Marco Teórico

Herceptin contiene la sustancia activa trastuzumab (anti-p185, rhuMAb HER2), que es un

anticuerpo monoclonal humanizado que se une a la proteína HER2. HER2 es una proteína
transmembrana de tipo receptor, que está relacionada estructuralmente con el receptor del factor
de crecimiento epidérmico y se ha demostrado que inhibe la proliferación de células tumorales
humanas que sobreexpresan HER2 tanto in vitro y en vivo. (Olazarán, 2016)
Composición
Trastuzumab está formulado como un polvo liofilizado y cada vial está diseñado para administrar
150 mg de trastuzumab. El producto terminado también incluye 3,36 mg de L-histidina HCl, 2,16
mg de L-histidina, 136,2 mg de trehalosa, dihidrato y 0,6 mg de polisorbato 20.
La solución estéril se llena asépticamente en viales de vidrio de borosilicato Tipo I de 15 ml con
tapones liofilizados de 20 mm y se liofiliza utilizando métodos validados. El vial liofilizado
(producto terminado) se reconstituye con 7,2 ml de agua estéril para inyecciones (no
suministrado) para producir una formulación de dosis única a 21 mg / ml de trastuzumab, a un pH
de aproximadamente 6.0. Un volumen de 4% asegura que la dosis etiquetada de 150 mg puede
retirarse de cada vial.
El HERCEPTIN reconstituido es una solución transparente de incoloro a amarillo pálido y debe
estar esencialmente libre de partículas visibles. El volumen requerido se determina sobre la base
de una dosis de carga de 4 mg de trastuzumab / kg de peso corporal, o una dosis semanal
subsiguiente de 2 mg de trastuzumab / kg de peso corporal. La cantidad apropiada de solución
debe extraerse del vial y agregarse a una bolsa de infusión que contenga 250 ml de solución de
cloruro de sodio al 0.9%. (Cieza, 2015)
El vial de dosis única de 150 mg se usó para ensayos clínicos fuera de los EE. UU. Sin embargo,
en el expediente presentado originalmente, Herceptin se presentó como una formulación
multidosis de 440 mg de trastuzumab para reconstituirse con 20 ml de agua bacteriostática para
inyección, que contiene 1,1% de alcohol bencílico para producir una dosis de formulación a 21
mg / ml de trastuzumab. Como el uso de conservantes era contrario al Ph. Eur. requisitos del
solicitante después de una solicitud de CPMP cambiado a 150 mg viales de dosis única para
reconstituirse con agua estéril para inyecciones sin conservante.
Síntesis
Trastuzumab se generó mediante la inmunización de ratones Balb / c con células que expresan
HER-2 en su superficie y membranas parcialmente purificadas que contienen p185 HER-2 de
acuerdo con técnicas de hibridoma estándar.
Los hibridomas se seleccionaron mediante un ELISA utilizando la proteína p185-HER-2
inmovilizada, un ensayo que detectó la inhibición del crecimiento mediada por HER-2 de las
células SK-BR-3 o un modelo de xenografía de cáncer de mama de ratones desnudos, que dio
como resultado muMAb 4D5.
La humanización de muMAb 4D5 se realizó de acuerdo con procedimientos estándar después de
la determinación de la secuencia primaria de las regiones de la cadena VH + L de muMAb 4D5.
Las construcciones resultantes se diseñaron para expresar el isotipo Fc γ 1 humano para soportar
al máximo CDC y ADCC. Se informa que el anticuerpo resultante del human human huMAb
4D5- 8, que expresaba la cantidad máxima del anticuerpo humanizado, se une al ECD de HER-2
aproximadamente 3 veces más estrechamente que el muMAb 4D5.
El principio activo trastuzumab se produce en células de ovario de hámster chino recombinante
utilizando un medio sin suero. Las células MCB, WCB y Fin de Producción se caracterizaron
suficientemente. MCB y WCB se adaptaron al crecimiento en medio sin suero. El proceso de
fabricación del ingrediente activo comienza con la descongelación y expansión de las células de
la MCB o la WCB derivadas de la MCB. Las células se expanden utilizando un tren de semillas
y fermentadores desde 80 litros hasta 12 000 litros.
Después de la recolección se utilizan diferentes etapas cromatográficas para la purificación. Con
Cromatografía de afinidad (proteína A): se pueden eliminar las proteínas no deseadas y los
posibles contaminantes de endotoxinas.
La cromatografía de intercambio de iones catiónicos elimina agregados de anticuerpos y
fragmentos y CHO impurezas La cromatografía de intercambio iónico aniónico está destinada a
separar el ADN, la endotoxina y retrovirus, si está presente. Con cromatografía de interacción
hidrófoba agregados de anticuerpos, fragmentos y las proteínas CHO se pueden eliminar. Después
de la formulación y filtración en acero inoxidable de congelación / descongelación. los tanques
en los que se formulan los productos a granel pueden almacenarse a 2-80 ° C y / o congelarse y
almacenarse a -200 ° C o menos Se lleva a cabo un procesamiento adicional hasta el producto
terminado.

