación: presenta una actividad antibacteriana, que incluye
bacterias resistentes a los fármacos de las restantes generaciones.
D) Cuarta generación: actúa eliminando bacterias que causan infecciones.

ANTIBIÓTICOS
Los antibióticos son medicamento, potentes que combaten las infecciones
bacterianas. Su uso correcto puede salvar vidas. Actúan matando las bacterias o
impidiendo que se reproduzcan. Después de tomar los antibióticos, las defensas
naturales del cuerpo son suficientes.
APLICACIÓN CLÍNICA: Es importante obtener las muestras correspondientes
para la identificación bacteriológica de microorganismos causal. Tan pronto como
se ha tenido esto, se puede empezar con la farmacoterapia basada en la mejor
suposición, después de identificar microorganismos causantes, por medio de
pruebas de laboratorio el régimen inicial se modifica según sea necesario.

FARMACOTERAPIA: Empleo terapéutico de los medicamentos. Estudio de la

acción de los medicamentos sobre el organismo enfermo.

EL MICROORGANISMO CAUSAL SE BASA EN LAS CONSIDERACIONES

SIGUIENTES
1. El sitio de infección ejemplo, neumonía, infección urinaria.
2. La edad del paciente, ejemplo, meningitis, recién nacido, preescolar y adulto.
3. El lugar donde se adquirió la infección hospital o fuera de este.
4. Factores mecánicos predisponentes.
5. Factores predisponentes del hospedado, inmunodeficiencia corticoesteroides
trasplante, quimioterapia contra canser.

MECANISMOS
Cuando dos antibióticos actúan de manera simultánea solo la población
microbiana homogénea, el efecto puede ser uno de los siguientes:
 Potenciación: La potencia de los antibióticos se expresa en unidades de
actividad. En cada caso la unidad de actividad antibiótica se establece y
define internacionalmente.
 Adición: Esto es la acción combinada es equivalente a la suma de las
acciones de cada fármaco cuando se utiliza de modo aislado.
 Sinergia: Esta es la acción combinada es mucho mayor que la suma de
ambos efectos.
 Antagonismo: es decir la acción combinada es menor que la del fármaco
más eficaz cuando se utiliza en forma aislada.
POLIPEPTIDICOS
Bacitracina: Es producida por cepas de bacillus subtilis (bacteria grampositivas) se
caracteriza por tener una cadena de aminoacidos, algunas veces circular. Se
indica contra las bacterias grampositivas. Se descubrió por medio de una herida.

POLIENOS
Contienen 3 o más dobles enlaces. El grupo incluye a los antibióticos.
1. Nistatina: Es producida por Streptomyces nousei y fue el primer anti
fúngico, debido a su toxicidad se usa en tratamientos de la piel e
infecciones bucales.
2. Anfotericina: Es producida por Streptomyces nodosus y tambien es toxico.
(causa daños en el riñón) se usa en infecciones internas fúngicas.

OTROS ANTIBIÓTICOS
Cloranfenicol: Posee una estructura simple (nitrobenceno) lo produce
Streptomyces venezualae debido a su simplicidad, resulta más económica su
síntesis. Se usa en fiebre tifoidea, accesos cerebrales e infecciones oculares.

ANTIBIÓTICOS BACTERIOSTÁTICOS
Macrólidos, tetraciclina, cloranfenicol.

ANTIBIÓTICOS BACTERICIDAS
Betalactámicos, aminoglucósidos, polipeptídicos, polienos.

ANTIBIOTICOS
Las posibles razones para utilizar dos o más antibióticos de forma simultánea en
lugar de solo usar un fármaco son las siguientes:
1. Administrar tratamiento inmediato a un paciente muy grave o con sospechas
una infección microbiana peligrosa.
2. Para retrasar el surgimiento de mutantes microbianos resistentes a un fármaco,
infecciones crónicas al utilizar un segundo o tercer fármaco que no tenga
reacciones cruzadas.
3. Para tratar infecciones mixtas en especial las que son consecutivas a un
traumatismo masivo a las que abarcan estructuras vasculares.
4. para obtener la sinergia bactericida o proporcionar acción bactericida.

DESVENTAJAS
Al utilizar antibióticos combinados, se deben tomar en consideración las
desventajas siguientes:
1. En ocasiones el medico piensa que, al administrar varios fármacos está
haciendo todo lo posible por el paciente, con lo cual se esfuerza menos para
establecer el diagnostico especifico. Además, esto le da un sentimiento falso de la
seguridad.
2. Entre más fármacos se administren mayor es la probabilidad de que ocurra una
reacción farmacológica o que el paciente se sensibilice a los medicamentos.
3. El costo es necesariamente elevado.

4. Las combinaciones de los antibióticos casi nunca logran más que un solo
fármaco eficaz.
5. En raras ocasiones, un fármaco antagoniza medicamento que se administra de
modo simultáneo.

RELACION HUESPED PARASITO

PARÁSITO:
Organismo que vive a expensas de otro (huésped) y además causa daño.
HUÉSPED:
Aquel organismo que alberga a otro en su interior o lo que porta sobre sí, ya sea
por parasitismo, comensalismo y mutualismo.

TIPOS DE RELACIÓN HUESPED PARASITO

PARASITISMO
Es una estrecha relación en el cual uno de los participantes depende del otro
obteniendo algún beneficio y normalmente el parásito causa daño al huésped.
En el parasitismo existen los ENDOPARASITOS Y ECTOPARASITOS

ENDOPARÁSITOS.
Residen permanentemente, al menos algunas etapas de su desarrollo, en el
interior de su huésped, ocupando huéspedes sucesivos en distintas fases de su
ciclo. Un ejemplo de esto es:
 Plasmodium Falciparum en la sangre, uno de los endoparásitos causantes
de la malaria.

