"Año del Fortalecimiento de la Soberanía Nacional”

MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

TEMA: PRÁCTICA N.º 07

INTEGRANTES:

⁎Abad García Kely

* Diaz Sosa Shayra Abigayl
*Morocho Herrera Ana
* Peña Almestar Junior
* Veliz Olaya Tracy

DOCENTE:

*Hurtado Merino Alberto Zacarias

CURSO

*Microbiología y Parasitología

Grupo

N°. 02

PIURA – PERÚ
2022
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
PRÁCTICA Nro. 07

Laboratorio de:
Microbiología y Parasitología
Temática :
Bacilos Gramnegativos:
Escherichia coli, Klebsiella spp, Salmonella spp, Shigella spp, Proteus spp, Yersinia pestis, Pseudomonas
aeruginosa, Vibrio cholerae, Helicobacter pylori, Brucella spp, Bordetella pertussis, Chlamydia trachomatis,
Gardnerella vaginalis Espiroquetas: Treponema pallidum, Leptospira interrogans.
Sesión:8 Resultado de aprendizaje:
Aplica el conocimiento de la interacción
entre las bacterias y virus con el ser
humano, considerando su relación con el
medio ambiente.
Estudiante: Tiempo desarrollo de la guía:
IV Ciclo de la Escuela Profesional de Enfermería 150 minutos

I. INTRODUCCIÓN
“La familia de las enterobacterias (Enterobacteriaceae) incluye múltiples géneros y
especies de bacilos gramnegativos, algunos de los cuales son patógenos para el ser
humano. Tienen una amplia distribución: en el agua, el suelo, las plantas y la flora
intestinal de muchos animales y del hombre. Algunas especies (Shigella spp., varias
serovaresde Salmonella, Yersinia pestis) se han adaptado al ser humano y se consideran
patógenos primarios, mientras que otras (Escherichia coli, Klebsiella spp., Citrobacter spp.,
Enterobacter spp., Morganella morganii, Proteus spp., Providencia spp., Serratia spp., etc.)
forman parte de la microbiota normal, pero pueden comportarse como patógenos
oportunistas. El principal mecanismo de transmisión de estos microorganismos se produce
a través de las manos del personal sanitario, que se coloniza cuando entra en contacto con
pacientes que a su vez están colonizados”.
“El género Pseudomonas incluye múltiples especies con amplia distribución en diversos
ambientes, en especial los húmedos. La especie más importante en patología humana es
P. aeruginosa, que causa infecciones graves, con elevada morbimortalidad, en pacientes
inmunosuprimidos, principalmente en el ámbito hospitalario, en UCI y en unidades de
críticos oncohematológicos; además, es la causa más frecuente de infección respiratoria
crónica en pacientes con fibrosis quística. Las infecciones nosocomiales generalmente
incluyen neumonías, bacteriemias, infección de herida quirúrgica e infecciones de vías
urinarias. P. aeruginosa logra sobrevivir en ambientes y temperaturas propias del entorno
clínico y crece fácilmente en medios de cultivo habituales, pues sus requerimientos
nutritivos son escasos. Su identificación en el laboratorio y la determinación de su
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
sensibilidad a los antimicrobianos no suelen plantear dificultades, con la excepción de los
fenotipos mucosos que suelen identificarse en pacientes con fibrosis quística”.
“Vibrio cholerae 01 es un anaerobio facultativo. En presencia de oxígeno respira, y en su
ausencia es capaz de fermentar. Puede crecer en medios que contienen carbohidratos,
particularmente glucosa, así como nitrógeno, azufre, fósforo y sodio y se adhiere a
sedimentos para obtener estos nutrientes. Tiene un requerimiento absoluto de Na + para el
crecimiento. Dos estudios de laboratorio han revelado que las cepas toxígenas de V.
cholerae 01 biotipo El Tor requieren Na+ para sobrevivir en ausencia de otros nutrientes y
para crecer más rápido en presencia de ellos. Se encontró que el requerimiento de Na + no
se podía satisfacer mediante la sustitución con los metales alcalinos Li + o K+ . Sin embargo,
la adición de los metales alcalinotérreos Ca 2+ y Mg2+ en presencia de Na+ contribuyó a
prolongar su supervivencia”
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS: Evaluación Inicial:
¿Qué bacilos Gramnegativos conocen?
- Escherichia coli
- Salmonella
- Shigella
- Yersinia
- Helicobacter pylori
- Brucella
- Klebsiella
- Pseudomonas
- Bordetella
- Chlamydia trachomatis
- gardnerella
¿Qué bacilos Gramnegativos producen enfermedades en el hombre?
 Escherichia coli: Infecciones al tracto urinario así mismo produce procesos diarreicos dependiendo el
serotipo.
 Salmonella: Produce tifoidea.
 Shigella: Disentería Bacilar.
 Pseudomonas: Infecciones en los quemados y también en inmunodeprimidos.
 Yersinia pestis: Produce la peste.
 Helicobacter pylori: Se relaciona con ulceras a nivel del estómago.
 Klebsiella: Produce neumonías.
 Brucella: Produce la fiebre de malta.
 Bordetella: tos ferina Coqueluchoide.
 Chlamydia trachomatis: Linfogranuloma venéreo.
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

