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Página Principal / Mis cursos / Lab IV / 25 al 29 de octubre / MÓDULO 6_AUTOEVALUACIÓN

Comenzado el Saturday, 6 de November de 2021, 12:46


Estado Finalizado
Finalizado en Saturday, 6 de November de 2021, 14:38
Tiempo 1 hora 52 minutos
empleado
Calificación 6,00 de 7,00 (86%)

Pregunta 1
Correcta

Puntúa 1,00 sobre 1,00

Se realizó un
protocolo de purificación del fosfolípido fosfatidiletanolamina (PE) a partir
de yema de huevo. Como sustancia
patrón se eligió cuantificar fosfolípidos
totales. Los datos de purificación fueron los siguientes:

Pasos de purificación Fosfolípidos PE Volumen del Fosfolip. PE total CE E


(mg/mL) preparado Total (mg) (mg)
(mg/mL)

1. Yema de huevo sin tratar 52 10 35 mL        

2. Partición de Folch 55 13 25 mL        

3. Separación por 110 56         5


 mL        
cromatografía
preparativa

Indique la afirmación CORRECTA.

Seleccione una:
a.
El %R de PE fue
de 18%.

b. Al finalizar la
purificación la CE de PE fue de 2,6.

c. El E de PE del
proceso completo de purificación fue de 0,5.

d. La separación
cromatográfica logró un mejor  Verdadero: la separación cromatográfica logró un E = 2,16 con
enriquecimiento en comparación con el paso
anterior respecto al paso anterior, mientras que la partición de Folch
(partición de Folch). sólo logro un E= 1,23.

Respuesta correcta
La respuesta correcta es:

La separación
cromatográfica logró un mejor enriquecimiento en comparación con el paso
anterior (partición de Folch).
Pregunta 2
Correcta

Puntúa 1,00 sobre 1,00

Se requiere purificar la enzima Catalasa a partir


de extracto de fruta para uso industrial donde se necesita un gran rendimiento.
Tanto
la papaya como el ananá presentan estas enzimas que necesitamos.
Procesamos 100 mL de ambas materias primas mediante
precipitación por punto
isoeléctrico (PI) y obtenemos 2 mL del producto con las características que se
muestran en la tabla.
Considerando que las proteínas totales serán nuestro
mayor contaminante ¿Cuál jugo nos conviene utilizar? Indique la afirmación
correcta.
 

Material
de partida (100 mL) Jugo de
ananá Jugo de
papaya

Actividad enzimática (U/mL) 350 820

Proteínas totales (mg/mL) 5,3 2,4

Luego de
precipitación por PI (2    
mL)

Actividad enzimática (U/mL) 15500 3250

Proteínas totales (mg/mL) 29,7 70,6

Seleccione una:
a. No elegiría
purificar la enzima a partir del ananá ya que el producto final no alcanza el
70% de recuperación.

b. Elegiría
purificar la enzima a partir de  Verdadero: a partir del jugo de ananá se obtuvo un producto con un %R =
ananá ya que obtengo mayor %R y 88,6% y una AE (actividad específica) = 522 U/mg de proteina total, mientras
mejor pureza
que con el jugo de que del jugo de papaya se consiguió un %R = 8% y un producto con una AE =
papaya.
46 U/mg proteina total.

c. En
ambos jugos se obtiene similar E, pero elijo la papaya ya que tiene mayor
cantidad de U iniciales.

d. Elegiría
purificar la enzima a partir de la papaya ya que mediante precipitación por
punto isoeléctrico se obtiene el mejor
enriquecimiento (E).

Respuesta correcta

La respuesta correcta es: Elegiría


purificar la enzima a partir de ananá ya que obtengo mayor %R y mejor pureza
que con el jugo de
papaya.
Pregunta 3
Correcta

Puntúa 1,00 sobre 1,00

Un estudiante necesita comparar la eficiencia de


purificación de dos métodos (M1 y M2) para la purificación de colesterol a
partir de yema de huevo y decide utilizar como patrón los lípidos totales de
cada una de las fracciones. Indique la afirmación
CORRECTA:
 

Seleccione una:
a. Debería calcular la cantidad específica (CE),
tomando como patrón lípidos totales en la preparación inicial de yema de huevo.

b. Debería calcular la relación entre la cantidad de


colesterol en la preparación final por el método M1 / el colesterol en la
preparación por M2.

c.
Debería cuantificar el colesterol en la muestra original y en la
preparación final y obtener el porcentaje de recuperación final
(%R) para M1 y
M2 y compararlos.

d. Debería obtener la relación entre el CE de


colesterol en la  Verdadero: la forma correcta de comparar la eficiencia de
preparación final / la CE de colesterol en la muestra purificación de dos procesos es comparando su
original
para cada método y compararlas. enriquecimiento (E).