LA MALARIA
Es una enfermedad parasitaria que involucra fiebres altas, escalofríos, síntomas
seudogripales y anemia, es causada por un parásito que se transmite a los
humanos a través de la picadura de mosquitos anofeles infectados. Después de la
infección, los parásitos (llamados esporozoitos) viajan a través del torrente
sanguíneo hasta el hígado, donde maduran y producen otra forma de parásitos
llamada mormones. Los parásitos ingresan en el torrente sanguíneo e infectan a
los glóbulos rojos. Los parásitos se multiplican dentro de los glóbulos rojos, los
cuales se rompen al cabo de las 48 a 12 horas, infectando más glóbulos rojos. Los
primeros síntomas se presentan por lo general de 10 días a 4 semanas después
de la infección, aunque pueden aparecer incluso a los 8 días o hasta un año
después de está. Los síntomas oscilan entre 42 a 72 horas.

ECTOPARASITOS
Son organismo que viven en el exterior de otro organismo (huésped), la relación
puede ser especialmente específica y pueden ser permanentes o temporales. Ya
que viven en el exterior algunos ejemplos pueden ser las pulgas y los piojos.

COMENSALISMO
Es una forma de interacción en la que uno de los intervinientes obtiene un
beneficio, mientras que el huésped no se perjudica ni se beneficia. Estos son
menos selectivos con los huéspedes que escogen tanto en los casos de la foresis
(el transporte del organismo del más pequeño por el más grande). Uno de los
ejemplos son las rémoras y los tiburones, las rémoras rodean al tiburón para estar
protegidas de otros depredadores entonces las rémoras son beneficiadas y los
tiburones no se afectan ni se benefician

MUTUALISMO
Es una interacción entre individuos de diferentes especies, en donde ambos se
benefician. Un ejemplo es de las bacterias que ayudan a la digestión. Bacteroides,
Prevotella y Ruminococcus, cada uno asociado a diferentes preferencias de
nutrientes, como los carbohidratos, mucopolisacáridos y azúcares. El grupo
bacteroides tiene más bacterias que producen vitaminas C, B2, B5 y H, mientras
que en el Prevotella predominan la fabricación de B1 y de ácido fólico. Bacteroides
ovatus, una bacteria buena para metabolizar la fibra.

En función de su utilidad para el parásito existen varios tipos de hospedadores o

huéspedes.
 HUESPED PRIMARIO
 HUESPED SECUNDARIO
 HUESPED INTERMEDIARIO
 HUESPED RESERVORIO
 HUESPED DEFINITIVO

HUÉSPED PRIMARIO: Es donde se desarrolla la mayor parte de la existencia del

parásito, sobre todo su crecimiento.
HUÉSPED SECUNDARIO: El huésped secundario es aquel que alberga al
parásito solo en la fase inicial de su crecimiento, casi siempre en relación a su
dispersión y para facilitar su ingreso con el hospedador primario, ejemplo de
huésped secundario: es el de las especies de Plasmodium que infectan a los
seres humanos (protestas apicomplejos que producen la malaria ), caso en el que
el huésped secundario es un mosquito del género Anopheles, el cual actúa como
vector de la enfermedad.
HUÉSPED INTERMEDIARIO: Designa a un hospedador igualmente
imprescindiblemente en el ciclo vital del parásito, donde este se desarrolla alguna
todas las fases larvales o juveniles, el ganado vacuno es huésped intermediario de
Taenia saginata.
HUÉSPED RESERVORIO: Es el que alberga, tanto que huésped primario, a un
agente infeccioso o parasito que puede invadir ocasionalmente también al
organismo humano.
HUÉSPED DEFINITIVO: Designa a un ser vivo que es impredecible para el
parásito ya que este desarrollará principalmente su fase adulta en el anfitrión, es
decir, aquel que alberga las formas más evolucionadas del parásito, por ejemplo,
el hombre es huésped definitivo del Taenia saginata y el gato de toxoplasma
gondii.

INMUNOLOGÍA
Inmunidad se refiere a la protección frente a las infecciones. El sistema inmunitario
es un conjunto de células y moléculas responsables de defender el cuerpo frente a
los incontables microorganismos patógenos con lo que los sujetos se encuentran
Los defectos en el sistema inmunitario hacen a los sujetos presa fácil de las
infecciones.
Inmunidad innata (natural o nativa). Esta mediada por células y proteínas que
están siempre presentes, destinadas a reaccionar frente a microorganismos
infecciosos. Es la primera línea de defensa. Una reacción importante es la
inflamación. Los principales componentes de la inmunidad innata son barreras
epiteliales que impiden la entrada de microbios, las células fagocíticas (sobre todo
neutrófilos y macrófagos), células dendriticas, los linfocitos citolíticos naturales (nk)
y varias proteínas plasmáticas, como las proteínas del sistema de complemento.
Las células que participan en la inmunidad innata pueden reconocer ciertos
componentes microbianos que comparten microbios relacionados, esenciales para
su carácter infeccioso, a estos se les conoce como patrones moleculares
asociados a microrganismos patógenos los leucocitos también reconocen
moléculas liberadas por las células dañadas o necrosadas que se llaman patrones
moleculares asociados al daño. En conjunto estos receptores se les denomina
receptores de reconocimiento de patrón.
El sistema inmunitario innato proporciona defensas al anfitrión por medio de las
siguientes reacciones

INFLAMACION: Citosinas productos de activación del complemento y otros

mediadores desencadenantes de las reacciones inflamatorias se producen
durante las reacciones inmunitarias innatas.
DEFENSA ANTIVIRICA: Interferones tipo producidos en respuesta a los virus
actúan activando enzimas que degradan ácidos nucleicos víricos e impiden la
replicación.
Inmunidad adaptativa. Mecanismos que estimulan a los microbios y son capaces
de reconocer sustancias microbianas y no microbianas. Se desarrollan después de
la exposición de microbios y aumenta con exposiciones repetidas al antigeno
(memoria inmunitaria). Es más potente que la inmunidad innata contra las
infecciones. Comprende los linfocitos y sus productos lo que incluye los
anticuerpos. El término "respuesta inmunitaria" se refiere a la inmunidad
adaptativa. Hay dos tipos de la inmunidad adaptativa:

1. INMUNIDAD HUMORAL. Protege contra microbios extracelulares y sus

toxinas. Mediada por linfocitos B y sus productos secretados (anticuerpos o
también llamados inmunoglobulinas) capaces de unirse específicamente
con correspondiente antígeno y neutralizarlo o eliminarlo. el
2. INMUNIDAD CELULAR. Responsable de la defensa contra microbios
intracelulares. Mediada por los linfocitos T, capaces de eliminar
específicamente la sustancia extraña por la activación de fagocitos
profesionales o por la eliminación directa de las células que contienen la
sustancia extraña.

