Metodología de Extracción de Celulosa y Almidón

Cesar Macias Escamilla Biotecnología de Polímeros

Ing. Bioquimica Edgar García Hernández

METODOLOGIA DE EXTRACCION DE CELULOSA Y ALMIDÓN

CELULOSA

El enfoque que se le dará a la celulosa será de forma bacteriana, en el cual se

determinará los métodos de extracción mas convenientes para la realización de
una práctica.

La celulosa bacteriana es mas conocida por su extracción por parte de las

bacterias y también, de las características fisicoquímicas que esta misma posee
por la forma de extracción y también de la especie que se ocupó. Aunque algunas
fuentes citadas tienen un promedio de las propiedades, el método de extracción es
importante también para determinar estos parámetros.

Por lo tanto, se conocen varios tipos de extracción y los que considero importantes
son los siguientes:

- Obtención de celulosa bacteriana en cultivo de microalgas inmovilizadas en

alginato [1]:
Este método consistió de lo siguiente:
Se usó la cepa Desmodesmus
Se cultivó en Medio BBM ( Bold´s basal Medium )
En condiciones de: Temperatura 29 °C. Intensidad luminosa 95
micromoles/s. Periodos de luz de 12:12 (Luz:oscuridad)
Inmovilización de cultivo:
1.- Elaboración de solución de alginato de sodio (3%) en agua.
2.- Se calienta la solución a 60°C en agitación constante en una parrilla
hasta disolverse
3.- Se deja enfriar la mezcla a temperatura ambiente
4.- Se agregan 10 ml de cultivo de microalgas al alginato
Elaboración de medios de cultivo de obtención CB (Celulosa bacteriana)
1.- Se preparan 1,800 ml de m.c de infusión de té negro (6g/L) y azucar
(114 g/L)
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2.- Se ajusta pH con ácido acético glacial hasta el pH 3 – 4
3.- Se miden los grados brix de la infusión con un refractómetro
Establecimiento de co-cultivos
1.- Se elabora un cultivo control
2.- Se agregan 150 ml de infusión a frascos esterilizados
3.- Se usa el inoculo SCOBY (Cultivo simbiótico de bacterias y levaduras)
en diferentes muestras a 1.5 ml. Se hacen 4 cultivos para ver sus
resultados con las sigs. concentraciones
C = Solo Scoby
SAV = 5 ml aloe vera + scoby
SA = 100 esferas de algas inmovilizadas +scoby
SAAV= 100 esferas + 5 ml de aloe vera + scoby
4.- Se mantiene con temperatura de 23°C , Intensidad luminosa de 95
micromoles/m^2 * s, fotoperiodos de 12:12 (L:O) y revisados por 3 semanas
5.- Pasando las 3 semanas. A las algas inmovilizadas de les realiza un
corte transversal para comprobar el estado que se encuentra
6.- Pasando 3 semanas, se pesa y mide la CB obtenida después de una
deshidratación de 24 horas.

También hay otros métodos de obtención como lo son:

Cultivo Estático: Es una técnica de fermentación utilizada en el cual se obtiene 1%

del peso total de celulosa en su elaboración, pero en este tipo de método
mantiene su actividad y producción de celulosa con las diferentes cepas que se
usen en la fermentación. Su principal inconveniente es l tiempo y el área
superficial que necesita por la disponibilidad de oxigeno que exige su producción.
La ventaja considerable es que el método es ocupado para producción en gran
escala. [2]

Cultivo agitado: Es una técnica de fermentación utilizada donde la celulosa sale de

forma amorfa en sus fibras, pero requiere de un reactor que tenga condiciones de
operación necesarias. El inconveniente que tiene es la baja productividad,
impidiendo un escalamiento conciso. [2]
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Una novedosa forma de extraer celulosa fue encontrada a partir de kombucha
(hongo de Té):

La metodología que se empleó fue la siguiente: (Los experimentos se realizan por

cultivo 3 veces)

1.- Se prepara un inoculo de Kombucha y 20 g/L de sacarosa

2.- Los cultivos se hacen de 0.21/cm(prepacion área/volumen)

3.- Se preparan 4 medios diferentes: 1) YNB ( Levadura de base nitrogenada), 2)

Té Negro 3) Fertilizante 4) M & S

4.- En los medio 1, 3 y 4 se ajusta C/N a 10 ( Carbono/nitrógeno)

5.- Se incuban los medios a 30°C por 17 días.

6.- Las CB que se obtienen se lavan con agua, se sumergen en etanol 70% y se
secan a 30°C por 5 días.

7.- La CB que se obtiene por té negro se blanquea durante 3 minutos con Cloro al
10% y se enjuaga con abúndate agua.

ALMIDÓN:

Se conoce que el almidón en fuente de varios autores, es un carbohidrato

encontrado en todas las dietas, ya que es una fuente de energía constituida por
amilosa ( 18- 30 %) y amilopectina (70 – 80 %).