III. MATERIAL
 Videos e imágenes de atlas virtuales de microbiología y parasitología

IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA:

Actividad 1. Reconocimiento de Escherichia coli, Salmonella, Shigella, Vibrio cholerae,
Pseudomonas aeruginosa.
 Características culturales
- Reconocer características de las colonias: aspecto, color.
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

Pseudomonas aeruginosa
en Mc Conkey
 Características microscópicas
- Reconocer características microscópicas
Enterobacteriaceae

Vibrio cholerae
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
 Identificación bioquímica
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
0.5 PUNTO

0.5 PUNTO

Observación:
Escherichia coli

Características culturales:
En Agar MacConkey, forman colonias rojas.

0.
5 PUNTO Escherichia coli

TSI A\A+ - (G+ ; SH2 -)

LIA K\K

UREASA (negativo) -

CITRATO (negativo) -

TSI LIA UREASA CITRATO INDOL INDOL (positivo) +

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
 Observación:
Escherichia coli
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
Muestra: Heces PROGRAMA DE ENFERMERÍA

Coloración: Gram
0.5 PUNTO Observación:
Aumento: 1000x
Salmonella sp. Muestra:
Heces

Coloración:

Gram

Aumento: 1000x

0.5 PUNTO

Observación:
Salmonella sp. Características

culturales:

En Agar Salmonella SP, forma colonias translucidas e incoloras

con H2S en el centro.

0.5 PUNTO
Salmonella sp.

TSI K\A - +

LIA K\K - +

UREASA (negativo) -

CITRATO (positivo) +

INDOL (negativo) -
 TSILIAUREASACITRATOINDOL

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ENFERMERÍA

0.5 PUNTO Observación:

Shigella sp. Muestra:

Heces Coloración:
Gram

Aumento: 1000x

0.5 PUNTO

Observación:

Shigella sp. Características culturales: En Agar SS, forma

colonias traslucidas e incoloras.

0.5 PUNTO
Shigella sp.

TSI K\A - -

LIA K\A

UREASA (negativo) -

CITRATO (negativo) -

INDOL (negativo) -
 TSILIAUREASACITRATOINDOL
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

Observación:
0.5 PUNTO

Vibrio cholerae Muestra: Heces

Coloración: Gram Aumento: 1000x

0.5 PUNTO

Observación:
Vibrio cholerae

Características culturales:

En TCBS, forma colonias amarillas cremosas.

0.5 PUNTO
Vibrio cholerae

TSI A\A - -

LIA K\K

UREASA (negativo) -

CITRATO (positivo) +

INDOL (positivo) +
TSILIAUREASACITRATOINDOL

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ENFERMERÍA

Observación:
0.5 PUNTO Pseudomonas aeruginosa

Muestra:

Orina Coloración:
Gram

Aumento: 1000x

0.5 PUNTO

Observación:
Pseudomonas aeruginosa

Características culturales:

En Agar Cetrimide, forma pigmentos verdes azulados.

(pioverdina y piocianina).

V. PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD
Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener organismos vivos
peligrosos.
Portar la bata y equipo de protección (guantes)
Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por insignificante que parezca.
No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan dudas.
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
VI. CONCLUSIONES (1 PUNTO)

Los bacilos gramnegativos son causantes de un gran número de enfermedades. Algunos de ellos son
microorganismos comensales presentes en la flora intestinal normal. Estos microorganismos comensales más
otros provenientes de reservorios animales o del medioambiente pueden causar enfermedades. En esta
práctica hemos podido evidenciar las diferentes reacciones a los medios de cultivo TSI, LIA, UREASA,
CITRATO, INDOL; de los microorganismos gramnegativos como la escherichia coli. Salmonella sp, shiguela
sp, Vibrio cholerae, pseudomona, Observando la formación de colonias, forma y características específicas de
cada una.

 Escherichia coli, en Agar MacConkey, coloración Gram se observa formación de colonias rojas;
siendo lactosa positiva, TSI: A/A con presencia de gas + y SH2 -, LIA: K/K; UREASA negativo,
CITRATO negativo, INDOL positivo.
 En Salmonella sp en agar salmonela SP, se forman colonias traslucidas e incoloras con H2S en el
centro; TSI: K/A; LIA: K/K; UREASA negativo; CITRATO positivo; INDOL negativo.
 Shigella SP en agar SS, se formó colonias traslucidas e incoloras por lo que son lactosa negativa,
TSI: K/A; LIA: K/A; UREASA negativo, CITRATO negativo; INDOL negativo.
 Vibrio cholerae en Agar TCBS, forma colonias amarillas cremosas, TSI: A/A; LIA: K/K;
UREASA negativo, CITRATO positivo; INDOL positivo.
 Pseudomonas aeruginosa en Agar Cetrimide se forma pigmentos verdes azulados
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

VII. EVALUACIÓN:
1. COMPLETE EL SIGUIENTE CUADRO EN RELACIÓN AL ASPECTO DE LAS HECES DE
LOS PACIENTES CON INFECCIÓN POR: (4 PUNTOS)
BACTERIA ASPECTO DE LAS HECES
Escherichia coli Diarreas intensas con sangre.

Salmonella sp. Diarreas espesas, hediondas (huevo podrido), rara vez sangre.

Shigella sp. Heces acuosas con presencia de moco, pus y sangre.

Vibrio cholerae Heces liquidas con aspecto de agua de arroz con poco material fecal.

2. EXPLIQUE A QUE SE DEBE LA RESISTENCIA A MULTIPLES ANTIBIÓTICOS POR

Pseudomonas aeruginosa: (4 PUNTOS)
La Pseudomonas aeruginosa es resistente a múltiples antibióticos debido a que su membrana celular
tiene propiedades excepcionales de impermeabilidad. Además, por la presencia de b-lactamasas y
alteraciones de la permeabilidad de membrana dadas por la presencia de bombas de expulsión y las
mutaciones de las porinas transmembranales.

VIII. BIBLIOGRAFÍA (4 PUNTOS)

Código de LIBROS/REVISTAS/ARTÍCULOS/TESIS/PÁGINAS WEB.TEXTO
biblioteca
616.01 / M95c Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiología Médica. 6ta. ed. Madrid: Elsevier España;
2009.

616.01 / B84E Brooks G, Morse S, Batel J. Microbiología Médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. 19va ed.
Mexico: El Manual Moderno: 2008.

Fariñas MC, Martínez-Martínez L. Infecciones causadas por bacterias gramnegativas

multirresistentes: enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii y otros
bacilos gramnegativos no fermentadores. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2013;31(6):402-9.
Borroto RJ. Ecology of Vibrio cholerae serogroup 01 in aquatic environments. Rev Panam Salud
Pública. 2007;1(1):3-8.

Gómez Álvarez, Carlos Andrés, Leal Castro, Aura Lucía, Pérez de

González, María de Jesús, & Navarrete Jiménez, Myriam
Lucía. (2005). MECANISMOS DE RESISTENCIA EN
PSEUDOMONAS AERUGINOSA: ENTENDIENDO A UN
PELIGROSO ENEMIGO. Revista de la Facultad de
Medicina , 53 (1), 27-34. Recuperado el 17 de mayo de 2022, de
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120
-00112005000100004&lng=en&tlng=es.