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Espectrofotometra para calcular concentracin y pureza del ADN

PROBLEMA 1
Pregunta 1
Se extrae y purifica ADN de una muestra de tejido vegetal, la cual se resuspende
en un volumen final de 50l de agua ultrapura. Se toman 10l para realizar el anlisis
espectrofotomtrico en una celdilla de 1ml, el cual arroja las siguientes lecturas: A260
de 0.520, A280 de 0.305, A310 de 0.028. Cul es la concentracin de ADN de la
muestra? (Debes incluir las unidades. Para el smbolo miu -como en micra- utiliza una
u, ejemplo ul para microlitros)
Respuesta: 2600 ug/ml
Pregunta 2
Cul es el cociente de la muestra del problema 1 (para calcular la pureza
respecto a ARN, protenas y compuestos fenlicos)?
Respuesta: 1,7049
Pregunta 3
De acuerdo con el cociente resultante para esta muestra, puedes concluir que...
Seleccione una:
a. Tiene pureza aceptable
b. Est contaminada por protenas o compuestos fenlicos
c. Est contaminada por ARN

Retroalimentacin
Recuerda que si el cociente es...
1.7 - 2.0 la muestra tiene pureza aceptable
Menor a 1.7 la muestra est contaminada por protenas o compuestos fenlicos
Mayor a 2.0 la muestra est contaminada por ARN
La respuesta correcta es: Tiene pureza aceptable

Pregunta 4
Cul es el porcentaje de carbohidratos que presenta esta muestra?
Respuesta: 5.3846

PROBLEMA 2
Pregunta 5
Se extrae y purifica ADN a partir de un cultivo bacteriano; la muestra se
resuspende en un volumen final de 50 l de agua ultrapura. Se toman 10 l y se llevan
a un volumen final de 1000 l para analizar en el espectrofotmetro: A260 de 0.415,
A280 de 0.183, A310 de 0.00
Cul es la concentracin de ADN en esta muestra? Recuerda escribir las unidades.
Respuesta: 2075 ug/ml
Pregunta 6
Realiza los clculos necesarios para determinar la pureza de esta muestra.
Entonces, la muestra...
Seleccione una:
a. Tiene pureza aceptable
b. Est contaminada por protenas o compuestos fenlicos

Est contaminada por ARN. La respuesta correcta es: Est contaminada por protenas
o compuestos fenlicos.
Pregunta 7
Ya calculaste la concentracin de la muestra. Ahora calcula la cantidad total de
ADN que queda en los 40ul de muestra que se conserva.
Respuesta: 83 ug/ml

PROBLEMA 3
Pregunta 8
Se extrae y purifica ADN y se resuspende en un volumen final de 50l. Se toman
20 l y se llevan a un volumen final de 1000 l para analizar en el espectrofotmetro.
Las lecturas resultantes son las siguientes: A260 de 0.725, A280 de 0.680, A310 de
0.154. Cul es la concentracin de ADN de la muestra?
Respuesta: 1812,5 ug/ml
Pregunta 9
Realiza todos los clculos necesarios para poder determinar cules son los
contaminantes presentes en esta muestra...
Seleccione una:
a. No est contaminada
b. Est contaminada por protenas y/o compuestos fenlicos
c. Est contaminada por ARN
d. Est contaminada por carbohidratos
e. Est contaminada por protenas y compuestos fenlicos, y adems por
carbohidratos
f. Est contaminada por ARN y carbohidratos

Pregunta 10
Ya obtuviste la concentracin para la muestra del tercer problema, pero cul es
el rendimiento de ADN en los 50ul de muestra que se recuperaron? Escribe las
unidades correspondientes, y recuerda utilizar coma en lugar de punto (ejemplo 0,0)
Respuesta: 90,95 ug

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