ESCUELA INTERNACIONAL

DE CIENCIAS DE LA SALUD

DOCENTE:
Q.F.B Rubén Córdova Uscanga

ASIGNATURA:

BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR

PRACTICA No.3: “Determinación de

colesterol y triglicéridos séricos”
INTEGRANTES:
Naranjo Hernández Tania Citlalli
Sánchez Mendoza Héctor Miguel
Moo Salvador Karen Aidé
Méndez García Víctor Hugo
Barajas Farfán Erick Gabriel
Bautista Méndez Andres Daniel

Semestre: 1ro Grupo: “A”

Lic. Médico Cirujano

Fecha de entrega: 06/Febrero/ 2022 1

 “Determinación de colesterol y triglicéridos séricos”

OBJETIVO GENERAL: Conocer la determinación de glucosa capilar y sérica comparando los

valores de cada una, para su diagnóstico y lectura.
OBJETIVO ESPESIFICO:
 Obtener las aptitudes para identificar los valores normales y alterados de glucosa
sanguínea.
 Obtener el conocimiento básico para la interpretación de resultados de valores dados
por prueba de glucosa sanguínea.
 Conocer y aplicar la metodología para la toma de muestra sanguínea por punción
venosa.
1. Definir y conocer la técnica de toma de muestra de glucosa capilar 2. Explicar la importancia
de este procedimiento y su aplicación en la práctica clínica 3. Conocer el material que se requiere
y las medidas de seguridad que debe tener al realizar el procedimiento 4. Llevar a cabo una
buena relación con paciente (presentación, expl icar procedimiento y mencionar complicaciones
del mismo) 5. Mostrar la técnica adecuada para la realización de este procedimiento 6. Conocer
las indicaciones y posibles efectos adversos de este procedimiento.
INTRODUCCION: Los niveles de glucosa sanguínea son muy importantes y la glucosa es la
principal fuente de energía para el desarrollo de la actividad metabólicas y de correcto equilibrio
fisiológico, su principal fuente de obtención es a través de la alimentación y se almacena
principalmente en hígado, el cual tiene el papel importantísimo de mantener los niveles de
glucosa en sangre estables (Glucemia) , un hormona que ayuda a que los niveles se mantengan en
equilibrio es la insulina secretada por páncreas, la deficiencia de esta hormona hace que la
glucosa se acumule algo que trae como consecuencia muchas complicaciones clínicas he aquí la
importancia de saber la fundamentación y metodología de una correcta realización de toma de
muestra de glucosa sanguínea ya que será de gran importancia para la corroboración de
diagnósticos de enfermedades o trastornos metabólicos, ejemplo tal es el de la diabetes mellitus la
cual incapacita al cuerpo para la óptima metabolización de azucares, proteínas y grasas.
Los niveles normales de glucosa en la sangre según la American Diabetes Association
(1) un examen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100 mg/dl (3.9 y 5.6 mmol/l) se
considera normal. Si se realiza aleatoriamente una prueba de glucemia los niveles diferirán
dependiendo el tiempo transcurrido a la última comida la mayoría de las veces, el nivel de
glucemia estará por debajo de 125 mg/dl (6.9 mmol/l),
La OMS maneja un rango de valores de glucosa normal en estado de ayuno de 70 mg/dl y 110
mg/dl.

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 Determinación de colesterol y triglicéridos séricos

Cuanto mayor cantidad de glucosa exista en sangre, se tiende a excretar por la orina, pero la
determinación en orina es muy inexacta así que el resultado de muestra sanguínea es más
concreta y confiable.
FUNDAMENTOS: La determinación de glucosa se lleva a cabo después de la oxidación
enzimática en presencia de glucosa oxidasa. El indicador colorimétrico es la quinoeimina, la cual
se forma a partir de peróxido de hidrógeno, 4 – aminofenazona y fenol bajo la actividad catalítica
de la peroxidasa (Reacción de Trinder).
La glucosa Oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a acido glucónico. El peróxido gde
hidrogeno (H2O2) Producido se detecta mediante un aceptor cromogénico de oxígeno, fenol, 4-
aminofenazona (4-AF), en presencia de la peroxidasa (POD)
B-D-Glucosa +O2+H2O GOD
Acido Glucónico + H2O2
H2O2+Fenol+4-AF POD
Quinona + H2O
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de glucosa presen te en la
muestra ensayada.
Significado clínico y/o utilidad diagnóstica: La glucosa es la mayor fuente de energía
para las células del organismo; la insulina facilita la entrada de glucosa en las células. La diabetes
mellitus es una enfermedad que se manifiesta por una hiperglucemia, causada por un déficit de
insulina. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de
laboratorio.
Para toma de muestra de glucosa capilar según sus antecedentes es un método enzimático
específico para la determinación de niveles de glucosa en sangre, se realiza para control de
glucemias en pacientes diabéticos o para método consultivo de detección de diabetes. La
glucemia capilar es una prueba en la que se evalúa el nivel de glucosa del momento por medio
de una pequeña gota de sangre y un aparato para la lectura de la concentración de glucosa en la
sangre. No se debe utilizar la glucemi a capilar para el rastreo de la diabetes en la población sana.
Las variaciones en resultados pueden deberse a distintos aspectos como: manos
inadecuadamente limpias, almacenamiento inadecuado de las tiras, suciedad en el aparato, manos
muy frías, etc. La glucemia en los capilares de los dedos suele arrojar resultados más altos de los
reales.
Cuando se tiene un exceso de glucosa en la sangre por arriba del límite superior normal para una
edad (valores de referencia), se presenta la hiperglucemia. Aunque los valores altos de glucosa
sérica en ayunas se relacionan con suma frecuencia con la presencia de diabetes sacarina, el
número de enfermedades y trastornos fisiológicos que pueden llevar a incrementos mayores es
vasto. El aumento de la concentración de glucosa sérica se da en los siguientes casos: respuesta a
la tensión, enfermedad de Cushing, diabetes mellitus, acromegalia, hipertiroidismo, pancreatitis
crónica, administración de algunos fármacos como diuréticos clorotiacídicos porque suprimen la
secreción de insulina, coma hiperosmolar no cetónico (referencia bibliográfica). La
hipoglucemia es