Las dos clases de linfocitos expresan receptores para una amplia variedad de
antígenos.
La inmunidad puede adquirirse por una respuesta al antígeno (inmunidad activa) o
conferirse mediante la transferencia de anticuerpos o células efectoras (inmunidad
pasiva).

CÉLULAS DEL SISTEMA INMUNITARIO

Neutrófilos: Se producen en la médula ósea, con un núcleo dividido en lóbulos 13
5 lóbulos, granulocitos polimorfonucleares o polinucleares unidos entre sí
mediante finas hebras de cromatina.
El citoplasma contiene gránulos de tipo:
1. Gránulos primarios: Grandes azurófilos, son de forma de lisosomas
primarios que contienen enzimas colagenasa, elastasa, mieloperoxidasa,
hidrolasas ácidas y lisozima
2. Gránulos secundarios: De coloración suave y pequeños en forma de copos.
Son lisosomas que contienen fosfatasa alcalina, lactoferrina, cogelanasa,
lisozima y otras sustancias microbicidas con defensivas y catelicidinas. Su
 producción es activada por el factor activador de colonias de granulocitos
(G CSF).

FUNCION DE LAS CELULAS EN EL SISTEMA INMUNITARIO

El sistema inmunitario humano protege al cuerpo contra agentes extraños, tales
como microorganismos o virus.
Está formado por diversas células que viajan a través de la sangre para poder
combatir infecciones en cualquier región del organismo.
Cada una de dichas células juegan un papel distinto.
Inmunidad innata o específica
Sistema de defensas con el cuál naces y te protege de todos los antígenos
La inmunidad innata consiste en la barrera que impide que los materiales dañinos
ingresen al cuerpo
Ejemplos:
A. reflejo de la tos B.
B. las enzimas en las lágrimas y aceites en la piel C.
C. el moco que atrapa bacterias y partículas pequeñas
D. la piel

Inmunidad adaptativa o adquirida

No es congénita (no nace con nosotros) se adapta y aprende a medida que el
sistema inmunitario se encuentra con sustancias extrañas (antígeno).
Los componentes de la inmunidad aprendan a atacar y así cada vez es más
rápido la respuesta, gracias a su memoria.
Las partículas en la inmunidad adquirida son:
Linfocitos B y los anticuerpos

CÉLULAS DENDRÍTICAS:
Tienen la función similar a los macrófagos
Ejemplo: El VIH puede infectarlas y alojarse en su interior.
Es un tipo especial de célula inmunitaria.
Se encuentra en los tejidos como la piel y estimula la respuesta inmunitaria.

NEUTRÓFILOS:
Quieren y destruyen bacterias y otros patógenos que podrían causar infecciones
(oportunistas) acomodar alguna situación para obtener provecho.
Su función principal es la fagocitosis de bacterias y hongos. Tienen un periodo de
vida muy corto va de horas a algunos días solamente.

EOSINÓFILOS:
Son leucocitos (células blancas) que se encuentran en la sangre y tejidos.
Su función es la defensa contra parásitos, respuestas alérgicas, inflamación de
tejidos e inmunidad. También son fundamentales en la homeostasis del tejido que
sufre remodelación.
Algunos están presentes en tejidos periféricos el recubrimiento mucoso de las vías
respiratorias, digestivas y genitourinarias

MACRÓFAGOS:
Fagocitar (ingieren) patógenos o toxinas una vez estos pasan dentro del
macrófago, lo destruyen mediante diversas sustancias químicas.
Ejemplo: el virus del VIH puede alojarse e incluso reproducir en su interior, lo que
convierte a esta célula en reservorios del virus que impiden que el tratamiento cure
la infección y sólo puede hacer la crónica.
Puede hallarse en tejidos a los que los fármacos llegan con dificultad lo que la
potencia su papel como reservorio (sitio donde el VIH se esconde)

MASTOCITOS:
Son células pertenecientes al sistema inmunitario originadas por células
hematopoyéticas (proceso de formación de los elementos de la sangre)
(eritrocitos, leucocitos plaquetas).
Se originan en la médula ósea y se encuentran en la mayoría de los tejidos del
cuerpo.
Se relacionan con alergias, artritis y cáncer.
Se localizan en la piel, mucosa del tracto digestivo

BASÓFILOS:
Está implicado en la inflamación y el ataque a parásitos, respectivamente.
Son un tipo de glóbulos blancos (que ayudan al cuerpo a combatir infecciones)
producidas en la médula ósea.

Sin embargo, cuando una persona tiene basofilia (aumento de los glóbulos
blancos) se debe a una causa grande.
En personas sanas la basofilia, representa una mínima cantidad de población de
las células.

LINFOCITOS B (leucocitos):
Se trata de células productoras de anticuerpos, pequeñas proteínas capaces de
inactivar virus u otros microorganismos, además de señalizar a otras células
inmunitarias la presencia de un agente infeccioso.
Como tal dan origen a las células plasmáticas que producen anticuerpos.

ANTICUERPOS
Ayudan a la célula a ingerir antígenos (fagocitos).
Inactivan en sustancias tóxicas producidas por las bacterias.
Atacan directamente bacterias y virus.
Ayudan a ciertas células NK (Linfocitos sistólicos (granulocitos) naturales). A
destruir las células infectadas de cáncer.

LINFOCITOS TCD8
Destruyen células del cuerpo u organismo dañadas y o afectadas por virus
bacterias u otros patógenos también destruyan cuándo reconocen células
cancerosas. Mediante un ataque directo a las células infecciosas inyectan enzimas
tóxicas que provocan su destrucción. Son tan específicas que pueden identificar
las células malas y matarla si no afectar las vecinas.

