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Introducción:
Los microorganismos
1. Tienen un enorme impacto en la vida y en la composició n física y química de nuestro planeta.
Se encargan de llevar a cabo los ciclos de elementos químicos indispensables par la vida, tales como:
El carbono
Nitró geno
Azufre
Hidrogeno
Oxigeno
1. La bioquímica, biología molecular y genética ofrecen los recursos necesarios para el aná lisis de los
microorganismos.
2. La microbiología amplia el horizonte de estas disciplinas científicas
Mutualismo: Un bió logo describiría este intercambio como algo que beneficia a todos los
participantes.
Simbiosis: se denomina de mutualismo que es una relació n continua de distintos organismos.
3. Una divisió n bioló gica importante separa a:
Eucariotas: microorganismos que contienen nú cleo rodeado de una membrana. Células eucariotas
se distinguen por su tamañ o relativamente grande y la presencia de organelos especializados,
rodeados de membranas como las mitocondrias.
Procariotas: en los que el DNA no esta separado físicamente del citoplasma.
Virus
1. Los virus carecen de los atributos de las células, como la capacidad de multiplicarse.
2. Solo cuando infectan una célula adquieren la característica esencial de un sistema viviente: la
reproducció n.
3. Se sabe que los virus infectan cualquier célula incluso las células microbianas.
Viró fagos: virus infectan a otros virus.
4. Las partículas virales por lo general son pequeñ as y constan de una molécula de acido nucleico, ya
sea DNA o RNA, contenida en una capa proteínica o cá pside viral (tenida en una envoltura de lípidos,
proteínas y carbohidratos).
5. Las proteínas (glucoproteínas) de la cá pside determinan la especificidad de la interacció n del virus
con la célula hospedadora.
6. El á cido nucleico viral redirige la maquinaria enzimá tica del hospedador hacia funciones que tienen
que ver con la replicació n viral.
Priones
La forma celular de la proteína prió nica (PrPc) es codificada por el DNA cromosó mico del hospedador.
Procariotas
1. Las características principales que distinguen a las procariotas son su tamañ o relativamente pequeñ o,
casi siempre de 1 um de diá metro y la ausencia de una membrana nuclear.
2. La mayor parte de las células procariotas tienen un solo cromosoma.
Nucleoide: la regió n especializada de la célula que contiene al DNA y se puede observar con un
microscopio electró nico o un microscopio de luz después de someter a la célula a un tratamiento
especial para hacerlo visible.
Diversidad procariótica:
1. Las procariotas poseen relativamente pocos genes que permiten la adaptació n fisioló gica del
microorganismo a su ambiente.
2. Su principal fuente de energía para la vida es la luz solar.
Cianobacterias: bacterias azul-verde producen oxigeno que proporciona energía a través de la
respiració n en ausencia de luz.
Microorganismos aerobios: dependen de la respiració n en presencia de oxígeno para obtener
energía.
Microorganismos Anaerobios: utilizan aceptores de electrones distintos del oxigeno en la
respiració n, llevan a cabo fermentaciones de donde se obtienen la energía mediante la reorientació n
metabó lica de los sustratos químicos para el crecimiento.
Protistas
Algas:
Microorganismos que producen O2 como producto de la fotosíntesis. Un subgrupo importante de estos
microorganismos, las bacterias verde-azules o cianobacterias, son procariotas y ya no se llaman algas.
1. Esta clasificació n se reserva de manera exclusiva para los microorganismos eucariotas fotosintéticos.
2. Todas las algas contienen clorofila en la membrana fotosintética de su clotoplasto intracelular.
3. Unas algas son unicelulares, otras multicelulares muy grandes, otras producen toxinas venenosas para
los humanos y otras para los animales.
4. La marea roja producida por el dinoflagelado de la especie Gonyaulax, produce toxinas como
saxitoxina y gonyautoxinas, que se acumulan en los mariscos.
a. El consumo de estos mariscos produce intoxicació n paralítica por mariscos que puede
causar la muerte.
Protozoarios
1. Son organismos protistas unicelulares no fotosintéticos.
2. Los má s primitivos son los flagelados y se asemejan en muchos aspectos a algunos representantes de
las algas.
3. Es probable que los antecesores de estos fueran algas que se tornaron heteró trofas; las necesidades
alimentarias de estos se satisfacen con compuestos orgá nicos.
Hongos
1. Son protistas no fotosintéticos que crecen en forma de conjuntos de filamentos ramificados y
entrelazados (“hifas”) conocidos como micelios.