Validación de procesos (sustancia activa y producto terminado)

Los pasos críticos de la fabricación del producto terminado se han validado utilizando una escala
piloto y lotes a gran escala: influencia de los parámetros de mezcla durante el agrupamiento,
rendimiento de proteínas, homogeneidad durante el llenado, simulación de una interrupción
durante el llenado, homogeneidad durante el llenado probado después de la liofilización ,
homogeneidad de secado, evaluación del ciclo de liofilización. Además, se han establecido
controles adecuados en el proceso y el análisis de tres lotes de productos terminados a escala
completa muestra la consistencia del proceso de fabricación. Como medida de seguimiento, se
proporcionarán los datos sobre los controles en proceso y de liberación para dos lotes adicionales.
Para el principio activo, se presentaron estudios de validación del proceso para demostrar la
eliminación del ADN relacionado con el huésped, las proteínas de las células de ovario de hámster
chino (CHOP) y las impurezas no relacionadas con el huésped. La vida de las columnas de
purificación y los puntos de retención durante el proceso de purificación se validaron.

Los datos de los ensayos de liberación validados para cinco lotes de ingrediente activo a granel
producidos en Vacaville se presentaron y compararon con los rangos de estos ensayos
especificados para el trastuzumab. La consistencia de la sustancia farmacológica se evaluó
utilizando los métodos de prueba y las especificaciones descritas en el MAA en la sección II.C.1.1
Todos los resultados estuvieron dentro de los límites de especificación y dentro del rango de los
lotes producidos en el sitio anterior, South San Francisco. La comparación del proceso de cultivo
celular de Vacaville y el sitio de fabricación anterior evaluó el rendimiento del cultivo de
producción. Todos los resultados estuvieron dentro de los rangos de los resultados de la
producción anterior. El rendimiento de la recuperación se evaluó comparando los rendimientos
de recuperación de los lotes de Vacaville con los lotes producidos en el sitio anterior y los
rendimientos de cada paso de producción estuvieron dentro del rango de los resultados conocidos.
Los controles en proceso para los lotes de Vacaville mostraron resultados dentro de los límites
especificados.
Los perfiles de impurezas se obtuvieron al probar las proteínas de la célula huésped, el ADN de
la célula huésped y la proteína A residual en varias etapas intermedias del proceso. Todos los
resultados estuvieron dentro de los rangos de los lotes producidos en el sitio anterior. Se realizaron
estudios de estabilidad después del almacenamiento durante 1 mes a 37 ° C. Los cambios
observados estuvieron dentro del rango de los cambios del material fabricado en el sitio anterior.
Se requieren más datos de estabilidad como medida de seguimiento para el producto a granel para
reflejar el tiempo de almacenamiento anticipado y las condiciones utilizadas durante la
producción completa.

Validación viral
Se investigaron cinco pasos de producción para demostrar la seguridad del virus del trastuzumab:
(1) Cromatografía de proteína A,
(2) incubación a bajo pH (<3.7),
(3) Cromatografía de intercambio catiónico,
(4) Cromatografía de intercambio aniónico y
(5) Cromatografía de interacción hidrófoba.