Para la obtención de almidón se ocupa la amilopectina en producción industrial por

varios tubérculos. También, este polisacárido ramificado posee una diversidad de
usos por sus características que tienen capacidades de formar geles, también en
aplicaciones con formulaciones distintas para industrias alimentarias y no
alimentarias.

Los métodos de extracción que considere que era los mas sencillos para obtener
al almidón fueron por lo siguiente: Utilización de un tubérculo comercial,
simplicidad, fácil observación del almidón y no muy complejo en su obtención
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El primer método va de lo siguiente [4]:

Obtención de almidón:

1.- Lavar el tubérculo de con abundante agua y jabón, después se pela y se ralla
con un rallador hasta obtener una pulpa o ralladura fina, todo se almacena en un
vaso de cristal o vaso de precipitado

2.- Añadir agua fría hasta doblar el volumen y agitarse cada 5 minutos por 30
minutos, después fíltrelo con una gasa doble o un paño de cielo a otro vaso de
cristal o vaso de precipitado por 30 minutos hasta que se mire una capa blanca en
el fondo por sedimentación.

3.- Una vez sedimentado, se descarta el sobrenadante sin dejar tirar lo blanco del
fondo del vaso, agregue mas agua y deje reposar.

4.- Ocupe un decantador para quitar el agua de sobrenadante y solo dejar lo

blanco del vaso mas aislado.

5.- La capa blanca es el almidón, extiéndalo en plato plano o una caja Petri y
déjelo reposar por una hora en el sol para que se seque.

Comentarios: Este procedimiento es sencillo, pero es uno de los mas utilizados en

el laboratorio.

Segundo método de extracción [5]:

1.- Lavar el tubérculo de con abundante agua y jabón, después se pela y se ralla
con un rallador hasta obtener una pulpa o ralladura fina, todo se almacena en un
vaso de cristal o vaso de precipitado para extraer el almidón.

2.- Filtrarse el almidón de la celulosa con un tamiz de fibra en otro recipiente para
después ponerlo en una probeta y se deja en reposo por 2 horas de reposo para
hacerse un lavado y sedimentarse el mismo tiempo.
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3.- Se separa el almidón de todo el sobrenadante del agua y se lleva a una
cámara de secado por aire caliente por 1 hora o hasta que el almidón se seque
por completo
4.- Una vez seco, se muele el almidón para obtener el polvo del mismo y se
procede a hacer un tamizado del mismo para tener un tamaño de partícula
deseado.

Comentarios: Este procedimiento se ocupa una cámara de secado por aire

caliente como optimización en el proceso de secado.

Referencias:
[1]: Barroeta Bonilla D. (2019) “OBTENCIÓN DE CELULOSA BACTERIANA
EN COCULTIVO DE MICROALGAS INMOVILIZADAS EN ALGINATO”
(Revista: ACONTACS Vol. 2 Ed. 2019) Consultado de: https://www-
optica.inaoep.mx/~tecnologia_salud/acontacs/articulos/2019/MyT2019-170-
obtencion_de_celulosa_bacteriana_mediante_el_co-
cultivo_simbiotico_de_algas_inmovilizadas.pdf
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[2]: Carreño Pineda L. Dary (2012) “Técnicas de fermentación y
aplicaciones de la celulosa bacteriana: una revisión “ (Revista: Ingenieria y
Ciencia Vol.8 n°16 pp. 307-335) Consultado en:
http://www.scielo.org.co/pdf/ince/v8n16/v8n16a12.pdf
[3]: Gutiérrez Castañeda J. (2015) “PRODUCCIÓN DE CELULOSA
BACTERIANA A PARTIR DE KOMBUCHA (HONGO DEL TÉ) USANDO
DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO” ( Revista: XVI Congreso Nacional de
Biotecnología y Bioingeniería. Celebrado en Guadalajara) Consultado en:
https://smbb.mx/congresos%20smbb/guadalajara15/PDF/XVI/trabajos/XI/
XIC-02.pdf
[4]: Practica de Laboratorio, Universidad de Sonora. Lic. Químico En
alimentos (Practica #3 “Obtención de Almidón”, 2021) Consultado en:
https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-de-sonora/bioquimic
a/practica-3-obtencion-de-almidon/12463239
[5]: Apaza Canqui Erasmo A. (2021) “Obtención de Almidón” (Practica:
“Obtención del almidón de la papa) Consultado en:
https://www.studocu.com/pe/document/universidad-nacional-jorge-basadre-
grohmann/quimica-de-los-compuestos-organicos-i/informe-2-obtencion-de-
almidon-tecnologia-de-los-alimentos/20425490
[6]: Medina, Carlos, Paredes, Alison, Rodríguez, María E, Moreno, Mario,
Belén-Camacho, Douglas, García, David, & Ojeda, Carlos. (2010).
Evaluación de dos métodos de extracción de almidón a partir de cotiledones
de mango. Bioagro, 22(1), 67-74. Recuperado en 13 de octubre de 2022,
de: http://ve.scielo.org/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S131633612010000100009&lng=es&tlng=es.