2. Los hongos que poseen micelios se denominan mohos.
3. Algunos tipos de hongos denominados levaduras no forman micelios.
Las subdivisiones de los hongos
Chitridiomycota
Zygomycota (Cigomicetos) Dependiendo de la
Ascomicota (Ascomicetos) reproducció n o su forma.
Basidiomycota (Basidiomicetos)
Deuteromicetos (Hongos imperfectos)
Mohos de fango
1. Estos microorganismos se caracterizan por la presencia, durante una fase de su ciclo vital, de una
masa multinucleada ameboide de citoplasma llamada sincicio.
Métodos ópticos
El microscopio de luz
1. Microscopio de campo brillante
2. Microscopio de contraste de fases
3. Microscopio de campo oscuro
4. Microscopio de fluorescencia
5. Microscopio diferencial de contraste de interferencia
Microscopio electró nico
Microscopio laser confocal
Microscopio de sonda de barrido
Núcleo
1. El nú cleo contiene el genoma de la célula.
2. Esta limitado por una membrana formada
3. La membrana nuclear muestra permeabilidad selectica por la presencia de poros, que consisten
en varias proteínas complejas cuya funció n es importar sustancias y extraer sustancias del nucléo.
4. Los cromosomas de la célula eucariota contienen macromoléculas de DNA lineal expuestas en una
doble hélice.
5. Bá sicas denominadas histonas
6. El nucléolo, un á rea rica en RNA que es el sitio de síntesis del RNA ribosó mico.
Estructura citoplásmicas
Capas superficiales
1. El citoplasma esta rodeado por una membrana plasmá tica compuesta por proteínas y fosfolípidos.
2. Muchos microorganismos eucariotas también tienen pared celular externa, que puede ser
compuesta por polisacá ridos como celulosa o quitina.
Organelos que participan en la motilidad
1. Muchos microorganismo eucariotas tienen organelos denominados flagelos o cilios
2. Los flagelos eucariotas surgen de la regiones polares de la célula y los cilios, de las células
eucariotas tienen la misma estructura bá sica y composició n bioquímica.
3. Compuestos por una proteína llamada tubulina
Es mas simple que la eucariota en todos los aspectos, con una excepció n: la envoltura celular es
mas compleja.
Nucloide
No tienen un nú cleo verdadero; almacena su DNA en una estructura conocida como nucleoide.
Estructura citoplátima
1. Carecen de plá tidos autó nomos, como la mitocondrias y cloroplastos; las enzimas de transporte de
electrones se localizan en la membrana citoplá smica.
2. Los pigmentos fotosintéticos(carotenoide, bacterioclorofina) de la bacterias fotosintéticas de
encuentran contenidos en sistemas de membrana intracitoplá smicas.
Envoltura celular
1. Las células procariotas está n rodeadas por una envoltura compleja en capas que didiere en
composició n entre los principales grupos
2. Tales estructulals protehen al microorganismo de entornos ambientales hostiles, como
osmolaridad extrema, químicos nocivos e invluso antibió ticos.
Membrana celular
A. Estructura:
La membrana celular bacteriana, también denominada membrana citoplá smica, compuesta
por fosfolípidos y proteínas le da característica a la bacteria para dif.
B. Funció n
Permeabilidad selectiva y transporte de solutos
Transporte de electrones y fosforilació n oxidativa en especies aerobias.
Excreció n de exoenzimas hidrolíticas
Transporte de enzimas y moléculas que participan en la biosíntesis de DNA polímeros de la
pared celular y lípidos de la membrana
Portar receptores y otras proteínas quimiotá cticas y otros sistemas sensiorales de
tranducció n.
Pared Celular
1. La pared celular bacteriana debe su resistencia a una capa de compuestos de diversas sustancias
como mureína, mucopéptidos o peptidoglucados(todos son sinó nimos)
2. La mayor parte de las bacterias se clasifica como grampositivas o gramnegativas con base de su
respuesta al procedimiento de tinció n de Gram
3. El procedimiento recibió su nombre por el histó logo, Hans Christian Gram, quien desarrollo este
procedimiento de tinció n diferencial en un intento para teñ ir la bacteria en los tejidos infectados.
4. La tinció n de Gram depende de la capacidad de ciertas bacterias (grampositivas) color violeta ( un
colorante de color violá nceo) ademá s de yodo después de un breve lavado con alcohol o acetona.
5. Las bacterias gramnegativas no retienen el complejo de colorante-yodo y se vuelven tranlucidas,
pero pueden volverse a teñ ir con safranina( un colorante de color rojo)
6. Las bacterias grampositivas adquieren un aspecto violá ceo bajo el microscopio, en tanto que las
bacterias gram negativas se ven de color rojo.
