Control De Calidad Interno

Seguimiento de las condiciones de

trabajo de cada laboratorio, que
permite ver a diario la confiabilidad

de los resultados.

Dr. Luis F. San Martin B.

Fases Para La Calidad De Un Proceso
En El Laboratorio:

■ Fase pre-analítica

■ Fase analítica

■ Fase post-analítica
• Fase Pre-analítica
Control de equipos que
intervengan en la conservación y
análisis de la muestra, reactivos,
personal, etc.
Errores que podemos encontrar:
 Errores administrativos.

 Errores de la muestra.

 Errores en la estandarización.
🞍
Fase Analítica :

Se refiere a los controles y

observaciones de los análisis
realizados en el laboratorio, con
la respectiva verificación del
método.
ErroresAnalíticos:

Errores determinados ó sistemáticos.

✓ Relacionados con el método,

personal e instrumentos.
✓ Resultados constantemente bajos
o altos son causados por este tipo
de error.
✓ Influye en la exactitud de los
resultados.
ErroresIndeterminadosoAleatorios
✓ Entrenamiento inadecuado, fatiga,
dificultad de observación,
vencimiento de reactivos.

✓ Influyen en la reproductibilidad de
la medición.

✓ Afecta la precisión de los

resultados.
🞍 Fase Post-analítica :
Confirmación de los resultados
(trascripción)
Puntualidad reporte
Registro (unidades SI)
Inspeccionar nueva curva de calibración
Verificar los valores de control de
calidad en relación a los límites
aceptables
Manuales (manual de calidad)
Control Interno en Microbiología

■ Control a la muestra
■ Control a los medios de cultivo
■ Control a los procesos de tinción
■ Control de pruebas de sensibilidad
Control al Proceso de Tinción:
■ Se preparan láminas con una gota de
suspensión que contenga organismos
gram(+) y gram (-) en proporciones
iguales.

■ Una vez seco, se almacenan sin fijar con

calor como controles.

■ Bacillus spp. y Neisseria spp.

■ Controles se aplican a reactivos nuevos,

entrenamiento, una vez por semana.
Control de Calidad en las Pruebas de
Sensibilidad

• Según las necesidades respiratorias de los

microorganismos, se distinguen 2 grupos de
Antibiogramas:

■ Antibiogramas para gérmenes

aerobios
■ Antibiogramas para gérmenes
anaerobios
A. Antibiograma por dilución:

1. En medio líquido
Permite investigar la concentración
mínima inhibitoria (CMI) y la
concentración mínima bactericida
(CMB)

2. En medio sólido
Permite investigar la CMI, que en este
caso coincide con la CMB
B. Antibiogramaspor difusiónenmedio
sólido

Permite investigar la CMI de forma

indirecta y aproximada, al
relacionarla mediante reglas de
regresión con los halos de
inhibición
Antibiograma Aeróbio
1. Método de dilución en medio
líquido
2. Método de dilución en medio
sólido
3. Método de difusión en medio
sólido
En cualquiera de los 3 tipos de
antibiogramas aerobios se consideran los
siguientes puntos:

■
• Medio de
■
cultivo Inóculo
■
Antimicrobiano
■
s Incubación
■
• Lectura e interpretación de resultados
■
Control de calidad al producto final
Medio de Cultivo :
■ Será de amplio espectro nutritivo y
permitirá el crecimiento de la mayoría de
microorganismos a los que va destinado.

■ Para los más lábiles podrá incorporar

sangre o suero sanguíneo.

■ La adición de lo anterior no es muy

recomendable, pues limita la acción de
algunos antimicrobianos que se ligan a
las proteínas.
 Tendrá un pH estable (7.2-7.4)
y no sufrirá oscilaciones por
■
acción de los microorganismos
sobre los componentes del
medio

■
• No incluirá inhibidores de los antimicrobianos
como:


• Peptonas, que inactivan los derivados
sulfamídicos
 Fosfatos, NaCl y extracto de
cerebro (lecitina), que inactivan
aminoglicósidos y polimixinas


• Sales de Ca y Mg, que forman compuestos
quelantes con betalactamicos y tetraciclinas
 Ácido para-amino-benzóico (PABA) o cualquier
otro antagonista por competencia.