Para los estudios de validación se utilizaron virus de la leucemia murina xenotrópica (X-MuLV),
MVM y SV40. X-MuLV es un modelo para los retrovirus de tipo A y C, que contaminan el cultivo
celular. Fue utilizado para la evaluación de los cinco pasos. No se utilizó ningún otro virus
envuelto. La cromatografía de proteína A se investigó adicionalmente con MVM y la
cromatografía de intercambio aniónico con MVM y SV40.
Aunque la seguridad del virus de trastuzumab se basa especialmente en la capacidad de
eliminación del virus de los pasos cromatográficos, tres de las cuatro cromatografías solo se
probaron con uno o dos virus. Se proporcionaron datos adicionales para los pasos cromatográficos
de Proteína-A y de intercambio aniónico con el fin de aclarar el mecanismo subyacente para la
eliminación de virus modelo mediante la partición y para demostrar las condiciones de reducción
en relación con la escala de producción. Además, el La eficacia de la columna de intercambio
aniónico para eliminar virus después de 50 ciclos de uso y el efecto de la desinfección de las
columnas sobre la inactivación del virus se han demostrado adecuadamente.
Caracterización del producto
La sustancia del fármaco se caracteriza por una serie de técnicas analíticas modernas para
determinar parámetros químico-físicos y biológicos.
Para los métodos no compendiales se presentaron datos de validación. Trastuzumab fabricado
por la línea celular de desarrollo temprano, que se usó en los ensayos clínicos de fase I y fase II,
o por la línea celular que se comercializará se comparó de manera intensiva.
Se demostró que las sustancias farmacéuticas fabricadas con ambos procesos son equivalentes,
excepto por la ausencia del polimorfismo en el residuo de la cadena pesada 376. Material de
referencia primario, lote HER1097-3 se caracteriza por una serie de pruebas.
Para el sitio de fabricación anterior, se presentaron datos de análisis de lotes del ingrediente activo
a granel de cuatro lotes de calificación y 24 lotes de producción. Para el nuevo sitio de fabricación,
se presentaron datos suficientes obtenidos de la fabricación de 5 lotes de ingrediente activo a
granel para demostrar la comparabilidad de los lotes de ingrediente activo a granel producidos en
los sitios anteriores y nuevos.
El producto terminado se caracteriza por una serie de pruebas de control validadas.
Se demostró la comparabilidad del vial de dosis única frente al vial multidosis. Las similitudes
fueron la misma resistencia, rellenada del mismo volumen formulado, la misma composición del
producto final y la misma calidad de vidrio. Diferencias: los tapones se laminaron con una película
de resina de flúor en lugar de siliconada, tamaño de vial nuevo, adicional; Filtración estéril, ciclo
de liofilización ajustado al tamaño del vial más pequeño, sitio de Roche Basel para llenado y
liofilización.
Se ha fabricado un lote de material de referencia y se proporcionaron datos de caracterización
adecuados.
Pruebas de producto terminado
Se desarrolló un completo sistema de control de ensayo para garantizar que el producto cumple
con estándares rigurosos de calidad y consistencia de lote a lote. El control de calidad de las
proteínas recombinantes requiere una selección cuidadosa de múltiples ensayos que sean
complementarios para la evaluación de identidad, pureza, potencia, fuerza y estabilidad. En el
caso de una proteína recombinante como el trastuzumab, el patrón de degradación es complejo y
ningún método individual puede abordar todos los modos de degradación. Por lo tanto, una serie
de ensayos individuales se utilizan para detectar cambios moleculares sutiles. Las pruebas de
pureza y consistencia molecular en la producción de trastuzumab se realizan principalmente en el
Bulk for Storage. Se eligió este paso en el proceso porque, en este punto, todas las operaciones
de purificación de proteínas se han completado, y un volumen, o parte de él, se puede combinar
con otros graneles, o partes de otros graneles, antes de la producción del Vial final . Se ha tenido
en cuenta la información de caracterización molecular, los resultados de la validación del proceso,
los requisitos del compendio y los resultados de la validación del ensayo en el diseño de los
sistemas de control. Los límites de acción y las especificaciones son consistentes con el historial
de fabricación y la experiencia clínica. Se proporcionaron informes de validación de ensayos para
las pruebas de liberación no compendiales para el almacenamiento masivo y el producto
terminado, que se consideraron adecuados.
La re-prueba completa se realiza en Roche, Grenzach, Alemania.
Durante el procedimiento de aprobación, las muestras de 3 lotes del producto terminado se
probaron experimentalmente en el laboratorio del Relator. Los resultados cumplen con la
especificación del producto terminado. Sin embargo, se identificaron algunos problemas