LINFOCITOS TCD4
Coordinan la respuesta inmunitaria por medio de sustancias químicas que inducen
a la creación de anticuerpos por parte de los linfocitos B y atacan a los patógenos
por parte de los macrófagos los linfocitos TCD8+ son las principales células
afectadas por VIH dado a sus importantes funciones la inmunosupresión causada
por dichos virus.
Inmunosupresión: Disminución o anulación de la respuesta inmunológica del
organismo mediante el tratamiento médico.

LINFOCITOS NK NATURAL KILLER

Son capaces de reconocer y destruir células infectadas, actividad similar a la de
los linfocitos TCD8+ pero estas son menos selectivas.
Proveen protección frente a la infección viral y bacterias y ayudan a detectar y
limitar el desarrollo de cáncer.
Son descritas como células con habilidad para destruir células tumorales sin
recibir señales.

CÉLULAS DENDRÍTICAS
Las células dendríticas son una población de células especializadas presentes en
los epitelios, los órganos linfoides y la mayoría de los tejidos. Poseen numerosas
prolongaciones citoplasmáticas finas que parecen dendritas y se encuentran
debajo de los epitelios. Capturan antígenos proteicos y muestran los péptidos para
que los reconozcan los linfocitos T. Además de su función presentadora de
antígenos las células dendríticas están provistas de una rica colección de
receptores que detectan microbios y células dañadas y estimulan la secreción de
citosinas, mediadores que desempeñan funciones cruciales en la inflamación y en
la defensa frente a los virus. Además, las células dendríticas expresan cantidades
elevadas de CPH (complejo principal de histocompatibilidad) y de otras moléculas
necesarias para presentar antígenos a los linfocitos T y activarlos. De este modo
células dendríticas participan en el inicio de las respuestas inmunitarias innatas,
pero, al contrario que los macrófagos, no participan en la destrucción de los
microbios ni otras sustancias lesivas.

Células dendríticas clásicas.

Responden a los microbios emigrado a los ganglios linfáticos, donde presentan
antígenos proteínicos microbianos a los linfocitos T.

Células dendríticas plasmocitoides.

Responden pronto a la infección vírica, reconocen ácidos nucleicos de los virus
intracelulares y producen proteínas solubles llamadas interferones de tipo I, que
tienen potentes actividades antivíricas.

LINFOCITOS T
Los linfocitos T se desarrollan en el timo a partir de precursores que surgen de las
células hematopoyéticas.
Linfocitos T maduro se encuentra en la sangre, donde constituyen el 60 a 70% de
los linfocitos y en las zonas del linfocito T de los órganos linfoides periféricos.
Hay tres poblaciones importantes de linfocitos T que realizan diferentes funciones
Los linfocitos T colaboradores estimulan a los linfocitos B para que se produzcan
anticuerpos y activan a otros leucocitos p. ej. fagocitos para que destruyan a los
microbios; Los linfocitos T citotóxicos que matan a las células infectadas; Los
linfocitos T reguladores que limitan las respuestas inmunitarias e impiden
reacciones contra antígenos propios.
Linfocitos B su principal función es fabricar anticuerpos, también llamados
inmunoglobulinas y fabrican 5 clases de anticuerpos que son la inmunoglobulina
G, A, M, D y E, cada uno con distintas funciones.

Factores de virulencia
Son los mecanismos con los que cuenta un microorganismo para poder entrar al
organismo e invadir los tejidos y provocar enfermedad.
Una vez que los microorganismos son trasmitidos a un huésped susceptible,
deben adherirse a los tejidos penetrar o invadir sus defensas y causar daño tisular.
Clasificación de Mecanismos de Virulencia
 Factores que promueven la colonización e invasión del huésped.
 Factores que provocan daño en el huésped. Sistema de secreción de
bacterias.
 Factores que favorecen la colonización y la invasión del huésped
Fimbrias: son apéndices que consisten en subunidades de proteinas que están
ancladas, ya sea la membrana extensa o en la pared celular.
Adhesinas: son lectinas y su función es la adhesión a los receptores celulares.

Factores que promueven la colonización e invasión del huésped

Factores de adherencia. Invasión de las células y tejidos del hospedador.
Toxinas.
A. Exotoxinas
B.Exotoxinas que causan enfermedades diarreicas e intoxicaciones alimentaria,
C. Lipolisacaridos de las bacterias gramnegativas,
D. Peptidoglucano de las bacterias grampositivas.
A. Enzimas que degradan tejidos,
B.Proteasa Ig Al

 Factores antifagociticos.
 Patogenicidad intracelular.
 Heterogeneidad antigénica.
 Sistemas bacterianos de secreción.
 Requerimiento de hierro.
 Función de las biopeliculas bacterianas.
.

Factores de adherencia
Una vez que la bacteria penetra en el cuerpo del hospedador se debe adherir a las
células de una superficie histica sino se adhiere es eliminada por el moco y otros
liquidos que bañan las superficies de los tejidos. Después de la adherencia que
constituye únicamente un paso en el proceso infeccioso se forman micro colonias
y se lleva a cabo los pasos ulteriores en la patogenicidad de la infección.
Para muchas bacterias patógenas es indispensable invadir el epitelio de
hospedador para generar una infección.
Algunas bacterias (p. ej., especies de Salmonella) invaden los tejidos a través de
las uniones entre las células epiteliales. Otras bacterias (p. ej.. Yersina, N.
gonorrhoeae, Chlamydia trachornatis) invaden ciertos tipos de células epiteliales.
Otro hospedador y posteriormente penetran los tejidos.
Una vez dentro de la célula hospedadora, la bacteria permanece encerrada en una
vacuola formada por la membrana de la célula hospedadora o bien la membrana
de la vacuola se disuelve y la bacteria se dispersa en el citoplasma.
Toxinas
Por lo general las toxinas que producen las bacterias se clasifican en dos grupos
toxinas extracelulares (a menudo llamadas exotoxinas) y endotoxinas.
A. Exotoxinas
Muchas bacterias grampositivas como gramnegativas que tienen exotoxinas que
tienen gran importancia médica.
B. Exotoxinas que causan enfermedades diarreicas e intoxicación alimentaria
Con frecuencia las exotoxinas que causan enfermedades diarreicas se denominan
enterotoxinas. El Vibrio cholerae ha causado enfermedades diarreicas epidémicas
(cólera) en muchas partes del mundo. Una vez se penetra en el hospedador a
través de los alimentos o bebidas contaminadas. El Vibrio cholerae invade la
mucosa intestinal y se adhiere a los microbellosidades del borde en el cepillo de
las células epiteliales intestinales.
C. Lipopolisacaridos de las bacterias gramnegativas
Los lipopolisacaridos (LPS, endotoxinas) de las bacterias gramnegativas se
derivan de las paredes celulares y a menudo se liberan durante la lisis bacteriana.
Peptidoglucano en las bacterias grampositivas
El peptidoglucano de las bacterias grampositivas está formado por
macromolecules entrecruzadas que rodean las paredes bacterianas.