7. Cuadro 2-1 Compracion de las características de las bacterias grampositivas y gramnegativas. Pag
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A. Capa de peptidoglucanos
El peptidoglucano es un polímero complejo que consite de tres partes:
1. Estructura bá sica
2. Compuesta de moléculas alteradas de N-acetilglucosamina
3. Acido N-acetilmurá mico unidas por enlaces beta 1 → 4 y un grupo idéntico de
enlaces peptídicos cruzados.
Varian de una especie a otra
Las cadenas laterales tetrapeptídicas.
2. Polisacá ridos
Anosa
Arabinosa
Ramnosa
Glucosamina
1. Membrana externa
Es una estructura con bicapa cuya hoja interna tiene una composiscion simila a la de la
membrana celular.
Lipopolisacá ridoos
Proteger a la célula de sustancias nocivas
Porinas
2. Lipoproteína
Las molecilas poco comunes de lipoproteína unen la membrana externa con la capas de
peptidoglucanos
Es estabilizar la membrana externa y fijarla a la capa de peptidoglucano
M.tuberculosis
Contienen grandes cantidades de ceras
Hidrocarbonos ramificados complejos conocidos como ácidos micólicos.
La pered celular esta compuesta de peptidoglucanos y una bicapa lipídica asimétrica externa
Es una bicapa lipídica muy ordenada en la cual las proteínas se encuentran embebidas formando
poros llenos de agua a través de los cuales pasan con lentitud ciertos fá rmacos y nutrientes
La estructura hidró foba confiere a estas bacterias resistencia a muchos compuestos químicos
como detergentes y á cidos fuertes.
Si se introduce un colorante en estas células por un proceso de calentamiento breve o el
tratamiento con detergentes, no puede eliminarse con la aplicació n de á cido clorohídrico diluido,
como ocurre en otras bacterias.
Capsula y glucocáliz
Cá psula y capa mucílaginosa
Capas de polisacá ridos también se utilizan el término mas incluyente, glococalíz que se define
como el material encuentra fuera de la célula y que contiene polisacá ridos.
La capsula contribuye a la capacidad de invasió n de la bacteria pató gena
El glucocá liz participa en la adhesió n bacteriana S. Mutans
Adhiere estrechamente al esmalte de los dientes por medio de su glucocá liz
Puede participar en la resistencia a la desecació n
Flagelos
A. Estructura
Son apéndices fusiformes compuestos en su totalidad por proteína
Son ó rganos de locomoció n
Un flagelo bacteriano esta constituido por varios miles de moléculas de subunidades proteínicas
denominadas flagelina.
Pilosidades (fimbrias)
Tinción
Los colorantes sufren combinació n química con el protoplasma de la bacteria; si la bacteria no esta
muerta, el proceso de tinció n la destruye; por lo tanto, tal proceso es drá stico y puede producir
artefactos.
Los colorantes bá sicos: consisten de cationes teñ idos con un anió n incoloro.
Los colorantes á cidos: ocurre lo contrario de colorantes bá sicos.
Tinción de Gram
Una característica taxonó mica importante de las bacterias es su respuesta a la tinció n de Gram.
Las propiedades de tinció n de Gram parecen ser fundamentales, por que la reacció n de Gram se
correlaciona con muchas otras propiedades morfoló gicas.
Los procedimientos de tinció n de Gram
La razó n por la que es importante conocer estas diferencias mínimas es que cada organismo infeccioso:
Es indispensable contar con un vocabulario que permita comunicar las características singulares de los
organismos infecciosos a los estudiantes, microbió logos y al personal dedicado a la salud.
Con la finalidad de evitar el caos que sobrevendría sin las limitaciones de organizació n propias de la
TAXONOMÍA BACTERIANA.
Taxonomía bacteriana (del griego TAXÓ N=Organizació n), esto es la clasificació n de los microorganismos
en un sistema ordenado, que indica una relació n natural.
La primera palabra del nombre de una bacteria se escribe con mayú sculas
La segunda palabra del nombre de una bacteria se escribe con minú sculas
Principios de nomenclatura:
También se puede escribir de la siguiente manera:
En plural, en lugar del epíteto específico, por ejemplo: Canis sp. La abreviatura plural «spp.» se utiliza
generalmente para referirse a todas las especies individuales dentro de un género. Para una especie
concreta cuyo epíteto específico es desconocido o carece de importancia se utiliza «sp.».
Sp: no se ha determinado la especie
Spp: varias especies del mismo género.
LOS SELECTIVOS: son ú tiles para distinguir entre las bacterias presentes un una muestra clínica que
contiene numerosos microrganismos.