metodológicos en los ensayos de potencia, que se aclararán mediante la presentación de un SOP
actualizado como medida de seguimiento.
Estabilidad del ingrediente activo.
Se realizaron estudios en tiempo real de tres meses utilizando una variedad de condiciones de
almacenamiento para evaluar el impacto de la realización de ciclos de congelación /
descongelación, almacenamiento de líquidos entre 2 ° C y 8 ° C y almacenamiento congelado a
entre -20 ° C. La eficacia de la columna de intercambio aniónico para eliminar virus después de
50 ciclos de uso y el efecto de la desinfección de las columnas sobre la inactivación del virus se
han demostrado adecuadamente.
Caracterización del producto
La sustancia del fármaco se caracteriza por una serie de técnicas analíticas modernas para
determinar parámetros químico-físicos y biológicos.
Para los métodos no compendiales se presentaron datos de validación. Trastuzumab fabricado por
la línea celular de desarrollo temprano, que se usó en los ensayos clínicos de fase I y fase II, o por
la línea celular que se comercializará se comparó de manera intensiva. Se demostró que las
sustancias farmacéuticas fabricadas con ambos procesos son equivalentes, excepto por la ausencia
del polimorfismo en el residuo de la cadena pesada 376. Material de referencia primario, lote
HER1097-3 se caracteriza por una serie de pruebas.
Para el sitio de fabricación anterior, se presentaron datos de análisis de lotes del ingrediente activo
a granel de cuatro lotes de calificación y 24 lotes de producción. Para el nuevo sitio de fabricación,
se presentaron datos suficientes obtenidos de la fabricación de 5 lotes de ingrediente activo a
granel para demostrar la comparabilidad de los lotes de ingrediente activo a granel producidos en
los sitios anteriores y nuevos.
El producto terminado se caracteriza por una serie de pruebas de control validadas.
Se demostró la comparabilidad del vial de dosis única frente al vial multidosis. Las similitudes
fueron la misma resistencia, rellenada del mismo volumen formulado, la misma composición del
producto final y la misma calidad de vidrio. Diferencias: los tapones se laminaron con una película
de resina de flúor en lugar de siliconada, tamaño de vial nuevo, adicional; Filtración estéril, ciclo
de liofilización ajustado al tamaño del vial más pequeño, sitio de Roche Basel para llenado y
liofilización.
Se ha fabricado un lote de material de referencia y se proporcionaron datos de caracterización
adecuados.
Pruebas de producto terminado
Se desarrolló un completo sistema de control de ensayo para garantizar que el producto cumple
con estándares rigurosos de calidad y consistencia de lote a lote. El control de calidad de las
proteínas recombinantes requiere una selección cuidadosa de múltiples ensayos que sean
complementarios para la evaluación de identidad, pureza, potencia, fuerza y estabilidad. En el
caso de una proteína recombinante como el trastuzumab, el patrón de degradación es complejo y
ningún método individual puede abordar todos los modos de degradación. Por lo tanto, una serie
de ensayos individuales se utilizan para detectar cambios moleculares sutiles. Las pruebas de
pureza y consistencia molecular en la producción de trastuzumab se realizan principalmente en el
Bulk for Storage. Se eligió este paso en el proceso porque, en este punto, todas las operaciones
de purificación de proteínas se han completado, y un volumen, o parte de él, se puede combinar
con otros graneles, o partes de otros graneles, antes de la producción del Vial final . Se ha tenido
en cuenta la información de caracterización molecular, los resultados de la validación del proceso,
los requisitos del compendio y los resultados de la validación del ensayo en el diseño de los
sistemas de control. Los límites de acción y las especificaciones son consistentes con el historial
de fabricación y la experiencia clínica. Se proporcionaron informes de validación de ensayos para
las pruebas de liberación no compendiales para el almacenamiento masivo y el producto
terminado, que se consideraron adecuados.
La re-prueba completa se realiza en Roche, Grenzach, Alemania.
Durante el procedimiento de aprobación, las muestras de 3 lotes del producto terminado se
probaron experimentalmente en el laboratorio del Relator. Los resultados cumplen con la
especificación del producto terminado. Sin embargo, se identificaron algunos problemas
metodológicos en los ensayos de potencia, que se aclararán mediante la presentación de un SOP
actualizado como medida de seguimiento.
Estabilidad del ingrediente activo.
Se realizaron estudios en tiempo real de tres meses utilizando una variedad de condiciones de
almacenamiento para evaluar el impacto de la realización de ciclos de congelación /
descongelación, almacenamiento de líquidos entre 2 ° C y 8 ° C y almacenamiento congelado a
entre -20 ° C.