 Glúcidos, que en medios mal tamponados

dan lugar a disminuciones del pH.

El medio que mejor cumple estas condiciones

es el Mueller-Hinton.
Inóculo
■ Presentará una turbidez análoga al tubo
No. 0.5 de Mcfarland, que se prepara
añadiendo 0.5 ml de BaCl2 0.048 M a
99.5 ml de H2SO4 0.36 N.

■ Este patrón se conserva estable durante

1 año en tubos de vidrio tapados, pero si
se cierran a la llama, su duración es de
varios años.
Antimicrobianos:

■ Deben proceder directamente de firmas

comerciales que se dediquen a su fabricación,
y tendrán una actividad en producto activo
conocida ( mg ó UI/ml)

■ Los discos o comprimidos procederán de

firmas acreditadas, que solo se dediquen a su
producción, y que además no fabriquen
antibióticos

■ Cada vez que entre un nuevo lote se debe

controlar la calidad de los discos
Incubación :
• En todos los medios aerobios, se incuba a
35oC durante 18-24 horas

• Lectura e Interpretación
de los resultados :
• Es propio de cada método y se realiza
comparando el resultado obtenido (halo)
con las tablas correspondientes
Control de Calidad:

• Cada laboratorio tendrá seleccionadas

algunas cepas de sensibilidad conocida,
para que sirvan periódicamente de control
interno de la calidad
• Staphylococcus aureus, Escherichia coli
y Pseudomona aeruginosa
Antibiograma Anaerobio

■ Método de difusión en medio

sólido
■ Método de Elución en medio
líquido
■ Método de dilución en caldo
■ Método de dilución en Agar
Medio de cultivo

■ La necesidad de utilizar productos

suplementarios para garantizar el
crecimiento de anaerobios, afecta los
resultados del antibiograma.
■ La adición de sangre al medio base
rebaja las CMI y el diámetro del halo de
inhibición.
■ Otras sustancias inhiben o alteran los
resultados:extracto de carne,
peptonas,etc.
Los cambios de pH:

La atmósfera ideal esta compuesta

de 85% de Nitrógeno, 10% de
Hidrogeno y 5% de Anhídrido
Carbónico. La presencia de este
último compuesto provoca en la
superficie del medio una tendencia
hacia la acidez, que altera la
acción de betalactamicos y
aminoglicósidos
Concentración del inóculo

• El distinto periodo de duplicación de los

microorganismos dificulta estandarizar las
normas para la preparación del inoculo
Características de la incubación:

■
• Se encuentran entre 35oC y tiempo de
incubación entre 24-48h, según la
velocidad de crecimiento del
microorganismo.

■ En cualquier caso las siembras se

incuban dentro de jarras
especiales exentas de oxígeno
Fuentes Comunes de Error:

■ Utilización de un agar diferente al

recomendado por la técnica.

■ Preparación del medio de cultivo

con un pH inadecuado.

■ Utilización de medios de cultivo

con fecha de expiración vencida,
mal almacenados o hidratados.
■ Excesivo retraso entre la preparación del
medio y su inoculación

■ Excesivo retraso entre la inoculación y la

aplicación de los discos

■ Conservación incorrecta de los discos de

sensibilidad: refrigerados y en recipientes
libres de humedad.
 Preparación y/o conservación
■ incorrecta del patrón de
turbidez

■ Cualquier omisión o falla en el

procedimiento ó técnica
escogida(temperatura,tiempo,lectura)

■ Omitir el uso de las cepas de

microorganismos control
■
No realizar las modificaciones y
justificaciones para:

 H. Influenzae: Agar MH + 1% de Hb
(5% sangre de caballo).

 N. Gonorrhoeae : Agar GC base sin

Hb y suplementado con 1% de
isovitalex. CO2 al 5-10%.
 S. Pneumoniae: Agar MH +
sangre de cordero al 5% y
atmósfera aerobica sin CO2


• Estafilococos: para detectar las cepas
heteroresistentes a las penicilinas
isoxazólicas, deben incubarse a 30oC, agar
MH hipertónico (4% NaCL)