Enzimas
A. Enzima que degrada tejidos
Muchas bacterias producen enzimas que degradan tejidos la que se han descrito
mejor son las de clostridium perfringens, Staphylococcus aureus, estreptococo del
grupo A y, en menor grado las bacterias anaerobias.
B. Proteasas igA1
La inmunoglobulina A constituye el anticuerpo secretor de mucosas las proteasa
IgA1 es una factor importante en la virulencia para las bacterias patógenas N.
gonorrhoeae N. meningitidis H. influenzae y S. pneumoniae. También producen
estas enzimas algunas capas de prevotella melaninogenica algunos estreptococos
que causan enfermedades dentales y unas cuantas cepas de otras especies que
en ocasiones causan enfermedades.

Factores antifagociticos
Muchas bacterias patógenas son aniquiladas rápidamente una vez que las
ingieren los polimorfonucleares o los macrófagos.
Otras evaden a la fagocitosis o los mecanismos microbicidas leucositicos al
absorber componentes del hospedador sano en su superficie celular.
Patogenicidad intracelular
Alunas bacterias (p. ej., tuberculosis especies de brucella y de legionella viven y
proliferan en el ambiente de hostil dentro de los polimorfonucleares, macrófagos o
monocitos.
Lo hacen gracias a una serie de mecanismos muchas.
Bacterias viven dentro de las células no fagociticas.
Heterogeneidad antigena.
Las estructuras de superficie de la bacteria (y de muchos otros microorganismos
tienen gran heterogeneidad antigénica.
El tipo antigénico de la bacteria en ocasiones indica la virulencia en relación con
naturaleza clonal de la bacteria patogena, aunque en realidad no constituya el
factor (o factores) de virulencia.
Sistemas bacterianos de secreción
Los sistemas bacterianos de secreción son importantes en la patogenia de la
infección y son indispensables para la interacción entre bacterias y c eucariotas
del hospedador las bacterias gramnegativas poseen paredes celulares.

con membrana citoplasmática y membranas externas también existe una capa

delgada de peptidoglucano.
Las bacterias grampositivas tienen una membrana citoplasmática y una capa muy
gruesa de peptidoglucano algunas bacterias gramnegativas y grampositivas
poseen capsula también membranas.
Requerimiento de hierro
El hierro es un nutriente esencial para la proliferación y el metabolismo de casi
todos los microorganismos y también es un cofactor esencial de numerosos
procesos metabólicos y enzimáticos.
La reserva de hierro en el ser humano para la asimilación microbiana es limitada
puesto que el hierro es fijado por las proteinas altamente afines que se unen a las
llamadas transferrina en el suero y lactoferrina en la mucosa.
Función de las biopelículas bacterianas
Una biopelicula es un conglomerado de bacterias interactivas adheridas a una
superficie sólida o unas cortas y encerradas dentro de una matriz de
expolisacarido Una biopelicula puede estar formada por una sola especie de
bacterias o por barias especies en conjunto.

Técnicas de descontaminación desinfección y esterilización

 Todo material utilizado para la recogida de cualquier tipo de muestra que
posteriormente será procesada en el laboratorio deberá estar totalmente
esterilizado.
 Todo material utilizado para la realización de las pruebas oportunas (placas
de Petri, tubos de ensayo, medios de cultivo, pipetas asas de siembra, etc.)
en el laboratorio de microbiologia deberá estar estéril.
 Es fundamental que todo material que tenga que estar en contacto con un
germen problema este estéril.
 Antes de cualquier esterilización el material deberá estar limpio yo
desinfectado.
 Conviene, si es económicamente viable, utilizar material desechable.
  En el laboratorio de microbiología el material de uso aséptico deberá
guardarse separadamente del uso séptico.
 La limpieza de los residuos del suelo mesas de trabajo y en general
cualquier superficie del laboratorio se realiza mediante desinfección y de
forma periódica, detectando el grado o riesgo de posible contaminación
ambiental.
 Destreza y formación por parte del personal sanitario. Siempre se tendrá en
cuenta que en un laboratorio de microbiologia se deberá trabajar en
condiciones de total asepsia, al menos en la inmensa mayoria de los casos,
por lo que se deberán conocer muy bien todos los métodos de
descontaminación existentes y como llevarlos a la práctica.
 La manipulación de todo material y/o muestra deberá ser la adecuada
siguiendo el protocolo de trabajo preciso, teniendo en cuenta las medidas
cautelares para la prevención de accidentes laborales.
1. Fases de manipulación del material de laboratorio
Todo material utilizado en un laboratorio de microbiología puede ser, o desechable
o reutilizable.
 Material desechable. Aquí se incluyen las agujas, jeringas, guantes, gorros
calzas, lancetas, torundas placas de Petri de plástico pipetas etc. En este
caso dicho material se adquiere estéril se utiliza una sola vez y una vez
utilizado se desecha y se destruye. Si el material es punzante o cortante (pe
agujas) se tirará en recipientes resistentes a la punción que puede
presentar distintos colores (p.e., tapadera roja) según el riesgo que pueda
presenta muestra. Si el material no es punzante o cortante primeramente se
introduce en la autoclave con el fin de destruir sus gérmenes (p.e., medios
de cultivo con germen problema) y posteriormente se tirarà en
contenedores especiales (bolsas de color rojo o naranja) o incluso sin pasar
se trará directamente a dichos contenedores para que posteriormente y a
través de tratamientos especificos sean destruidos.
 Material reutilizable. Aquí se incluye todo el material de vidrio utilizado en
microbiologia, batas gorros de tela y en general cualquier materia que
permita ser esterilizado de nuevo. En estos casos, después de su utilización
es preciso someter a este material a un proceso de descontaminación para
lo que es necesario una limpieza y una desinfección o esterilización según
los casos.
Todo instrumento deberá limpiarse inmediatamente después de haber sido
utilizado siguiendo el protocolo preciso para cada caso. En microbiologia se podría
decir que primero se destruye el germen, (por técnicas de esterilización) como
medida cautelar muy importante ya que es necesario la eliminación de todo
germen por lo menos los patógenos. Posteriormente se limpia y una vez
realizadas estas tareas se efectuarán una desinfección o una esterilización.
La esterilización es un método que se utiliza generalmente.
Su objetivo es la destrucción total de cualquier forma de vida, incluidas formas de
resistencia o esporas.
Hay otros casos, los menos, en los que se podrán utilizar materiales no
esterilizados previamente, como, por ejemplo, los portaobjetos para realizar
alguna tinción, frascos lavadores con agua destilada, frascos que contengan
colorantes, etc. En estos casos, dichos materiales se someten a desinfección cuyo
objetivo es la destrucción de toda forma de vida patógena.
2. Principios básicos de descontaminación. Concepto de limpieza
desinfección y estilización.
2.1. Limpieza
En microbiologia primeramente se destruye el gérmen por técnicas de
esterilización o desinfección y posteriormente se limpia. A partir de aquí suele
suceder de la siguiente forma:
 Se prepara el material de uso séptico del de uso aséptico procediendo
inmediatamente a su limpieza. Se tendrá la precaución de no dejar
demasiado tiempo el material metálico de agua.
 Se limpiarán los instrumentos primeramente con agua fría, ya que el calor .
hace que muchos residuos por ejemplo pus o sangre se adhieran mas
 Se lavará con agua caliente y jabón frotando especialmente en los sitios o
lugares más angulosos. destilada .
 Tras el lavado y enjuagado se volverá a aclarar de nuevo en agua estado.
 Se secará y se comprobará su
 Se protegerá si es necesario.