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 Determinación de colesterol y triglicéridos séricos

un trastorno caracterizado por una concentración de glucosa en ayunas, menor al límite inferior
normal para el grupo de edad (valores de referencia) y esto sucede en los siguientes casos:
enfermedad hepática, desnutrición, posgastrectomía, tolerancia deficiente a la glucosa,
administración excesiva de insulina, hipoglucemia funcional o espontánea, ingestión de alcohol
en ayunas (referencia bibliográfica). Debido a que la concentración de glucosa sérica por lo
general se vuelve anormal sólo cuando hay un trastorno grave de esta interacción , el verificar la
glucosa sérica ayuda a evaluar la función e integridad del sistema. La prueba de glucosa en
ayunas evalúa de modo aproximado la capacidad del cuerpo para regular la glucosa y
proporciona información acerca de la clase de anormalidad, si es que la hay. No se tomarán
alimentos ni bebidas, excepto agua, cuando menos por ocho horas antes de tomar la muestra. La
diabetes es una enfermedad en la que los niveles de glucosa (azúcar) de la sangre están muy
altos. La glucosa proviene de los alimentos que consume. La insulina es un a hormona que ayuda
(y regula) a que la glucosa entre a las células para suministrarles energía. En la diabetes tipo 1, el
cuerpo no produce insulina. En la diabetes tipo 2, la más común, el cuerpo no produce o no usa la
insulina de manera adecuada. Sin suficiente insulina, la glucosa permanece en la sangre.
Mencionar el objetivo o justificación.
MATERIALES Y EQUIPOS REQUERIDOS
Toma de muestra de Glucosa capilar

 Frasco con reactivos.

 Torundas alcoholadas.
 Lancetas o agujas
 Dispositivo de punción
 Depósito de RPBI
 Glucómetro
Toma de muestra de Glucosa sérica

Material:
Reactivos: Equipo:
 Tubos de ensaye
 Pipetas serológicas  Reactivo enzimático  Espectrofotómetro
de glucosa de 490-550 nm.
 Micropipeta  Suero control  Centrifuga.
 Puntas para micropipeta.  Vortex
 Suero no
 Gradilla hemolizado
 Celdilla para  Agua destilada
espectrofotómetro

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 Determinación de colesterol y triglicéridos séricos

PROCEDIMIENTO:
1.- Seguidamente de haber recolectado la muestra de glucosa capilar y sérica, de anotar los
resultados obtenidos.

2.- Se deja reposar el tubo con la sangre en la gradilla hasta que esta se coagule el tiempo
estimado es de 10 a 15 minutos.
3.- Seguidamente se llevó a la centrifugadora para separar el suero del plasma.

4.- Pipetear con la pipeta automática en cada tubo de ensaye recolector:

Blanco St Suero (problema)
Reactivo (glucosa 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
oxidasa)
st 10 microlitros
Suero problema 10 microlitros

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 Determinación de colesterol y triglicéridos séricos

5.- Agitar y Reposo 20 minutos

6.-Condiciones del ensayo:

Longitud de onda.......................................................................510 nm (490-550)
Cubeta..........................................................................................1cm paso de luz
Temperatura:................................................................................37ºC/ 15-25ºC
7.- Ajustar el espectrofotómetro a
cero frentes agua destilada.

8.- Mezclar e incubar 10 minutos a 37ºC o 20 min a temperatura ambiente (15-25 ºC).

9.- Leer en el espectrofotómetro a 510 nm

10.- Leer la absorbancia (A) del patrón y la muestra, frente al Blanco de reactivo. El color es
estable como mínimo 30 minutos.