Si bien los datos proporcionados originalmente se obtuvieron para el ingrediente activo a granel
fabricado en el sitio anterior, los resultados de un estudio en curso para el material producido en
Vacaville se proporcionarán como una medida de seguimiento para reflejar el tiempo de
almacenamiento previsto y las condiciones utilizadas para Principio activo a granel producido en
el nuevo sitio. (Cornejo, 2017)
Estabilidad del producto terminado.
Los resultados de los estudios en tiempo real para determinar la estabilidad de Herceptin en la
configuración que se comercializará se proporcionaron con la aplicación para el producto
producido en los sitios de Genentech. Por consiguiente, el producto farmacológico se ha
reconstituido con agua bacteriostática para inyección, que contiene 1,1% de alcohol bencílico. La
estabilidad se controló en las condiciones de almacenamiento recomendadas de 2 ° - 8 ° C, así
como a 30 ° C. Las muestras se analizaron de acuerdo con los protocolos definidos y se analizaron
utilizando métodos que indican estabilidad. Además, se realizaron estudios para determinar el
efecto de la luz intensa, la manipulación a temperatura ambiente y el envío, la manipulación y la
manipulación de Herceptin reconstituido para usos múltiples, así como para evaluar la estabilidad
del producto terminado después de la dilución en cloruro de sodio al 0,9% o dextrosa al 5% en ya
sea bolsas de cloruro de polivinilo o poliolefina IV. Además, se examinó la estabilidad del y
posteriormente almacenado a 2 ° - 8 ° C. Los resultados de estos estudios proporcionaron una
seguridad adecuada sobre la estabilidad del producto terminado. Sin embargo, dado que el sitio
de fabricación y la formulación del producto terminado se cambiaron a Basilea y la dosis única
de 150 mg, respectivamente, fue necesario realizar un nuevo estudio de estabilidad. Se
proporcionaron datos de estabilidad de tres lotes a escala piloto de viales de 150 mg que cubren
6 meses. Se proporcionaron datos de apoyo durante 36 meses a partir de viales de 150 mg
fabricados en Genentech para ensayos clínicos. Como medida de seguimiento, los resultados de
un estudio en curso para demostrar la estabilidad de los lotes de productos terminados a gran
escala producidos en Roche, Basilea.
Toxico-aspectos farmacológicos.
Herceptin se dirige contra HER2 (proteína del receptor del factor de crecimiento epidérmico
humano 2), que forma parte de una familia de fosfoglicoproteínas unidas a la membrana con
actividad tirosina quinasa. HER2 está codificado por el protooncogén c-erb B-2, el homólogo
humano del oncogén neu de rata. Las proteínas codificadas por los oncógenos, las oncoproteínas,
están todas involucradas en las cascadas de señalización que controlan la proliferación y
diferenciación celular.( Olazarán, 2016)
La relación principal del oncogén v-erbB2 y su proteína asociada (el receptor de un factor de
crecimiento) con el cáncer se refiere a la sobreproducción del receptor, con la consecuencia de
que la célula afectada se vuelve inusualmente sensible a la estimulación mitogénica por cantidades
normales (pequeñas) de factor de crecimiento . La sobreexpresión de la proteína receptora
endógena puede ocurrir por amplificación genómica o por una mutación en la "región de control
del potenciador de la proteína" del proto-oncogen celular c -erbB2, que puede dar como resultado
un aumento de la transcripción y, posteriormente, un aumento de la formación de proteínas.
La sobreexpresión de HER2, observada en aproximadamente el 30% de los tumores de mama
humanos, es un factor pronóstico de mala supervivencia.
Aspectos clínicos.
La sobreexpresión de HER-2 se ha relacionado con un peor resultado en pacientes con cáncer de
mama. En consecuencia, el cáncer de mama que sobreexpresa HER-2 presenta una oportunidad
ideal para explotar el concepto de terapia contra el cáncer "dirigida". Por lo tanto, se desarrolló
una estrategia para antagonizar la función anormal de la sobreexpresión de HER-2. Se produjeron
anticuerpos monoclonales murinos contra el dominio extracelular de la proteína HER-2. Se
encontró que uno de tales anticuerpos (muMAb 4D5) inhibe marcadamente la proliferación de
células tumorales humanas que sobreexpresan HER-2. Este efecto fue mediado a través de la
unión de muMAb 4D5 al receptor HER-2. Se observó eficacia en estudios no clínicos in vivo que
utilizaron el anticuerpo solo y en combinación con quimioterapia citotóxica.
Dado que la administración crónica de anticuerpos monoclonales murinos a humanos está
limitada por las respuestas inmunes a la proteína no humana, el anticuerpo fue "humanizado" (es
decir, las regiones de muMAb 4D5 que determinan la especificidad de unión de anti-HER-2 se
diseñaron en el marco de una anticuerpo humano genérico. El anticuerpo resultante, rhuMAb
HER-2 (trastuzumab), se une específicamente al dominio extracelular de la proteína HER-2 con
alta afinidad. (Olazarán, 2016)