2.2. Desinfección
Este método en microbiología se utiliza para la descontaminación de materiales o
superficies inertes y para descontaminación de manos, piel, mucosas etc.
 Materiales o superficies inertes (suelo o cualquier superficie de laboratorio
incluido sus materiales). Se utiliza sobre todo los métodos químicos, es
decir los desinfectantes, (detergentes hipocloritos etc.) que van a producir la
destrucción de todos los gérmenes patógenos no destruyendo los
gérmenes no patógenos.
 Desinfección de manos, piel y mucosa la desinfección sobre tejidos vivos
corresponde a técnicas de antisepsia y lo que se aplica sobre ellos no son
desinfectantes si no antisépticos. En el lugar donde se aplican producen
una destrucción de los gérmenes patógenos.
2.3. Esterilización
Este método es utilizado en microbiologia para la para la reutilización de cualquier
material que pueda y que deba utilizarse como material aséptico. Existen distintas
técnicas, pero en cualquier caso van a producir la destrucción de cualquier forma
de vida.
Técnicas de descontaminación física
3.1. Tratamientos térmicos por calor seco y húmedo
Consiste en la destrucción total (esterilización) o parcial (desinfección) de los
gérmenes por la aplicación de calor. Este calor se aplica puede ser en calor seco o
húmedo.
3.1.1. Descontaminación por calor seco
Dependiendo de la temperatura y del tiempo de aplicación se consigue o no
esterilización. Las técnicas de esterilización por calor seco, son:
 Flameado: consiste en expones un objeto o parte de material a la lama de
un mechero durante uno o varios minutos según del material que se trate
Este método se utiliza para esterilizar en la punta del asa se siembra,
(hasta incandescencia), las bocas de los tubos de ensayo o matraces
cuando se abren por el motivo que sea y siempre antes de cerrarlos, puntas
de pipetas etc.
 Incineración: consiste en destruir en hornos crematorios el material es
utilizado para destruir material de un solo uso, por ejemplo jeringas guantes
catéteres etc.
 Horno seco: estufa Pasteur o Poupinel. Son hornos metálicos formados por
una doble pares y con bandeja ajustable en su interior.