En vista de la diversidad de microorganismos que habitan en algunos sitos del cuerpo (piel, aparato
respiratorio, digestivo, vagina), se usan medios SELECTIVOS para eliminar o (reducir) el gran nú mero de
bacterias irrelevantes en estas muestras.
El fundamento de estos medios de cultivo es la adició n de una sustancia que inhibe de manera selectiva el
crecimiento de las bacterias irrelevantes, algunos ejemplos son:
2. Sales biliares: Selecciona bacterias Gram negativas intestinales e inhibe Gram negativas de la
mucosa y a la mayor parte de las Gram positivas.
No selectivos:
AGAR SANGRE Y AGAR CHOCOLATE: Son medios de cultivo COMPLEJOS Y NO SELECTIVOS,
facilitan el crecimiento de diversas bacterias.
El propó sito de ellos es cultivar tantas especies como sea posible, generando de esta manera
numerosos tipos de colonias bacterianas.
Medios diferenciales:
Son ú tiles para observar cambio de color producido por pigmentos característicos, con base en la
producció n de enzimas extracelulares, dicha actividad enzimá tica, puede identificarse al observar zonas
claras alrededor de las colonias cultivadas en presencia de sustratos insolubles (por ejemplo zonas de
hemó lisis en un agar que contiene eritrocitos) como agar sangre de carnero.
Microscopia bacteriana:
La tinció n de Gram junto con la visualizació n a través del microscopio de luz, es uno de los métodos má s
informativos para clasificar a las bacterias.
Constituye el primer paso para dividir a las bacterias con base en diferencias fundamentales en la
estructura de sus paredes celulares.
La pregunta que todos nos hacemos al hacer un Gram es:
¿Son Gram positivo o Gram negativo?
PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
PRUEBA DE LA OXIDADSA: Permite distinguir entre las Enterobacterias de otros bacilos
Gramnegativos
PRUEBA DE LA CATALASA: Diferencia entre los Cocos Gram positivo (los cuales son catalasa
positivo), estreptococos son catalasa negativo. Sirve para clasificar a los microorganismos por
la presencia o ausencia de una enzima CATALASA.
Diferencia a los estafilococos de los estreptococos
Staphylococcus aureus catalasa positivo
PRUEBA DE LA COAGULASA: La coagulasa es una proteína, da como resultado la formació n de
un coá gulo visible. Se utiliza para identificar Staphylococcus aureus de otras especies de
Estafilococos.
La coagulasa puede hacerse en lá mina o en tubo
Resultados
Positivo: La formació n de un coá gulo (Staphylococcus aureus)
Negativo: No se observa formació n de coá gulo
(Staphylococcus epidermidis).
Taxonomía numérica:
API: Analytical Profile Index (API), es un método que se utiliza para identificar un gran
nú mero de microorganismos. Consta de varias tiras de plá stico, cada una de las cuales tiene 20
compartimientos pequeñ os que contienen las pruebas bioquímicas.
Los resultados de las pruebas con el API permiten identificar a casi todos los grupos de
bacterias que se pueden cultivar y má s de 500 especies. Las desventaja es que este sistema es
ESTÁTICO, no toma en cuenta la evolució n de las bacterias ni el descubrimiento sistemá tico
de bacterias pató genas nuevas.
DEMUESTRA COMO PUEDEN IDENTIFICARSE LAS BACTERIAS POR MEDIO DE PRUEBAS
Curva de proliferació n:
• FASE DE LATENCIA
Las células, que carecen de metabolitos y enzimas como resultado de las condiciones
desfavorables que existieron al final de su cultivo previo), se adaptan a su medio ambiente, las
enzimas se acumulan y alcanzan concentraciones que permiten reiniciar el crecimiento.
• FASE EXPONENCIAL
Las células se encuentran en estado de equilibrio
• FASE ESTACIONARIA
El agotamiento de nutrientes o la acumulació n de productos tó xicos interrumpen el crecimiento.
• FASE DE MUERTE
Después de cierto tiempo en la fase estacionaria, la viabilidad de las células comienza a disminuir
a una etapa definida, la tasa de muerte incrementa hasta que alcanza un nivel equilibrado
¿CÓ MO REALIZAR LA TOMA DE MUESTRA PARA UN CULTIVO PROVENIENTE DE UN PACIENTE?
RESUMEN
COLORANTES COLORANTES
Cristal violeta Carbol-fucsina
Lugol CALOR
Alcohol-Acetona Alcohol-á cido
Safranina Azul de Metileno
MEDIOS DE
CULTIVO AGAR MAC CONKEY
SELECTIVOS
AGAR SANGRE CNA
API
DIFERENCIALES
AGAR MAC CONKEY