REFERENCIAS
Olazarán Santibáñez, F. E. (2016). Síntesis y evaluación biológica in vitro e in vivo de nuevos
derivados de azetidin-2-ona conjugados con un anticuerpo monoclonal anti-her-2 (Doctoral
dissertation, Universidad Autónoma de Nuevo León).

Cieza Villafañe, L. (2015). Reacciones click: síntesis de fármacos para el tratamiento del cáncer
de mama.

Cornejo, C., de Laboratorio Pharmabrand, E. G. G., & de Laboratorio, S. E. D. M. (2017).

Bioterapéuticos y la industria farmacéutica ecuatoriana. In Medicamentos biológicos, presente y
futuro de la terapéutica (pp. 217-236). Universidad Central del Ecuador.
Resumen:
Herceptin contiene la sustancia activa trastuzumab (anti-p185, rhuMAb HER2), que es un
anticuerpo monoclonal humanizado que se une a la proteína HER2. HER2 es una proteína
transmembrana de tipo receptor, que está relacionada estructuralmente con el receptor del factor
de crecimiento epidérmico y se ha demostrado que inhibe la proliferación de células tumorales
humanas que sobreexpresan HER2 tanto in vitro y en vivo
Trastuzumab está formulado como un polvo liofilizado y cada vial está diseñado para administrar
150 mg de Trastuzumab
El vial liofilizadose reconstituye con 7,2 ml de agua estéril para inyecciones una formulación de
dosis única a 21 mg / ml de trastuzumab, a un pH de 6.0.
Trastuzumab se generó mediante la inmunización de ratones Balb / c con células que expresan
HER-2 en su superficie y membranas parcialmente purificadas que contienen p185 HER-2 de
acuerdo con técnicas de hibridoma estándar.
Los hibridomas se seleccionaron mediante un ELISA utilizando la proteína p185-HER-2
inmovilizada, un ensayo que detectó la inhibición del crecimiento mediada por HER-2 de las
células SK-BR-3 o un modelo de xenografía de cáncer de mama de ratones desnudos, que dio
como resultado muMAb 4D5.
La humanización de muMAb 4D5 se realizó de acuerdo con procedimientos estándar después de
la determinación de la secuencia primaria de las regiones de la cadena VH + L de muMAb 4D5.
Las construcciones resultantes se diseñaron para expresar el isotipo Fc γ 1 humano para soportar
al máximo CDC y ADCC. Se informa que el anticuerpo resultante del human human huMAb
4D5- 8, que expresaba la cantidad máxima del anticuerpo humanizado, se une al ECD de HER-2
aproximadamente 3 veces más estrechamente que el muMAb 4D5.
El principio activo trastuzumab se produce en células de ovario de hámster chino recombinante
utilizando un medio sin suero. Las células MCB, WCB y Fin de Producción se caracterizaron
suficientemente. MCB y WCB se adaptaron al crecimiento en medio sin suero. El proceso de
fabricación del ingrediente activo comienza con la descongelación y expansión de las células de
la MCB o la WCB derivadas de la MCB. Las células se expanden utilizando un tren de semillas
y fermentadores desde 80 litros hasta 12 000 litros.
Después de la recolección se utilizan diferentes etapas cromatográficas para la purificación. Con
Cromatografía de afinidad (proteína A): se pueden eliminar las proteínas no deseadas y los
posibles contaminantes de endotoxinas.
La cromatografía de intercambio de iones catiónicos elimina agregados de anticuerpos y
fragmentos y CHO impurezas La cromatografía de intercambio iónico aniónico está destinada a
separar el ADN, la endotoxina y retrovirus, si está presente. Con cromatografía de interacción
hidrófoba agregados de anticuerpos, fragmentos y las proteínas CHO se pueden eliminar. Después
de la formulación y filtración en acero inoxidable de congelación / descongelación. los tanques
en los que se formulan los productos a granel pueden almacenarse a 2-80 ° C y / o congelarse y
almacenarse a -200 ° C o menos Se lleva a cabo un procesamiento adicional hasta el producto
terminado.