Suelen calentarse mediante resistencias eléctricas, pudiendo regularse su

temperatura.
Externamente estas estufas presentan un termómetro que indica en todo momento
la temperatura que existe en el interior del horno (que deberá coincidir con la
temperatura elegida). También incluye un selector de temperatura y en ocasiones
un reloj. La esterilización consiste en 180° durante 2 horas o 160° por 3 horas y
media. Este tipo de esterilización se utiliza en materiales en profundidad la
esterilización se llevará a cabo de la forma siguiente:
1. Se prepararán los instrumentos o materiales a esterilizar que
deberán estar debidamente protegidos, por ejemplo, envolviéndolos
en papeles especiales colocándolos en el interior en cajas etc.
 2. Se introduce en una estufa y se conecta está seleccionando la
temperatura en el termostato y el tiempo en el reloj (si lo hubiera)
comenzara a contabilizar cuando alcance la temperatura
seleccionada.
3. Transcurrido el tiempo deseado a la temperatura elegido se
desconecta el interruptor y dejamos descender la temperatura hasta
50-60°C
4. Abrimos la estufa y recogemos el material.
Los materiales que se pueden esterilizar por este método son todo tipo de
materiales vidrio, porcelanas, metal, etc. No se utiliza para esterilizar medios de
cultivo productos liquidos telas plásticos etc.
Descontaminación con calor húmedo
Ebullición es un método en el laboratorio se utiliza poco ya que no es muy fiable.
En sentido estricto no es un método de esterilización, ya que no destruyen las
esporas. consiste en introducir el material en agua hirviendo a (100°C) durante
unos 10 minutos como minimo.
Autoclave: Es un recipiente cilindrico grande o pequeño que se cierra
herméticamente. Externamente lleva un manómetro que registra la presión que
existe en el interior del autoclave cuando este está en marcha. Existe un sistema
que nos permite seleccionar la presión que deseamos. Además presenta una
válvula de seguridad que se abrirá espontáneamente cuando la presión interna
supere la elegida o resulte peligrosa una llave de purga que permite la salida de
vapor y un reloj de seleccionado el tiempo deseado con una alarma que indica el
final del proceso interiormente en todo autoclave puede observarse en su fondo
una rejilla por debajo de la cual hay agua destilada y un sistema de tuberías que la
calienta generalmente por electricidad dicho calentamiento origina vapor de agua
que asciende por la rejilla y llega a los objetos el autoclave es el aparato muy
utilizado y sus propiedades esterilizadoras dependerán de las condiciones de la
presión y tiempo elegidos es decir se conseguirá esterilización si sometemos el
autoclave a 0.8 atmosferas durante 30 minutos (118°C) 1 atmosfera durante 20.
minutos (120°C) 2 atmosferas durante 10 minutos (134°C) o 3 atmosferas durante
5 minutos (144°C).
Técnica para utilizar autoclave:
5. Con el autoclave apagado y abierto añadimos agua destilada hasta
la rejilla, cubriéndola ligeramente.
6. Se pondrá algún soporte mecánico para evitar que el material que se
desee esterilizar contacte directamente con el agua. Esto no es
siempre necesario. Se coloca adecuadamente los objetos que se van
a esterilizar (Castillos, cajas etc.). Se cierra la tapa y se ajusta la
presión.
 7. Se abrirá la llave de purga para que permita la salida de vapor y se
ajustara la presión deseada para la esterilización, asi como el tiempo
(p.e., 1 atmosfera durante 20 minutos.
8. Se pondrá en marcha el aparato y se esperará hasta que salga vapor
por la llave de purga.
9. Se cerrará la llave de purga y la presión comenzará a subir hasta
llegar al nivel programado. A partir de aquí comenzara a contar el
tiempo de esterilización.
10. Una vez realizada la esterilización se apagará el interruptor del
autoclave y se esperara a que el manómetro baje a 0.
11. Cuando la presión este a 0, abriremos la llave de la purga para que
salga gran parte del vapor que todavía se encuentra contenido. Esto
se realizará con cuidado para evitar descompresiones bruscas que
podrían originar la apertura de aquellos recipientes tapados con
algodón graso.
12. Una vez comprobado la salida de vapor, se abre la tapa del
autoclave y se extrae el material.
En la autoclave se puede esterilizar material metálico cristal, torundas, compresas
paños, batas, plásticos y gomas reutilizables. Tiene el inconveniente de que con el
tiempo los objetos metálicos se oxidan.
Tyndalización: es el método de esterilizaciones consecutivas se utiliza en
microbiologia cuando existe un problema de contaminaciones algún material o en
algún propio del autoclave. Consiste básicamente en las esterilizaciones repetidas
a lo largo de unos 3, o incluso, 4 dias, hasta que se elimina el germen
contaminante Teóricamente no se deben alcanzar temperatura por encima de los
100°C y durante este intervalo no se debe abrir el aparato o recipiente que se
somete a tyndalizació El objetivo de este método de destruir las esporas cuando
estas germinan, asi como evitar contaminación por organismos resistentes.
Vapor fluente. Consiste en utilizar el autoclave siguiendo la técnica actual pere
con la llave de purga abierta, lo que impedirá que se produzca presión y que
temperatura nunca sea superior a 100°C este método es utilizado para materiales
que no deban soportar temperaturas superiores a 100°C por ejemplo con medios
muy azucarados, para evitar su caramelizarían es un método poco usado en
microbiologia.
Uperización: Es un método muy utilizado en la industria alimentaria. Consiste en
tratar el medio de temperatura en uno 149-150°C durante unos instantes (de 1 a 5
segundos). No se alteran las propiedades del medio y produce esterilización.
Pasteurización: No es un método de esterilización y es utilizado en alimentaria,
no en microbiologia consiste en calentar el medio a temperaturas comprendidas
entre 62°C (15 minutos) y 72°C (30 minutos) no destruye las formas de resistencial
4.2. TRATAMIENTOS A TEMPERATURA AMBIENTE
4.2.1. Radiaciones ionizantes
Rayos ultravioletas. Mas que para esterilizar, se usan para mantener la esterilidad
de superficies y/o recintos. Se caracteriza porque tienen poca penetración. Actúan
impidiendo y alterando la duplicación de adn celular. Se debe evitar su presencia
en la piel.
Rayos gama: Se utiliza para conseguir la esterilización en frio. Son producidos por
isotopos radiactivos. Presentan un poder de penetración muy alto, constituyendo
el método de esterilización más utilizados a nivel industrial. Se utiliza para
esterilizar materiales de uso único o desechable (guantes, jeringas, catéteres,
prótesis, válvulas etc.) y en general cualquier tipo de material que pudiera
alterarse por calor.
4.2.2. Sistema de filtración
Son dispositivos que como su nombre indica van a separar del medio a filtrar
todas aquellas estructuras que sobrepasen un determinado tamaño, según el tipo
de filtro la efectividad de un filtro. La efectividad del filtro va a ser proporcionado el
tamaño del poro pudiendo conseguirse a la esterilización. Otra caracteristica es la
presencia de presión, vacio e incluso la carga del filtro que generalmente suele ser
positiva. ya que las bacterias en medios neutros tienen carga negativa. Los más
utilizados son:
Filtros de membrana Son filtros de celulosa muy purificada y con un tamaño de
poro generalmente fino o muy fino. Estos sistemas pueden ser desde muy
sencillos, a estar formados por sistemas de piezas demostrables que en muchas
ocasiones llevan acoplada una bomba de vacio para ejercer succión sobre el
medio a filtrar
Filtros de vidrio poroso o de fibra de vidrio. Se utiliza cayos especificos y
tienen más resistencia que los anteriores.