Respuesta correcta

La respuesta correcta es:

Debería obtener la relación entre el CE de


colesterol en la preparación final / la CE de colesterol en la muestra original
para cada
método y compararlas.
Pregunta 4
Incorrecta

Puntúa 0,00 sobre 1,00

En relación a la purificación de ADN plasmídico, indique la afirmación CORRECTA:

Seleccione una:
a.  Falso: en una extracción de este tipo la fase orgánica, rica en cloroformo, se
Luego de la extracción y partición con
encuentra como la fase inferior de la partición, concentrando el material
cloroformo la
fase superior contiene los
hidrofóbico como los lípidos. En la fase superior acuosa se encontrará el ADN
lípidos bacterianos.
plasmídico.

b. La lisis
alcalina parcial y controlada permite que solamente se libere el ADN genómico.

c.
La
utilización del isopropanol permite precipitar el ADN plasmídico.

d. La utilización del etanol permite precipitar el ADN


plasmídico dejando en solución al ARN.

Respuesta incorrecta.

La respuesta correcta es:

La
utilización del isopropanol permite precipitar el ADN plasmídico.
Pregunta 5
Correcta

Puntúa 1,00 sobre 1,00

Se analizó un preparado de un plásmido mediante electroforesis en gel de


agarosa. Una fracción de dicho plásmido fue tratado con la
enzima de
restricción BamHI y otra fracción con la enzima Pstl. Teniendo en cuenta el
patrón de bandas que se muestra en la figura a
continuación indique la
afirmación CORRECTA.

Seleccione una:
a. La
enzima BamHI muestra solo dos sitios de restricción en este plásmido, por ello
muestra dos bandas.

b. El
plásmido sin tratar muestra impurezas en forma de tres bandas.

c. Los
plásmidos cortados con PstI muestran una banda que contiene una única fracción
de ADN.

d. La enzima PstI mostró la presencia de dos  Verdadero: el gel muestra una banda de la mitad del PM del plásmido. Por
sitios
de restricción en este plásmido.
lo tanto, esa banda corresponderá a dos fragmentos del mismo tamaño
producidos por dos cortes equidistantes de la enzima en el plasmido.

Respuesta correcta
La respuesta correcta es: La enzima PstI mostró la presencia de dos sitios
de restricción en este plásmido.
Pregunta 6
Correcta

Puntúa 1,00 sobre 1,00

En un laboratorio
se desea purificar un fragmento lineal de ADN genómico (marcado como X en la
ilustración), extraído
mediante el uso de la enzima de restricción EcoRI y que contiene sitios de
restricción para las enzimas Kpnl y BamHI. El mapa
de restricción de dicho
fragmento se muestra abajo, donde se destaca en gris la localización del fragmento
de interés (X). Se
sometió el fragmento a diversos tratamientos y se analizó
por electroforesis en gel de agarosa. Basado en los resultados que
se muestran
a continuación, indique la afirmación CORRECTA:

Seleccione una:
a.
La muestra analizada en el carril
A corresponde al plásmido sin tratar.

b. La muestra analizada en el carril


B  Verdadero:  en el carril A se obserban dos bandas que corresponden a dos
fue tratada con las enzimas EcoRI y fragmentod de aproximadamente a 4 y 3 kB.  Por lo tanto, éstos han sido
BamHI. extraido del genoma total mediante dos cortes de la enzima EcoRI y dividido en
dos fragmentos por la enzima BamHI.

c. La muestra analizada en el carril


C evidencia contaminación con ARN.

d.
El fragmento de interés no se ha
podido purificar por este método a partir de ninguno de los preparados.

Respuesta correcta
La respuesta correcta es:

La muestra analizada en el carril


B fue tratada con las enzimas EcoRI y BamHI.
Pregunta 7
Correcta

Puntúa 1,00 sobre 1,00

En un práctico de laboratorio se desarrolló la


purificación de un plásmido a partir de un cultivo bacteriano y se analizó el
producto de la purificación mediante electroforesis en gel de agarosa, según
muestra la fotografía que se muestra a
continuación. Indique la afirmación
CORRECTA:

Seleccione una:
a. La fotografía muestra bandas
brillantes que corresponden a la autofluorescencia de los ácidos nucleicos.

b.
La banda C muestra tres bandas
que corresponden a tres plásmidos con distinta relación carga/masa.

c.
En el carril D se observa una
sola banda, que puede ser el producto de la digestión de la muestra corrida en
C con la enzima
ligasa.

d. El carril B muestra una gran cantidad


de ácidos nucleicos de bajo peso molecular que pueden corresponder  Verdadero
a ARN
presente en la muestra.

Respuesta correcta

La respuesta correcta es:

El carril B muestra una gran cantidad


de ácidos nucleicos de bajo peso molecular que pueden corresponder a ARN
presente en la
muestra.

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