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 Determinación de colesterol y triglicéridos séricos

RESULTADOS:

Cálculos
Absorbancia muestra
------------------------------ x Concentración control = mg/dL de glucosa
Absorbancia control

.576
------------------------------ x 99 = 108 mg/dL de glucosa x 0.0555= 5.9994 mmol/L
.528
Valores de referencia
 Suero o plasma 60 – 110 mg/dL = 3.33 – 6.10 mmol/L
INTERPRETACION: Se encuentra en los límites de los valores normales.
a) Una concentración alta de glucosa en sangre se llama hiperglucemia.
b) Una concentración baja de glucosa en sangre se llama hipoglucemia.
La determinación de glucosa se lleva a cabo después de la oxidación enzimática en presencia de
glucosa oxidasa. El indicador colorimétrico es la quinoeimina, la cual se forma a partir de
peróxido de hidrógeno, 4 – aminofenazona y fenol bajo la actividad catalítica de la peroxidasa
(Reacción de Trinder).
Glucosa + O2 + H2O GOD
H2O2 + Glu conato Quinona
2H2O2 + Fenol + 4-AF POD
+ 4H2O.
GOD = Glucosa oxidasa

POD = Peroxidasa 4-AF = 4-aminofenazona.

Las concentraciones altas de glucosa pueden sugerir una diabetes. Cada paso seguido en la
metodología de la prueba de concentración de glucosa sanguínea es importante ya que cualquier variación
en esta diferirá en los resultados finales que serán cruciales para determinar o confirmar el diagnóstico
final del paciente. La centrifugación ayudo a separar la composición sanguínea para así extraer el plasma
necesario para la determinación de glucosa en sangre. Para su posterior evaluación en espectrofotómetro el
cual nos dio un dato de absorbancia que posteriormente utilizamos para calcular el valor de glucosa en
sangre con la formula dada.
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 Determinación de colesterol y triglicéridos séricos

Cuando la glucosa en plasma está por debajo de 50 mg/dl es una condición muy seria, la
hiperglucemia es muy perjudicial a la larga, mientras que la hipoglucemia por un corto periodo
puede llegar a ser fatal.
Para ser considerada un no-diabético la Asociación Americana de la Diabetes (1) recomienda un
nivel de la glucosa de menos de 180 mg/dl (10 mmol/l) después de una comida y un nivel de
glucosa en sangre de 90-130 mg/dl (5 a 7,2 mmol/l) antes de la comida o en ayuno.
El paciente de nuestra muestra presento un valor de glucosa en sangre de 60 – 110 uno de los
factores que influyo a este resultado es el estado de ayuno en el que se encontraba sin embargo
está en los estándares normales (Normoglucemia) por lo cual se descartaría cualquier afección
referente a anormalidades metabólicas si se presentara un nivel mayor en un rango de 100 a 125
mg/dl (5.6 a 6.9 mmol/l) representaría una alteración de glucosa en ayunas lo cual podría ser
atribuible a una prediabetes esto sería motivo para seguir monitoreando su glucosa en sangre ya
que esto nos daría motivos para pensar que existe riesgo a desarrollar diabetes tipo 2.
Un nivel de 126 mg/dl (7mmol/l) o mayor casi siempre significa padecimiento de diabetes en el
paciente se recomienda la realización de más pruebas para confirmar el diagnóstico como una
prueba de tolerancia a la glucosa sin embargo esto ya representa una anomalía grande en los
rangos de glucosa.
Un nivel superior a 200 mg/dl (11 mmol/l) en un paciente que no se encuentra necesariamente en
ayunas significa la presencia de diabetes se hace hincapié que debería ser sometido a otra prueba
para la confirmación del diagnóstico preciso.
Problemas que pueden provocar un nivel de glucosa en sangre superior a lo normal son:
hipertiroidismo, cáncer pancreático, pancreatitis, estrés debido a traumatismos, tumores,
Niveles de glucosa en sangre inferiores a lo normal (Hipoglucemia): hipopituitarismo,
hipotiroidismo, insulinoma, ayuno prolongado, presencia de insulina o medicamentos para la
diabetes, ejercicio vigoroso
CONCLUSION: La cuantificación de glucosa sérica, es una de las pruebas más utilizadas por
los servicios de salud hoy en día, por lo cual resulta importante conocer sus técnicas,
aplicaciones, así como fundamentos para la correcta interpretación y utilización de las mismas, ya
que al haber diversos tipos de pruebas se infiere que no todas se aplican en todos los pacientes.
Además, a la luz de todos los mitos que existen a la hora del realizar un diagnóstico de Diabetes,
la cual es muy común en México y el mundo, es necesario saber determinar cuál de las técnicas
de determinación de glucosa es la más adecuada para un diagnóstico veras y oportuno.
BIBLIOGRAFIA:
https://docs.bvsalud.org/biblioref/2018/05/883397/abc-glucosa.pdf
Nelson, D. L., Cuchillo Foix, C. M., Lehninger, A. L., & Cox, M. M.
(2005). Lehninger: Principios de Bioquímica (4a. ed.). Barcelona: Omega.