Filtros de Chamberland. Son filtros de porcelana porosa, pero resultan más

caros que los anteriores y son menos utilizados.
Filtros de flujo laminar. Son dispositivos de filtrado donde entra aire contaminado
y sale estéril. Son utilizados como mecanismo de esterilización en campanas de
flujo laminar, en quirófanos y en, general, en cualquier recinto en el que se
pretenda crear o mantener un ambiente estéril.
Pueden ser de flujo vertical u horizontal.
Ultrasonidos: Consiste en introducir el material en tanques de distintos tamaños
que contiene un liquido generalmente desinfectante. Una vez puesto en marcha el
dispositivo comienza a vibrar a gran velocidad originando pequeñisimas burbujas
que entran en todos los recodos del material consiguiendo eliminar los
microorganismos es un método poco utilizados, ya que resulta caro y poco
práctico.
5. Técnicas de descontaminación química.
Hay que distinguir entre los métodos químicos de desinfección y los métodos
quimicos de esterilización.
5.1. Métodos químicos de desinfección
Van a producir la destrucción de todos los microorganismos patógenos. Son los
desinfectantes y los antisépticos. Los desinfectantes son sustancias quimicas
aplicadas sobre objetos y superficies. Los antisépticos son sustancias quimicas
aplicadas aplicada sobre la piel y mucosa.
 Todo método de desinfección deberá cumplir las siguientes condiciones:
 Matar el mayor número de gérmenes o, al menos, todos los patógenos.
 Ser económico
 No ser corrosive, toxico ni irritante para los tejidos
 Se debe diluir al menos en agua Tener un olor agradable .
.

Los desinfectantes utilizados son:

Detergentes catiónicos. Se pueden utilizar diluidos al 1% para desinfección de
manos. Su uso más corriente es para la limpieza y desinfección de paredes,
suelos, ropa y objetos en general.
Clorofenoles. Son muy eficaces y suelen asociar con los detergentes catiónicos
para mejorar el grado de desinfección. Compuestos clorados. Son utilizados para
la desinfección de superficies, ropa, urinarios, etc. Se suelen usar diluidos en agua
y en ejemplo tipico lo constituyen la lejias (hipocloritos)
Ácido fenico. Se utiliza diluido al 5% para limpieza de objetos y superficies. Los
antisépticos más utilizados son los siguientes:
Alcoholes. Se utiliza para limpiar y desinfectar la piel, las manos, el filo del
instrumental y algunas superficies pequeñas. Se utiliza el etanol para los tejidos y
el metanol para superficies que no vayan a estar en contacto con la piel.
Mercuriocromo. En su composición aparece el mercurio que tiene efecto
desinfectante muy bueno. Es especialmente utilizado en heridas superficiales
debido a que las desinfecta y las mantiene secas y protegidas.
Derivados yodados. Son utilizados para preparar la piel antes de una
intervención quirúrgica, en la punción lumbar, antes de punción para hemocultivo
etc. Son extraordinariamente efectivos y ejercen su acción por oxidación.
5.2. Métodos quimicos de esterilización
Los más utilizados son:
Óxido de etileno. Se emplea en forma de gas a (10'C es gas) mezclado con
dióxido de carbono, ya que el óxido de etileno puro es muy oxidante y al
mezclarse con el oxigeno al aire podría explosionar presenta un gran poder de
penetración y como un método de esterilización se va a producir en temperaturas
bajas (de 40°C) con una humectad relativa (40-60%) durante un tiempo de 3 a 8
horas (media de 5) para que todo esto sucede se requiere de cámaras o
instalaciones especificas para ello que son muy caras el óxido de etileno se puede
aplicar a cualquier material sensible al calor y que no pueda esterilizarse por otros
medios por ejemplo elementos de endoscopia plásticos termolabiles cauchos
material eléctrico el material estará disponible para ser utilizado en 48 horas
después de la esterilización. El material deberá conservarse estéril en el interior de
una bolsa de plástico cerrada por procedimientos termoeléctricos la duración de
dicha esterilización es de 6 meses.
Glutaraldeido activado: Es un producto liquido que se utiliza diluido y en ph
alcalino, en esta solución se introduce el material limpio y se deja actuar durante 3
horas no es método muy usado.
Valores de formol: Es utilizado en aparatos de anestesia, respiradores,
incubados, etc., a temperaturas de esterilización que oscila entre 17°C (durante 48
horas) y 50°C (en torno a 2 horas). Antes de su utilización es necesario eliminar el
olor residual del formol.
6. Control de esterilización
Los sistemas de control son sistemas que permiten comprobar la eficacia del
proceso de esterilización.
Existen diferentes tipos de controles los más importantes son los siguientes:
1. Controles de desinfección tipo fisico.
2. Controles de esterilización de tipo quimico.
3. Controles de esterilización de tipo biológico.
Controles de esterilización tipo fisico. Son sistemas de control incluidos en el
aparato de esterilización y estos pueden ser sistemas mecánicos oculares. Tales
como los nanómetros que miden la presión en el interior de la cámara o incluso
vacóumetros que miden el vacio en el interior de la misma en ocasiones nos
encontramos con sistemas que miden ambos parámetros e incluso termómetros
para indicar en cada momento el proceso de temperatura que hay en el interior
otros sistemas de tipo físico que se pueden encontrar son gráficos que consisten
en registrar en cada momento los valores de los parámetros más significativos del
procesos tales como la temperatura, grado, humedad, presión, vacio, tiempo etc.
Controles de esterilización de tipo quimico. Están basados en productos
quimicos comercializados generalmente en el soporte de cinta adhesiva. Dicho
producto químico actuara como indicadores del proceso de esterilización ya que
por encima de una determinada temperatura cambian de color este hecho servirá
para saber si la condición de esterilización ha sido prevista también según las
fabricaciones y formulación con este tipo de sistemas quimicos se pueden conocer
otros parámetros, aunque fundamentalmente se utilizan los del control térmico.
Sistema de tipo biológico. Son sistemas generalmente comercializados en forma
de capsulas cerradas cuyo interior hay esporas de resistencia a la esterilización
conocida. Dichas ampollas, tras haber sido sometidas a condiciones de
esterilización se incuba a 56°C (en caso de las capsulas con bacillus stearat.
hermophilus) o a 40°C (en caso de capsulas en bacillus subtilis). Al cabo de 24 a
48 horas se produce una lectura donde la germinación y cambio de color indicará
en cada caso que no se han producido condiciones de esterilización.